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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：胡海霞郑良朴陈文列林久茂陈旭征林薇赵锦燕福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室

目的:研究中药复方解毒消症饮对胃腺癌细胞凋亡作用和线粒体膜电位的影响。方法:大鼠随机分组为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别用不同浓度解毒消症饮灌胃。饲养7天后,制取含药血清。不同含药血清与胃腺癌细胞共培养24、48... 详细信息

目的:研究中药复方解毒消症饮对胃腺癌细胞凋亡作用和线粒体膜电位的影响。方法:大鼠随机分组为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别用不同浓度解毒消症饮灌胃。饲养7天后,制取含药血清。不同含药血清与胃腺癌细胞共培养24、48、72小时,MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪观察不同时间不同剂量组的细胞凋亡率、细胞周期及线粒体膜电位的变化。结果:与对照组比较,含药血清组可以显著抑制胃腺癌细胞的生长,且呈剂量依赖性;含药血清与细胞共培养24小时后,细胞的凋亡率显著增加,细胞周期显示呈现二倍体的凋亡峰,而线粒体膜电位则较对照组明显降低。结论:解毒消症饮能够抑制胃腺癌细胞的生长,同时又可促进细胞的凋亡,这可能与中药含药血清可以提高细胞的凋亡率、改变细胞周期、降低线粒体膜电位有关。

关键词：解毒消癥饮胃腺癌细胞细胞凋亡线粒体膜电位流式细胞术

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壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构观察(摘要)

壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构观察(摘要)

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：林如辉陈文列刘献祥黄云梅黄美雅福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室

目的:骨性关节炎为中老年常见骨关节疾病,通过观察中成药壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构的变化,探讨壮骨关节丸治疗骨性关节炎的作用机理。方法:通过采用改良Hulth法造大白兔膝关节骨性关节炎模型。实验分组及干预措施:①正常... 详细信息

目的:骨性关节炎为中老年常见骨关节疾病,通过观察中成药壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构的变化,探讨壮骨关节丸治疗骨性关节炎的作用机理。方法:通过采用改良Hulth法造大白兔膝关节骨性关节炎模型。实验分组及干预措施:①正常对照组:正常饲养,不给予任何处理。②关节炎模型组:采用改良Hulth法造模,取兔左膝关节内侧入路,切断内侧副韧带,摘除内侧半月板,切断前交叉韧带。术后连续3天给青霉素20万u肌肉注射,1周后开始每天强迫兔活动0.5h,连续15周。③壮骨关节丸干预组:造模成功后,壮骨关节丸水溶液5ml（含壮骨关节丸1g）灌胃,每日1次,持续15周。透射电镜制样与观察:切取股骨内髁软骨及软骨下骨组织1×1×3mm（长轴与软骨面平行）,3%戊二醛-1.5%多聚甲醛前固定,5.5%EDTA-1.5%戊二醛脱钙-固定,1%四氧化（?）后固定,环氧树脂包埋;半薄切片1um,甲苯胺蓝染色,光镜观察细微结构并定位;超薄切片70nm,铀-铅染色,日立H-7650型透射电镜观察骨组织相关细胞与基质成分的超微结构变化,SIS公司2K×2K CCD相机拍摄。结果:正常对照组:软骨细胞胞体较大,呈卵圆形或多角形,细胞表面可见较多短突起,伸向软骨陷窝壁。核内常染色质细微,异染色质多见;胞质内粗面内质网有些扩张成池状,表面附着较多的核糖体;高尔基复合体可见,线粒体呈圆形且较少,可见糖原颗粒。软骨及软骨下骨交界处,有低电子密度与深电子密度相邻的骨基质区域,其纤维排列方向不一致。低电子密度胶原纤维束中的胶原原纤维粗细相彷,均与纤维束呈同一走向;深电子密度胶原纤维束中的胶原原纤维走向不规则,呈斜形、横形交错。成骨细胞呈不规则形,胞内可见较多的轻度扩张的粗面内质网及高尔基复合体。骨细胞呈扁椭圆形,突起较多,细胞器较少。偶见圆形哈佛氏管。关节炎模型组:软骨细胞胞体较大,呈多角形,突起较少;细胞核变形、固缩,或异染色质边聚,呈凋亡细胞核;胞质中粗面内质网有些扩张成池状,有脱颗粒现象;糖原聚集。软骨及软骨下骨交界处,成骨细胞呈椭圆形或不规则形,见少量突起;细胞核呈椭圆形,以异染色质为主,聚于核膜下;胞质内可见较多轻度扩张的粗面内质网。骨细胞呈扁椭圆形或不规则形,突起较少,其周边可见骨小管断面;细胞核呈不规则形,异染色质斑块状,多靠核膜;细胞质内细胞器较少,结构较模糊。（图1.2.3）。壮骨关节丸干预组:软骨细胞呈扁平或椭圆形,胞膜可见少量突起;核形状不规则,异染色质聚集不明显,常染色质为主,未见明显凋亡现象;粗面内质网扩张成池状,胞质内见糖原。软骨及软骨下骨交界处,有低电子密度与深电子密度相邻的骨基质区域,其纤维排列方向不一致。成骨细胞呈椭圆形,突起较少;细胞核呈椭圆形,核内以常染色质为主,异染色质多于核膜下,核仁未见;粗面内质网可见,以核周为多,有些扩张成池状,未见明显脱颗粒现象;线粒体少见。骨细胞呈椭圆形或不规则形,突起较多,可见骨小管的断面;核内常染色质较少,以异染色质为主,多于核膜下。粗面内质网可见,有些扩大成池状,未见明显脱颗粒现象。（图4.5.6）。结论:中成药壮骨关节丸能改善骨性关节炎的软骨与软骨下骨形态,减少软骨细胞的凋亡。

关键词：骨性关节炎壮骨关节丸软骨软骨下骨超微结构

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透射电镜EMTP组织处理仪制样方法

透射电镜EMTP组织处理仪制样方法

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：林如辉黄美雅陈文列黄云梅福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室

EMTP组织处理仪脱水既能减少组织在常规脱水换液过程中吸收空气中的水分,可大批量处理样品,节省大量时间,并能减少手工操作的差异。

关键词：透射电镜组织处理仪脱水制样

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透骨消痛颗粒对骨性关节炎软骨及软骨下骨影响的组织化学研究

透骨消痛颗粒对骨性关节炎软骨及软骨下骨影响的组织化学研究

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：黄云梅陈文列刘献祥黄美雅林如辉李民福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室福建中西医结合研究院骨病研究所

探讨透骨消痛颗粒对兔膝骨性关节炎软骨及软骨下骨的影响。方法:取新西兰大白兔72只,雌雄各半,根据改良Hulth法制作骨性关节炎模型,动物随机分成正常对照组、骨性关节炎模型组、透骨消痛颗粒低、中、高剂量组和壮骨关节丸组各,术后第1... 详细信息

探讨透骨消痛颗粒对兔膝骨性关节炎软骨及软骨下骨的影响。方法:取新西兰大白兔72只,雌雄各半,根据改良Hulth法制作骨性关节炎模型,动物随机分成正常对照组、骨性关节炎模型组、透骨消痛颗粒低、中、高剂量组和壮骨关节丸组各,术后第1周、第3周、第6周、第9周、第12周、第15周分批进行取材,采用石蜡切片HE染色、番红-固绿染色、AB-PAS染色和V-G染色法,观察膝关节软骨和软骨下骨的变化,以及PCNA免疫组织化学染色观察软骨细胞和成骨细胞的增殖情况。结果:模型组关节软骨和软骨下骨发生典型的骨性关节炎病理形态变化,软骨基质蛋白多糖尤其是酸性粘多糖和胶原减少,软骨和成骨细胞增殖早期较正常组活跃,晚期软骨细胞增殖能力下降;实验组与模型组相比,组织结构破坏有明显改善,蛋白多糖和胶原的含量增加,细胞增殖较稳定,且呈药物剂量依赖性,高剂量组效果优于壮骨关节丸组。结论:透骨消痛颗粒对实验性兔膝骨性关节炎软骨和软骨下骨病变均有一定的防治作用,这可能与其调节软骨和成骨细胞的代谢和增殖有关。<正>骨性关节炎;透骨消痛颗粒;蛋白多糖;胶原纤维;特殊染色;PCNA;免疫组织化学

关键词：骨性关节炎实验组高剂量正常组免疫组织化学染色模型组壮骨关节丸组织化学

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解毒消癥饮对胃癌细胞凋亡相关基因表达的激光共聚焦显微镜研究

解毒消癥饮对胃癌细胞凋亡相关基因表达的激光共聚焦显微镜研究

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：黄云梅陈文列胡海霞黄祖芳黄美雅郑良朴林如辉李钻芳杜建福建中西医结合研究院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室医学光电科学与技术教育部重点实验室(福建师范大学)

目的:探讨中药复方解毒消症饮对人胃癌细胞凋亡相关基因的影响。方法:将培养的人胃腺癌细胞株BGC-823分成低、中、高剂量含药血清组及空白血清对照组,分别加入相应剂量的解毒消症饮大鼠含药血清和空白对照血清,培养24h、48h和72h;免疫... 详细信息

目的:探讨中药复方解毒消症饮对人胃癌细胞凋亡相关基因的影响。方法:将培养的人胃腺癌细胞株BGC-823分成低、中、高剂量含药血清组及空白血清对照组,分别加入相应剂量的解毒消症饮大鼠含药血清和空白对照血清,培养24h、48h和72h;免疫荧光染色法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及Fas-L的表达,应用激光共聚焦显微镜观察并做半定量分析。结果:胃癌细胞经解毒消症饮含药血清干预后,Bax、Fas表达明显增加(P<0.05),且随药物浓度的增加该趋势更加明显,Fas-L则随药物浓度的增加表达明显减弱(P<0.05);各含药血清组与空白血清对照组相比,Bcl-2的表达量无明显变化。结论:解毒消症饮可能通过调控胃癌细胞Bax、Fas及Fas-L等基因,从而促进细胞凋亡,并降低细胞免疫逃逸的功能。

关键词：解毒消癥饮胃癌细胞凋亡 Bax Bcl-2 Fas Fas-L 激光共聚焦显微镜

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腔道医学原虫超微结构细胞化学及免疫组化研究

腔道医学原虫超微结构细胞化学及免疫组化研究

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中国动物学会原生动物学分会第十五次学术讨论会

作者：陈文列钟秀容福建中西医结合研究院重点实验室福州350108 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福州350108 福建医科大学基础医学院病理学系电镜室福州350004

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激光共聚焦显微技术在中医药研究中的应用

激光共聚焦显微技术在中医药研究中的应用

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：李钻芳陈文列陈荣黄祖芳福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室医学光电科学与技术教育部重点实验室(福建师范大学医学光电科学与技术教育部重点实验室(福建师范大学)

激光扫描共聚焦显微镜是20世纪80年代发展起来的医药学图像分析仪器,现已成为细胞生物学、生理学、病理学及药学等研究领域中重要的研究工具,在中医药抗肿瘤、防治中枢神经系统疾病、心血管系统疾病、免疫系统疾病等研究中发挥独特的作... 详细信息

激光扫描共聚焦显微镜是20世纪80年代发展起来的医药学图像分析仪器,现已成为细胞生物学、生理学、病理学及药学等研究领域中重要的研究工具,在中医药抗肿瘤、防治中枢神经系统疾病、心血管系统疾病、免疫系统疾病等研究中发挥独特的作用,越来越受到中医药研究学者的青睐。本文综述了激光扫描共聚焦显微技术在中医药研究领域取得的进展。

关键词：激光扫描共聚焦显微镜中药单体中药复方抗肿瘤细胞凋亡

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乌龙药茶对高脂血症大鼠血脂水平的调节和血管内皮保护作用的研究

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茶叶科学 2008年第2期28卷 107-110页

作者：郑良朴林薇叶蕻芝陈文列胡海霞福建中医学院福建省高校中西医结合基础重点实验室福建中西医结合研究院福建福州350108

采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,通过药、茶和乌龙药茶分别灌胃,实验35d后,检测大鼠血液丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL... 详细信息

采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,通过药、茶和乌龙药茶分别灌胃,实验35d后,检测大鼠血液丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的含量,以及观察大鼠的一般情况和肝、肾组织的病理变化,来观察乌龙药茶对实验性高脂血症大鼠血脂水平调节和血管内皮细胞的保护作用。结果表明,药、茶和乌龙药茶均能明显降低模型大鼠血液TCHO、TC、LDL-C和ET-1含量,提高HDL-C和NO含量(P<0.05,P<0.01),其中,乌龙药茶作用显著优于药、茶。研究结论,药、茶和乌龙药茶均能显著调节机体的血脂水平,有效预防高脂血症和保护血管内皮细胞功能;乌龙药茶表现为药与茶两者协同作用、提高功效。

关键词：乌龙药茶高脂血症大鼠

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松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素-7表达的影响

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解剖学报 2008年第6期39卷 901-905页

作者：黄云梅刘卉魏建恩林晋周瑞祥福建中医学院福建省高校中西医结合基础重点实验室福建中西医结合研究院福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系神经生物学研究中心福州350108

目的探讨松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素7(IL-7)表达的影响及其意义。方法1.培养大鼠胸腺上皮细胞,应用广谱角蛋白抗体进行免疫细胞化学显色鉴定;MTT法观察褪黑素(1×10-3～10-9mol/L)干预对细胞生长的影响;细胞... 详细信息

目的探讨松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素7(IL-7)表达的影响及其意义。方法1.培养大鼠胸腺上皮细胞,应用广谱角蛋白抗体进行免疫细胞化学显色鉴定;MTT法观察褪黑素(1×10-3～10-9mol/L)干预对细胞生长的影响;细胞分空白对照组、褪黑素10-8mol/L处理组和褪黑素10-6mol/L处理组,RT-PCR法观察细胞IL-7mRNA的表达;2.选用清洁级雄性SD大鼠110只,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素7.5mg/(kg.d)腹腔注射组和松果体摘除+褪黑素15mg/(kg.d)腹腔注射组。术后4周和8周取材,运用免疫组织化学和RT-PCR方法观察胸腺上皮细胞IL-7表达的变化。结果褪黑素干预对大鼠胸腺上皮细胞的生长无显著影响,但能使IL-7mRNA的表达水平呈剂量依赖性升高;松果体摘除对大鼠胸腺上皮细胞表达IL-7无显著影响,补充褪黑素15mg/(kg.d)4周后IL-7表达显著增高,8周后均下降至正常水平。结论松果体及褪黑素可能通过影响大鼠胸腺上皮细胞IL-7的表达,从而调节胸腺细胞的分化发育。

关键词：松果体褪黑素胸腺上皮细胞白细胞介素7 免疫组织化学反转录-聚合酶链反应大鼠

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软骨细胞体外分离培养与鉴定的实验研究

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福建中医学院学报 2008年第6期18卷 32-33,37页

作者：叶蕻芝李西海梁文娜刘献祥吴明霞福建中医学院中西医结合研究院福建福州350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 福建福州350108 福建中医学院福建福州350108

目的探讨免关节软骨细胞分离、培养和鉴定的方法,建立软骨细胞的体外培养体系。方法4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法.分离膝关节软骨细胞接种培齐以及传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定... 详细信息

目的探讨免关节软骨细胞分离、培养和鉴定的方法,建立软骨细胞的体外培养体系。方法4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法.分离膝关节软骨细胞接种培齐以及传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。结果成功建立了体外培养软骨细胞的实验方法。原代培养的软骨细胞呈多角形.传代3次后出现反分化。形态学、免疫化学染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。细胞传至5代后,出现"成纤维细胞样"。结论本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代、第3代细胞生长良好.适合于实验研究:软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。

关键词：关节软骨软骨细胞细胞培养

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