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福建中西医结合研究院2008年学术年会

作者：胡海霞苏东辉吴林青福建中西医结合研究院重点实验室，福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 福州 350108 福建省中西医结合老年性疾病研究重点实验室(福建中医学院)福州 350108 福建医科大学，福州 350108

目的：用体外实验研究CXC家族趋化因子I-TAC对原代T细胞分化作用及黏附分子表达的影响，探讨I-TAC在中枢神经系统的退行性病变的慢性炎症中可能发挥的免疫调节作用。方法：用尼龙毛分离纯化小鼠原代T细胞，加I-TAC培养。用ELISA检... 详细信息

目的：用体外实验研究CXC家族趋化因子I-TAC对原代T细胞分化作用及黏附分子表达的影响，探讨I-TAC在中枢神经系统的退行性病变的慢性炎症中可能发挥的免疫调节作用。方法：用尼龙毛分离纯化小鼠原代T细胞，加I-TAC培养。用ELISA检测培养上清中的IFN-γ和IL-4浓度。应用流式细胞术检测黏附分子CD11a在T细胞表面的表达。结果：重组I-TAC对小鼠T细胞产生Th1型细胞因子IFN-γ的增加占显著优势。流式细胞技术检测显示I-TAC以剂量依赖的形式显著增加CD11a(LAF-1)阳性T细胞的百分比。结论：I-TAC可能通过促进T细胞的分化及表达黏附分子而在中枢神经系统的退行性病变的慢性炎症中发挥的积极的免疫调节作用。

关键词： T细胞分化黏附分子退行性病变中枢神经系统慢性炎症流式细胞术动物模型免疫调节

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保持阴道毛滴虫粘附状态的原位固定方法

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中国病原生物学杂志 2010年第3期5卷 198-199,F0002页

作者：钟秀容陈文列福建医科大学病理学系电镜室福建福州350004 福建中医学院福建中西医结合研究院电镜实验中心福建省高校中西医结合基础重点实验室福建福州350108

目的观察阴道毛滴虫在粘附状态下的形态结构特点。方法将固定液注入感染阴道毛滴虫的大鼠阴道,达到局部预固定效果后,再取材浸泡固定,分别进行透射电镜、扫描电镜、光镜免疫组化及特染观察。结果经预固定后制作的标本片虫体数量较多。... 详细信息

目的观察阴道毛滴虫在粘附状态下的形态结构特点。方法将固定液注入感染阴道毛滴虫的大鼠阴道,达到局部预固定效果后,再取材浸泡固定,分别进行透射电镜、扫描电镜、光镜免疫组化及特染观察。结果经预固定后制作的标本片虫体数量较多。电镜下见阴道毛滴虫呈阿米巴样粘附于上皮细胞表面,虫体指状伪足插入上皮细胞间。结论采用原位加浸泡固定方法制备的样品,虫体数量多,且更接近其粘附状态下的形态结构特点。

关键词：阴道毛滴虫原位固定电镜技术光镜技术

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慢性氧化应激诱导兔动脉粥样硬化对蛋白酶体26S及20S活性影响的实验研究

慢性氧化应激诱导兔动脉粥样硬化对蛋白酶体26S及20S活性影响的实...

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福建中西医结合研究院2008年学术年会

作者：谭春江陈文列沈双宏蔡晶杜建李玉光福建中西医结合研究院，福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 福州 350108 福建省中西医结合老年性疾病研究重点实验室(福建中医学院)福州 350108 汕头大学医学院，汕头 515041

目的：探讨慢性氧化应激诱导动脉粥样硬化(AS)对蛋白酶体26S及20S活性的影响，以及与泛素/泛素蛋白结合物(ub/upc)的表达之间的关系。方法：新西兰雄性兔30只，随机分为正常饮食组(N)，高胆固醇饮食组(H)，共饲养12周，检测26S及20... 详细信息

目的：探讨慢性氧化应激诱导动脉粥样硬化(AS)对蛋白酶体26S及20S活性的影响，以及与泛素/泛素蛋白结合物(ub/upc)的表达之间的关系。方法：新西兰雄性兔30只，随机分为正常饮食组(N)，高胆固醇饮食组(H)，共饲养12周，检测26S及20S的活性，观察血管的病理变化，ub/upc的表达及氧化应激等指标。结果：成功诱导了AS模型，H组的20S的活性比N组明显增高(P＜0.01)，而26S的活性两组间无差异(P＞0.05)，ub/upc在H组的表达比N组明显增强。结论：慢性氧化应激状态下，20S泛的活性明显增强，ub/upc大量聚集，可能在AS的病理变化过程中起着重要的作用。

关键词：氧化应激动脉粥样硬化蛋白酶体动物模型

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补肾中药对雄性大鼠神经系统雌激素受体β亚型的影响

补肾中药对雄性大鼠神经系统雌激素受体β亚型的影响

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2006海峡两岸四地中医药论坛暨福建中西医结合研究院学术年会

作者：蔡晶杜建曹治云福建中西医结合研究院，福州 350108 福建中西医结合研究院，福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院)，福州 35010

目的：通过检测服用补肾阳中药和补肾阴中药后的雄性大鼠杏仁核和皮质顶叶雌激素受体β亚型(estrogenreceptorβ，ERβ)mRNA及蛋白，探讨补肾中药对雄性大鼠神经系统雌激素受体的影响。方法：SD雄性大鼠，分为A、B、C三组，A、B分别给... 详细信息

目的：通过检测服用补肾阳中药和补肾阴中药后的雄性大鼠杏仁核和皮质顶叶雌激素受体β亚型(estrogenreceptorβ，ERβ)mRNA及蛋白，探讨补肾中药对雄性大鼠神经系统雌激素受体的影响。方法：SD雄性大鼠，分为A、B、C三组，A、B分别给予补肾阳中药淫羊藿和补肾阴中药女贞子持续灌胃14 d，C组作为空白对照;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测雌激素受体ERβmRNA表达量，免疫组化染色检测ERβ蛋白的分布及表达。结果：A组杏仁核、皮质顶叶雌激素受体ERβmRNA表达量显著高于B组和C组(P<0．01)，B组仅在杏仁核中ERβmRNA表达量高于对照组(P<0．05);A组和B组ERβ蛋白H-score积分均显著高于C组(P<0．01)，A组皮质顶叶ERβ蛋白H-score积分高于B组。结论：补肾中药对ERβ基因及蛋白具有调节作用。该作用可能与补肾中药对神经系统生长、发育、缺血损伤后再生重建等保护作用有关。

关键词：补肾中药雌激素受体神经系统反转录聚合酶链反应调节作用动物实验

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健骨颗粒对去卵巢OP模鼠尿D-Pyr及骨组织Itgβ1mRNA表达的影响

健骨颗粒对去卵巢OP模鼠尿D-Pyr及骨组织Itgβ1mRNA表达的影响

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2006海峡两岸四地中医药论坛暨福建中西医结合研究院学术年会

作者：林燕萍周瑞祥冯尔宥黄美雅福建中医学院福州 350108 福建医科大学福州 350108 福建中医学院福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室福建中医学院福州 350108

目的：从分子水平及骨代谢角度探讨健骨颗粒对成骨细胞功能的调控作用以及对骨吸收的影响。方法：通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松(OP)模型，药物干预，分别运用酶联免疫吸附法和原位杂交等手段，检测模鼠尿脱氧吡啶酚(D-Pyr)水平和骨组... 详细信息

目的：从分子水平及骨代谢角度探讨健骨颗粒对成骨细胞功能的调控作用以及对骨吸收的影响。方法：通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松(OP)模型，药物干预，分别运用酶联免疫吸附法和原位杂交等手段，检测模鼠尿脱氧吡啶酚(D-Pyr)水平和骨组织整合素1β(Itgβ1)mRNA表达。结果：切除卵巢后模鼠尿D-Pyr水平明显升高，骨组织成骨细胞Itgβ1mRNA表达降低。健骨颗粒治疗12周，骨质疏松模鼠尿D-Pyr水平明显下降，而骨组织成骨细胞数量以及Itgβ1mRNA表达均显著增加。结论：健骨颗粒通过降低骨质疏松模鼠骨基质中Ⅰ型胶原纤维的分解代谢，提高成骨细胞的成骨活性，从而改善或扭转因E2下降出现的成骨不足病理态势，发挥“健骨”之功。

关键词：骨质疏松健骨颗粒尿脱氧吡啶酚骨组织整合素中药药理作用药物代谢

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活血化瘀中药对激素性股骨头缺血坏死模鼠TGF-β1表达的实验研究

活血化瘀中药对激素性股骨头缺血坏死模鼠TGF-β1表达的实验研究

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福建中西医结合研究院2008年学术年会

作者：齐振熙康靖东郑良朴福建中西医结合研究院骨病研究所福州 350108 福建中医学院科技产业处，福州 350003 福建中医学院骨伤系福州 350108 福建中西医结合研究院重点实验室福州 350108 福建中医学院骨伤系福州 350108 福建中西医结合研究院重点实验室福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院)，福州 350108

目的：观察活血化瘀中药对激素性股骨头缺血性坏死大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响，进一步探讨其防治激素性股骨头坏死的作用机制。方法：采用清洁级SD大鼠40只，随机分为空白组4只和模型组36只，模型组每周2次腹腔注射醋... 详细信息

目的：观察活血化瘀中药对激素性股骨头缺血性坏死大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响，进一步探讨其防治激素性股骨头坏死的作用机制。方法：采用清洁级SD大鼠40只，随机分为空白组4只和模型组36只，模型组每周2次腹腔注射醋酸泼尼松龙24.5mg/kg，经6周诱导出早期激素性股骨头缺血坏死的模型，空白组每周2次腹腔注射同等剂量的生理盐水。6周后处死空白组4只和模型组4只，进行光、电镜观察，确定造模成功。随后将其余32只模型组大鼠再随机分为治疗组16只和对照组16只，分别灌服桃红四物汤和生理盐水，于灌胃后第6、8周检测血清中TGF-β1的含量;检测股骨头局部TGF-β1mRNA的转录及股骨头局部TGF-β1的表达。结果：1、光镜观察：模型组空缺骨陷窝数明显增多，骨小梁细疏，髓腔脂肪细胞增大、增多，与空白组有明显差异(P＜0.01)。2、电镜观察：模型组骨细胞数量减少，退变固缩或出现出现脂滴，成骨细胞减少，髓内脂肪细胞增大、增多，空白组骨细胞富含粗面内质网，多聚核糖体多，线粒体发达，嵴结构清晰，核异染色质丰富，核仁可见。3、图像分析仪分析：治疗组股骨头局部TGF-β1较对照组表达明显增强，两组有明显差异(P＜0.01)。4、血清丁GF-β1含量检测：治疗组血清中TGF-β1的表达增强，与对照组相比有明显差异(P＜0.01)。5、股骨头局部TGF-β1 mRNA的转录：治疗组在第6周时表达即增强，在第8周时表达又降低，而对照组在第6周时表达减少，在第8周时未检测到TGF-β1 mRNA的表达，两组差异显著(P＜0.05，P＜0.01)。结论：活血化瘀中药可促进激素性股骨头缺血坏死模鼠股骨头局部TGF-β1 mRNA的转录水平，促进股骨头局部TGF-β1表达，明显减少股骨头局部空骨陷窝数，促进坏死股骨头的修复。

关键词：股骨头坏死转化生长因子β 活血化瘀中药动物模型

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解毒消癥饮对BGC-823胃腺癌细胞线粒体膜电位与细胞凋亡的流式细胞术研究

解毒消癥饮对BGC-823胃腺癌细胞线粒体膜电位与细胞凋亡的流式细...

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第六届全国中西医结合基础理论研究学术研讨会暨第二届湖南省中西医结合学会肝病专业学术年会

作者：胡海霞郑良朴陈文列林久茂陈旭征林薇锦燕福建中西医结合研究院重点实验室福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室

目的:研究中药复方解毒消癥饮含药血清对胃腺癌细胞BGC-823增殖与凋亡作用的影响。方法:采用血清药理学方法,低、中、高剂量含药血清干预体外培养的胃腺癌细胞BGC-823(24、48、72h),MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞... 详细信息

目的:研究中药复方解毒消癥饮含药血清对胃腺癌细胞BGC-823增殖与凋亡作用的影响。方法:采用血清药理学方法,低、中、高剂量含药血清干预体外培养的胃腺癌细胞BGC-823(24、48、72h),MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期及线粒体膜电位的变化。结果:与对照组比较,随时间延长(24、48、72h),含药血清组可以显著抑制胃腺癌细胞的生长,且呈剂量依赖性(r=0.951,p<0.05);含药血清与细胞共培养24小时后,低、中、高剂量组的细胞凋亡率(%)分别为2.392±0.188,3.960±0.568,6.350±0.065,较对照组1.357±0.335增加;细胞周期显示出现典型的S期阻滞;含药血清低、中、高剂量组的线粒体膜电位下降的细胞百分率5.095+0.971、8.593±0.944、16.217+2.358则较对照组1.610±1.067明显降低。结论:解毒消癥饮能抑制胃腺癌细胞生长并促其凋亡,可能与中药含药血清对细胞凋亡率、细胞周期及线粒体膜电位的影响有关。

关键词：解毒消癥饮人胃腺癌细胞BGC-823 细胞凋亡线粒体膜电位流式细胞术

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疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究

疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究

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福建中西医结合研究院2008年学术年会

作者：吴广文刘伯龄刘献祥黄云梅陈文列福建中西医结合研究院，福州 350108 福州市第二医院，福州 350007 福建中西医结合研究院，福州 350108 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 福州 350108 福建省中西医结合老年性疾病研究重点实验室(福建中医学院)福州 350108

目的：通过疏密波对骨髓间充质干细胞(HSCs)体外抽取、分离、纯化、培养、软骨分化等基础实验，以优化软骨组织工程的种子细胞，增强软骨的自我修复功能，延缓软骨的退行性改变，达到预防与治疗骨性关节炎(OA)的目的，同时，探讨疏密波... 详细信息

目的：通过疏密波对骨髓间充质干细胞(HSCs)体外抽取、分离、纯化、培养、软骨分化等基础实验，以优化软骨组织工程的种子细胞，增强软骨的自我修复功能，延缓软骨的退行性改变，达到预防与治疗骨性关节炎(OA)的目的，同时，探讨疏密波促进软骨生成的最佳波段组合，并从分子生物学水平阐明疏密波调控HSCs向软骨细胞分化的机制，为疏密波治疗仪应用于临床提供实验依据，也为诱导干细胞定向分化为软骨细胞提供一新思路。方法：①实验于2006-10/2008-03在福建中医学院中西医结合研究院完成。选用4周龄SD大鼠45只，雌雄不限，动物处理方法符合动物伦理学标准。②抽取SD大鼠骨髓液，采用全骨髓贴壁培养法经体外分离、纯化、培养获得SD大鼠HSCs，通过倒置相差显微镜观察其生长情况，研究HSCs的体外生长状况。通过检测HSCs表面标志抗原CD45和CD90表达阳性率，对第3代SD大鼠HSCs(F3 HSCs)进行鉴定。③疏密波发射仪由福州大学生物医学仪器研究所提供。根据干预仪器工作模式的不同，将F3 HSCs分为：A组、B组、C组和D组(空白对照组);组内根据干预时间的差异分为：A1组(仪器在模式Ⅰ下干预30分钟，1次/日)，A2组(仪器在模式Ⅰ下干预60分钟，1次/日)，B1组(仪器在模式Ⅱ下干预30分钟，1次/日)，B2组(仪器在模式Ⅱ下干预60分钟，1次/日)，C1组(仪器在模式Ⅲ下干预30分钟，1次/日)，C2组(仪器在模式Ⅲ下干预60分钟，1次/日)。诱导14天后，采用RT-PCR、甲苯胺蓝染色和免疫组化等方法，研究疏密波对骨髓间充质干细胞(HSCs)向软骨细胞表型分化过程的影响。结果：①体外培养的HSCs生长状况良好，14d可获得均质性较好的HSCs。F3HSCs CD45和CD90表达阳性率分别为2.14％、99.12％。②疏密波诱导14d后，CbfalmRNA、Sox9mRNA均有表达，C组优于其它各组(P＜0.05)，组内无显著性差异(P＞0.05);甲苯胺蓝染色可见诱导后细胞胞质和细胞外基质异染;免疫组化可见诱导组呈阳性反应。结论：疏密波能诱导骨髓间充质干细胞体外分化为软骨细胞表型，并分泌软骨细胞特异性基质Ⅱ型胶原，且C组优于其它各组，其主要通过上调CbfalmRNA、Sox9mRNA的表达.进而促进糖胺聚糖和Ⅱ型胶原基质的表达来实现。

关键词：骨髓间充质干细胞疏密波软骨细胞组织工程种子细胞骨性关节炎

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中药肾康灵干预阿霉素肾病大鼠血蛋白质质谱表达的实验研究

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中国中西医结合肾病杂志 2010年第12期11卷 1048-1053,1137页

作者：郑健艾斯林青吴华嵩陈蓉艳陈乃清陈文列张洪生福建中医药大学附属人民医院福州350004 福建省中医药研究院福州350003 福建中医学院福建省高校中西医结合基础重点实验室福州350108

目的：应用血蛋白质组学筛选阿霉素肾病（AN）大鼠血清中差异表达的蛋白质,旨在蛋白质分子水平探索频复发性肾病综合征（FRNS）的诊断标志物及中药肾康灵治疗的作用靶点。方法：利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）... 详细信息

目的：应用血蛋白质组学筛选阿霉素肾病（AN）大鼠血清中差异表达的蛋白质,旨在蛋白质分子水平探索频复发性肾病综合征（FRNS）的诊断标志物及中药肾康灵治疗的作用靶点。方法：利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）联合CM10蛋白质芯片技术检测各组大鼠血蛋白质组质谱的表达,采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机自动收集数据,使用Ciphergen Proteinchip Software3.2.1和Biomarker Wizard分析软件筛选出各组大鼠血清差异表达的蛋白质。结果：在质荷比值（M/Z）2000~50000范围内,P〈0.05,芯片共捕获到30种差异蛋白质,质谱仪筛选出B组与A组比较的25种差异蛋白,C组与B组比较筛选出5种差异蛋白,其中3种差异蛋白在B、C、D、E组间差异有统计学意义,且从B组→C组→D、E组→A组呈递减趋势,这3种蛋白峰分别为8837.7、15013.0、15053.2。结论：SELDI-TOF-MS能有效分析阿霉素肾病大鼠血清蛋白质质谱,中药肾康灵干预治疗后蛋白质质谱表达差异有统计学意义。

关键词：表面增强激光解析-电离飞行时间质谱 CM10芯片肾康灵阿霉素肾病血蛋白质组学

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透骨消痛颗粒干预骨性关节炎模型的超微结构观察(摘要)

透骨消痛颗粒干预骨性关节炎模型的超微结构观察(摘要)

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第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：陈文列林如辉刘献祥黄云梅郑良朴吴广文黄美雅林久茂林薇福建中西医结合研究院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院) 福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院) 国家中医药管理局三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室

目的:骨性关节炎是常见于中老年骨关节退行性疾病,通过透射电镜观察中药复方透骨消痛颗粒干预兔膝骨性关节炎模型的超微结构,探讨透骨消痛颗粒治疗骨性关节炎的作用机理。方法:6月龄新西兰大白兔36只,体重2100±100g,雌雄各半,随机... 详细信息

目的:骨性关节炎是常见于中老年骨关节退行性疾病,通过透射电镜观察中药复方透骨消痛颗粒干预兔膝骨性关节炎模型的超微结构,探讨透骨消痛颗粒治疗骨性关节炎的作用机理。方法:6月龄新西兰大白兔36只,体重2100±100g,雌雄各半,随机分组实验。①正常对照组:正常饲养,不做任何处理;②关节炎模型组:采用改良Hulth法建立膝关节骨性关节炎模型,1周后开始每天强迫兔活动0.5h,连续15周;③透骨消痛颗粒低、中、高剂量组:造模后大白兔分组,分别用5g、10g、20g透骨消痛颗粒剂灌胃,每天1次;同时设阳性对照药组（造模后大白兔用壮骨关节丸1g/5ml水溶液每日灌胃）;各组动物按各时间点,即灌药后每隔3周至第15周,分批进行影像学观察并取材供光镜、电镜观察。透射电镜制样与观察:切取胫骨平台软骨及软骨下骨组织1×1×3mm（长轴与软骨面平行）,3%戊二醛-1.5%多聚甲醛前固定,5.5%EDTA-1.5%戊二醛脱钙-固定,1%四氧化（?）后固定,环氧树脂包埋;半薄切片美蓝-天青染色,光镜辅助观察细微结构并定位;超薄切片铀-铅染色,日立H-7650型透射电镜观察骨组织相关细胞与基质成分的超微结构变化,SIS公司2K×2K CCD相机拍摄。结果:①正常对照组:软骨细胞呈较大的椭圆形或扇贝形,细胞表面可见较多细而短的突起;细胞核圆形或椭圆形,核内常染色质为主,染色质均匀;胞质内可见粗面内质网、线粒体等,糖原颗粒散在,有的细胞微丝成束;静止期软骨细胞的细胞器较少。软骨组织基质中有丰富纤细的胶原原纤维。软骨与软骨下骨交界处,有低电子密度与高电子密度相邻的骨基质区域,其纤维排列方向不一致。成骨细胞少见。骨细胞呈扁椭圆形,在陷窝内细胞表面突起明显,胞质相对较少,细胞器少见;核内异染色质丰富、散在。骨组织基质中有丰富的横纹明显的胶原原纤维。见哈佛氏管。（图1-4）②关节炎模型组:软骨细胞固缩变性,呈多角形等不规则形,表面突起较少;细胞核变形、固缩,或异染色质边聚,呈凋亡细胞核;胞质基质深染,部分细胞器结构破坏,糖原聚集,可见脂滴。软骨下骨部位,骨小梁粗细不一、可见骨折,腔隙孔洞大小不同。骨细胞大小不一,呈不规则形,突起较少;细胞核不规则形,异染色质边聚,细胞凋亡多见。（图5-8）③透骨消痛颗粒低、中、高剂量组:软骨细胞椭圆或扇贝形,表面突起较多;核椭圆形,核染色质均匀;胞质中粗面内质网较发达,部分池扩张明显,糖原颗粒散在、多见,微丝丰富;软骨细胞群中同源细胞多见,未见明显变性现象,低剂量组有很少数细胞坏死。软骨下骨部位,低剂量组可见凋亡细胞;成骨细胞长椭圆形,突起较少,中、高剂量组中的成骨细胞数量比低剂量组少,而骨细胞呈椭圆形或梭形,多数结构较正常;骨小梁、腔隙孔洞大小比模型组明显改善。（图9-16）。阳性对照药组（壮骨关节丸干预组）:细胞状况相似于透骨消痛颗粒组。结论:中药复方透骨消痛颗粒能减少软骨细胞的变性、骨细胞的凋亡,改善骨性关节炎的软骨与软骨下骨的超微结构。

关键词：骨性关节炎透骨消痛颗粒软骨软骨下骨超微结构

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