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中国组织工程研究 2025年第18期29卷 3758-3766页

作者：胡斌涵陈灿黄茂畅赵宇刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:软骨终板基质稳态与椎间盘退变关系密切,针刀松解椎间孔内口后壁黄韧带可改善腰椎间盘退变患者的症状,其作用机制是否与调控软骨终板基质稳态有关尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解兔L_(7)/S_(1)椎间孔内口对软骨终板基质稳... 详细信息

背景:软骨终板基质稳态与椎间盘退变关系密切,针刀松解椎间孔内口后壁黄韧带可改善腰椎间盘退变患者的症状,其作用机制是否与调控软骨终板基质稳态有关尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解兔L_(7)/S_(1)椎间孔内口对软骨终板基质稳态的影响。方法:24只雄性新西兰兔随机分为对照组6只、造模组18只,采用横断棘上棘间韧带后间歇性站立的方式进行腰椎间盘退变造模,时间为12周。造模后将造模组随机分为模型组、针刀组、假针刀组,每组6只。针刀组在超声引导下针刀松解兔L_(7)/S_(1)右侧椎间孔内口后壁黄韧带,假针刀组针刀只抵达椎间孔内口后壁黄韧带表面,共干预4次,每次间隔1周;对照组、模型组兔不做干预。干预结束30 d后,MRI观察椎间盘退变情况;苏木精-伊红染色、番红O固绿染色观察L_(7)/S_(1)椎间盘软骨终板、髓核、纤维环形态并评分;免疫组化检测L_(7)/S_(1)椎间盘髓核、软骨终板Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、基质金属蛋白酶13表达。结果与结论:①MRI显示,L_(7)/S_(1)髓核相对灰度值模型组明显低于对照组(P<0.01),针刀组高于模型组和假针刀组(P<0.05);②苏木精-伊红染色及番红O固绿染色显示,模型组髓核、纤维环退变明显,软骨终板变薄,与骨性终板交界处钙化明显,针刀组软骨终板形态及髓核退变较模型组改善;模型组、针刀组、假针刀组形态学评分明显高于对照组(P<0.01);针刀组评分明显低于模型组和假针刀组(P<0.01);③免疫组化显示,与对照组比较,模型组和假针刀组髓核、软骨终板中Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达明显降低(P<0.01),基质金属蛋白酶13表达明显升高(P<0.01);与模型组、假针刀组比较,针刀组髓核、软骨终板Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达升高(P<0.05),基质金属蛋白酶13表达明显降低(P<0.01);④结论:针刀松解椎间孔内口可调节兔软骨终板基质稳态,改善椎间盘退变。

关键词：腰椎间盘退变软骨终板针刀椎间孔内口超声

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超声引导下针刀松解黄韧带对兔退变腰椎间盘整合素α5、β1表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 331-338页

作者：陈灿赵宇胡斌涵杜梦凡刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰... 详细信息

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰兔,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与造模组(n=18)。造模组采用横断L5/6、L6/7节段棘上、棘间韧带并保持站立姿势对腰椎施加轴向载荷的方式建立兔腰椎间盘退变模型,造模成功后再随机分为模型组、超声针刀组、假针刀组,每组6只,超声针刀组在超声引导下使用针刀松解L7/S1右侧黄韧带,假针刀组针刀入路同超声针刀组,但不松解黄韧带,1次/周,共4次。针刀干预后30 d,利用MRI观察L7/S1椎间盘髓核信号强度变化,苏木精-伊红染色观察L7/S1椎间盘形态变化,免疫组化染色检测L7/S1椎间盘髓核内Ⅰ,Ⅱ型胶原表达,RT-PCR、Western Blot检测L7/S1椎间盘中整合素α5、β1、p38、核因子κB的表达。结果与结论:①MRI成像显示,模型组兔椎间盘髓核呈灰-黑色,髓核灰度值明显低于对照组(P<0.01);超声针刀组兔椎间盘髓核亮度较模型组升高,髓核灰度值高于模型组(P<0.01);②苏木精-伊红染色显示,模型组髓核形状不规则,髓核细胞数量减少,细胞外基质被压缩,纤维环破裂,终板结构与边界不清,软骨细胞排列紊乱;与模型组相比,超声针刀组髓核细胞数量增多,纤维环破裂情况有改善,软骨终板细胞排列较为规则;③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达增加(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达减少(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达减少(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达增加(P<0.01);④RT-PCR、Western Blot检测显示,与对照组比较,模型组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.01);⑤结果表明,超声引导下针刀松解黄韧带可改善兔腰椎间盘退变程度,该作用与通过调控整合素α5、β1表达、抑制p38和核因子κB表达有关。

关键词：腰椎间盘退变针刀黄韧带超声引导整合素

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龟鹿二仙胶对膝骨关节炎大鼠肠道菌群的影响:机器学习与16S rDNA分析

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中国组织工程研究 2026年第4期30卷 1058-1072页

作者：顾富城杨美鑫吴伟欣蔡玮俊钦洋溢孙铭一孙健耿秋东李楠福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:龟鹿二仙胶由龟甲胶、鹿角胶、枸杞子和人参组成。在早期的临床观察中,发现使用龟鹿二仙胶治疗肝肾不足型膝骨关节炎患者能有效缓解膝关节疼痛、增加运动范围、提高行走能力。然而,口服龟鹿二仙胶能够对膝关节产生局部治疗作用的... 详细信息

背景:龟鹿二仙胶由龟甲胶、鹿角胶、枸杞子和人参组成。在早期的临床观察中,发现使用龟鹿二仙胶治疗肝肾不足型膝骨关节炎患者能有效缓解膝关节疼痛、增加运动范围、提高行走能力。然而,口服龟鹿二仙胶能够对膝关节产生局部治疗作用的确切机制尚不清楚。目的:研究龟鹿二仙胶对膝骨关节炎大鼠肠道菌群的影响,并利用16SrDNA测序和机器学习分析评估其作用机制。方法:将18只雄性SD大鼠随机分为3组:空白组、模型组、龟鹿二仙胶组,每组8只。模型组和龟鹿二仙胶组采用内侧半月板失稳手术制备膝骨关节炎模型。造模成功后,龟鹿二仙胶组灌胃龟鹿二仙胶水煎剂,空白组和模型组则给予等量的蒸馏水。持续干预28 d后,使用高效液相色谱技术检测龟鹿二仙胶有效成分;MRI成像观察大鼠膝关节软骨情况采集各组大鼠粪便样本,使用试剂盒提取DNA,通过PCR扩增及纯化,构建Illumina测序文库,利用Illumina MiSeq平台进行高通量测序,生成原始序列数据。得到原始数据后,使用QIIME2软件对数据进行处理,使用线性判别分析效应值和随机森林算法对微生物数据进行差异性物种筛选,使用KEGG和MetaCyc功能通路分析探索关键菌群与实验组间的关联,使用线性判别分析效应值和随机森林算法筛选差异性物种,使用关联网络分析微生物群落间的相互作用,结合机器学习方法分析肠道菌群组成和变化。结果与结论:(1)龟鹿二仙胶中药复方进行LC-MS成分鉴定,共指出7种有效成分。(2)MRI成像显示,龟鹿二仙胶组大鼠高密度影的滑膜炎症范围减少,且股骨头内侧髁软骨较模型组退化较少。(3)16SrDNA测序显示模型组大鼠表现出明显的菌群失衡,在门水平上厚壁菌门和拟杆菌门的丰度显著降低,而变形菌门的比例显著增加(P<0.05)。龟鹿二仙胶组大鼠的肠道菌群结构有了显著改善,其厚壁菌门和拟杆菌门的比例回升,恢复了更为多样的菌群组成,接近空白组(P<0.05)。(4)KEGG和MetaCyc功能通路分析显示,龟鹿二仙胶组显著激活了多条代谢通路,包括氨基酸代谢、脂质代谢和生物素合成通路(P<0.05)。(5)上述结果提示,龟鹿二仙胶含有7种有效成分,并利用16SrDNA测序分析膝骨关节炎大鼠肠道菌群变化;龟鹿二仙胶能显著改善肠道菌群失衡,恢复有益菌丰度,对肠道菌群组成有显著影响,为龟鹿二仙胶的药效及机制提供了科学依据。

关键词：龟鹿二仙胶膝骨关节炎肠道菌群 16SrDNA测序机器学习 α多样性 β多样性差异通路

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急性脊髓损伤动物模型的建立与评估

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中国组织工程研究 2016年第49期20卷 7341-7348页

作者：吴杨鹏范筱张俐福建中医药大学骨伤学院省部共建教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:目前国内外脊髓损伤模型的设计种类繁多,各有其优缺点,但尚未有一种客观化、标准化的模型以满足临床研究。目的:设计一种简易打击器并建立脊髓损伤模型,通过与NYU(New York University)打击器建立的脊髓损伤模型进行对比,评估自制... 详细信息

背景:目前国内外脊髓损伤模型的设计种类繁多,各有其优缺点,但尚未有一种客观化、标准化的模型以满足临床研究。目的:设计一种简易打击器并建立脊髓损伤模型,通过与NYU(New York University)打击器建立的脊髓损伤模型进行对比,评估自制改良Allen’s脊髓损伤模型的参数及稳定性。方法:雌性SD大鼠随机分为5组,即假手术组(A组6只),自制打击器5,10 cm组(B1,B2组),NYU打击器1.25,2.5 cm组(C1,C2组),A组不打击,其余各组根据分组的不同高度进行打击,每组6只;各组分别与造模术后1,3,5,7 d进行行为学评分,冰冻切片后用尼氏染色法观察病理学改变,并进行半定量分析。结果与结论:(1)在行为学评分、脊髓损伤面积比和脊髓前、后角神经元半定量分析中,同一时间点,其他4组与A组比较差异均有显著性意义(P<0.05),B1组和C1组、B2组和C2组差异无显著性意义(P>0.05),B1组和B2组、C1组和C2组差异均有显著性意义(P<0.05);(2)病理学改变:A组见脊髓灰、白质分界清晰,呈蝴蝶状,神经元细胞核大、核仁明显、数量较多,胞质内斑块状或虎斑样尼氏体清晰;余各组出现不同程度的淤血灶,神经元数目减少,损伤处可见细胞肿胀,轴突脱髓鞘改变,部分细胞呈空泡样改变,尼氏体模糊或消失;(3)结果证实,自制打击器能制备出不同损伤程度的脊髓损伤模型,与NYU脊髓损伤模型效果相近,可靠性高,稳定性好,且操作简单,易于推广,可为大鼠脊髓损伤的研究提供基础。

关键词：脊髓损伤模型,动物神经行为学表现组织工程实验动物神经损伤与修复动物模型动物模型改良Allen’s法感觉评分 BBB评分尼氏染色冰冻切片国家自然科学基金

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活血通督汤对大鼠急性脊髓损伤后神经生长因子和胶质纤维酸蛋白质表达的影响

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中华中医药杂志 2017年第2期32卷 697-701页

作者：吴杨鹏范筱张俐福建中医药大学骨伤学院省部共建教育部重点实验室福州350122

目的:观察活血通督汤对急性脊髓损伤后神经生长因子(NGF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨活血通督汤对脊髓损伤干扰的作用机制。方法:将24只成年雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和活血通督汤组,每组8只。术前、术后7d均予... 详细信息

目的:观察活血通督汤对急性脊髓损伤后神经生长因子(NGF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨活血通督汤对脊髓损伤干扰的作用机制。方法:将24只成年雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和活血通督汤组,每组8只。术前、术后7d均予连续灌胃,活血通督汤组灌服活血通督汤,另两组灌服等量0.9%氯化钠溶液,均为每日2次。假手术组椎板摘除暴露脊髓但不予打击,模型组和活血通督汤组采用改良Allen’s法制备脊髓损伤模型。术后7d取材,灌注固定、石蜡包埋。采用尼氏染色法观察脊髓及神经元形态变化,免疫荧光法检测脊髓中NGF和GFAP的表达情况。结果:假手术组脊髓灰质呈蝴蝶状,结构完整,灰白质界限清楚,胞质内可见虎斑样尼氏体;与模型组比较,活血通督组瘀血面积较小,神经元水肿较轻,神经元形态较好,未见空泡样改变;与假手术组比较,模型组和活血通督组NGF和GFAP表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,活血通督组NGF阳性细胞数表达较高(P<0.01),GFAP阳性表达较低(P<0.01)。结论:活血通督汤能促进大鼠急性脊髓损伤后NGF的表达,抑制GFAP的表达,从而有利于急性脊髓损伤的修复。

关键词：活血通督汤脊髓损伤神经生长因子胶质纤维酸性蛋白

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电针对大鼠早期局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡机制的研究

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中国康复医学杂志 2014年第1期29卷 3-8页

作者：陶静陈阿贞兰岚杨珊莉林志诚陈立典福建中医药大学康复医学院福州350003 福建中医药大学教育部中医骨伤及运动康复重点实验室福建省运动功能康复重点实验室

目的:探讨电针刺激对大鼠早期局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的机制。方法:选用96只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、电针组各32只。采用改良Longa线栓法制作缺血再灌注大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,电针组于脑缺血再灌注2h后... 详细信息

目的:探讨电针刺激对大鼠早期局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的机制。方法:选用96只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、电针组各32只。采用改良Longa线栓法制作缺血再灌注大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,电针组于脑缺血再灌注2h后开始电针患侧"曲池"、"足三里"穴。各组于术后24h行神经行为学评分,TUNEL法检测脑组织细胞凋亡,免疫印迹法及逆转录PCR法检测脑组织细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax的表达,ELISA检测血清BDNF的变化。结果:脑缺血再灌注24h后,电针组大鼠神经行为学评分较模型组差异有显著性,且脑组织中TUNEL阳性细胞数明显降低(P<0.05);与模型组相比,电针组Bcl-2表达增高,Bax表达下降;模型组与电针组血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平较假手术组相比均明显下降,但电针组较模型组有进一步的升高,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:电针刺激可抑制脑组织中Bax的表达,提高Bcl-2,BDNF的作用,对抗脑缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡,达到加速神经功能恢复的目的。

关键词：电针脑缺血再灌注凋亡

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丹参及其制剂对脊髓损伤的保护作用及机制研究概况

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中华中医药杂志 2012年第11期27卷 2887-2890页

作者：陈凯张俐福建中医药大学骨伤学院省部共建教育部重点实验室福州350108

脊髓损伤(SCI)所造成的截瘫是长期未能解决的医学难题之一。近年来,对丹参及其制剂在脊髓损伤中的保护作用及机制的研究已有长足进展,丹参及其制剂主要通过抑制细胞凋亡、增加脊髓损伤区的血流量、抑制神经元凋亡、调节细胞内水、钙离... 详细信息

脊髓损伤(SCI)所造成的截瘫是长期未能解决的医学难题之一。近年来,对丹参及其制剂在脊髓损伤中的保护作用及机制的研究已有长足进展,丹参及其制剂主要通过抑制细胞凋亡、增加脊髓损伤区的血流量、抑制神经元凋亡、调节细胞内水、钙离子的浓度、减轻炎性反应、促进基因及神经丝表达等方式减轻脊髓损伤所导致的一系列病理生理损伤。本文针对近几年丹参及其制剂防治SCI的一些研究进行汇总研究,发现丹参作为一种常用的活血化瘀中药对脊髓损伤能起到一定的保护作用。

关键词：丹参丹参制剂脊髓损伤保护作用机制综述

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活血法对脊髓损伤后神经修复的机制研究

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中华中医药杂志 2016年第2期31卷 588-590页

作者：陈芬芳张俐邵航福建中医药大学骨伤学院省部共建教育部重点实验室福州350122

脊髓损伤(SCI)所造成的神经功能障碍是目前医学界未能解决的难题之一。当今,中医药在防治SCI方面有其独特的优势,大量临床经验和相关研究表明活血法对脊髓损伤后的神经修复疗效确切。文章将对近几年有关活血法促神经修复的研究作一综述... 详细信息

脊髓损伤(SCI)所造成的神经功能障碍是目前医学界未能解决的难题之一。当今,中医药在防治SCI方面有其独特的优势,大量临床经验和相关研究表明活血法对脊髓损伤后的神经修复疗效确切。文章将对近几年有关活血法促神经修复的研究作一综述,以拓展活血法在脊髓损伤中的应用,为今后进一步研究提供客观依据。

关键词：神经修复脊髓损伤活血法综述

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活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤NF-κB、VCAM-1表达的作用

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中华中医药杂志 2015年第4期30卷 1020-1023页

作者：张俐张纪浩陈凯刘宇福建中医药大学骨伤学院教育部省部共建重点实验室福州350122

目的:观察活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤关键因子核因子-κB(NF-κB)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤作用机制。方法:将新西兰家兔随机分为假手术组(8只)、模型组(32只)和活血通督汤组(32... 详细信息

目的:观察活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤关键因子核因子-κB(NF-κB)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤作用机制。方法:将新西兰家兔随机分为假手术组(8只)、模型组(32只)和活血通督汤组(32只)。3组术前7d均予连续灌胃,活血通督汤组灌服活血通督汤,每日2次,假手术组及模型组予灌服0.9%氯化钠溶液,每日2次。假手术组分离出L3-6动脉但不予夹闭,其余2组分离并夹闭L3-6动脉,制成脊髓缺血再灌注损伤模型。3组分别于术后0.5、1、4、8h取出家兔脊髓,采用免疫组化法和ELISA法检测脊髓组织中的NF-κB、VCAM-1的含量。结果:NF-κB在同一时点表达,假手术组最少,模型组最高;与假手术组相比,其余2组各时点NF-κB都明显升高(P<0.01);但活血通督汤组的表达水平显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);VCAM-1在同一时点,假手术组表达最少,模型组表达最高;与假手术组相比,其余2组各时点VCAM-1的表达显著升高(P<0.01);血管表达率情况观察:假手术组始终无阳性血管表达,0.5h时3组皆无阳性血管表达,1、4、8h模型组阳性血管表达率明显高于活血通督汤组(P<0.05,P<0.01)。结论:活血通督汤能有效改抑制NF-κB、VCAM-1的表达,从而减轻炎性反应,以期达到减轻脊髓缺血再灌注损伤。

关键词：活血通督汤脊髓缺血再灌注损伤核因子-κB 血管细胞黏附分子-1

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张安桢教授芪癀方临床运用撷英

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中华中医药杂志 2014年第2期29卷 464-466页

作者：叶友友张俐福建中医药大学骨伤学院省部共建教育部重点实验室福州350122

张安桢教授是我国高等中医院校中医骨伤科学专业的奠基人之一,是我国骨伤界的泰斗。张安桢教授从事临床和基础研究50余载,创制了许多本于经典、源于实践的良方。芪癀方就是其中的精华之一。芪癀方(由黄芪、麦冬、补骨脂、甘草、田七、... 详细信息

张安桢教授是我国高等中医院校中医骨伤科学专业的奠基人之一,是我国骨伤界的泰斗。张安桢教授从事临床和基础研究50余载,创制了许多本于经典、源于实践的良方。芪癀方就是其中的精华之一。芪癀方(由黄芪、麦冬、补骨脂、甘草、田七、牛黄、蛇胆、麝香等组成)是基于扶正固本、祛邪解毒的中医理论组方,能增强患者机体免疫力,降低肿瘤患者的化疗毒性。笔者通过总结该方的学术思想和临床经验,以期促进名老中医临床经验的学术传承。

关键词：张安桢芪癀方临床运用

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