检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2024年第9期44卷 2010-2016页

作者：陈福再赵聪慧张晓璇张春萍黄佳承陈吉龙马树杰福建农林大学动物科学学院福建省“一带一路”畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002

旨在构建稳定过表达环状RNA LAMP3(circLAMP3)的C57/B6-L和A549细胞系,为后续深入研究circLAMP3的生物学功能奠定基础。分别提取C57/B6-L和A549细胞总RNA,反转录后扩增circLAMP3全长序列,连接到pLC5-ciR载体上,得到pLC5-Mouse-circLAMP3和pLC5-Human-circLAMP3重组质粒。利用瞬时转染方法在HEK293T细胞上包装慢病毒,将慢病毒分别感染C57/B6-L和A549细胞,经嘌呤霉素筛选得到稳定表达circLAMP3的细胞系。利用荧光显微镜、PCR扩增、荧光定量PCR(qPCR)和Sanger测序对构建的细胞系过表达circLAMP3效果进行验证。结果表明,pLC5-Mouse-circLAMP3和pLC5-Human-circLAMP3过表达质粒构建成功,荧光显微镜下可见构建的C57/B6-L和A549细胞系表达强烈绿色荧光。PCR和qPCR结果可见过表达细胞系circLAMP3表达显著增强,Sanger测序结果表明circLAMP3环化位点正确。本研究成功构建了过表达circLAMP3的C57/B6-L和A549细胞系,为进一步探索circLAMP3在流感病毒复制中的生物学功能提供了生物材料。

关键词：环状RNA circLAMP3 载体构建细胞系

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一株具有插入和缺失突变特征鸭腺病毒B2毒株的分离鉴定

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福建农业学报 2024年第2期39卷 125-130页

作者：郭博伦李雅汝郑欣江丹丹曾丽陈少莺马燕梅陈仕龙福建农林大学动物科学学院/福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013

【目的】对一份疑似鸭腺病毒B2(Duck adenovirus B2,DAdV B2)感染的番鸭白肝病的病例进行确诊,并对分离株进行测序,为福建省DAdV B2流行病学研究提供参考。【方法】开展病料PCR检测,并进行病毒的分离鉴定、全基因二代测序,利用MegAlign... 详细信息

【目的】对一份疑似鸭腺病毒B2(Duck adenovirus B2,DAdV B2)感染的番鸭白肝病的病例进行确诊,并对分离株进行测序,为福建省DAdV B2流行病学研究提供参考。【方法】开展病料PCR检测,并进行病毒的分离鉴定、全基因二代测序,利用MegAlign和SnapGene软件对测序结果进行同源性及遗传进化分析,再进行动物回归试验,确定对雏番鸭的致病性。【结果】病料样本检测为DAdV B2阳性,并成功分离到一株DAdV B2毒株,命名为DAdV B2/BG48。该分离株感染鸡肝癌细胞(LMH)后细胞变大变圆、最后死亡崩解,形成特征性细胞病变;感染MDEF后细胞由长梭形变为圆形并聚集,细胞间出现空隙。测序结果表明,BG48基因组在pX基因区域中有3 bp的插入,在ORF19B基因区域有33 bp的插入,在ORF64和ORF67基因区域的交界处有42 bp的缺失,ORF67基因起始密码子往后第133位碱基为G,没有突变为终止密码子,其他编码基因与CH-GD-12-2014、实验室之前鉴定的BG27和BG18无特征性差异。动物回归试验显示,2日龄的番鸭对DAdV B2分离株BG48易感,致病率为50%,死亡率为0,发病鸭可见与自然感染病鸭相似的临床症状和病理变化。【结论】成功从番鸭白肝病病例中分离鉴定1株DAdV B2突变株BG48,BG48具有多位点插入和缺失特征,提示DAdV B2毒株容易突变,临床流行毒株复杂。本结果为DAdV B2的分子流行病学调查和遗传进化研究提供了参考。

关键词：番鸭白肝病鸭腺病毒B2 分离鉴定插入和缺失 ORF67

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1株鸡滑液囊支原体的分离鉴定与全基因组分析

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畜牧兽医学报 2022年第8期53卷 2663-2676页

作者：许李锋贾晨宇陈福再方梦园刘孝丹陈吉龙李训良福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福州350002

鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)能引起家禽呼吸道疾病、传染性滑膜炎、蛋壳顶端异常及生长迟缓等,给全球养禽业带来巨大的经济损失。然而不同国家和地区MS的耐药性和致病性存在差异,因此本研究旨在挖掘福建MS菌株的特征。作者... 详细信息

鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)能引起家禽呼吸道疾病、传染性滑膜炎、蛋壳顶端异常及生长迟缓等,给全球养禽业带来巨大的经济损失。然而不同国家和地区MS的耐药性和致病性存在差异,因此本研究旨在挖掘福建MS菌株的特征。作者采集福建省疑似患MS的病鸡关节腔内容物,对菌株进行分离鉴定,并利用三代联合二代测序技术对其进行全基因组测序。结果显示,该分离株病原特性稳定,已保藏至中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No.:M 2021210,并将其命名为MS-FJ01。MS-FJ01基因组全长为795381bp,GC含量为28.39%;预测编码基因数为704个,占整个基因组的90.48%;并在COG、GO和KEGG数据库分别注释到476、382、425个基因。通过各数据库的分析,注释了40个耐药相关基因,4个碳水化合物相关酶基因,136个病原与宿主互作相关基因,47个毒力因子相关基因,106个膜转运蛋白相关基因,25个限制修饰相关基因。通过与MS HN01和MS 5-9基因组进一步比较发现,MS-FJ01与这两个中国菌株均存在良好的共线性关系,且与MS 5-9的亲缘关系更近。本研究阐明了福建MS菌株的基因组结构、通过相关数据库的分析,预测和注释了其基因的功能,为深入研究MS提供参考依据。

关键词：鸡滑液囊支原体分离鉴定全基因组测序基因功能注释分析

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甲型流感病毒通过调控TGF-β1介导的ORM2抑制CCL3表达

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中国兽医科学 2022年第10期52卷 1308-1316页

作者：潘宸胡精蕴张岩威赵森红张欣格彭本群毛亚楠王淑霖王松福建农林大学动物科学学院福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002

为探究甲型流感病毒(IAV)感染对类黏蛋白(ORM)表达的调控作用,利用H1N1、H9N2亚型流感病毒感染A549和DF1细胞,检测发现ORM1和ORM2的表达水平显著升高;H1N1亚型流感病毒感染BALB/c小鼠后,小鼠肺中ORM1和ORM2的表达水平同样显著升高。进... 详细信息

为探究甲型流感病毒(IAV)感染对类黏蛋白(ORM)表达的调控作用,利用H1N1、H9N2亚型流感病毒感染A549和DF1细胞,检测发现ORM1和ORM2的表达水平显著升高;H1N1亚型流感病毒感染BALB/c小鼠后,小鼠肺中ORM1和ORM2的表达水平同样显著升高。进一步筛选发现,IAV感染激活的转化生长因子β1(TGF-β1)能够显著诱导ORM1和ORM2的表达,使用TGF-β1受体抑制剂处理可以阻断IAV和TGF-β1诱导的ORM表达水平的升高。为探究ORM蛋白在流感病毒感染中发挥的作用,使用IAV感染ORM1和ORM2过表达及干扰细胞系。结果显示,细胞中干扰或过表达ORM1和ORM2后对IAV的复制没有影响,但ORM2能够抑制趋化因子CCL3的表达。综上所述,IAV通过TGF-β1介导的ORM2抑制趋化因子CCL3的表达,从而抑制体内炎症反应,拮抗宿主天然免疫应答。

关键词：甲型流感病毒类黏蛋白转化生长因子β1 CCL3

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N^(pro)蛋白可抑制poly(I:C)和流感病毒激活的天然免疫应答

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微生物学报 2022年第12期62卷 4894-4917页

作者：施文豪蔡彬祥杨彬偲邱昊日文法鑫池晓娟王松陈玉海廖源陈叶陈吉龙马树杰福建农林大学动物科学学院福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室福建福州350002 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

【目的】猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)感染猪引起出血综合征和免疫抑制,是一种高度传染性的猪病。本研究以CSFV为研究对象,探究CSFV抑制宿主天然免疫的机制及其在免疫抑制条件下对甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)... 详细信息

【目的】猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)感染猪引起出血综合征和免疫抑制,是一种高度传染性的猪病。本研究以CSFV为研究对象,探究CSFV抑制宿主天然免疫的机制及其在免疫抑制条件下对甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)感染的潜在作用。【方法】首先,为探究CSFV对宿主天然免疫的影响,利用反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative PCR,RT-qPCR)和Western blotting技术检测PK-15细胞感染CSFV后对Poly(I:C)诱导干扰素(interferons,IFNs)、干扰素诱导基因(IFN-stimulated genes,ISGs)和信号传导子和转录活化子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)磷酸化的影响。其次,利用过表达CSFV蛋白的细胞系筛选并确定抑制天然免疫的关键蛋白。最后,在过表达CSFV N^(pro)蛋白的细胞系上,利用RT-PCR、RT-qPCR、Western blotting和病毒噬斑实验技术研究N^(pro)蛋白对天然免疫和IAV感染的影响。【结果】CSFV可抑制poly(I:C)诱导的Ⅰ型和Ⅲ型IFN的表达。CSFV N^(pro)蛋白在体外直接抑制STAT1的磷酸化,引起寡腺苷酸合成酶样蛋白(OASL)、2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)和干扰素刺激基因15(ISG15)表达下调。重要的是,CSFV N^(pro)蛋白可抑制IAV诱导的Ⅰ型和Ⅲ型IFN的表达,并导致STAT1的磷酸化和OASL、OAS1、IFITM3和ISG15的表达显著下降,进而显著促进IAV在过表达N^(pro)蛋白的PK-15细胞中复制。【结论】猪瘟病毒的N^(pro)蛋白能够拮抗由poly(I:C)和IAV所激活的天然免疫应答,表明N^(pro)蛋白可抑制RIG-I依赖的信号通路并可促进IAV在表达N^(pro)蛋白的PK15细胞中复制。

关键词：猪瘟病毒甲型流感病毒 N^(pro) 天然免疫干扰素信号传导子和转录活化子1(STAT1)

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一株鸭源H11N3亚型禽流感病毒的遗传进化分析及对小鼠的致病性研究

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中国预防兽医学报 2023年第2期45卷 115-121页

作者：王辰川李菁文法鑫陈福再王露露张春萍黄佳承杨洲陈吉龙马树杰福建农林大学动物科学学院/福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院/福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院/闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室福建福州350002 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

为了解H11N3亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对2020年在福州市某活禽市场鸭中分离的一株H11N3亚型AIV进行了全基因组测序、遗传进化分析和对BALB/c小鼠的致病性试验。测序结果显示,分离株HA裂解位点为PAIASR↓GLF,符合低致病性... 详细信息

为了解H11N3亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对2020年在福州市某活禽市场鸭中分离的一株H11N3亚型AIV进行了全基因组测序、遗传进化分析和对BALB/c小鼠的致病性试验。测序结果显示,分离株HA裂解位点为PAIASR↓GLF,符合低致病性AIV分子特征;HA蛋白226L和228S突变显示病毒具有结合人源受体(SAα-2,6 Gal)的特征性氨基酸。PB1、PA、NP和M1蛋白均出现对哺乳动物致病性增强的特征性氨基酸。遗传进化分析显示,H11N3 AIV的8个基因节段均属于欧亚分支,其HA基因与A/duck/Fujian/SD061/2017(H11N3)株HA基因序列相似性最高,而NA基因与A/EN/Fujian/02754/2016(H3N3)株NA基因序列相似性最高。该病毒内部基因分别与浙江、福建和云南等地鸭和鸡体内分离的H7N9、H7N7、H1N2、H7N2、H7N7和H9N6等亚型AIV相关基因高度同源。小鼠致病性试验结果显示,该病毒未经适应即可在小鼠鼻甲和肺脏中高效复制,表明该病毒株具备感染哺乳动物的能力。上述结果表明该病毒株为新型重组病毒,对小鼠具有一定致病性,本研究为了解H11N3亚型AIV的生物学特性及其感染的防控提供了参考。

关键词：禽流感病毒 H11N3亚型遗传进化小鼠致病性

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动物生理学线上线下混合式教学与思政元素协同育人的应用探究

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中国教育学刊 2024年第2期 I0039-I0039页

作者：马燕梅福建农林大学动物科学学院福建农林大学动物科学学院福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室

课题调研情况。“线上线下”的教学模式已经成为当前教育领域的重要教学模式之一。该课题主要通过实际调研的方式,了解动物生理学课程教学过程中,线上线下混合教学与思政元素的具体应用案例,总结其实施经验,为今后开展线上线下混合教学... 详细信息

课题调研情况。“线上线下”的教学模式已经成为当前教育领域的重要教学模式之一。该课题主要通过实际调研的方式,了解动物生理学课程教学过程中,线上线下混合教学与思政元素的具体应用案例,总结其实施经验,为今后开展线上线下混合教学与思政元素协同育人提供新的思路和方向,促进我国高校专业教学质量的提升。课题调研采取访谈和问卷调查的方式进行,共发放调查问卷50份,收回问卷50份,回收率100%;座谈采取学生代表和教师共同座谈的方式进行,座谈会共计50分钟。

关键词：协同育人动物生理学线上线下生理学课程课题调研教学模式思政应用探究

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