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昆虫学报 2021年第3期64卷 363-373页

作者：杜宇蒋海宾王杰范小雪王秀娜冯睿蓉张文德隆琦熊翠玲郑燕珍陈大福郭睿福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 福建农林大学蜂产品加工与应用教育部工程研究中心福州350002 福建农林大学生命科学学院福州350002 福建农林大学福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福州350002

【目的】本研究旨在探究蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称“球囊菌”)菌丝(Aam)和孢子(Aas)中的全长转录本与菌丝生长、孢子萌发以及有性生殖的相关性。【方法】将前期获得的Aam和Aas的Nanopore长读段测序数据中的有效读段与球囊菌参考... 详细信息

【目的】本研究旨在探究蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称“球囊菌”)菌丝(Aam)和孢子(Aas)中的全长转录本与菌丝生长、孢子萌发以及有性生殖的相关性。【方法】将前期获得的Aam和Aas的Nanopore长读段测序数据中的有效读段与球囊菌参考基因组注释的已知转录本进行序列比对,获取全长转录本与已知转录本的对应信息。利用生物信息学方法对Aam和Aas的全长转录本进行差异表达、功能注释以及结构特征分析。【结果】Aam和Aas共有的全长转录本数量为19966条,特有的全长转录本数量分别为1273和2856条。Aas vs Aam比较组含有3230条差异表达转录本(differentially expressed transcripts,DETs),包含3072条上调和158条下调。GO功能注释结果显示,这些DETs涉及代谢进程、细胞、催化活性等GO条目。KEGG注释结果显示,这些DETs注释到内吞作用、MAPK信号通路、糖酵解/糖异生、碳代谢以及氨基酸的生物合成等相关通路。进一步分析发现,部分全长转录本的剪接异构体在Aam和Aas中具有不同的表达量和结构。【结论】本研究发现球囊菌在菌丝和孢子两个不同阶段伴随着转录本表达量和结构的变化,研究结果为深入探究不同剪接异构体在球囊菌的菌丝生长、孢子萌发和有性生殖中的分子功能提供了理论依据和数据基础。

关键词：蜜蜂球囊菌菌丝孢子差异表达转录本全长转录本三代测序

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靶向DEC-205的弓形虫SAG1 DNA疫苗的构建及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2020年第20期 72-75,80,159页

作者：林霞琳黄春芳陈育琪李丽娜魏坤亚陈欢黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院福建省动物药物工程实验室福州350002

为了构建新型弓形虫DNA疫苗并鉴定,试验以弓形虫SAG1作为疫苗候选抗原,融合小鼠树突状细胞(DC)表面分子DEC-205的单链抗体(single chain antibody fragment against DEC-205,scFv DEC-205),构建可表达弓形虫速殖子的表面抗原SAG1和scFvD... 详细信息

为了构建新型弓形虫DNA疫苗并鉴定,试验以弓形虫SAG1作为疫苗候选抗原,融合小鼠树突状细胞(DC)表面分子DEC-205的单链抗体(single chain antibody fragment against DEC-205,scFv DEC-205),构建可表达弓形虫速殖子的表面抗原SAG1和scFvDEC-205-SAG1的DNA质粒,对该质粒进行酶切鉴定,同时用该质粒对真核细胞进行转染,对目标蛋白的表达情况进行鉴定。结果表明:经电泳、双酶切及测序证实目的基因大小与实际相符,重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1构建成功;经Western-blot和细胞免疫荧光试验证实重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1可成功表达目的蛋白。说明成功构建重组DNA疫苗pVAX1-scFvDEC205-SAG1并在体外表达。

关键词：弓形虫 DNA疫苗 SAG1抗原树突状细胞 DEC-205单链抗体重组质粒

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艾美耳球虫EF1α的功能与研究前景

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当代畜牧 2021年第7期50卷 32-33页

作者：田校源黄潇航江和基黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)/福建省动物药物工程实验室福建福州350002

鸡球虫病是危害全球养禽业的重要寄生原虫病,对于地面养殖的肉鸡危害尤其严重。鸡球虫病的防控主要依靠抗球虫药物,但随着我国饲料“禁抗”时代的来临以及人们对于安全禽类产品的需求,在饲料中添加抗球虫药物来预防和控制鸡球虫病已不... 详细信息

鸡球虫病是危害全球养禽业的重要寄生原虫病,对于地面养殖的肉鸡危害尤其严重。鸡球虫病的防控主要依靠抗球虫药物,但随着我国饲料“禁抗”时代的来临以及人们对于安全禽类产品的需求,在饲料中添加抗球虫药物来预防和控制鸡球虫病已不可持续。使用疫苗预防鸡球虫病变得尤为重要。如何开发高效广谱的鸡球虫病疫苗是学界研究的热点。笔者对鸡球虫病疫苗候选抗原延伸因子1α(EF-1α)的功能、免疫作用以及应用前景进行介绍,以期为鸡球虫病疫苗的研究提供帮助。

关键词：鸡球虫病 E.m-EF1α 球虫疫苗

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复方银杏叶对免疫应激仔猪生长性能和血清代谢组学特征的影响

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动物营养学报 2021年第4期33卷 2311-2320页

作者：李焰岳稳李婷潘佳佳邱龙新黄杰李状伟龙岩学院生命科学学院龙岩364000 福建省生猪疫病防控工程技术研究中心龙岩364000 福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室龙岩364000 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350000

本试验旨在研究复方银杏叶对脂多糖(LPS)诱导的免疫应激仔猪生长性能及血清生化指标的影响,并采用代谢组学技术研究免疫应激仔猪的血清代谢组学特征。选择“杜×长×大”杂交仔猪36头,随机分为对照组(每天灌服110 mL生理盐水)、... 详细信息

本试验旨在研究复方银杏叶对脂多糖(LPS)诱导的免疫应激仔猪生长性能及血清生化指标的影响,并采用代谢组学技术研究免疫应激仔猪的血清代谢组学特征。选择“杜×长×大”杂交仔猪36头,随机分为对照组(每天灌服110 mL生理盐水)、LPS应激组(每天灌服110 mL生理盐水)和LPS+复方银杏叶组(每天灌服110 mL复方银杏叶制剂),每组4个重复,每个重复3头,3个组均饲喂同一基础饲粮,试验期27 d。试验第23天,LPS应激组和LPS+复方银杏叶组仔猪腹膜注射LPS,建立免疫应激模型;对照组仔猪腹膜注射等量的生理盐水。结果显示:1)在试验第24~27天,LPS+复方银杏叶组的料重比与LPS应激组相比降低了35.77%(P<0.05),与对照组相比差异不显著(P>0.05);2)与LPS应激组相比,复方银杏叶显著缓解了LPS刺激引起的尿素氮、肌酐含量和γ-谷氨酰转移酶活性的升高(P<0.05),以及LPS刺激引起的胰高血糖素样肽-2含量的降低(P<0.05);3)差异代谢物分析显示,与LPS应激组相比,LPS+复方银杏叶组血清N6-甲基-L-赖氨酸和L-谷氨酸含量显著上升(P<0.05),而血清谷氨酰胺、羟(基)脯氨酸和L-焦谷氨酸含量显著下降(P<0.05)。由此可见,复方银杏叶可显著缓解LPS应激导致的仔猪血清生化指标的改变,减轻LPS应激导致的肝脏损伤,在一定程度上改善仔猪对营养物质的消化和吸收,提高机体对含氮物质的利用效率以及肠黏膜屏障功能,从而保证仔猪的正常生长发育;复方银杏叶可能通过调控D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路,进而改善LPS诱导的仔猪免疫应激。

关键词：复方银杏叶仔猪免疫应激脂多糖代谢组学

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林蛙肺线虫的临床分离,病理研究及分子生物学鉴定

林蛙肺线虫的临床分离,病理研究及分子生物学鉴定

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2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛

作者：黄潇航贺金峪李诗艺王诗晨唐丹彤黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建省动物药物工程实验室

为探究1例自林蛙肺线虫病的肺线虫感染种类和蛙肺线虫自然感染对肺部的病理损伤影响。采用临床剖检法确诊患有肺线虫病的林蛙,采用传统形态学观察和聚合酶链式扩增反应(PCR)扩增1株分离获得虫株的核糖体间隔转录区ITS部分片段,对采集获... 详细信息

为探究1例自林蛙肺线虫病的肺线虫感染种类和蛙肺线虫自然感染对肺部的病理损伤影响。采用临床剖检法确诊患有肺线虫病的林蛙,采用传统形态学观察和聚合酶链式扩增反应(PCR)扩增1株分离获得虫株的核糖体间隔转录区ITS部分片段,对采集获得的虫株综合进行生物学鉴定,同时使用H.E染色法制备肺病理切片进行病变观察。[结果]通过临床剖检发现林蛙肺外观出血,肺毛细血管间出血严重,采用灭菌生理食盐水冲洗发现肺腔内存在大量的线虫感染,通过光镜形态学观察分离获得的线虫具有典型的棒状型食道,尾刺等结构特征符合文献记载棒状科线虫的临床特征。H.E病理组织切片结果显示,肺线虫在林蛙肺部的寄生感染导致了炎性浸润,组织出血,肺腔黏膜脱落等症状。通过PCR扩增获得大小约为750bp的阳性条带,产物测序后通过NCBI数据库物种序列比对,DNA Star7.0等分析结果显示,扩增获得的肺线虫与报道的Rhabdias ***(KF999609.1),同源性最高,为100%,其次为Rhabdias bufonis.(KF999593.1,99.7%)、Rhabdias engelbrechti.(MG428406.1,99.0%),邻近法进化树结果显示该肺线虫与Rhabdias ***聚于一支,与其余棒状线虫类群形成较为明显的分支。结合形态学和分子生物学鉴定结果,确定病蛙感染肺线虫种类为Rhabdias ***,多量寄生肺导致肺炎,引起病理损伤,在蛙类人工养殖繁育中应该引起重视并进行相关的驱虫防控。

关键词：肺线虫病理鉴定分子生物学 ITS Rhabdias cf.bufonis

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弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制

弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制

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中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第八届会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：王海论黄晓宇余春辰殷光文王登峰王磊黄志坚福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)福建省动物药物工程实验室

引言弓形虫感染哺乳动物后会造成一系列的损伤,通常能引起全身性疾病和多器官受损。妊娠母畜感染后可造成流产、死产和早产等结果。在雄性动物上,弓形虫的感染可导致精液质量下降,雄性激素分泌紊乱等。雄性动物的睾丸间质细胞分泌的睾... 详细信息

引言弓形虫感染哺乳动物后会造成一系列的损伤,通常能引起全身性疾病和多器官受损。妊娠母畜感染后可造成流产、死产和早产等结果。在雄性动物上,弓形虫的感染可导致精液质量下降,雄性激素分泌紊乱等。雄性动物的睾丸间质细胞分泌的睾酮主要维持第二性征和促进精子的发生发育,当睾丸间质细胞因感染发生内质网应激时,其睾酮分泌能力明显下降。但其影响睾丸间质细胞睾酮分泌的具体机制尚不清楚。材料与方法本试验运用ELISA、Western-blotting、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光和流式细胞术等方法,探究了(1)弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞的增殖和睾酮分泌的影响;(2)弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成相关酶表达的影响;(3)弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞内ERS相关蛋白表达的影响。结果(1)弓形虫速殖子与小鼠睾丸间质细胞共培养6小时左右,速殖子开始进入细胞中,细胞内形成明显的纳虫泡。(2)细胞与弓形虫速殖子比例为1:20共培养24小时可以显著增加睾丸间质细胞睾酮的分泌量。通过细胞计数等方法检测后发现,弓形虫速殖子的感染可以显著减少细胞的数量。(3)经RT-qPCR检测发现,弓形虫感染可以显著抑制类固醇激素合成酶StAR、3β-HSD、CYP11A1和CYP17A1的表达。(4)经RT-qPCR检测发现,弓形虫感染可以显著抑制内质网应激蛋白GRP78的表达,对eIF2α和ATF6的影响不明显。(5)流式细胞术结果显示,弓形虫感染可以显著增加细胞凋亡率。讨论本研究通过使用ELISA、Western-blotting、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光和流式细胞术等技术,探究弓形虫RH株速殖子感染睾丸间质细胞过程中类固醇激素合成酶、未折叠蛋白反应通路相关蛋白的表达变化,揭示弓形虫感染影响睾丸间质细胞睾酮分泌的机制。可以为进一步探究ERS在弓形虫感染睾丸间质细胞过程中的作用提供研究基础。

关键词：弓形虫睾丸间质细胞内质网应激类固醇激素合成

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肉桂醛影响小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的机制研究

肉桂醛影响小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第八届会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：黄晓宇王海论余春辰殷光文王登峰王磊黄志坚福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)福建省动物药物工程实验室

引言我国肉桂产量丰富,主要产于广西、广东、云南和福建等地。福建省肉桂种植区域较广,主要在闽东南地区,即漳州地区各县、晋江市绝大部分。中医上肉桂常被作为补火助阳、散热止痛、温通经脉的药物使用,在畜牧生产中也发现肉桂可以提高... 详细信息

引言我国肉桂产量丰富,主要产于广西、广东、云南和福建等地。福建省肉桂种植区域较广,主要在闽东南地区,即漳州地区各县、晋江市绝大部分。中医上肉桂常被作为补火助阳、散热止痛、温通经脉的药物使用,在畜牧生产中也发现肉桂可以提高雄性动物雄激素的分泌和改善雄性动物的生殖功能。雄性动物体内维持生殖器官分化、第二性征、副性腺的发育和精子发生的主要激素是睾酮。睾酮由睾丸间质细胞合成并分泌,多条信号通路和多种酶参与这一过程中。研究发现,在相关细胞中肉桂醛能够对胰岛素、黄体酮和睾酮等多种激素的合成与分泌起到调节作用。但其影响睾丸间质细胞睾酮分泌的具体机制尚不清楚。材料与方法本试验运用CCK-8、ELISA、Western-blotting、实时荧光定量PCR和流式细胞术等方法,探究了（1）肉桂醛处理对小鼠睾丸间质细胞的增殖和睾酮分泌的影响;（2）肉桂醛处理对小鼠睾丸间质细胞内类固醇激素合成相关酶的表达变化规律;（3）肉桂醛处理对小鼠睾丸间质细胞内类固醇激素合成相关核受体的表达变化规律。结果（1） 5×10M的肉桂醛处理睾丸间质细胞可以显著提高处于S期细胞的比例。检测细胞周期相关蛋白的表达后发现,细胞周期蛋白CyclinA1和CyclinB1的表达量显著增加。5×10M的肉桂醛处理睾丸间质细胞24 h可以显著促进细胞睾酮的分泌。（2） 5×10M的肉桂醛的处理可以显著上调类固醇激素合成酶StAR和CYP11A1的表达。（3） 5×10M的肉桂醛的处理可以显著上调类固醇激素合成核受体SF-1和SHP的表达。讨论传统中药肉桂提取物肉桂醛在调节哺乳动物生殖性能方面有显著功效,本试验通过体外探究肉桂醛影响睾丸间质细胞睾酮分泌的机制可以为后期肉桂在饲料添加剂和基于此开发相应的功能性饲料方面提供一定的试验基础。

关键词：肉桂醛睾丸间质细胞细胞周期类固醇激素合成核受体

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鸭源蛔虫分子生物学鉴定及临床病理研究

鸭源蛔虫分子生物学鉴定及临床病理研究

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2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛

作者：黄潇航王诗晨李诗艺贺金峪张龙黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建省动物药物工程实验室

为了解鸭源蛔虫感染的临床病理及相关分子生物学特性。本研究对1例番鸭感染蛔虫病病例中的鸭只肠道进行苏木精-伊红染色的病理组织学研究,同时以分离自我国福建省屏南县的番鸭肠道蛔虫研究对象,基于传统形态学研究基础上,提取3株肠道内... 详细信息

为了解鸭源蛔虫感染的临床病理及相关分子生物学特性。本研究对1例番鸭感染蛔虫病病例中的鸭只肠道进行苏木精-伊红染色的病理组织学研究,同时以分离自我国福建省屏南县的番鸭肠道蛔虫研究对象,基于传统形态学研究基础上,提取3株肠道内疑似蛔虫的线虫DNA,借助PCR技术对提取的DNA进行18S rRNA基因片段的扩增和Sanger测序比对。病理结果显示:蛔虫寄生造成肠道黏膜大量损伤脱落,并伴有大量的嗜酸性细胞浸润。患病番鸭肠道内感染的寄生虫种类为鸡蛔虫,测序结果显示:在18S rRNA基因遗传上与鸡蛔虫(EF180058.1)高达100.0%。此次分离的鸭源蛔虫属于鸡蛔虫,为国内对鸭源蛔虫分子生物鉴定,为鸭蛔虫病的防控提供了相关参考。

关键词：鸭源蛔虫 18S rRNA 基因序列

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一例人工饲养王锦蛇消化道蛔虫病的临床报道

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野生动物学报 2020年第4期41卷 1051-1055页

作者：黄潇航宋肇程张龙李诗艺胡奇林黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院福州350002 福建农林大学福建省动物药物工程实验室福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013

蛇蛔虫病是困扰我国蛇类种群保育的一类重要寄生虫病。在临床疾病报道方面,蛔虫病在宿主体内感染寄生可以造成动物严重的消化系统炎症、功能性机械损伤等,且在损伤严重的情况下容易继发细菌性感染。该病例报道了1例福建省某蛇类养殖场... 详细信息

蛇蛔虫病是困扰我国蛇类种群保育的一类重要寄生虫病。在临床疾病报道方面,蛔虫病在宿主体内感染寄生可以造成动物严重的消化系统炎症、功能性机械损伤等,且在损伤严重的情况下容易继发细菌性感染。该病例报道了1例福建省某蛇类养殖场中王锦蛇感染蛇蛔虫导致胃肠阻塞的案例,记述了发病相关情况、临床症状及病理学研究,结合病因就蛔虫病在蛇类人工繁育中的防治提出相关建议,为圈养蛇类的蛔虫病防控提供相关参考。

关键词：蛇寄生虫剖检病理学胃肠阻塞

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DEC205免疫应答机制及其分子疫苗的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2020年第15期 36-38,42页

作者：黄潇航宋肇程黄春芳陈育琪黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 福建省动物药物工程实验室福州350002

DEC205是一种能够呈递抗原并介导树突状细胞内吞作用的受体。在免疫机制方面,DEC205具有抗原识别性好、抗原呈递速率高、参与细胞信号传递、调控免疫功能等作用。由于其在介导宿主抗肿瘤及在细菌、病毒和寄生虫免疫方面表现出的免疫调... 详细信息

DEC205是一种能够呈递抗原并介导树突状细胞内吞作用的受体。在免疫机制方面,DEC205具有抗原识别性好、抗原呈递速率高、参与细胞信号传递、调控免疫功能等作用。由于其在介导宿主抗肿瘤及在细菌、病毒和寄生虫免疫方面表现出的免疫调控功能及疫苗增强效果被免疫学、医学和兽医学等领域研究者所关注。文章综述了DEC205受体在体内分布情况、免疫应答机制及其在动物源性病原疫苗实验室试验及临床中的相关应用,展望了其未来在分子疫苗研发方面的应用前景,以期为相关的免疫学研究及生物制品的研发提供理论方面的借鉴。

关键词： DEC205 免疫学树突状细胞免疫应答免疫调控

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