检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2024年

作者：王梦真何锐杰邓雅婷罗怡方庭曾黎辉福建农林大学园艺学院贵州省生物技术研究所

以‘黄金’百香果(Passiflor edulis f. flavicarpa)的无菌苗茎段为外植体，研究6-BA浓度、培养基组分对茎段直接分化的影响；利用携带pBI 121质粒的农杆菌EHA 105菌株对无菌茎段进行侵染，研究预培养时间、重悬液不同蔗糖浓度、菌液浓... 详细信息

以‘黄金’百香果(Passiflor edulis f. flavicarpa)的无菌苗茎段为外植体，研究6-BA浓度、培养基组分对茎段直接分化的影响；利用携带pBI 121质粒的农杆菌EHA 105菌株对无菌茎段进行侵染，研究预培养时间、重悬液不同蔗糖浓度、菌液浓度、侵染时间以及共培养时间对农杆菌介导遗传转化效率的影响。研究结果表明：茎段诱导不定芽最佳培养基为MS+1 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂，不定芽诱导率达到100%，分化系数为13.6；不定芽生根成苗最佳培养基为MS+20.0 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂+2.0 g/L活性炭，成苗率93.75%。农杆菌介导遗传转化最佳侵染条件为：茎段预培养3 d，使用含50 g/L蔗糖的1/2 MS液体培养基重悬农杆菌，农杆菌侵染液OD600=0.6，侵染10 min后置于添加200 μmol/L AS的不定芽诱导培养基中暗培养3 d；经GUS染色和PCR检测，转化率达到11.67%。本研究建立了‘黄金’百香果高频再生体系和遗传转化体系，为进一步遗传改良和基因功能的研究提供了基础。

关键词：百香果茎段再生体系遗传转化体系

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新中国果树科学研究70年——龙眼

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果树学报 2019年第10期36卷 1414-1420页

作者：郑少泉曾黎辉张积森林河通邓朝军庄伊美福建省农业科学院果树研究所福建农林大学园艺学院福建农林大学基因组与生物技术研究中心福建农林大学食品科学学院福建省亚热带植物研究所

新中国成立70 a(年)以来,我国龙眼科学研究取得长足进展,在龙眼种质资源、遗传育种、采后生物学、生物技术等研究领域领跑国际同类研究。建立了国际上资源数量最多、类型最为丰富的国家级龙眼种质资源圃,杂交育种培育出有不同香气、留... 详细信息

新中国成立70 a(年)以来,我国龙眼科学研究取得长足进展,在龙眼种质资源、遗传育种、采后生物学、生物技术等研究领域领跑国际同类研究。建立了国际上资源数量最多、类型最为丰富的国家级龙眼种质资源圃,杂交育种培育出有不同香气、留树保鲜期长、成熟期配套、优质丰产等优异性状的适宜轻简化栽培的系列新品种;利用新育成的不同熟期龙眼品种,结合催花技术和生态差异选择,在我国实现龙眼鲜果的周年供应;研发出了龙眼安全保鲜物流新技术;先后构建了龙眼的基因组草图和精细参考基因组图谱,促进龙眼基础研究进入了功能基因组学和分子育种研究时代。未来应进一步加强龙眼产业发展的基础研究与关键性技术的研发创新。

关键词：龙眼新中国 70年科学研究回顾展望

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番木瓜果糖-2,6-二磷酸酶CpF2KP基因克隆和蛋白表达纯化

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生物工程学报 2023年第2期39卷 614-624页

作者：左丽萍曾秋霞赵晓兵杨丽媛徐良伟赖娟岳晶晶福建农林大学基因组与生物技术研究中心、福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室福建福州350002 福建农林大学园艺学院福建福州350002

番木瓜是岭南四大名果之一,在我国东南部地区广泛种植,因其具有食用和药用双重价值,因此深受人们的青睐。果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是一个独特的双功能... 详细信息

番木瓜是岭南四大名果之一,在我国东南部地区广泛种植,因其具有食用和药用双重价值,因此深受人们的青睐。果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是一个独特的双功能酶,具有激酶功能域和酯酶功能域,能催化生物体内糖代谢的重要调节物果糖-2,6-二磷酸(Fru-2,6-P_(2))的合成和降解。为了研究番木瓜中编码该酶的基因CpF2KP的功能,得到目的蛋白尤为重要。本研究从番木瓜基因组中提取到CpF2KP基因的编码序列(coding sequence,CDS)序列,该基因CDS全长2274 bp。将该基因CDS全长扩增之后选用pGEX-4T-1载体进行原核表达。对载体pGEX-4T-1用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切,利用基因重组的方式将扩增序列构建到原核表达载体上。经过诱导条件探索,SDS-PAGE结果显示GST-CpF2KP重组蛋白的大小约为110 kDa,诱导CpF2KP蛋白表达的最适条件为:异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度为0.5 mmol/L,温度28℃。对诱导后的CpF2KP蛋白进行纯化,得到了纯化的单一目的蛋白。此外,检测了该基因的组织表达特性发现该基因在种子中表达量最高,在果肉中表达量最低。该研究为进一步深入揭示番木瓜CpF2KP蛋白的功能及研究该基因参与的生物学过程提供了重要基础。

关键词：番木瓜 CpF2KP 原核表达蛋白纯化

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龙眼——木本植物体细胞胚胎发生研究的模式植物

龙眼——木本植物体细胞胚胎发生研究的模式植物

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中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议

作者：赖钟雄陈春玲王凤华李冬梅桑庆亮陈振光福建农林大学园艺植物生物技术研究所福建农林大学园艺植物生物技术研究所福建农林大学园艺植物生物技术研究所福建农林大学园艺植物生物技术研究所福建农林大学园艺植物生物技术研究所福建农林大学园艺植物生物技术研究所

植物体细胞胚胎发生研究是植物细胞生物学和植物细胞工程研究的前沿领域之一.由于体细胞胚胎发生过程与合子胚胎类似,即类似的分子机制调控着在体内(in vivo)和离体(in vitro)的胚胎发生过程,而且体细胞胚胎发生过程可以在离体条件下... 详细信息

植物体细胞胚胎发生研究是植物细胞生物学和植物细胞工程研究的前沿领域之一.由于体细胞胚胎发生过程与合子胚胎类似,即类似的分子机制调控着在体内(in vivo)和离体(in vitro)的胚胎发生过程,而且体细胞胚胎发生过程可以在离体条件下人为控制,被认为是分离胚胎发育相关基因和研究胚胎发育的良好

关键词：木本植物模式植物体细胞胚胎发生

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龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组学

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中国农业科学 2012年第9期45卷 1775-1790页

作者：赖呈纯赖钟雄方智振何园姜顺日福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建省农业科学院农业工程技术研究所

【目的】通过龙眼(Dimocarpus longan Lour.)体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质组学研究,为植物胚胎发育相关蛋白基因分离和植物体细胞胚发生相关机制等的深入研究奠定基础。【方法】利用已建立的龙眼体细胞胚发生再生系统,经同步化培养... 详细信息

【目的】通过龙眼(Dimocarpus longan Lour.)体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质组学研究,为植物胚胎发育相关蛋白基因分离和植物体细胞胚发生相关机制等的深入研究奠定基础。【方法】利用已建立的龙眼体细胞胚发生再生系统,经同步化培养获得龙眼体细胞胚发生早期5个阶段胚性培养物,并采用双向电泳和质谱技术对龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质2D表达谱可检测到1 203—1 798个蛋白点,其在龙眼体细胞胚发生早期各阶段大部分具有阶段差异表达特性,有小部分是阶段特异表达,根据其蛋白数目、表达丰度、分子量和等电点等变化,确定了龙眼体细胞胚发生早期的ECII到CpECGE阶段是体细胞胚发生早期的关键性阶段。成功鉴定45个差异蛋白,成功率为37%,其中以能量、碳水化合物代谢相关蛋白和氧化胁迫反应相关蛋白占多数,分别为22%和27%;通过其功能分析可以推断出,龙眼体细胞胚发生早期,能量和糖代谢是体细胞胚发生的基础,而氧化胁迫反应是体细胞胚发生的先决条件,并通过参与细胞骨架的稳定、氮代谢、信号转导、基因调控、蛋白质的翻译加工修饰和定位等功能的蛋白,构成一个庞大的龙眼体细胞胚发生蛋白质调控网络系统,保证体细胞胚的正常发育。【结论】对龙眼体细胞胚发生早期过程的蛋白质表达变化有了较全面的了解,蛋白质表达数量呈先减低后升高再减低的趋势,龙眼体细胞胚发生早期能量和糖代谢旺盛,氧化胁迫反应相关蛋白对体细胞胚早期的发生和发育有重要的调控作用。

关键词：龙眼体细胞胚发生蛋白质组学双向电泳质谱

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龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析

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中国农业科学 2010年第16期43卷 3392-3401页

作者：赖呈纯赖钟雄方智振林玉玲姜顺日福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建省农业科学院农业工程技术研究所

【目的】克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因(mitochondrial F1-ATPase beta subunit gene),并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。【方法】采用RT-PCR结合RACE法,通过T/A克隆测序,获得龙... 详细信息

【目的】克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因(mitochondrial F1-ATPase beta subunit gene),并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。【方法】采用RT-PCR结合RACE法,通过T/A克隆测序,获得龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因全长序列;随后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达规律。【结果】成功克隆龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因完整cDNA序列(GenBank登录号:FJ222749),该序列全长2099bp,由1677bp核苷酸组成的ORF,编码558个氨基酸。该基因与其它植物的线粒体ATP合酶β亚基基因在核苷酸序列和推导的氨基酸序列方面相似性较高。对来源于动、植物的28条线粒体ATP合酶β亚基基因编码区序列所构建的进化树分析表明,由线粒体ATP合酶β亚基基因编码区序列所建立的系统关系树与真实的动、植物进化基本一致,龙眼处在双子叶植物中,由于该基因在龙眼同科属的植物中为首次克隆,所以有自己单独的分支。qRT-PCR结果分析表明,随着龙眼体胚的发育,线粒体ATP合酶β亚基基因转录水平逐渐升高,到球形胚阶段达到最高,而后又急剧下降,到鱼雷形胚阶段降到最低,子叶形胚阶段略有升高。【结论】龙眼线粒体ATP合酶β亚基基因与其它植物相应序列具有较高同源性,在龙眼体胚发育过程中,以球形胚阶段的表达最高。

关键词：龙眼体细胞胚胎发生线粒体ATP合酶β亚基基因基因克隆实时荧光定量PCR

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从福建分离的广东赛葵曲叶病毒的分子特征(英文)

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植物病理学报 2008年第3期38卷 258-262页

作者： Roy B.Mugiira 吴剑丙吴祖建李桂新 @周雪平周雪平浙江大学生物技术研究所杭州310029 福建农林大学植物病毒研究所福州350002

从中国福建省表现曲叶和脉突症状的赛葵上分离到病毒分离物FJ1～FJ6。利用菜豆金色花叶病毒属病毒的特异性简并引物PA／PB，在所有6个分离物中都分离到了约500bp长度的病毒部分DNA片段。这些DNA片段与已报道的广东赛葵曲叶病毒（Malvast... 详细信息

从中国福建省表现曲叶和脉突症状的赛葵上分离到病毒分离物FJ1～FJ6。利用菜豆金色花叶病毒属病毒的特异性简并引物PA／PB，在所有6个分离物中都分离到了约500bp长度的病毒部分DNA片段。这些DNA片段与已报道的广东赛葵曲叶病毒（Malvastrum leaf curl Guangdong virus，MLCuGdV）的核苷酸序列同源性高达90％-93％。随机挑选FJ3分离物进行全基因组DNA的克隆测序。结果表明，FJ3 DNA全长2765个核苷酸，具有典型的双生病毒科病毒的基因组结构特征，与MLCuGdV的同源性为92．9％，表明FJ3是MLCuGdV的一个分离物。系统进化分析表明，除了MLCuGdV，FJ3与其它赛葵上分离到的双生病毒的亲缘关系都较远，而与分离自中国南方番木瓜上的双生病毒聚成簇，有较近的亲缘关系。进一步比较分析各蛋白编码的氨基酸序列发现，FJ3可能是一个种间重组分子，它可能是由中国番木瓜曲叶病毒或广东番木瓜曲叶病毒和另外的未知病毒重组产生的。

关键词：广东赛葵曲叶病毒赛葵序列重组福建

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多效唑影响朱顶红植株生长的转录组分析

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热带作物学报 2022年第1期43卷 185-195页

作者：黄宝华许小琼陈晓慧徐小萍张春渝林玉玲赖钟雄漳州职业技术学院福建漳洲363000 福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002

朱顶红具有较高观赏价值,但其高花茎和叶太长成为其发展盆栽的限制因素。本研究应用不同浓度的多效唑(paclobutrazol,PBZ)对朱顶红进行处理,观测其表型性状的特征,并应用RNA-seq技术进行转录本分析。结果表明,PBZ对朱顶红的株高及叶片... 详细信息

朱顶红具有较高观赏价值,但其高花茎和叶太长成为其发展盆栽的限制因素。本研究应用不同浓度的多效唑(paclobutrazol,PBZ)对朱顶红进行处理,观测其表型性状的特征,并应用RNA-seq技术进行转录本分析。结果表明,PBZ对朱顶红的株高及叶片长度具有抑制作用,随着PBZ浓度的增加,其株高越矮,叶长逐渐变短,各处理间呈显著差异,成熟的花茎高度也随PBZ浓度的增加而降低。经转录组分析,Q20介于98.320%~98.450%之间,均值为98.385%,说明测序质量较好,可以用于后续分析。差异基因富集最显著的途径为苯并噁唑嗪酮类化合物生物合成途径。对差异表达基因的GO功能分类进行分析,在生物过程分类下的6个比对中,差异表达基因富集到的前3个词条分别是:代谢过程、细胞过程、单一生物过程。在细胞组成的6个比对中,差异表达基因富集到的前7个词条都是一致的,分别是细胞、细胞部分、膜、细胞器、膜部分、细胞器部分、大分子复合物,其富集相似度很高。在分子功能的6个比对中,前3个的富集词条分别是催化活性、绑定、运输活动。表明不同浓度PBZ主要通过影响植物体内各种生物学过程来调控朱顶红矮化,同时也涉及改变植物组织细胞组分以及调控分子功能来影响朱顶红矮化。KEGG功能分类中,代谢占比最大,都达60%以上。Pathway富集分析也显示差异基因显著富集在代谢途径和次生代谢产物的生物合成中。通过对代谢通路进行分析,表明影响脂肪酸的合成及丙二酰COA的提升是矮化的影响因素之一。木质素的大量合成和微管蛋白TUBA、TUBB的提升促使茎粗的增加。茉莉酸甲酯和不饱和脂肪酸类的提升和合成促使其抗性的提升。HSF、hsp70及HSP90基因表达的提升,提高了其耐热性。研究结果为进一步了解PBZ对朱顶红的影响机理奠定了基础,也为朱顶红育种提供了参考。

关键词：朱顶红多效唑 RNA-seq 生长

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茶树RNA的提纯与鉴定

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福建农林大学学报（自然科学版） 2003年第1期32卷 70-72页

作者：林金科开国银福建农林大学园艺学院福建福州350002 上海交通大学植物生物技术研究中心上海200030

研究了一种可有效排除茶树叶片细胞所富含的茶多酚、茶多糖等杂质污染的茶树总RNA提取方法.即在Trizol法的基础上,于提取的初始阶段,重点防止褐化效应,用水不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和β-巯基乙醇(β-Me)排除茶多酚干扰,同时用低含量... 详细信息

研究了一种可有效排除茶树叶片细胞所富含的茶多酚、茶多糖等杂质污染的茶树总RNA提取方法.即在Trizol法的基础上,于提取的初始阶段,重点防止褐化效应,用水不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和β-巯基乙醇(β-Me)排除茶多酚干扰,同时用低含量乙醇去除茶多糖;在最后阶段,55-60℃热水浴10min,低温离心进一步去除茶多糖的干扰.利用这一方法提取的茶树总RNA,经琼脂糖电泳鉴定,可见清晰的18s和28sRNA的2条带型,证明RNA完整,无弥散或降解.

关键词：茶树 RNA 提纯鉴定分子生物学茶多酚茶多糖萜类化合物

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龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-4的克隆与表达分析

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热带作物学报 2012年第2期33卷 302-309页

作者：赖呈纯林玉玲赖钟雄福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002 福建省农业科学院农业工程技术研究所福建福州350003

以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性培养物为材料,采用简并引物结合RACE方法分离得到龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-4的cDNA全长序列,全长为1 061 bp,由735个核苷酸组成的开放阅读框,编码244个氨基酸(GenBank登录号为GQ443758)。采用... 详细信息

以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性培养物为材料,采用简并引物结合RACE方法分离得到龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-4的cDNA全长序列,全长为1 061 bp,由735个核苷酸组成的开放阅读框,编码244个氨基酸(GenBank登录号为GQ443758)。采用生物信息学方法分析,发现该基因推导的蛋白分子量为28 576 ku,pI为9.96;该蛋白为60S Ribosomal protein L30蛋白质家族成员中的L7蛋白,是一个具有核糖体蛋白L30信号位点和1个典型的Ribosomal L30 like superfamily组件,无典型信号肽结构,无跨膜螺旋的亲水性蛋白;α螺旋是该蛋白最大量的结构元件,散布于整个蛋白质中。实时荧光定量PCR分析结果显示,DlUP-4基因在龙眼体胚发生过程中均有表达,其表达水平的趋势呈"M"形,其中2个高峰出现在不完全胚性紧实结构阶段和鱼雷形胚阶段,而球形胚阶段最低。该研究结果对DlUP-4基因在龙眼体胚发生过程中的作用有了一个初步的认识,其在龙眼体胚发生过程中,在调控体胚发生的启动、细胞的极化、细胞的增殖等方面可能有重要的功能,这为进一步研究该基因在龙眼体胚发生过程中的功能奠定了基础。

关键词：龙眼体胚未知蛋白DIUP-4 基因克隆基因表达

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