检索结果-内蒙古大学图书馆

作物学报 2018年第6期44卷 824-835页

作者：毛花英刘峰苏炜华黄宁凌辉张旭王文举李聪娜汤翰臣苏亚春阙友雄福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室/国家甘蔗工程技术研究中心福建福州350002

Sec14-like磷脂酰肌醇转运蛋白(Sec14-like phosphatidylinositol transfer proteins,PITPs),广泛存在于真核生物细胞中,参与肌醇磷酸代谢、膜运输、极性生长、信号转导、逆境胁迫等多种重要的生命过程。甘蔗中响应干旱和盐胁迫的Sec14-... 详细信息

Sec14-like磷脂酰肌醇转运蛋白(Sec14-like phosphatidylinositol transfer proteins,PITPs),广泛存在于真核生物细胞中,参与肌醇磷酸代谢、膜运输、极性生长、信号转导、逆境胁迫等多种重要的生命过程。甘蔗中响应干旱和盐胁迫的Sec14-like基因尚未见报道。本研究从甘蔗受黑穗病胁迫的转录组数据库中获得一条SEC14基因序列,并利用RT-PCR技术克隆得到甘蔗SEC14基因c DNA全长序列,命名为Sc SEC14(Gen Bank登录号为MG571103)。生物信息学分析显示,Sc SEC14基因全长1617 bp,包含一个1008 bp的完整开放阅读框,编码335个氨基酸;Sc SEC14为不稳定的亲水性蛋白,不存在信号肽;蛋白二级结构元件多为α-螺旋,具有典型的SEC14结构域和CRAL_TRIO_N结构域。此外,系统进化树分析揭示,该蛋白属于Sec14-like蛋白家族的SSH(soybean Sec14 homolog group)亚家族。亚细胞定位结果表明,Sc SEC14蛋白主要定位于细胞膜。实时荧光定量PCR分析发现,Sc SEC14基因在甘蔗中组成型表达,在蔗皮中的表达量最低,蔗叶中的表达量最高,约为蔗皮的4.9倍;该基因在PEG、Na Cl、CaCl_2和水杨酸(SA)胁迫下的表达量均上调。因此,甘蔗Sc SEC14基因可能参与Ca^(2+)和SA介导的抗逆信号通路,积极响应逆境胁迫,尤其调节了干旱和高盐环境下的抗逆性。

关键词：甘蔗 Sec14-like磷脂酰肌醇转运蛋白 ScSEC14 干旱盐胁迫

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转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定

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分子植物育种 2019年第4期17卷 1220-1227页

作者：王文治杨本鹏冯小艳王俊刚冯翠莲熊国如赵婷婷沈林波张树珍许莉萍中国热带农业科学院甘蔗研究中心中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海口571101 福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福州350002

随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检... 详细信息

随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测的。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统的红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度的引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定的甘蔗红糖DNA的提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖的商业化所需的转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要的转基因甘蔗白糖DNA的提取及分子鉴定提供借鉴。

关键词：甘蔗红糖转基因生物外源基因分子鉴定荧光定量PCR

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rDNA在斑茅染色体的物理定位和染色体基数研究

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甘蔗糖业 2018年第2期47卷 1-5页

作者：吴嘉云黄永吉王勤南凌秋平邓祖湖李奇伟陈如凯广东省生物工程研究所(广州甘蔗糖业研究所)广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广东广州510316 福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心福建福州350002 福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福建福州350002

为了了解5S rDNA和45S rDNA在斑茅染色体上的分布情况及其染色体基数,利用荧光原位杂交技术在斑茅海南92-77(2n=60)和海南92-105(2n=60)的中期染色体和间期细胞核上进行5S rDNA和45S rDNA定位研究。结果表明在海南92-77和海南92-105的... 详细信息

为了了解5S rDNA和45S rDNA在斑茅染色体上的分布情况及其染色体基数,利用荧光原位杂交技术在斑茅海南92-77(2n=60)和海南92-105(2n=60)的中期染色体和间期细胞核上进行5S rDNA和45S rDNA定位研究。结果表明在海南92-77和海南92-105的中期染色体和间期细胞核上45S rDNA位点均有6个信号位点,且均位于染色体短臂的端部上;这6个45S rDNA位点大小具有明显的差异,说明斑茅的45S rDNA的拷贝数存在差异。5S rDNA位点在海南92-77和海南92-105均有6个信号位点,且均位于染色体长臂的着丝粒附近;5S rDNA位点大小相差无几,说明斑茅的5S rDNA的拷贝数差异不大。因此,可以推断染色体数目为60的斑茅染色体基数为x=10。

关键词：斑茅荧光原位杂交核糖体DNA 物理定位染色体基数

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甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法

甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法

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标准类型：国家标准

本标准规定了甘蔗条纹花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus)实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法的仪器与设备、试剂与材料、样品的采集与前处理、检测以及结果判断与表述等。本标准适用于可能带有甘蔗条纹花叶病毒的活...

标准号: GB/T 36820-2018

本标准规定了甘蔗条纹花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus)实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法的仪器与设备、试剂与材料、样品的采集与前处理、检测以及结果判断与表述等。本标准适用于可能带有甘蔗条纹花叶病毒的活体寄主植物的快速检测、诊断。

关键词：

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甘蔗杆状病毒实时荧光PCR检测方法

甘蔗杆状病毒实时荧光PCR检测方法

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标准类型：国家标准

本标准适用于可能带有SCBIMV和SCBMOV病毒的活体寄主植物的快速检测、诊断。

标准号: GB/T 36806-2018

本标准适用于可能带有SCBIMV和SCBMOV病毒的活体寄主植物的快速检测、诊断。

关键词：

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甘蔗宿根矮化病菌实时荧光PCR检测方法

甘蔗宿根矮化病菌实时荧光PCR检测方法

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标准类型：国家标准

本标准规定了甘蔗宿根矮化病菌(Leifsonia xyli subsp. xyli)实时荧光PCR检测方法的仪器与设备、试剂与材料、样品的采集与前处理、检测以及结果判断与表述等。本标准适用于可能带有甘蔗宿根矮化病菌的活体寄主植物的快速检测、诊断。

标准号: GB/T 36829-2018

关键词：

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白茅45S rDNA IGS的克隆及序列分析

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基因组学与应用生物学 2017年第3期36卷 993-1000页

作者：余凡罗玲李雪停黄永吉吴嘉云杨永庆邓祖湖福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心福州350002 广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广州510316 广东省生物工程研究所广州510316 福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福州350002

本研究以云南2009-48和广东2010-13为实验材料,通过PCR方法扩增克隆了2种不同的白茅的45S rDNA IGS。序列分析结果表明:云南2009-48的45S rDNA IGS序列长度为2 613 bp,GC含量为64.6%;广东2010-13的45S rDNA IGS序列长度为2 882 bp,GC含... 详细信息

本研究以云南2009-48和广东2010-13为实验材料,通过PCR方法扩增克隆了2种不同的白茅的45S rDNA IGS。序列分析结果表明:云南2009-48的45S rDNA IGS序列长度为2 613 bp,GC含量为64.6%;广东2010-13的45S rDNA IGS序列长度为2 882 bp,GC含量64.4%;它们的IGS序列一致性为84.5%。45S rDNA IGS均由NTS和ETS组成:云南2009-48的NTS和ETS长度分别为1 441 bp和1 172 bp,GC含量分别为63.5%和66.1%;广东2010-13的NTS和ETS长度分别为1 719 bp和1 163 bp,GC含量分别为64.2%和65.3%;它们的NTS序列一致性为76.5%,而ETS的NTS序列一致性高达96.2%。NTS中存在4种类型的亚重复序列(SR1,SR2,SR3,SR4),ETS中存在1种类型的亚重复序列(SR5),序列一致性为74.0%~93.0%。通过软件辅助分析以及与其他植物的比较分析,我们发现了预测的转录起始位点和转录终止位点,并且也存在着大量的甲基化位点,它们在调控rRNA转录方面起着非常重要的作用。此外,聚类分析结果表明白茅与甘蔗的亲缘关系相对较近,为拓宽甘蔗遗传基础提供了理论依据。

关键词：白茅 45S rDNA 基因间隔区

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甘蔗脱毒种苗检测技术规范

甘蔗脱毒种苗检测技术规范

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作者：许莉萍阙友雄方晓东福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室/国家甘蔗工程技术研究中心全国农业技术推广中心中国热带农业科学院热带生物技术研究所

标准类型：行业标准

本标准规定了甘蔗脱毒种苗等的术语和定义、检测对象、抽样、检测方法和检测结果判定。本标准适用于甘蔗宿根矮化病菌、甘蔗花叶病毒、高粱花叶病毒、甘蔗条纹花叶病毒和甘蔗黄叶病毒的检测以及甘蔗脱毒种苗的抽样和检定。

标准号: NY/T 3179-2018

关键词：

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甘蔗花青素转录因子基因ScRS克隆与基因枪转化研究

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热带作物学报 2017年第7期38卷 1295-1302页

作者：刘迪施桂姣肖乃衍 Khalil Farghama 许跃语陈平华张卓王恒波高三基许莉萍张华福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心福建福州350002 福建农林大学农业部甘蔗及制品质量监督检验测试中心转基因检测室福建福州350002 福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福建福州350002

花青素不仅是天然色素,而且具有保健功能。花青素转录因子基因对于调控花青素的合成具有关键作用。本研究根据玉米花青素转录因子基因RS序列设计引物,利用同源克隆技术,得到甘蔗花青素转录因子基因ScRS的全长序列;在ScRS序列两端分别添... 详细信息

花青素不仅是天然色素,而且具有保健功能。花青素转录因子基因对于调控花青素的合成具有关键作用。本研究根据玉米花青素转录因子基因RS序列设计引物,利用同源克隆技术,得到甘蔗花青素转录因子基因ScRS的全长序列;在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS,包被微粒载体通过基因枪对甘蔗愈伤组织进行轰击,转化的愈伤组织明显呈紫红色;将紫红色愈伤组织分化培养获得再生甘蔗植株,经PCR检测,获得转ScRS基因阳性植株,初步证实利用克隆的基因转化甘蔗可以使愈伤组织显色。研究结果对于建立新型的遗传转化可视化示踪体系和培育高花青素甘蔗品种具有重要意义。

关键词：甘蔗花青素转录因子基因 ScRS 基因枪轰击

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甘蔗内标基因PCR检测技术研究

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热带作物学报 2017年第3期38卷 500-507页

作者：肖乃衍林冰刘迪陈平华许跃语施桂姣王恒波郭晋隆高三基许莉萍陈如凯福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心福建福州350002 农业部甘蔗及制品质量监督检验测试中心转基因检测室福建福州350002 农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福建福州350002

克隆鉴定甘蔗内源低拷贝基因鲜有研究,影响转基因甘蔗精确鉴定。根据其他作物已有的内标基因和内源低拷贝基因,按照内标基因的物种特异性和通用性原则,用12个有代表性甘蔗栽培品种对11个候选基因进行筛选与鉴定,获得了甘蔗特有的内源低... 详细信息

克隆鉴定甘蔗内源低拷贝基因鲜有研究,影响转基因甘蔗精确鉴定。根据其他作物已有的内标基因和内源低拷贝基因,按照内标基因的物种特异性和通用性原则,用12个有代表性甘蔗栽培品种对11个候选基因进行筛选与鉴定,获得了甘蔗特有的内源低拷贝基因,并以该基因建立了甘蔗内标基因PCR检测技术体系,为转基因甘蔗的精确检测和转基因标准的制定奠定了基础。

关键词：甘蔗内标基因鉴定 PCR检测技术

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