检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生态学杂志 2021年第5期33卷 594-598页

作者：邱薇钟民涛伦永志莆田学院药学与医学技术学院医学微生态学福建省高校重点实验室福建莆田351100 大连医科大学基础医学院微生物学教研室

众所周知,宏基因组学是一种通过提取样品中微生物的总DNA,构建宏基因组文库,研究环境中全部微生物的遗传组成及其菌落功能的方法。而宏基因组新一代测序(metagenome next-generation sequencing, mNGS)是在宏基因组学基础上进一步发展... 详细信息

众所周知,宏基因组学是一种通过提取样品中微生物的总DNA,构建宏基因组文库,研究环境中全部微生物的遗传组成及其菌落功能的方法。而宏基因组新一代测序(metagenome next-generation sequencing, mNGS)是在宏基因组学基础上进一步发展起来的新一代测序技术,无需对患者标本进行培养,直接分析标本中的微生物DNA或RNA。本文介绍了宏基因组学在临床上的应用,包括传染病的诊断、疾病和健康状态下的微生物组分析、人类宿主反应分析和肿瘤相关病毒及其基因组鉴定,并简要探讨了临床宏基因组学研究中所遇到的挑战及解决方法。

关键词：临床微生物学宏基因组学传染病诊断生物信息学

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聚合酶链反应在检测脑性瘫痪患儿人巨细胞病毒感染中的应用

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实用儿科临床杂志 2005年第2期20卷 157-159页

作者：类延花吴建贤蔡亦红王明丽安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230022 安徽医科大学附属医院康复医学科合肥230022

目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)在检测脑性瘫痪 (CP)患儿人巨细胞病毒 (HCMV)感染中的意义。方法　对 5 6例CP患儿用PCR检测尿巨细胞病毒 (CMV)DNA ,病毒分离检测尿标本 ,观察CMV特征性致细胞病变效应 (CPE) ,ELISA检测血清CMVIgM和IgG... 详细信息

目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)在检测脑性瘫痪 (CP)患儿人巨细胞病毒 (HCMV)感染中的意义。方法　对 5 6例CP患儿用PCR检测尿巨细胞病毒 (CMV)DNA ,病毒分离检测尿标本 ,观察CMV特征性致细胞病变效应 (CPE) ,ELISA检测血清CMVIgM和IgG。结果　PCR检测CMVDNA阳性率为 5 3 .6% ,9例CMV病毒分离结果阳性 ;CMVIgM、IgG阳性率分别为 12 .5 %、3 7.5 % ;病毒分离 :CMVIgM阳性与CMVDNA阳性的符合率分别为 10 0 %、10 % ,前两者与后者比较均有显著差异 (P <0 .0 1) ;CMVIgG阳性与PCR阳性符合率为 6.7% ,两者无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　PCR检测CMVDNA能够早期快速检测到CP患儿CMV感染 ,可应用于CP患儿中CMV感染的检测 ,为早期干预提供可靠依据。

关键词：巨细胞病毒脑性瘫痪聚合酶链反应酶联免疫吸附试验

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白细胞介素-32与疾病关系的研究进展

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中国病原生物学杂志 2017年第12期12卷 1228-1230页

作者：徐翠平柳爱华宝福凯王玲官文焕昆明卫生职业学院基础医学院病原生物学与免疫学教研室云南昆明650600 昆明医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系昆明医科大学基础医学院微生物学与免疫学系

白细胞介素-32(IL-32)是2005年发现的一种细胞因子,它有六种剪接变异体分别为IL-32α、IL-32β、IL-32γ、IL-32δ、IL-32ε和IL-32ζ。IL-32与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6等细胞因子一样在炎症及自身免疫性疾病中高表达。本文主要对... 详细信息

白细胞介素-32(IL-32)是2005年发现的一种细胞因子,它有六种剪接变异体分别为IL-32α、IL-32β、IL-32γ、IL-32δ、IL-32ε和IL-32ζ。IL-32与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6等细胞因子一样在炎症及自身免疫性疾病中高表达。本文主要对IL-32的生物学作用以及与结核病、肿瘤及自身免疫性疾病如炎性肠病、类风湿性关节炎(RA)等疾病关系进行了综述。

关键词：白细胞介素-32 生物学功能结核病自身免疫性疾病综述

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中介素对脂多糖诱导巨噬细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化及细胞焦亡的影响

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中华风湿病学杂志 2022年第12期26卷 813-819,I0002页

作者：景刚张军锋朱爱萍杨佳常思佳黄太平王艳红山西医科大学第二医院检验科太原030001 山西中医药大学基础医学院晋中030619 山西医科大学微生物学与免疫学教研室太原030001

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3... 详细信息

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)阻滞剂LY294002组。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞NLRP3炎症小体的激活情况及炎症因子IL-1β和IL-18表达,碘化丙锭(PI)染色法检测细胞焦亡的改变。计量资料以±s表示,组间差异比较采用方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组[(0.83±0.09),(0.49±0.04)]比较,脂多糖组磷酸化(p)-PI3K/PI3K(0.44±0.05),p-Akt/Akt(0.27±0.06)比值均显著降低,与脂多糖组相比,脂多糖+中介素组细胞中p-PI3K/PI3K(1.22±0.18),pAkt/Akt(0.83±0.09)比值均显著升高(F=31.40,P<0.001;F=50.88,P<0.001)。与对照组比较,脂多糖组(脂多糖和ATP)可刺激RAW264.7细胞炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体(NLRP3,caspase-1,ASC)的mRNA及蛋白表达上调;与脂多糖组相比,中介素处理可抑制炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体表达,这种效应可被PI3K/Akt通路的阻滞剂LY294002所阻断。Real-time PCR结果显示,IL-1βmRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.11),脂多糖组为(8.32±0.61),脂多糖+中介素组为(8.32±0.55),脂多糖+中介素+LY组为(7.23±0.41)(F=15.42,P<0.001);IL-18 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.17),脂多糖组为(1.82±0.21),脂多糖+中介素组为(1.14±0.15),脂多糖+中介素+LY组为(1.53±0.11)(F=18.16,P<0.001);NLRP3 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.13),脂多糖组为(2.58±0.18),脂多糖+中介素组为(1.07±0.17),脂多糖+中介素+LY组为(1.33±0.32)(F=15.98,P<0.001);caspase-1 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.09),脂多糖组为(6.20±0.19),脂多糖+中介素组为(3.43±0.06),脂多糖+中介素+LY组为(5.50±0.45)(F=18.39,P<0.001);ASC mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.21),脂多糖组为(4.58±0.48),脂多糖+中介素组为(2.07±0.51),脂多糖+中介素+LY组为(3.33±0.32)(F=15.19,P<0.001)。蛋白质免疫印迹结果显示,IL-1β蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±14)%],脂多糖+中介素组为[(112±11)%],脂多糖+中介素+LY组为[(171±27)%](F=21.25,P<0.001);IL-18蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(183±16)%],脂多糖+中介素组为[(115±19)%],脂多糖+中介素+LY组为[(179±23)%](F=19.62,P<0.001);NLRP3蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(149±15)%],脂多糖+中介素组为[(106±10)%],脂多糖+中介素+LY组为[(144±15)%](F=14.35,P<0.001);ASC蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±12)%)],脂多糖+中介素组为[(110±18)%],脂多糖+中介素+LY组为(192±8)%(F=15.79,P<0.001)。结论中介素通过调节PI3K/Akt活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡。

关键词：巨噬细胞脂多糖类细胞焦亡 NLRP3炎症小体中介素 PI3K/Akt信号通路

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中药热毒清抑制人巨细胞病毒的体外实验研究

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中成药 2010年第2期32卷 296-298页

作者：杨李冯晓亮吴德唐久来安徽医科大学第一附属医院小儿神经康复中心安徽合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230032

发育中的脑组织易受病毒感染的损害,嗜神经病毒可对人类胚胎脑组织造成损伤,这些病毒包括风疹病毒、巨细胞病毒(HCMV)、轮状病毒和疱疹病毒属中的其他病毒等,其中以HCMV最为常见,但目前尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法.... 详细信息

发育中的脑组织易受病毒感染的损害,嗜神经病毒可对人类胚胎脑组织造成损伤,这些病毒包括风疹病毒、巨细胞病毒(HCMV)、轮状病毒和疱疹病毒属中的其他病毒等,其中以HCMV最为常见,但目前尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法.本实验采用体外细胞培养技术在HF细胞内测定了不同浓度的热毒清对巨细胞病毒(HC-MV)的抑制作用.

关键词：热毒清人巨细胞病毒抗病毒作用细胞病变效应

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乳酸链球菌nisk基因与细菌性双成分调节子的研究

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中国微生态学杂志 1995年第2期7卷 4-8,14页

作者：叶嗣颖伊.,蒂同济医科大学基础医学院微生物学教研室

本研究通过对乳酸链球菌亚种Ｎ８的Ｎｉｓｉｎｚ结构基因下游部分基因区的分子克隆、序列分析和ＯＲＦ的检测，揭示出一个属于细菌性双成份调节于系统的基因，ｎｉＳＫ，其起始区略与ｎｉｓＲ末端重叠，并发现ｎｉｓＲ和ｎｉｓｋ同被转... 详细信息

本研究通过对乳酸链球菌亚种Ｎ８的Ｎｉｓｉｎｚ结构基因下游部分基因区的分子克隆、序列分析和ＯＲＦ的检测，揭示出一个属于细菌性双成份调节于系统的基因，ｎｉＳＫ，其起始区略与ｎｉｓＲ末端重叠，并发现ｎｉｓＲ和ｎｉｓｋ同被转录一个多顺反子ｍＲＮＡ。在ｎｉｓＫ编码区后，有一个ρ非依赖性终止子（Ｇ°＝－４．７Ｋａｌ／ｍｏｌ）。推导出的含４４７个氮基酸的ｎｉｓｋ蛋白在其Ｎ末端区有两个过膜序列。其Ｃ末端区与细菌性双成份调节子系统的若干组氦酸激酶Ｃ末端同源。

关键词：乳酸链球菌细菌性双成调节子 nisk基因

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汉滩病毒糖蛋白Gn的T细胞表位预测及其跨种属验证

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解放军医学杂志 2023年第9期48卷 1000-1010页

作者：孙报增秦聪聪张俊琦王永凯张文标刘瑞波白天原张志辉张宇丝杨琨姜东伯空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生物武器损伤防治药物重点实验室陕西西安710032 空军医科大学唐都医院风湿科陕西西安710032 空军军医大学基础医学院微生物学教研室陕西西安710032

目的筛选、鉴定并验证汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白-N末端(Gn)上的免疫反应性表位。方法通过UniProt数据库获取HTNV 76-118株Gn蛋白序列。采用IEDB、SMMPMBEC、NetMHCpan 4.1、SYFPEITHI、Rankpep算法预测表位亲和力,VaxiJen v2.0分析免疫... 详细信息

目的筛选、鉴定并验证汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白-N末端(Gn)上的免疫反应性表位。方法通过UniProt数据库获取HTNV 76-118株Gn蛋白序列。采用IEDB、SMMPMBEC、NetMHCpan 4.1、SYFPEITHI、Rankpep算法预测表位亲和力,VaxiJen v2.0分析免疫原性,Blastp工具计算保守性,HPEPDOCK和EpiDOCK模拟pMHC对接,TBtools进行双向聚类分析,酶联免疫斑点(ELISpot)实验评价表位细胞免疫反应性。结果通过UniProt数据库获得了HTNV 76-118株Gn蛋白序列(PRO_0000036816)。整合5种亲和力算法,在小鼠H-2亚型中获得了61个优势表位,在人主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅰ亚型中得到234个优势表位,MHC-Ⅱ亚型中得到212个优势表位;VaxiJen筛选分别获得H-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ亚型强免疫原性优势表位23、110、42个;进一步采用Blastp筛选获得高亲和力、强免疫原性、种间种内保守的MHC-Ⅰ类限制性表位3个,MHC-Ⅱ类限制性表位81个。双向分层聚类分析揭示了小鼠H2-d、H2-b和部分人类白细胞分化抗原(HLA)在提呈HTNV Gn表位上的相似性。ELISpot验证了5个表位具有较强的诱导脾细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结论预测并验证了HTNV Gn上的细胞免疫反应性表位,证实在MHC提呈中病毒抗原存在跨基因、种属、物种的交叉免疫反应性,为预防肾综合征出血热(HFRS)提供了新思路。

关键词：汉滩病毒糖蛋白表位计算机预测免疫反应性

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检测SARS冠状病毒的套式RT-PCR方法的建立与初步应用

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现代预防医学 2007年第3期34卷 455-456+459页

作者：赵卫晏辉钧张文炳方丹云周经姣朱利江丽芳龙北国广东广州南方医科大学公共卫生与热带医学学院广东广州中山大学基础医学院微生物学教研室

[目的]建立套式RT-PCR检测SARS冠状病毒的方法。[方法]从广东地区SARS患者尸解肺组织、咽拭子、嗽口水及本实验室分离的SARS冠状病毒(SARS-CoV)组织培养上清中提取RNA,利用针对SARS冠状病毒多聚酶基因的特异性引物,进行逆转录及套式PCR... 详细信息

[目的]建立套式RT-PCR检测SARS冠状病毒的方法。[方法]从广东地区SARS患者尸解肺组织、咽拭子、嗽口水及本实验室分离的SARS冠状病毒(SARS-CoV)组织培养上清中提取RNA,利用针对SARS冠状病毒多聚酶基因的特异性引物,进行逆转录及套式PCR扩增。扩增出的阳性片段连接入pGEM-T载体中,测序后比较其与其他已知SARS冠状病毒的同源性。[结果]从SARS患者尸解肺组织、咽拭子、嗽口水及SARS冠状病毒组织培养上清中均可扩增出阳性片段,经测序后证实是SARS冠状病毒特有序列。[结论]针对SARS冠状病毒多聚酶基因所建立的套式RT-PCR方法适用于临床标本及组织培养标本中SARS冠状病毒的检测。

关键词： SARS冠状病毒套式RT-PCR 检测

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钾离子通道阻滞剂对SD大鼠前列腺上皮细胞的增殖作用

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中华男科学杂志 2007年第2期13卷 138-142页

作者：周正兴梁朝朝唐智国郝宗耀郭清奎胡勇赵俊安徽医科大学第一附属医院泌尿外科安徽合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230022

目的:观察钾离子通道阻滞剂四乙胺(TEA)、四氨基吡啶(4-AP)、格列本脲(Glib)对体外培养SD大鼠前列腺上皮细胞增殖的调节作用。方法:胶原酶消化组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株,角化蛋白免疫组织化学染色(Pan-keratin)鉴定培养细胞,... 详细信息

目的:观察钾离子通道阻滞剂四乙胺(TEA)、四氨基吡啶(4-AP)、格列本脲(Glib)对体外培养SD大鼠前列腺上皮细胞增殖的调节作用。方法:胶原酶消化组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株,角化蛋白免疫组织化学染色(Pan-keratin)鉴定培养细胞,分别加入TEA(1、5、10mmol/L)、4-AP(1、5、10mmol/L)、Glib(10、50、100mol/L),培养24、48、72h后计数并绘制细胞生长柱形图,运用MTT方法和Hoechst33258细胞核染色法观察传代后细胞生长状况。对照组不加钾离子通道阻制剂。结果:培养细胞具有典型的上皮细胞形态特征,Pan-Keratin染色阳性,MTT法和Hoechst33258染色法均显示随着TEA、4-AP及Glib浓度的递增,作用于细胞24、48、72h后,与对照组相比,前列腺上皮细胞有不同程度的增殖(P<0.05或P<0.01)。结论:钾离子通道阻滞剂对体外培养的SD大鼠前列腺上皮细胞有增殖作用。

关键词：前列腺上皮细胞钾离子通道阻滞剂细胞增殖体外研究大鼠

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幽门螺杆菌CagA与YWHAE互作区段的确定

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中国人兽共患病学报 2022年第11期38卷 975-981页

作者：张晓艳温春燕陈豪佘菲菲福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建省肿瘤微生物学重点实验室福州350122

目的探讨幽门螺杆菌CagA蛋白与宿主细胞YWHAE蛋白相互作用的区段。方法先在酵母细胞水平构建CagA区段蛋白[-N、-M、-(N+M)、-C]的表达载体,经“滤纸法”检测、一对一交配试验及“ONPG液相法”分析,筛选互作区段;进而在哺乳动物细胞水平... 详细信息

目的探讨幽门螺杆菌CagA蛋白与宿主细胞YWHAE蛋白相互作用的区段。方法先在酵母细胞水平构建CagA区段蛋白[-N、-M、-(N+M)、-C]的表达载体,经“滤纸法”检测、一对一交配试验及“ONPG液相法”分析,筛选互作区段;进而在哺乳动物细胞水平,选用Cos7细胞经共转染、Co-IP方法确定互作区段,选用AGS细胞经上调/下调YWHAE表达、共转染、双荧光素酶报告基因检测等分析细胞NF-κB活性检测CagA候选区段与YWHAE互作的功能。结果成功构建CagA蛋白的N、M、(N+M)和C区段的酵母表达载体,CagA各区段蛋白“滤纸法”检测反式激活特性均为阴性,“一对一”交配后“液相法”筛选到CagA区段[-N、-(N+M)、-C]分别可与YWHAE在酵母中相互作用;Cos7细胞实验确定CagA区段[-N、-C]可分别沉淀外源性YWHAE,AGS细胞中CagA区段[-N、-C]对细胞NF-κB的激活,上调YWHAE能增强、下调YWHAE则抑制。结论幽门螺杆菌CagA蛋白N-末端与C-末端均分别与宿主细胞YWHAE蛋白相互作用,并可激活细胞NF-κB。

关键词：幽门螺杆菌 CagA YWHAE 相互作用 NF-κB

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