检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2022年第6期42卷 434-442页

作者：周世颖吴琼张翼张璐林旭陈婉南福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建省肿瘤微生物学重点实验室福州350122

目的探究泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)与乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)相互作用对HBx蛋白水平及其生物学功能的影响。方法通过GST pull-down、免疫共沉淀以及激光共聚焦试验检测HBx... 详细信息

目的探究泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)与乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)相互作用对HBx蛋白水平及其生物学功能的影响。方法通过GST pull-down、免疫共沉淀以及激光共聚焦试验检测HBx与USP22的相互作用。瞬时转染USP22真核表达质粒或干扰USP22表达的siRNA,Western blot检测肝细胞中HBx蛋白表达水平的变化。以环己酰亚胺(cycloheximide,CHX)、蛋白酶体抑制剂MG132(carbobenzoxy-Leu-Leu-leucinal,MG132)分别处理转染后的细胞,检测HBx蛋白的降解速率。进一步通过细胞内泛素化试验检测USP22对HBx泛素化的影响,明确USP22影响HBx蛋白稳定性的具体机制。最后,以双荧光素酶报告试验和平板克隆试验检测USP22对HBx生物学功能的影响。结果USP22与HBx存在相互作用。USP22显著增加HBx蛋白稳定性,并通过去除HBx的泛素化抑制HBx通过蛋白酶体降解,进而增强HBx的生物学功能。结论USP22抑制HBx通过泛素依赖-蛋白酶体途径降解,增强HBx蛋白稳定性并促进HBx功能。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白泛素特异性肽酶22 泛素蛋白酶体蛋白降解

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基于“五步一环模式”的医学免疫学教学实践与探索

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基础医学教育 2024年第10期26卷 829-832页

作者：张帆王艳红刘继斌姚红蔡红艳樊卫平山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室太原030001 山西医科大学基础医学院院办

医学免疫学是医学院校本科生一门重要主干和桥梁课程,但基础免疫学内容抽象复杂,理论较为深奥,且知识更新进展迅速,是医学生所学课程中最难理解和学习的课程之一。文章采用“五步一环”教学模式,通过案例-问题-原因-成果-思政五个步骤... 详细信息

医学免疫学是医学院校本科生一门重要主干和桥梁课程,但基础免疫学内容抽象复杂,理论较为深奥,且知识更新进展迅速,是医学生所学课程中最难理解和学习的课程之一。文章采用“五步一环”教学模式,通过案例-问题-原因-成果-思政五个步骤形成的闭环来讲解基础免疫学主要知识点。同时在采用“五步一环模式”的教学中借助故事教学法、案例教学法及文献阅读法等多种教学手段,一方面使抽象的免疫学知识点易于理解,激发学生科研热情,培养学生高阶思维能力;另一方面,可将思政元素巧妙融入,实现专业教学与思政教育互相交融,使学生的学业水平、专业素养和创新能力得到明显提升。

关键词：医学免疫学教学改革 “五步一环”教学模式案例教学法课程思政

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病原感染与免疫教学AI视频动画的制作与思考

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基础医学教育 2024年第3期26卷 249-254页

作者：夏丹丹郭萍刘伯玉张俊玲张林杰王林定王明丽安徽医科大学临床医学院基础医学部病原生物学与免疫学教研室合肥230031 安徽医科大学临床医学院临床医学系安徽医科大学基础医学院微生物学教研室

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系... 详细信息

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系。实施方案根据病原感染与免疫三门临床医学生必修课程为主线梳理出40个重难点,制作出30个具有综合内容的教学脚本,依据脚本完成AI化视频动画的制作与表现。在安徽医科大学临床医学院小范围使用后盲评教学效果,99%的学生都认为该教学动画能够加深对相应知识点的理解和记忆。71.71%学生认为画面非常有趣。全体参加该教学动画制作的学生的专业技能与理论联系实际能力显著提升。教师在教学过程使用该视频动画可以提高教学效率。

关键词：基础医学病原感染与免疫教学AI视频动画线上教育教学方法

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七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术的初步建立

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病毒学报 2023年第3期39卷 702-709页

作者：钱振黄涛张瑞雪殷强玲胡停停孙丽娜王世文梁米芳芜为柳燕安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

由呼吸道病毒引起的疾病严重威胁着人类的生命健康,为了建立一种快速高通量的呼吸道病毒核酸检测方法,本研究将多重PCR技术同液相芯片技术结合起来,针对呼吸道合胞病毒A型和B型、乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系、甲型流感病毒H1型... 详细信息

由呼吸道病毒引起的疾病严重威胁着人类的生命健康,为了建立一种快速高通量的呼吸道病毒核酸检测方法,本研究将多重PCR技术同液相芯片技术结合起来,针对呼吸道合胞病毒A型和B型、乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系、甲型流感病毒H1型和H3型以及新冠病毒等常见的七种呼吸道病毒,初步建立了七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术,评价了方法的特异性、敏感性和重复性,并使用来自安徽省疾控的25份临床急性期样本核酸对方法进行验证。结果显示,建立起的基于液相芯片多重核酸检测方法可特异性识别七种目标呼吸道病毒的靶基因序列,与包括副流感病毒在内的9种非目标呼吸道病毒无交叉反应。对七种病毒核酸进行十倍稀释液相检测,其中H3、BV、RSVB可以检出102拷贝/μL,BY、RSVA和SARS-CoV-2可以检出103拷贝/μL,对H1的检测限为104拷贝/μL。25份样本核酸检测结果与实际相符。结果表明,本研究建立的七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术具有特异性强、敏感性高、稳定性好等特点,可用于临床样本的快速检测,为呼吸道类传染病的液相芯片诊断奠定了实验室基础。

关键词：多重检测呼吸道病毒液相芯片 Magpix

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以实验素养为导向的医学微生物学实验探索

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基础医学教育 2023年第2期25卷 127-129页

作者：宋姗姗杨艾华王小敏王微微遵义医科大学基础医学院医学微生物学与免疫学实验室遵义563000 遵义医科大学基础医学院微生物学教研室

医学微生物学实验是一门实践性、应用型很强的课程,培养学生的实验素质是实验教学的重要组成部分,可直接影响学生实验技能的掌握度和科研思维的活跃力。为进一步加强和完善学生实验素质的培养,课题组在实验物品的归置、仪器设备的使用... 详细信息

医学微生物学实验是一门实践性、应用型很强的课程,培养学生的实验素质是实验教学的重要组成部分,可直接影响学生实验技能的掌握度和科研思维的活跃力。为进一步加强和完善学生实验素质的培养,课题组在实验物品的归置、仪器设备的使用、实验废弃物的处理、示教品标识的制作等方面进行探索和改革,注重培养学生的实验操作细节、团队合作以及自我防护的习惯,以期营造整洁、有序的实验环境,使学生养成良好的实验习惯,提高其综合实验素质,提升实验教学效率和教学质量。

关键词：医学微生物学实验教学素质培养

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微囊泡包裹溶瘤病毒的制备与鉴定及对Hepa 1-6细胞体外杀伤作用的探究

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微生物学通报 2024年第5期51卷 1754-1765页

作者：吴醒郑婷婷梁莹陶薇伊秦莹樊晓晖广西医科大学基础医学院微生物学教研室广西南宁530021 广西高校区域性疾病基础研究重点实验室广西南宁530021 南昌市洪都中医院检验科江西南昌330006

【背景】溶瘤病毒生物治疗是肿瘤治疗发展的新方向,其中新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)因具有生物安全及靶向性强等优势备受关注。然而,中和抗体的病毒清除将削弱溶瘤病毒的持续有效发挥的作用。基于肿瘤细胞源性的微囊泡递... 详细信息

【背景】溶瘤病毒生物治疗是肿瘤治疗发展的新方向,其中新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)因具有生物安全及靶向性强等优势备受关注。然而,中和抗体的病毒清除将削弱溶瘤病毒的持续有效发挥的作用。基于肿瘤细胞源性的微囊泡递送体系有望解决上述瓶颈,因此微囊泡包裹溶瘤病毒的制备具有非常重要的现实意义。【目的】探究建立基于肿瘤细胞源性的新城疫病毒微囊泡递送体系和评估其体外杀瘤效应。【方法】采用差速离心的方法,提取出微囊泡包裹的新城疫病毒(MV@NDV);粒度仪检测MV、NDV、MV@NDV的粒径大小;透射电子显微镜观察MV@NDV中MV和NDV的相对位置;免疫印迹技术(Western blotting, WB)检测MV@NDV的Integrin β-1、Gpc3和Flotillin-1蛋白表达;激光共聚焦显微镜观察MV@NDV感染Hepa1-6细胞24 h,细胞NDV-HN蛋白表达;倒置显微镜和CCK-8法分别检测感染Hepa 1-6细胞24、48、72 h的细胞形态以及活力变化;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qPCR)和免疫印迹技术(WB)分别检测MV@NDV感染Hepa 1-6细胞24 h凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9表达以及凋亡相关蛋白Caspase-3表达。【结果】粒径和透射电子显微镜检测结果表明MV粒径范围为141-342 nm,NDV粒径范围为91-825 nm,MV@NDV粒径范围为164-712 nm。WB结果表明MV@NDV能够表达MV所表达的Integrin β-1、Gpc 3、Flotillin-1蛋白。激光共聚焦显微镜观察结果表明MV@NDV、NDV感染Hepa1-6细胞,出现红色荧光,均表达NDV-HN蛋白。CCK-8结果表明MV@NDV组与NC组相比,Hepa 1-6细胞活力下降(P<0.05)。qPCR结果表明MV@NDV与NC组相比凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9均上调(P<0.05)。WB结果表明MV@NDV与NC组相比凋亡相关蛋白Caspase-3上调(P<0.05)。【结论】成功构建NDV微囊泡递送体系MV@NDV,有望解决治疗型溶瘤新城疫病毒在临床转化上存在的瓶颈,为临床新城疫病毒抗肿瘤方面提供新的思路及依据。

关键词：溶瘤病毒新城疫病毒微囊泡抗肿瘤

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我校卫生法学专业学生对法医学课程的认知调查与结果分析

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科学与财富 2024年第14期 142-144页

作者：高铁磊考文萍邵洪江赵永陈鹤杨丹哈尔滨医科大学基础医学院法医学教研室哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室哈尔滨医科大学基础医学院法医学教研室哈尔滨医科大学人文社会科学学院法学教研室哈尔滨医科大学基础医学院法医学教研室哈尔滨医科大学基础医学院法医学教研室

目的:通过问卷调查了解哈尔滨医科大学卫生法学专业的学生在法医学教学前后对法医学课程的认知、认可和需求情况.方法:应用微信中问卷星小程序制作并发布调查问卷,对已修完法医学课程的2017级～2021级法学专业共161名学生进行调查.应用E... 详细信息

目的:通过问卷调查了解哈尔滨医科大学卫生法学专业的学生在法医学教学前后对法医学课程的认知、认可和需求情况.方法:应用微信中问卷星小程序制作并发布调查问卷,对已修完法医学课程的2017级～2021级法学专业共161名学生进行调查.应用Execl 2003数据库和SPSS15.0统计软件对数据进行分析.结果:课程结束后,90.1％(136/151)的学生认为有必要学习法医学.对于法医学的分支学科,喜欢法医物证学的学生占比最高,为27.8％(42/151).对于教学方法,67.6％(102/151)的学生喜欢案例教学法.结论:法学专业学生对于法医学课程比较认同.法医物证学和案例教学法最受学生欢迎.但学生对法医学课程的认知还有待进一步提高.因此,为不断提高教学水平和教学效果,法医学教学需要在教学内容、授课方法等方面不断进行调整.

关键词：法医学医学生认知调查

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沙眼衣原体Pgp3多克隆抗体的制备及鉴定

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温州医科大学学报 2024年第3期54卷 184-189页

作者：周璐琪杨佳李洋朱珊丽温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室分子病毒与免疫研究所浙江温州325035

目的:制备沙眼衣原体(Ct)Pgp3蛋白的兔多克隆抗体,并检测其生物学功能。方法:采用原核表达系统制备Pgp3蛋白,通过镍柱亲和纯化Pgp3蛋白并进行复性。将复性的Pgp3蛋白经皮下多点注射免疫家兔制备兔多克隆抗体,利用ELISA和Western blot法... 详细信息

目的:制备沙眼衣原体(Ct)Pgp3蛋白的兔多克隆抗体,并检测其生物学功能。方法:采用原核表达系统制备Pgp3蛋白,通过镍柱亲和纯化Pgp3蛋白并进行复性。将复性的Pgp3蛋白经皮下多点注射免疫家兔制备兔多克隆抗体,利用ELISA和Western blot法检测抗体的效价和特异性。随后建立Ct感染HeLa细胞模型,通过间接免疫荧光法和非变性Western blot法检测兔多克隆抗体对天然Pgp3蛋白的特异性识别能力。结果:Pgp3重组蛋白成功诱导表达,且主要以包涵体形式存在。ELISA显示制备的兔多克隆抗体效价可达1:512000,Western blot法和间接免疫荧光法显示Pgp3兔多克隆抗体可以特异性识别重组及天然Pgp3蛋白。结论:制备的Pgp3多克隆抗体效价高,能特异性识别重组Pgp3蛋白及天然Pgp3蛋白,为Pgp3蛋白功能的研究及Ct免疫制剂的研发等奠定基础。

关键词：沙眼衣原体多克隆抗体 Pgp3

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抗人B7-H4嵌合抗体的制备及鉴定

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中国免疫学杂志 2022年第22期38卷 2763-2769页

作者：范振军张文婷张丽张俊爱赵祖国徐军发(指导) 广东医科大学医学技术学院检验医学研究所东莞523808 广东医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室东莞523808

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测... 详细信息

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测mAb纯度;ELISA测定mAb效价;SPR测定mAb的亲和力;BCA法检测mAb浓度;CCK-8法检测T细胞增殖情况;ELISA和Western blot确定mAb结合表位范围;使用Discovery Studio软件对单抗表位进行分析。结果:从杂交瘤细胞成功扩增出抗体可变区基因,筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO-K1细胞株;细胞培养上清中mAB浓度为1.82 mg/ml,ELISA有效效价为1.97×10^(5)左右,亲和力为3.72×10^(-9)kD;CCK-8结果表明嵌合单抗可以阻断B7-H4-Fc分子对T细胞增殖的抑制作用;表位分析结果表明嵌合mAb主要以氢键和疏水作用与B7-H4 IgC域结合。结论:本研究成功制备了抗B7-H4的人鼠嵌合单抗,可在体外有效地阻断B7-H4-Fc对T细胞增殖抑制作用并为B7-H4抗体药物研发提供了前期基础。

关键词： B7-H4 嵌合抗体抗体表位 T细胞增殖

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肠道病毒D68型感染前后转录组分析及差异表达基因的验证

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第三军医大学学报 2021年第4期43卷 275-282页

作者：唐霞司俊卓卢楠何永林徐蕾包嘉佳唐佳玲杨春重庆医科大学基础医学院病原微生物学教研室重庆400016

目的探讨肠道病毒D68型(enterovirus D68, EV-D68)感染前后宿主细胞转录组的表达变化,寻找与EV-D68感染的相关基因及信号通路,为初步探索EV-D68的感染机制奠定基础。方法将病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)0.01接种于人... 详细信息

目的探讨肠道病毒D68型(enterovirus D68, EV-D68)感染前后宿主细胞转录组的表达变化,寻找与EV-D68感染的相关基因及信号通路,为初步探索EV-D68的感染机制奠定基础。方法将病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)0.01接种于人横纹肌瘤(rhabdomyosarcoma, RD)细胞,24 h后提取感染组和对照组细胞总RNA进行转录组测序,筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),对其进行GO和KEGG富集分析,并用RT-qPCR验证8个主要差异表达的基因(EGR1、c-fos、ZNF625、ARRDC3、c-jun、ASNS、CHAC1、ADM2)。结果从测序结果中共筛选出差异表达两倍以上的基因140个,其中上调基因71个,下调基因69个。GO功能富集分析结果主要涉及离子的调控与应答;KEGG富集分析结果主要与甲状旁腺激素的合成分泌和作用、GnRH信号通路、Toll样受体信号通路、IL-17信号通路和MAPK信号通路等有关。RT-qPCR验证结果表明选取的8个基因上调或下调的差异表达倍数趋势与测序结果基本一致,c-fos和c-jun的表达量随病毒MOI及感染时长的增加而增加。结论通过对差异表达基因的功能和信号通路富集分析及验证,EV-D68加重哮喘的机制可能与c-fos上调有关;而MAPK信号通路可能在EV-D68感染期间发挥促炎作用和抗病毒作用。

关键词： EV-D68 转录组测序差异表达基因

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