检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 2016年第5期45卷 314-317页

作者：李小燕臧盛兵方雪婷马小杰黄爱民福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福州350001 福建医科大学附属协和医院病理科

目的筛选及验证肝癌细胞中与转录激活因子3（ATF3）相互结合的蛋白质，初步探讨在肝癌发生发展中协助ATF3发挥生物学功能的相关分子机制。方法应用免疫沉淀法沉淀出HepG2细胞中与ATF3相互结合的蛋白，经变性聚丙烯凝胶分析，与空载体组... 详细信息

目的筛选及验证肝癌细胞中与转录激活因子3（ATF3）相互结合的蛋白质，初步探讨在肝癌发生发展中协助ATF3发挥生物学功能的相关分子机制。方法应用免疫沉淀法沉淀出HepG2细胞中与ATF3相互结合的蛋白，经变性聚丙烯凝胶分析，与空载体组比对，挑选出差异性的电泳条带进行蛋白质谱分析，筛选出候选蛋白；再经免疫共沉淀验证二者是否相互结合；应用免疫组织化学及Westernblot检测并分析ATF3和候选蛋白在肝癌中的表达模式。结果过表达ATF3的HepG2实验组呈现出差异性表达的电泳条带；经质谱检测，Mascot软件分析及NCBI数据库检索，得到候选蛋白肽段信息，结合前期实验结果，PubMed文献报道，从中筛选出与ATF3最可能相关的蛋白gelsolin（GSN）；免疫共沉淀结果验证了ATI^3与GSN相互结合的关系，免疫组织化学及Westernblot检测出肝癌组织中ATF3与GSN的表达模式一致。结论ATF3可能通过与GSN蛋白之间的相互作用，在肝癌形成过程中协同发挥抑癌作用。

关键词：肝细胞癌转录激活因子3 蛋白质类

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shRNA介导DEPDC7基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力影响的研究

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中国细胞生物学学报 2015年第7期37卷 977-983页

作者：廖之君王心睿杨红曾也婷福建医科大学生物化学与分子生物学系福州350108 福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福州350108

功能未知基因DEPDC7(DEP domain containing 7)是从基因芯片数据挖掘得到的,基因表达谱提示只在肝组织中选择性高表达,但是关于DEPDC7在肝癌细胞内参与的生命活动及其分子机制的相关研究报道较少。该研究应用RNAi技术构建DEPDC7慢病毒... 详细信息

功能未知基因DEPDC7(DEP domain containing 7)是从基因芯片数据挖掘得到的,基因表达谱提示只在肝组织中选择性高表达,但是关于DEPDC7在肝癌细胞内参与的生命活动及其分子机制的相关研究报道较少。该研究应用RNAi技术构建DEPDC7慢病毒载体并感染人肝癌细胞株HepG2,利用RT-q PCR和Western blot方法检测DEPDC7干扰效果。运用噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成方法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Transwell小室检测细胞侵袭迁移能力。结果显示,成功构建的DEPDC7慢病毒载体可以有效干扰DEPDC7 m RNA和蛋白的表达(P<0.05)。此外,DEPDC7被沉默后,可以有效促进细胞周期从G1期向S期转变,细胞增殖和侵袭迁移能力均显著提高(P<0.05)。该研究提示,肝癌细胞HepG2中DEPDC7低表达能有效提高细胞增殖、克隆形成和侵袭迁移能力,为后续研究DEPDC7转录调控机制等指明了方向。

关键词： DEPDC7 RNA干扰肝癌增殖迁移侵袭

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人DEPDC7基因启动子的转录活性分析

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热带医学杂志 2015年第7期15卷 879-882,892页

作者：王心睿杨红曾也婷廖之君福建医科大学生物化学与分子生物学系福建福州350108 福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福建福州350108

目的对人DEPDC7基因近端启动子进行生物信息学分析并构建该启动子的荧光素酶报告系统,初步探讨该启动子的活性。方法采用生物信息学方法对人DEPDC7基因的启动子和转录因子进行分析和预测,通过PCR法扩增DEPDC7基因近端启动子序列,PCR产物... 详细信息

目的对人DEPDC7基因近端启动子进行生物信息学分析并构建该启动子的荧光素酶报告系统,初步探讨该启动子的活性。方法采用生物信息学方法对人DEPDC7基因的启动子和转录因子进行分析和预测,通过PCR法扩增DEPDC7基因近端启动子序列,PCR产物经HindⅢ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到p GL2-Basic载体,构建一系列的启动子区域荧光素酶报告基因载体,随后经脂质体转染入293T细胞并检测各缺失片段萤光素酶活性。结果人DEPDC7基因位于11p13,翻译起始位点上游1 300 bp左右可能为启动子区域。经双荧光素酶报告基因检测后发现,所有的重组质粒均表现出荧光素酶活性,其中p GL2-DEPDC7P3活性最强。结论初步证明人DEPDC7基因启动子在-879 bp^+100 bp区域具有较强转录活性,为进一步揭示该基因生物学功能和其分子调控机制奠定基础。

关键词： DEPDC7基因启动子转录因子生物信息学活性分析

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钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅱ在人胃腺癌组织中上调表达及其意义

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中华实验外科杂志 2014年第7期31卷 1563-1565页

作者：苏红英黄雄飞陈淑勤张白凌刘景丰黄爱民福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福州350004 福建医科大学口腔学院福建省肝病科学研究中心

目的检测人胃腺癌组织中钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）蛋白的表达水平,探讨AnnexinⅡ与胃腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学方法分别检测44对胃腺癌组织和配对的癌旁胃组织,以及10例正常胃组织中AnnexinⅡ蛋白的表达,... 详细信息

目的检测人胃腺癌组织中钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）蛋白的表达水平,探讨AnnexinⅡ与胃腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学方法分别检测44对胃腺癌组织和配对的癌旁胃组织,以及10例正常胃组织中AnnexinⅡ蛋白的表达,并分析胃腺癌组织中AnnexinⅡ蛋白表达水平与患者临床病理特征之间的关系。结果胃腺癌组织中AnnexinⅡ蛋白阳性表达率（70.45%）明显高于配对的癌旁组织（43.18%,P〈0.05）,AnnexinⅡ蛋白在癌组织中的表达主要定位于肿瘤细胞胞膜,AnnexinⅡ蛋白的表达水平和胃腺癌患者肿瘤组织的分化程度有关,中、高分化肿瘤组织中AnnexinⅡ蛋白阳性表达率（57.14%）明显低于低分化患者（87.5%,P〈0.05）。结论 AnnexinⅡ蛋白上调表达可能与胃腺癌的发生和恶性进展有关。

关键词：胃腺癌钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅱ 蛋白表达

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热休克蛋白70和葡萄糖调节蛋白78在肝细胞癌中的表达及其临床意义

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中华实验外科杂志 2014年第10期31卷 2115-2118,F0003页

作者：王斌刘景丰金杰钿葛小霞薛励秋黄爱民福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福州350004 福建医科大学孟超肝胆医院福建医科大学附属第一医院肝病中心肝外科

目的检测热休克蛋白70 （HSP70）和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在肝细胞癌（HCC）中的表达并探讨其与临床病理资料及预后的关系.方法采用Western blot和免疫组织化学染色的方法检测HCC及其癌旁肝组织中HSP70和GRP78的表达,分析其与临... 详细信息

目的检测热休克蛋白70 （HSP70）和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在肝细胞癌（HCC）中的表达并探讨其与临床病理资料及预后的关系.方法采用Western blot和免疫组织化学染色的方法检测HCC及其癌旁肝组织中HSP70和GRP78的表达,分析其与临床病理特征的关系;应用Kaplan-Meier法及多因素Cox比例风险模型分析HSP70和GRP78表达与预后的关系.结果 HSP70及GRP78蛋白在HCC组中的相对表达量明显高于癌旁肝组织（0.879±0.556比0.240±0.156,P＜0.01;0.515±0.353比0.202±0.132,P＜0.01）;HSP70阳性表达与肿瘤的大小、乙型肝炎病毒（HBV）感染、Edmondson分级、分化及TNM分期密切相关（P＜0.05）,GRP78阳性表达与Edmondson分级、分化、微血管侵犯、TNM分期及复发密切相关（P＜0.05）.单因素生存分析显示HSP70和GRP78蛋白阳性表达组生存率明显低于阴性表达组（P＜0.05）;多因素Cox回归分析结果显示TNM分期、肿瘤分化程度、肿瘤大小及复发是反映肝癌患者预后的独立危险因素,其相对危险度分别为1.502、1.971、2.267及4.746.结论 HSP70和GRP78过表达参与了HCC的发生和发展.

关键词：肝细胞癌热休克蛋白70 葡萄糖调节蛋白78 免疫组织化学预后

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膜联蛋白A2表达与肝纤维化和肝细胞癌的关系

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中华肝胆外科杂志 2014年第4期20卷 284-289页

作者：王斌徐涛刘景丰苏红英黄爱民福建医科大学基础医学院病理学系、肿瘤研究室福州350004 山西省运城市中心医院病理科福建医科大学孟超肝胆医院福建医科大学附属第一医院肝病中心肝外科

目的检测膜联蛋白A2（ANXA2）在肝纤维化和肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达并探讨其临床意义。方法采用蛋白印迹方法检测ANXA2蛋白在正常肝组织、肝硬化组织及HCC中的表达；采用免疫组织化学染色的方法检测ANXA2蛋白... 详细信息

目的检测膜联蛋白A2（ANXA2）在肝纤维化和肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达并探讨其临床意义。方法采用蛋白印迹方法检测ANXA2蛋白在正常肝组织、肝硬化组织及HCC中的表达；采用免疫组织化学染色的方法检测ANXA2蛋白在HCC及癌旁肝纤维化组织中的表达，并分析其临床意义。结果ANXA2蛋白在HCC和肝硬化中的表达较正常肝组织明显升高，又以在HCC中表达为最高（P=0．000）。ANXA2蛋白表达与肝纤维化分期呈显著正相关（P〈0．05）。ANXA2蛋白在HCC肿瘤细胞中的表达与HBV感染、肿瘤分化程度及复发密切相关（P〈0．05）。在部分HCC患者中，ANXA2蛋白在肿瘤结节最外围的肿瘤细胞及周围纤维基质表达增高。结论ANXA2蛋白过表达可能参与了肝纤维化及HCC的发生和发展。ANXA2蛋白有望成为判断肝纤维化程度、HCC肿瘤分化程度的分子标记物。

关键词：肝细胞癌(HCC) 肝纤维化膜联蛋白A2(ANXA2) 蛋白印迹免疫组织化学

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RNA干扰畸胎瘤细胞源性生长因子基因对人肝细胞癌HepG2增殖和侵袭的影响

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河北医科大学学报 2014年第11期35卷 1291-1295,F0002页

作者：王海燕黄爱民晋雯高凌云高美钦福建医科大学基础医学院病理学系福建医科大学肿瘤研究室福建福州350004

目的探讨RNA干扰畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)基因对肝细胞癌细胞HepG2增殖和侵袭的影响。方法采用脂质体法将PCDGF-shRNA表达载体瞬时转染人肝细胞癌细胞HepG2,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcrip... 详细信息

目的探讨RNA干扰畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)基因对肝细胞癌细胞HepG2增殖和侵袭的影响。方法采用脂质体法将PCDGF-shRNA表达载体瞬时转染人肝细胞癌细胞HepG2,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western Blot)检测转染后细胞PCDGF mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测转染后HepG2细胞体外增殖能力,体外侵袭实验检测转染后HepG2细胞侵袭能力。结果转染后,与未转染组(未转染质粒和脂质体)、脂质体组(转染空脂质体)和阴性质粒组(转染阴性质粒)相比,转染组(转染PCDGF-shRNA质粒)HepG2细胞的PCDGF mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),细胞的增殖能力受到抑制(P<0.01),细胞的侵袭能力也明显降低(P<0.01)。结论 RNA干扰PCDGF基因可抑制肝细胞癌细胞的体外增殖及侵袭能力,PCDGF基因可能成为肿瘤基因治疗的新靶点。

关键词：肝肿瘤 RNA干扰细胞增殖肿瘤浸润

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分泌型磷脂酶A2-IIAmRNA表达与人肝细胞癌临床病理特征的关系

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中华实验外科杂志 2013年第4期30卷 829-831页

作者：苏红英黄雄飞黄爱民陶璇张白凌刘景丰福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福州350004 福建医科大学第一临床医学院病理科福建医科大学口腔学院福建省肝病科学研究中心

目的检测人肝细胞癌（HCC）患者分泌型的磷脂酶A2-IIA（PLA2G2A）mRNA表达，探讨PLA2G2A与HCC发生发展的关系。方法采用SYBRGreenI荧光实时定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法分别检测51例HCC组织和配对的癌旁肝组织，以及9例正常肝组织中... 详细信息

目的检测人肝细胞癌（HCC）患者分泌型的磷脂酶A2-IIA（PLA2G2A）mRNA表达，探讨PLA2G2A与HCC发生发展的关系。方法采用SYBRGreenI荧光实时定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法分别检测51例HCC组织和配对的癌旁肝组织，以及9例正常肝组织中PLA2G2AmRNA表达，以B-肌动蛋白（B—actin）为内参，根据相对定量公式（2△△Ct）计算PLA2G2AmRNA相对表达量，并分析HCC组织中PLA2G2AmRNA表达水平与临床病理特征之间的关系。结果肝癌组织中PLA2G2AmRNA表达量明显低于配对的癌旁肝组织和正常肝组织，仅是癌旁肝组织的0．2446倍（P〈0．01），是正常肝组织的0．2339倍（P〈0．01）；PLA2G2AmRNA的表达水平和HCC组织的分化程度呈正相关（P〈0．05），与HCC患者血清的AFP蛋白的表达量呈负相关（P〈0．05）；有肝硬化背景的患者HCC组织中PLA2G2AmRNA表达量明显高于无肝硬化背景的患者（P〈O．05）。结论PLA2G2AmRNA的表达缺失可能与肝细胞癌的发生和进展有关。

关键词：癌肝细胞磷脂酶A2 表达

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EphB4及其配体EphrinB2在食管鳞癌中表达及其与血管生成的关系

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中国肿瘤临床 2013年第10期40卷 579-582页

作者：郑庆丰柳硕岩王海燕王枫王镇陈啸风王健键应敏刚郑雄伟林贤东周智锋龚福生谢云青福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院胸外科福建省肿瘤生物治疗重点实验室福州市350014 福建医科大学基础医学院病理学系福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院病理科福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院内科研究室福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院外科研究室

目的:探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达,采用逆转录多聚酶链反应(RT-P... 详细信息

目的:探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测60例食管鳞癌和10例癌旁食管组织中EphB4、EphrinB2和VEGF mRNA的相对含量,并分析EphB4、EphrinB2和VEGF的表达的相关性。结果:食管鳞癌组织中EphB4、EphrinB2、VEGF mRNA和蛋白的表达均高于癌旁正常食管黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。EphB4 mRNA和EphrinB2 mRNA表达正相关(r=0.541,P<0.05),EphB4 mRNA、EphrinB2 mRNA均和VEGF mRNA表达正相关(r=0.642,r=0.582;P均<0.05)。结论:EphB4和EphrinB2在食管鳞癌中高表达,与血管生成密切相关。

关键词： EphB4 EphrinB2 食管鳞状细胞癌血管生成

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RNA干扰畸胎瘤源性生长因子基因对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

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中华胃肠外科杂志 2013年第9期16卷 874-877页

作者：郑庆丰柳硕岩王海燕王枫王镇陈啸风王健键应敏刚郑雄伟林贤东周智锋龚福生谢云青福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院胸外科福建省肿瘤生物治疗重点实验室福州350014 福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院病理科福州350014 福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院内科研究室福州350014 福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院外科研究室福州350014 福建医科大学基础医学院病理学系

目的探讨RNA干扰畸胎瘤源性生长因子（PCDGF）基因对食管鳞癌细胞Eca-109的影响.方法脂质体介导PCDGF-shRNA的表达载体转染Eca-109细胞,应用RT-PCR、Westernblot检测转染后细胞PCDGF mRNA及蛋白的表达情况,分别采用Counting Kit-8（CC... 详细信息

目的探讨RNA干扰畸胎瘤源性生长因子（PCDGF）基因对食管鳞癌细胞Eca-109的影响.方法脂质体介导PCDGF-shRNA的表达载体转染Eca-109细胞,应用RT-PCR、Westernblot检测转染后细胞PCDGF mRNA及蛋白的表达情况,分别采用Counting Kit-8（CCK-8）试剂盒和Boyden小室法检测转染后Eca-109细胞的增殖能力和侵袭能力.结果转染组PCDGF mRNA和蛋白表达水平均较其他组下调.转染24、48和72 h转染组细胞增殖均受到抑制,抑制率分别为20.4％、21.1％和20.9％,其细胞增殖活性较未转染组、阴性质粒组和脂质体组均明显降低（均 P＜0.05）.未转染组、阴性质粒组、脂质体组和转染组的细胞迁移数分别为118.8±12.0、100.8±9.0、114.3±4.7和 53.5±16.3,转染组与其余3组比较,差异均有统计学意义（P=0.001,P=0.002,P=0.002）.结论 RNA干扰PCDGF基因可抑制食管鳞癌细胞的体外增殖及侵袭能力,PCDGF基因可能成为基因治疗的新靶点.

关键词：食管肿瘤畸胎瘤源性生长因子 RNA干扰生物学特性

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