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中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第5期17卷 536-540页

作者：陈裕庆黄丽汪晓军张文敏福建医科大学基础医学院病理学系暨肿瘤研究室福建福州350004

目的:探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肿瘤细胞中NY-ESO-1抗原表达的诱导作用。方法:常规培养人胃癌细胞株SGC-7901、人肝癌细胞株H2P和MHCC97-H、人结肠癌细胞株HT-29和LoVo及人脑胶质瘤细... 详细信息

目的:探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肿瘤细胞中NY-ESO-1抗原表达的诱导作用。方法:常规培养人胃癌细胞株SGC-7901、人肝癌细胞株H2P和MHCC97-H、人结肠癌细胞株HT-29和LoVo及人脑胶质瘤细胞株U251,RT-PCR和免疫细胞化学法检测5-Aza-CdR作用前后肿瘤细胞中NY-ESO-1 mRNA和蛋白的表达。结果:RT-PCR与免疫细胞化学检测仅见胃癌SGC-7901细胞阳性表达NY-ESO-1,其余5株肿瘤细胞不表达NY-ESO-1。NY-ESO-1阴性的肝癌细胞株H2P、结肠癌细胞株LoVo及脑胶质瘤细胞株U251经5-Aza-CdR(终浓度分别为1、5和10μmol/L)处理6 d后,细胞形态和生长速度均无明显改变,而NY-ESO-1 mRNA和蛋白均被诱导为阳性表达,并随5-Aza-CdR浓度增加而阳性表达逐渐增强。结论:5-Aza-CdR能诱导肝癌、结肠癌、脑胶质瘤等肿瘤细胞中NY-ESO-1抗原的表达,为肿瘤免疫治疗提供了一条新思路。

关键词： 5-氮杂-2’-脱氧胞营 NY-ESO-1 肝癌结肠癌胶质瘤

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缺氧低糖培养对少突胶质前体细胞的影响

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解剖学杂志 2009年第3期32卷 298-301页

作者：周琳瑛王玮林曦林凌福建医科大学基础医学院病理学系电镜室福建福州350004 福建医科大学基础医学院神经生物学研究中心福建福州350004

目的：探讨缺氧低糖环境对体外培养少突胶质前体细胞（O2A细胞）的影响。方法：应用台盼蓝染色计数细胞存活率，Hochest33258荧光染色及流式细胞仪分析细胞凋亡情况，透射电镜观察细胞形态变化。结果：缺氧培养3h细胞变化不明显，但缺... 详细信息

目的：探讨缺氧低糖环境对体外培养少突胶质前体细胞（O2A细胞）的影响。方法：应用台盼蓝染色计数细胞存活率，Hochest33258荧光染色及流式细胞仪分析细胞凋亡情况，透射电镜观察细胞形态变化。结果：缺氧培养3h细胞变化不明显，但缺氧培养6h，细胞存活率明显下降，凋亡细胞明显增多，并且随着缺氧时间延长存活细胞更少、凋亡细胞更多，至缺氧培养12h，大多数细胞破碎。结论：低糖联合缺氧培养模式可以建立可行的O2A细胞外缺氧模型。

关键词：少突胶质前体细胞细胞凋亡缺氧低糖细胞培养

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Genistein联合5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖与凋亡的影响

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中华肿瘤防治杂志 2010年第12期17卷 912-915,922页

作者：凌航陈裕庆高美钦张文敏福建医科大学基础医学院病理学系福建福州350001

目的:研究金雀异黄素(genistein)与5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度genistein和5-FU单用或联用对结肠癌细胞株SW480的抑制作用;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(... 详细信息

目的:研究金雀异黄素(genistein)与5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度genistein和5-FU单用或联用对结肠癌细胞株SW480的抑制作用;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,并在透射电镜下观察凋亡细胞超微结构的改变;流式细胞术(FCM)分析药物作用后细胞周期的改变。结果:1)genistein与5-FU单用均能抑制SW480细胞的增殖,存在浓度依赖性和时间依赖性。2)genistein与5-FU联合作用时对抑制SW480细胞增殖有协同相加效应,在两者联合作用48h,浓度分别为80μmol/L和30μg/mL时协同作用最明显(CI=0.51)。3)TUNEL技术观察到genistein与5-FU单用或双用均可引起SW480细胞凋亡,且以双药效果为著。4)电镜观察到凋亡细胞核电子密度增加,核碎裂,可见凋亡小体,以双药联用最为显著。5)FCM分析SW480细胞经genistein处理后细胞生长阻断于G2期,与5-FU作用机制不同。结论:genistein可通过诱导细胞凋亡协同5-FU对大肠癌细胞株SW480的杀伤作用,为提高化疗药对结肠癌的治疗疗效提供新思路。

关键词：结肠肿瘤/药物疗法氟尿嘧啶细胞凋亡

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琼脂糖细胞块制备技术改良方法

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中华病理学杂志 2019年第2期48卷 151-153页

作者：高美钦施佳健刘文文万榕黄雄飞黄爱民张文敏福建医科大学基础医学院科研中心福州350122 福建医科大学基础医学院病理学系福州350122 福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福州350122

改良一种琼脂糖细胞块的制作方法,以获得细胞数量分布适中的细胞块,应用于培养肿瘤细胞的鉴定。选用平底离心管,以琼脂糖为介质制备细胞石蜡包埋块,并进行切片、HE染色、免疫组织化学染色。利用本方法制备的细胞块完整有形,HE染色效果好... 详细信息

改良一种琼脂糖细胞块的制作方法,以获得细胞数量分布适中的细胞块,应用于培养肿瘤细胞的鉴定。选用平底离心管,以琼脂糖为介质制备细胞石蜡包埋块,并进行切片、HE染色、免疫组织化学染色。利用本方法制备的细胞块完整有形,HE染色效果好,免疫标记定位准确,背景清晰,结果稳定,可作为实验室常规的细胞块制备方法,并推广应用于病理的细胞学诊断。

关键词：制备技术改良方法细胞块琼脂糖免疫组织化学染色 HE染色细胞学诊断数量分布

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牙体硬组织教学磨片制作方法的改进

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解剖学杂志 2013年第3期36卷 418-419页

作者：高苏凤姚丽艳高美钦福建医科大学口腔医学院福州350004 福建医科大学基础医学院病理学系福州350004

牙磨片的制作必须经过离体牙固定、消毒、片切、磨薄、脱水以及透明和封固等工序。片切是牙磨片成功和提高效率的关键，目前该步骤的方法有手工法和锯式切片机法，锯式切片机法因设备昂贵，耗材消耗大且价格高等因素不被实验教学广泛采... 详细信息

牙磨片的制作必须经过离体牙固定、消毒、片切、磨薄、脱水以及透明和封固等工序。片切是牙磨片成功和提高效率的关键，目前该步骤的方法有手工法和锯式切片机法，锯式切片机法因设备昂贵，耗材消耗大且价格高等因素不被实验教学广泛采用。手工法按常规的方法是单个金刚石磨片切割牙齿，每片需切割2次，不仅厚薄难掌握，易破损残缺，且在操作过程中易使牙片飞出伤人，成为安全隐患。笔者在武峪峰等的研究基础上再进行改进，现介绍如下。

关键词：磨片牙体组织教学制作实验教学操作过程安全隐患切片机

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KiSS-1与肝癌细胞增殖及黏附和侵袭关系的体外实验研究

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中华肝脏病杂志 2012年第12期20卷 925-929页

作者：徐玫芳臧盛兵刘景丰高凌云高美钦杨映红黄爱民福建医科大学附属协和医院病理科福州350004 福建医科大学基础医学院病理学系肿瘤研究室福建医科大学附属第一医院肝病中心

目的观察KiSS-1基因表达对肝癌细胞体外增殖、黏附及侵袭能力的影响，为进一步探讨其抗肝细胞癌侵袭转移的机制奠定基础。方法培养具有高转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97-H，瞬时转染KiSS-1基因的细胞为实验组，转染空载体pcDNA3．1／HiS... 详细信息

目的观察KiSS-1基因表达对肝癌细胞体外增殖、黏附及侵袭能力的影响，为进一步探讨其抗肝细胞癌侵袭转移的机制奠定基础。方法培养具有高转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97-H，瞬时转染KiSS-1基因的细胞为实验组，转染空载体pcDNA3．1／HiSC的细胞为空白对照组，未转染细胞为阴性对照组，采用流式细胞术与四甲基偶氮唑盐法、基质黏附实验、Transwell体外侵袭和趋化运动实验检测KISS-1表达对MHCC97-H细胞体外增殖、黏附、侵袭和运动能力的影响。应用SPSS13．0统计软件包进行统计分析，组间差异以两样本t检验分析。结果转染组、空载体组和未转染组与Matrigel基质的黏附能力（A值）分别为0．257±0．029、0．374±0．016和0．394±0．031，转染组明显低于空载体组（t=-7．90345，P〈0．01）和未转染组（t=-7．22752，P〈0．01）；与Fibronectin基质的黏附能力（A值）分别为0．292±0．004、0．394±0．010和0．412±0．023，转染组明显低于空载体组（t=-20．93138，P〈0．01）和未转染组（t=-11．31371，P〈0．01）;趋化运动至Transwell小室下室表面的细胞数分别为65．80±1．92、93．80±2．28和96．40±2．07，转染组明显低于空载体组（t=-30．11750，P〈0．01）和未转染组（t=-24．19142，P〈0．01）;侵袭至Transwell小室下室表面的细胞数为42．40±1．14、66．00±1．58和67．80±1．92，转染组明显低于空载体组（t=-27．0711，P〈0．01）和未转染组（t=一25．4，P〈0．01）。而转染组、空载体组和未转染组的细胞增殖能力（A值）分别为0．644±0．027、O．669±0．022和0．678±0．027，转染组略低于空载体组（t=一1．60371，P〉0．05）和未转染组（t=-1．97828，P〉0．05）}同时，转染组较空载体组和未转染组未出现明显的G1期阻滞和S期阻滞，也未出现明显的凋亡峰。结论KISS-1表达虽不影响肝癌细胞的体外增殖能力，但可抑制其黏附、侵袭和运动能力，提示KISS-1可作为一个候选的肝细胞癌转移抑制基因，可望成为肝癌侵袭转移治疗的新靶点。

关键词：癌,肝细胞细胞增殖基因,肿瘤抑制

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结直肠癌组织ATF3及其靶基因Cyclin D1与Maspin表达的临床意义分析

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中华肿瘤防治杂志 2012年第24期19卷 1870-1874页

作者：臧盛兵郁万媛陈虹施磊健李婷婷陈安敏陈虹黄爱民福建医科大学基础医学院病理学系福建福州350108 福建医科大学附属第一医院病理科福建福州350004

目的:检测转录激活因子3(ATF3)及其靶基因Cyclin D1与Maspin在结直肠癌组织芯片中的表达,探讨ATF3表达在结直肠癌发生、发展中的意义。方法:构建含结直肠癌及癌旁相对正常肠黏膜的组织芯片,应用免疫组织化学检测ATF3、Cyclin D1及Maspi... 详细信息

目的:检测转录激活因子3(ATF3)及其靶基因Cyclin D1与Maspin在结直肠癌组织芯片中的表达,探讨ATF3表达在结直肠癌发生、发展中的意义。方法:构建含结直肠癌及癌旁相对正常肠黏膜的组织芯片,应用免疫组织化学检测ATF3、Cyclin D1及Maspin的表达情况。结果:ATF3、Cyclin D1与Maspin在结直肠癌中阳性表达率分别为70.3%、51.4%和59.5%,明显高于癌旁正常组织的21.6%、2.7%和13.5%,差异有统计学意义,χ2值分别为35.252、44.411和33.689,P值均为0.000;ATF3与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关,而与浸润程度和淋巴结有无转移有关,浆膜层表达(83.3%)高于肌层(38.9%),有淋巴结转移(92.3%)高于无淋巴结转移(45.7%),χ2值分别为13.290和17.110,P值均为0.000;Cyclin D1与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位及肿瘤大小无关,而与病理学分级、浸润程度和淋巴结有无转移有关,低分化组织表达(71.4%)高于高中分化组织(39.1%),浆膜层表达(61.1%)高于肌层(28.8%),有淋巴结转移(69.2%)高于无淋巴结转移(31.4%),χ2值分别为7.268、6.019和10.550,P值分别为0.007、0.014和0.001;Maspin与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、肿瘤分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移均无关,P值均>0.05。ATF3、Cyclin D1与Maspin在结直肠癌中均高表达,ATF3与Cyc-lin D1在结直肠癌中表达呈正相关(r=0.362,P=0.000),与Maspin表达无明显相关(r=0.075,P=0.513)。结论:ATF3表达与结直肠癌的发生密切相关,ATF3可能通过调控Cyclin D1表达而促进结直肠癌的发生发展及侵袭转移。

关键词：结直肠肿瘤/病理学 ATF3 CyclinD1 Maspin 免疫组织化学

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生存素、p27和PTEN在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

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中华肝脏病杂志 2008年第1期16卷 17-20页

作者：黄爱民丁毅刘景丰高凌云臧盛兵陈水平福建医科大学基础医学院病理学系、肿瘤研究室福州350004 福建医科大学附属厦门第一医院病理科福建医科大学附属第一医院肝病中心

目的探讨生存素蛋白、生存素mRNA、p27蛋白、p27mRNA和第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（PTEN）蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达及其临床病理意义。方法自制组织芯片，采用免疫组织化学和原位杂交法检测生存素蛋白、p27蛋白、P... 详细信息

目的探讨生存素蛋白、生存素mRNA、p27蛋白、p27mRNA和第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（PTEN）蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达及其临床病理意义。方法自制组织芯片，采用免疫组织化学和原位杂交法检测生存素蛋白、p27蛋白、PTEN蛋白和生存素mRNA、p27mRNA在141份肝细胞癌、128份癌旁肝组织、97份远癌肝组织及17份正常肝组织中的表达，探讨各指标的关系并建立预测肝癌发生的模型。结果肝癌组中生存素蛋白（Ridit值的95％甜为0．689±0．048，P〈0．01）、生存素mRNA（Ridit值的95％甜为0．690±0．049，P〈0．01）和p27蛋白（Ridit值的95％a为0．556±0．053，P〈0．05）表达明显增高，PTEN（Ridit值的95％a为0．282±0．048）表达明显下降（P〈0．01）；肝癌中生存素的表达与p27、PTEN表达均显著相关；生存素mRNA、p27蛋白和PTEN蛋白对判断肝癌发生与否有重要意义。结论生存素mRNA、p27蛋白的表达上调和PTEN蛋白的表达下调可作为判断肝癌发生的有价值指标。

关键词：癌肝细胞基因生存素第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因

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树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究

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中华实验外科杂志 2008年第4期25卷 463-465,I0002页

作者：陈丽红刘景丰邱明链方航荣黄爱民福建医科大学附属第一医院肝病中心 350005 福建医科大学基础医学院病理学系

目的观察大鼠骨髓来源的树突状细胞（DC）对同种异体肝移植大鼠免疫耐受的影响。方法用不同细胞因子诱导培养大鼠骨髓来源的成熟DC（mDC）和不成熟DC（imDC），采用形态学观察、表型分析和功能学实验对培养细胞进行鉴定，构建Wistar大鼠... 详细信息

目的观察大鼠骨髓来源的树突状细胞（DC）对同种异体肝移植大鼠免疫耐受的影响。方法用不同细胞因子诱导培养大鼠骨髓来源的成熟DC（mDC）和不成熟DC（imDC），采用形态学观察、表型分析和功能学实验对培养细胞进行鉴定，构建Wistar大鼠和SD大鼠肝移植模型，并于移植前5d注射到受体大鼠内，研究它们对移植后大鼠肝脏病理及存活时间的影响情况。结果DC细胞形态不规则，大多数细胞表面有细长树枝状突起，mDC和imDC表面均表达表面分子OX62，而表面分子CD86在imDC表面低表达，在mDC表面高表达。imDC和mDC与淋巴细胞相互作用，发现imDC对淋巴细胞的增殖无明显作用，相反mDC对淋巴细胞的增殖有明显的促进作用。注射imDC的受体大鼠的存活时间显著长于注射mDC的受体大鼠，注射mDC的肝移植大鼠在移植后较早且出现较强的急性排斥反应，而注射mDC的大鼠在移植后16d才开始出现轻度急性排斥反应。结论建立了在体外大量扩增大鼠骨髓来源DC的方法，imDC能显著延长受体大鼠肝移植的存活时间。

关键词：肝移植树突状细胞免疫耐受

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萘酚AS-TR磷酸酯法酸性磷酸酶染色在肌病诊断中的应用

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福建医科大学学报 2017年第3期51卷 202-203页

作者：刘文文陈裕庆张文敏高美钦福建医科大学基础医学院病理学系福州350122 福建医科大学基础医学院科研中心福州350004

酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）主要位于机体各组织中的溶酶体内,吞噬细胞胞质内也含有丰富的ACP。此酶在酸性条件下催化醇和酚类磷酸酯的水解,最适合的pH为4.8～5.2。显示ACP的常用方法有Leder and Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法与H... 详细信息

酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）主要位于机体各组织中的溶酶体内,吞噬细胞胞质内也含有丰富的ACP。此酶在酸性条件下催化醇和酚类磷酸酯的水解,最适合的pH为4.8～5.2。显示ACP的常用方法有Leder and Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法与Holtgn Bitensky改良磷酸铅法。现笔者选用改良萘酚AS-TR磷酸酯法应用于骨骼肌活检标本的病理诊断中，效果满意，值得推广应用，现报告如下。

关键词：萘酚AS-TR磷酸酯酸性磷酸酶酶组织化学肌疾病

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