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鞘内注射干扰素调节因子8小干扰RNA对术后持续性疼痛大鼠痛阈及脊髓小胶质细胞活化的影响

中国应用生理学杂志 2022年第2期38卷 113-118页

作者：徐昌顺林春蔡振宇厦门大学附属第一医院疼痛科厦门361001 福建医科大学基础医学院脑老化与神经变性疾病重点实验室福建医科大学疼痛研究所福州350108

目的:探究鞘内注射干扰素调节因子8小干扰RNA(IRF8 SiRNA)对PPsP大鼠痛阈及脊髓小胶质细胞活化的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH,n=12),模型组(SM,n=48),溶媒组(SD,n=12)和IRF8沉默组(SS,n=48),其中,SM组于大鼠后足中... 详细信息

目的:探究鞘内注射干扰素调节因子8小干扰RNA(IRF8 SiRNA)对PPsP大鼠痛阈及脊髓小胶质细胞活化的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH,n=12),模型组(SM,n=48),溶媒组(SD,n=12)和IRF8沉默组(SS,n=48),其中,SM组于大鼠后足中部隐静脉内侧按皮肤/肌肉切开牵拉(SMIR)法建立术后持续性疼痛(PPsP)模型,SH组仅切开不牵拉;SD组与SS组建模前一周先于L4/5椎间隙行鞘内置管术,SS组于建模后第5、6日连续鞘内给予IRF8 SiRNA溶液20μl(溶于DEPC水中,150 pmol),SD组给予等量DEPC水。测量并记录建模前(D0),建模后第1(D1)、3(D3)、7(D7)、12(D12)、22(D22)、33(D33)日等时点各组大鼠术侧后足机械刺激缩足反应阈值(PWT);建模后第12日各取6只,Western blot法检测脊髓背角Iba-1蛋白表达情况,并取SH组和SM组各3只,取术野隐神经行电镜观察其超微结构改变;再取SM组和SS组于上述各时点各6只,流式细胞术检测脊髓背角小胶质细胞活化情况。结果:与D0相比,SM组在D1~D22PWT降低(P<0.05或P<0.01),并在D33恢复至正常水平(P>0.05);与SH组相比,SM组PWT在D1~D22均降低(P<0.05或P<0.01);与SD组相比,SS组PWT在D7~D22增高(P<0.05或P<0.01);与SH组相比,SS组D7~D22降低(P<0.05或P<0.01);隐神经髓鞘平均厚度:SH组为(377.03±69.60) nm, SM组为(369.50±73.26) nm,两组间相比无统计学意义(P>0.05);与SH组相比,SM组Iba-1明显上调(P<0.01);与SD组相比,SS组Iba-1表达受到抑制(P<0.05),与SH组相比,SS组Iba-1表达也具有统计学差异(P<0.05),而SM组与SD组之间,Iba-1的表达无统计学意义(P>0.05);与D0相比,SM组小胶质细胞活化比率在D3~D22均显著增加(P<0.01),而SS组小胶质细胞活化于D3达到高峰(P<0.01);鞘内给药后,SS组脊髓背角小胶质细胞活化比率明显下降,与SM组相比,在D7~D12显著下降(P<0.01)。结论:SMIR诱导的PPsP大鼠显著且持续的机械痛觉过敏为非明显的外周神经损伤所致,可能是基于脊髓背角小胶质细胞活化所介导,而鞘内给予IRF8小干扰RNA可抑制脊髓背角小胶质细胞的激活,并逆转SMIR诱导的痛觉过敏。

关键词：干扰素调节因子8 小胶质细胞术后持续性疼痛脊髓痛觉过敏大鼠小干扰RNA(SiRNA)

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时间与缺血程度对皮瓣延迟效果的影响探讨

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中国临床解剖学杂志 2022年第4期40卷 447-453页

作者：陈绍锋荆幸方芳范莹娟庄跃宏福建省高校脑老化与神经变性疾病重点实验室福建医科大学基础医学院人体解剖学系临床应用解剖学研究所福州350122 福建医科大学药学院实验中心福州350122

目的探讨不同时长及缺血程度的延迟术式对皮瓣存活的影响。方法125只成年ICR小鼠随机等分为5组。对照组切取以髂腰血管为蒂的4.5 cm×1.5 cm皮瓣。4个延迟组按照延迟时间与切断胸背动脉尾侧支与否分为留血管7 d组与14 d组及切血管7 ... 详细信息

目的探讨不同时长及缺血程度的延迟术式对皮瓣存活的影响。方法125只成年ICR小鼠随机等分为5组。对照组切取以髂腰血管为蒂的4.5 cm×1.5 cm皮瓣。4个延迟组按照延迟时间与切断胸背动脉尾侧支与否分为留血管7 d组与14 d组及切血管7 d与14 d组。在延迟结束后,建立与对照组同样的皮瓣模型。之后,计算皮瓣的坏死率,并用激光散斑衬比成像仪测量皮瓣的动脉管径及血流灌注、以及利用CD31抗体标示皮瓣内的血管。利用单因素方差分析对各组数据进行统计学比较。结果术后7 d各延迟组的皮瓣坏死率均小于对照组(P<0.001)。4个延迟组蒂部与choke动脉管径及灌注强度都显著大于对照组(P<0.05)。两切血管组皮瓣存活率、蒂部与choke动脉管径、血流灌注强度均显著大于两留血管组(P<0.05);延迟7 d组之间与延迟14 d组之间各项指标的差异没有统计学意义(P>0.05)。术后0 d,4组延迟皮瓣的血管密度显著大于对照组(P<0.001),但术后7 d各组皮瓣的血管密度没有统计学差异(P=0.883)。结论延迟只需要7 d便能达到最佳效果。此外,延迟期间应尽量使皮瓣处于缺血最严重但不致组织坏死的状态。

关键词：延迟皮瓣 choke血管激光散斑血流动力学

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改良型大鼠鞘内穿刺置管针及导管末端注药装置在大鼠鞘内置管术中的应用研究

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中国应用生理学杂志 2020年第3期36卷 283-288页

作者：徐昌顺孙培林春福建医科大学基础医学院脑老化与神经变性疾病重点实验室疼痛研究中心福州350108

目的:介绍一种大鼠鞘内穿刺置管针及导管末端注药装置在大鼠鞘内置管术中的应用,并评价其可行性和有效性。方法:60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为常规组(C组,n=30)和改良组(M组,n=30)。C组使用尖端磨平的20G针头穿刺置管,置入微量导管后... 详细信息

目的:介绍一种大鼠鞘内穿刺置管针及导管末端注药装置在大鼠鞘内置管术中的应用,并评价其可行性和有效性。方法:60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为常规组(C组,n=30)和改良组(M组,n=30)。C组使用尖端磨平的20G针头穿刺置管,置入微量导管后于大鼠颈部两耳间穿出,留置2~3 cm,导管末端热封后游离放置;M组使用鞘内穿刺置管针进行操作,并以微量注射旋塞保护鞘内导管末端。术后1 d评估两组大鼠运动功能,分别于术后1、3、7、14、21 d进行利多卡因试验,至30 d鞘内注射亚甲蓝定位,观察并记录鞘内导管位置;记录两组鞘内给药操作时间;测定术前及术后上述时点两组大鼠机械刺激缩足反应阈值(PWT);术前及术后一周行旷场实验,评估两组大鼠自主活动情况。结果:运动功能分级:C组Ⅰ级75.9%,Ⅱ级20.7%,Ⅲ级3.4%,M组Ⅰ级96.7%,Ⅱ级3.3%,M组运动功能分级Ⅰ级占比率显著高于C组(P<0.05);利多卡因实验和亚甲蓝定位导管位置显示:C组分别于置管后第14日、21日各有1例脱落,至置管后第30日,共有4例导管脱落,而M组导管均在位,两组相比有统计学差异(P<0.05);M组鞘内注药操作时间多在1 min左右,而C组超过3 min,两组相比有显著统计学差异(P<0.01);PWT变化情况:两组置管后一周内PWT有波动,第3日降至最低,两组与术前相比均有显著差异(P<0.05),置管后7 d逐渐恢复至术前水平,两组间比较无差异;旷场实验:M组置管前后在总路程、中央区活动路程以及运动时间和速度等方面均无差异,两组间各指标之间相比也无差异。结论:改良型大鼠鞘内穿刺置管针较常规穿刺置管工具穿刺效能一致,但对大鼠运动功能影响小;微量注射旋塞能有效避免鞘内导管脱出,快速便捷完成注药,并对大鼠自主活动无影响,值得进一步推广使用。

关键词：鞘内置管大鼠蛛网膜下腔疼痛微量注射

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肠易激综合征的内脏高敏感化机制及其相应的靶点研究

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胃肠病学和肝病学杂志 2022年第11期31卷 1219-1224页

作者：戴亨纷陈爱琴林春福建医科大学附属福州市第一医院药学部福建福州350009 福建医科大学疼痛研究所福建医科大学基础医学院脑老化与神经变性疾病重点实验室

明确肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的病因和发病机制一直是基础研究的热点,目前研究主要认为与内脏高敏感化、胃肠道动力、黏膜免疫、肠道炎症、肠道微生态、脑-肠轴及脑肠肽异常,以及饮食、精神心理等因素有关。IBS主要... 详细信息

明确肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的病因和发病机制一直是基础研究的热点,目前研究主要认为与内脏高敏感化、胃肠道动力、黏膜免疫、肠道炎症、肠道微生态、脑-肠轴及脑肠肽异常,以及饮食、精神心理等因素有关。IBS主要的病理生理学基础是内脏高敏感化,其形成机制包括内脏感觉传入神经异常、脊髓神经元兴奋性增加、中枢神经系统感知功能的适应性改变。神经递质、细胞因子和其他递质如肽和神经肽等被认为介导从外周到中枢途径的内脏感受信号传导,所以内脏高敏感化可以发生在IBS患者肠道感受器、脊髓、脑、脑-肠轴信号传导途中等。

关键词：肠易激综合征内脏高敏感化中枢机制外周机制药物靶点

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三叉神经痛大鼠三叉神经根区Fyn的表达变化

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神经解剖学杂志 2017年第6期33卷 697-701页

作者：于映映林凌罗丽丽武婉莹罗道枢福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福州350122 福建医科大学神经生物学研究中心福州350122 福建医科大学脑老化与神经变性疾病福建省高校重点实验室福州350122

目的:在三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)动物模型基础上,研究三叉神经根区(trigeminal nerve root entry zone,TREZ)Fyn蛋白的表达。方法:通过三叉神经根慢性压迫损伤诱导建立大鼠TN动物模型,von Frey丝检测大鼠口面部术前1 d和术... 详细信息

目的:在三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)动物模型基础上,研究三叉神经根区(trigeminal nerve root entry zone,TREZ)Fyn蛋白的表达。方法:通过三叉神经根慢性压迫损伤诱导建立大鼠TN动物模型,von Frey丝检测大鼠口面部术前1 d和术后1、3、7、14、21 d和28 d的机械性痛敏,然后在大鼠分别存活7、14、21 d和28 d时灌注取材,采用免疫荧光染色方法以及蛋白质印迹(Western Blot)技术检测三叉神经根区Fyn的表达变化。结果:(1)行为学结果显示:TN模型组大鼠术后14 d的机械性痛敏阈值明显降低,与假手术(Sham)组相比有显著性差异(P<0.05);(2)免疫荧光染色显示:TN模型组大鼠术后三叉神经根区Fyn阳性细胞增多,Sham组未见明显变化。(3)Western Blot显示:TN模型组大鼠术后7 d Fyn表达量相对Sham组降低(P<0.05),术后14 d降至最低;术后21 d Fyn表达上调,但仍低于Sham组;术后28 d TN组Fyn表达量明显上升且高于Sham组。结论:大鼠TREZ慢性压迫损伤后,Fyn表达在TN早期降低,而在TN后期Fyn表达升高,提示Fyn可能参与TN动物模型的发病过程。

关键词：三叉神经痛三叉神经根慢性压迫 Fyn

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巴戟天水提液有效萃取成分促进微波致雄性大鼠生殖损伤的修复

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第2期26卷 115-121页

作者：宋斌王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福建省高校脑老化与神经变性疾病重点实验室福建医科大学神经生物学研究中心福州350122

目的探讨巴戟天(Morinda officinalis ***)水提液对微波辐射致生殖系统损伤的修复作用。方法以900MHz频率、218μm/cm2辐射密度的低功率微波持续辐射10天,建立雄性SD大鼠生殖损伤模型。66只健康成年雄性SD大鼠随机分为11组。A组为空白... 详细信息

目的探讨巴戟天(Morinda officinalis ***)水提液对微波辐射致生殖系统损伤的修复作用。方法以900MHz频率、218μm/cm2辐射密度的低功率微波持续辐射10天,建立雄性SD大鼠生殖损伤模型。66只健康成年雄性SD大鼠随机分为11组。A组为空白对照组,B组为辐射未给药组,C组为辐射+生理盐水组,D组为巴戟天水提液乙酸乙酯萃取水层治疗组,E组为巴戟天水提液乙酸乙酯萃取酯层治疗组(其中D、E组各有10g、20g、30g、40g生药量/kg浓度梯度组)。每天灌胃1.5ml,持续14d。观察大鼠性行为学指标差异,同时检测血清睾酮变化;比较睾丸、附睾指数以及睾丸组织形态学的改变。结果巴戟天水提液乙酸乙酯萃取各层浓度梯度组分别给药后,D3、D4组扑捉潜伏期与B、C组相比缩短,D4组扑捉次数较之B、C组增加,余治疗组性行为学指标与B、C组无明显差别。D3、D4组睾酮水平较之B、C组均显著升高。HE染色和PCNA/SCP3双重免疫荧光染色显示,随着给药剂量增大,D组大鼠生精细胞数量逐渐增多,以A型精原细胞和粗线期初级精母细胞修复最为明显。结论巴戟天水提液乙酸乙酯萃取水层可改善大鼠性欲、修复生精上皮生精细胞和精子生成,最佳治疗剂量为40g/kg,其机制可能与促进睾酮分泌增加有关。

关键词：巴戟天微波辐射精子生成男性不育

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缓激肽后处理对心肺复苏大鼠神经元保护效应

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中华急诊医学杂志 2015年第9期24卷 969-974页

作者：林世荣宋斌林庆明钱欣柯俊王晓萍陈敏陈锋福建省立医院急诊内科福建省急救中心福建医科大学省立临床医学院福建省急诊医学研究所福州350001 福建医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系福建医科大学神经生物学研究中心福建省高校脑老化与神经变性疾病重点实验室

目的探讨缓激肽延迟后处理对心肺复苏后大鼠海马CA1区神经元的保护效应.方法实验在福建医科大学神经生物学中心进行.24只SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（Sham组）、心搏骤停后自主循环恢复（restoration of spontaneously cir... 详细信息

目的探讨缓激肽延迟后处理对心肺复苏后大鼠海马CA1区神经元的保护效应.方法实验在福建医科大学神经生物学中心进行.24只SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（Sham组）、心搏骤停后自主循环恢复（restoration of spontaneously circulation,ROSC）组及缓激肽后处理（bradykinin postconditioning,BR-P）组.以窒息法诱导建立心搏骤停模型,在心搏停止6min后开始心肺复苏.于成功复苏后2d,对BR-P组和ROSC组大鼠分别经腹腔注射缓激肽（150 μg/kg）和等量生理盐水.心肺复苏后3d,对各组大鼠进行神经功能缺损评分（neurological deficit scores, NDS）后取材,取鼠脑进行DAPI/Bax、Bcl-2、Caspase-3免疫荧光双标染色,在共聚焦显微镜下观察各组海马CA1区神经元凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况.计量资料用均数±标准差（（x）±s）表示,组间比较采用单因素方差分析.结果与Sham组比较,ROSC组NDS评分降低（60.13vs.80.00,P=0.000）、CA1区凋亡神经元增多、Bax、Caspase-3蛋白表达显著增强（56.70vs.37.39,P =0.000;43.46vs.37.29,P=0.004）、而Bcl-2蛋白表达减弱（41.90vs.47.52,P=0.008）.BR-P组NDS评分高于ROSC组（69.75vs.60.13,P=0.000）、凋亡神经元减少、Bax、Caspase-3蛋白表达减弱（51.34vs.56.70,P=0.046;38.90vs.43.46,P=0.028）、而Bcl-2蛋白表达增强（46.04vs.41.90,P=0.048）.结论缓激肽后处理可诱导Bax、Caspase-3蛋白表达减弱,Bcl-2蛋白表达增强,减轻神经元凋亡,从而对心肺复苏后脑缺血-再灌注损伤起保护效应.

关键词：缓激肽后处理心搏骤停心肺复苏神经保护

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血管性痴呆大鼠海马结构神经限制性沉默因子和突触膜糖蛋白的变化

血管性痴呆大鼠海马结构神经限制性沉默因子和突触膜糖蛋白的变化

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中国解剖学会2015年年会

作者：朱宁伟朱渊明赵小贞王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福建医科大学神经生物学研究中心福建省高校脑老化与神经变性疾病重点实验室

神经限制性沉默因子(NRSF)在神经发生及神经系统疾病起到广泛的作用。而在不同的细胞环境下NRSF会特异性抑制不同基因的表达,对神经元起到不同的作用。为了探讨血管性痴呆形成中NRSF对突触可塑性的影响,本实验采用永久性结扎双侧颈总动... 详细信息

神经限制性沉默因子(NRSF)在神经发生及神经系统疾病起到广泛的作用。而在不同的细胞环境下NRSF会特异性抑制不同基因的表达,对神经元起到不同的作用。为了探讨血管性痴呆形成中NRSF对突触可塑性的影响,本实验采用永久性结扎双侧颈总动脉法制作血管性痴呆大鼠模型,应用Morris水迷宫、western blot、免疫组织化学法等技术,观测大鼠海马NRSF和突触膜糖蛋白变化,结果显

关键词：突触膜糖蛋白大鼠海马限制性因子和

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血管性痴呆大鼠海马结构NIX参与的线粒体自噬增强

血管性痴呆大鼠海马结构NIX参与的线粒体自噬增强

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中国解剖学会2015年年会

作者：赵小贞尹晓岚朱宁伟王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福建医科大学神经生物学研究中心福建省高校脑老化与神经变性疾病重点实验室

＜正＞为了探明线粒体自噬在血管性痴呆过程中的作用及可能机制,本实验采用永久性结扎双侧颈总动脉法制备血管性痴呆大鼠模型、Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;应用western blot、荧光免疫组织化学和共聚焦激光扫描显微镜等技术,观...

＜正＞为了探明线粒体自噬在血管性痴呆过程中的作用及可能机制,本实验采用永久性结扎双侧颈总动脉法制备血管性痴呆大鼠模型、Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;应用western blot、荧光免疫组织化学和共聚焦激光扫描显微镜等技术,观察自噬相关蛋白LC3、促凋亡蛋白NIX及NIX-LC3B-线粒体共定位数量在血管性痴呆大鼠海马结构的变化,结果显示:（1）假手术组与模型组大鼠海马结构LC3Ⅱ/LC3 I差

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