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中国药理学通报 2018年第5期34卷 664-669页

作者：张双双穆云萍贺志成颜晓晓林默君福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福建福州350108

目的研究大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)中电压依赖性钾通道(voltagedepending potassium channel,K_V)电流在肺高压(pulmonary hypertension,PH)中的变化,及钾通道阻滞剂四乙基铵(tetraethylammonium,TEA)对K_V电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录PASMCs的K_V电流,观察PH大鼠中K_V电流的变化,以及TEA对K_V的影响。结果野百合碱(monocrotaline,MCT)、慢性低氧(chronic hypoxia,CH)明显减小了大鼠PASMCs上记录到的K_V电流密度;TEA干预能够明显降低正常和PH大鼠PASMCs的K_V电流,并且TEA对K_V电流的抑制作用在PH大鼠中明显减小。结论在CH、MCT诱导的两种PH大鼠模型中,PASMCs的K_V开放程度被明显抑制,而且其对应的TEA敏感性K_V电流明显减小。

关键词：四乙基铵电压依赖性钾通道肺高压肺动脉平滑肌细胞野百合碱慢性低氧

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共聚焦显微镜不同倍数物镜下肠系膜动脉三级分支张力和Ca2＋信号同步变化的比较

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生理学报 2017年第6期69卷 785-793页

作者：穆云萍颜芙蓉林达岑郑思怡林默君福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福州350108

本文旨在建立优化的观察肠系膜动脉三级分支(sMA,直径100~300μm)血管张力和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内Ca^(2+)信号的同步变化的实验方法。分别采用DMT 360CW激光共聚焦微血管张力测定系统和Nikon C2激光共... 详细信息

本文旨在建立优化的观察肠系膜动脉三级分支(sMA,直径100~300μm)血管张力和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内Ca^(2+)信号的同步变化的实验方法。分别采用DMT 360CW激光共聚焦微血管张力测定系统和Nikon C2激光共聚焦显微镜,同时记录Ca^(2+)通道激动剂KCl、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)以及Ca^(2+)通道抑制剂钆离子(Gd3+)诱导的去内皮sMA血管张力和VSMCs内Ca^(2+)信号的变化,并对共聚焦显微镜不同物镜(10×、20×、40×)下记录到的Ca^(2+)信号荧光值变化量进行对比分析,探索最佳的实验条件。结果显示,KCl可引起sMA显著收缩,20×、40×物镜下VSMCs内Ca^(2+)信号会同步增强,相比40×物镜,20×物镜下Ca^(2+)信号变化量更大,荧光值更稳定,而10×物镜下VSMCs内Ca^(2+)信号变化不明显;不同浓度的ET-1能够引起sMA浓度依赖性收缩,同样20×物镜下VSMCs内Ca^(2+)信号也呈浓度依赖性同步增强;ET-1预收缩sMA后加入Gd3+显著降低ET-1诱导的血管收缩效应,相应地20×物镜下VSMCs内Ca^(2+)信号也显著降低。以上结果表明,Ca^(2+)通道激动剂或抑制剂引起血管收缩或舒张的同时,VSMCs内Ca^(2+)信号会发生相应的变化,提示本实验方法可同步记录两者的变化,而且共聚焦显微镜20×物镜为最佳的实验条件。与分别应用血管张力检测技术测定血管张力变化和动态细胞荧光成像技术测定VSMCs内Ca^(2+)信号变化的方法相比,同步检测张力和Ca^(2+)信号的变化更简单实用,有效避免了不必要的实验误差。

关键词：小动脉张力钙信号钙通道同步

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TRPV4通道介导慢性低氧肺高压大鼠肺微血管内皮通透性增加

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生理学报 2021年第6期73卷 867-877页

作者：焦海霞袁胜霞黄燕珍苏巧文何瑞岚吴枝娟林默君福建医科大学基础医学院福州350112 福建医科大学心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福州350112 中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院福州350102 福建医科大学附属泉州第一医院病理科泉州362000

本文旨在研究瞬时受体电位香草素受体4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)通道对慢性低氧肺高压(chronic hypoxia-induced pulmonary hypertension,CHPH)大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)通透性的影响,以阐明CHPH发生时血管内皮功能障碍的可能机制。Sprague-Dawley大鼠慢性低氧处理21天建立CHPH模型,组织块贴壁法原代培养PMVECs,采用FITC-葡聚糖法检测细胞通透系数,透射电镜观察紧密连接(tight junction,TJ)结构,实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测TRPV4和TJ相关蛋白Occludin、Claudin-5、ZO-1表达变化,TRPV4特异性激动剂GSK1016790A(GSK,10 nmol/L)和抑制剂HC-067047(HC,1μmol/L,0.5μmol/L)干预后观察PMVECs内Ca^(2+)浓度变化及其对PMVECs通透性的影响。结果显示:慢性低氧处理21天后成功建立CHPH大鼠模型,CHPH大鼠肺血管内皮间TJ结构破坏,PMVECs屏障功能降低,细胞间通透性增高,TJ相关蛋白表达显著减少,TRPV4表达增高(P<0.01)。特异性激活TRPV4后CHPH大鼠PMVECs内Ca^(2+)浓度显著增高,TRPV4特异性抑制剂HC对CHPH大鼠细胞Ca^(2+)增高的抑制效应显著高于正常PMVECs,并可以逆转CHPH大鼠PMVECs的通透性增高,增加三种TJ相关蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。上述结果提示,TRPV4通道通过增加胞内Ca^(2+)浓度,引起CHPH大鼠PMVECs上TJ结构破坏、TJ相关蛋白表达下降,诱发内皮功能障碍。

关键词：肺高压肺微血管内皮细胞紧密连接钙离子 TRPV4

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环孢素A对柔红霉素损伤H9c2心肌细胞的保护作用

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中国药理学通报 2021年第7期37卷 972-978页

作者：吴枝娟陈世珍徐丽霞何瑞岚焦海霞林默君福建医科大学心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福建福州350108 福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系福建福州350108 湖北省第三人民医院肾内科湖北武汉430033

目的研究环孢素A(cyclosporin A,CsA)对柔红霉素(daunorubicin,DNR)损伤大鼠H9c2心肌细胞的保护作用。方法CsA预处理2 h,1μmol·L^(-1) DNR共处理24 h。MTS法检测细胞生存率;苏木精-伊红染色观察细胞形态,生化试剂盒分析乳酸脱氢... 详细信息

目的研究环孢素A(cyclosporin A,CsA)对柔红霉素(daunorubicin,DNR)损伤大鼠H9c2心肌细胞的保护作用。方法CsA预处理2 h,1μmol·L^(-1) DNR共处理24 h。MTS法检测细胞生存率;苏木精-伊红染色观察细胞形态,生化试剂盒分析乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性,细胞免疫化学检测心房利尿钠肽;DCF-DA测定细胞内活性氧;Hoechst 33342分析细胞凋亡,GreenNuc测定caspase-3活性,蛋白免疫印迹结果CsA提高细胞生存率;减少乳酸脱氢酶、肌酸激酶和心房利尿钠肽含量,改善细胞形态;降低活性氧含量,增加Bcl-2表达,抑制caspase-3和细胞凋亡率。抑制NFAT,CsA不能进一步增加细胞生存率。结论CsA抑制DNR处理H9c2细胞氧化应激,减少凋亡,减轻损伤,提高生存率,可能与抑制CaN及NFAT有关。

关键词：环孢素A 柔红霉素 H9c2心肌细胞心肌损伤凋亡 CaN NFAT

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抗逆转录病毒药对孕育期雌鼠心血管影响

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中国应用生理学杂志 2022年第3期38卷 252-257页

作者：余海娟陈祖盛陈彤吴燚晶孙珂悦李昱静徐钦叶寒辉陈雅红阮琴韵傅丽云黄春燕周琳瑛汪敏华方秋娟福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福建福州350108 福建医科大学临床医学部福建福州350108 福建医科大学护理学院福建福州350108 福建医科大学孟超肝胆医院福建福州350108 福建医科大学附属第一医院超声科福建福州350108 福建医科大学公共技术中心电镜室福建福州350108 福建中医药大学附属第二人民医院妇产科福建福州350108

目的:评价抗逆转录病毒药对孕育期雌性大鼠心血管功能及某些生化指标的影响。方法:SD大鼠9周龄雌鼠19只、10周龄雄鼠6只,9只/10只雌鼠与3只雄鼠合1笼,共2笼,分为正常对照组(CON)、高效抗逆转录病毒治疗组(HARRT)。其中CON组雌性大鼠每... 详细信息

目的:评价抗逆转录病毒药对孕育期雌性大鼠心血管功能及某些生化指标的影响。方法:SD大鼠9周龄雌鼠19只、10周龄雄鼠6只,9只/10只雌鼠与3只雄鼠合1笼,共2笼,分为正常对照组(CON)、高效抗逆转录病毒治疗组(HARRT)。其中CON组雌性大鼠每天早、晚生理盐水(10 ml/kg)灌胃,HARRT组雌性大鼠灌等容积抗逆转录病毒药(AZT 31.25 mg/kg+3TC 15.63 mg/kg+LPV/r(41.67/10.42)mg/kg),连续3个月。记录雌性大鼠体重、存活情况;检测超声心动图,多导生理记录仪检测动脉血压、心脏血流动力学参数;相应试剂盒检测血糖、血脂四项、心肌酶及肝酶;Masson染色及透射电镜分别观察心肌胶原纤维和心肌细胞超微结构。结果:CON组雌性大鼠均存活(9/9),HARRT组雌性大鼠存活6只(6/10);与CON组比较,HAART组雌性大鼠体重减少(P<0.01);LVDd、IVST、LVPWT、LAD增加(P<0.05);动脉舒张压增加(P<0.05)、LVP+dP/dt_(max)减少(P<0.01);TG减少、Glu增加(P<0.05)、CK减少(P<0.01)、GOT减少(P<0.05);心肌组织胶原纤维增多,心肌细胞超微结构异常。结论:抗逆转录病毒药可导致孕育期雌性大鼠心血管病变。

关键词：雌鼠大鼠孕育期高效抗逆转录病毒治疗心血管不良反应

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TRPM2在粥样硬化小鼠主动脉5-HT高反应性中的作用

TRPM2在粥样硬化小鼠主动脉5-HT高反应性中的作用

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2019年中国生理学会心血管生理学术研讨会

作者：刘晓如颜晓晓林默君福建医科大学基础医学院心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室

目的:动脉粥样硬化（AS）是血管壁慢性炎症性疾病,血管平滑肌细胞（VSMCs）上活性氧物质的过表达以及钙信号的改变是促成AS新生内膜生成的重要因素。TRPM2是VSMCs内氧化应激和活性氧的内源性氧化还原传感器,介导氧化应激相关的[Ca]增加... 详细信息

目的:动脉粥样硬化（AS）是血管壁慢性炎症性疾病,血管平滑肌细胞（VSMCs）上活性氧物质的过表达以及钙信号的改变是促成AS新生内膜生成的重要因素。TRPM2是VSMCs内氧化应激和活性氧的内源性氧化还原传感器,介导氧化应激相关的[Ca]增加。本文旨在探究TRPM2的表达和功能在AS小鼠主动脉5-HT的高反应性中的作用。方法:采用APOE、鼠高脂饲料诱导构建AS小鼠模型,比较TRPM基因表达变化,运用血管环张力检测技术测定小鼠主动脉对5-HT的反应性变化,观察TRPM2抑制剂处理对5-HT反应性的作用。结果:与对照组相比,AS模型小鼠的体重,血糖,血脂均显著增高,HE染色,主动脉窦和大体油红O染色主动脉斑块形成明显,提示模型制备成功;AS模型小鼠主动脉上,TRPM家族各成员中TRPM2、TRPM5、TRPM7mRNA与对照组相比,表达水平显著增高,TRPM2的蛋白表达水平较对照组显著增高,提示AS模型小鼠主动脉上TRPM2基因表达上调;AS模型小鼠主动脉对5-HT反应性较对照组增高,AS小鼠主动脉引起的最大收缩高于对照组,EC50减小;TRPM2抑制剂A CA （1M）对AS模型小鼠主动脉5-HT诱发的收缩起显著抑制作用;TRPM2抑制剂2-APB （10μM）显著抑制了AS模型组5-HT诱发的主动脉收缩。结论:APOE基因敲除和高脂饮食处理:成功诱导小鼠AS产生;上调了小鼠主动脉TRPM2基因表达;增强小鼠主动脉对5-HT反应性,加强了TRPM2抑制剂对5-HT诱导收缩效应的抑制作用。这些结果提示APOE基因敲除和高脂饮食处理可能通过上调TRPM2基因表达,增强TRPM2在5-HT高反应性中的作用,促进小鼠AS的产生。

关键词：动脉粥样硬化 TRPM2 5-羟色胺主动脉平滑肌细胞

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CaN/NFAT信号通路在MCT诱导肺高压PASMCs增殖、迁移和凋亡中的作用

CaN/NFAT信号通路在MCT诱导肺高压PASMCs增殖、迁移和凋亡中的作用

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：何瑞岚吴枝娟王瑞幸刘晓如焦海霞林默君心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系

目的:肺高压(PH)是以持续的血管收缩,血管反应性增强和血管重构为主要特征的一种疾病,最终引起右心衰竭以致死亡。研究表明,肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的异常增殖、迁移增强和凋亡减少,与肺高压的血管重构密切相关。肺血管异常重构的分... 详细信息

目的:肺高压(PH)是以持续的血管收缩,血管反应性增强和血管重构为主要特征的一种疾病,最终引起右心衰竭以致死亡。研究表明,肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的异常增殖、迁移增强和凋亡减少,与肺高压的血管重构密切相关。肺血管异常重构的分子机制尚不明确。目前,PH的治疗是以血管舒张为主,延缓病情进展的对症治疗。研究发现,在野百合碱(MCT)诱导的PH大鼠模型中,PASMCs的静息[Ca2+]i和钙池操纵性钙内流(SOCE)显著增强,其

关键词： PASMCs 异常增殖肺高压 CaN/NFAT MCT 信号通路

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CaN/NFAT信号通路在MCT诱导肺高压PASMCs增殖、迁移和凋亡中的作用

CaN/NFAT信号通路在MCT诱导肺高压PASMCs增殖、迁移和凋亡中的作用

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中国生理学会张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议;中国生理学会第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：何瑞岚吴枝娟王瑞幸刘晓如焦海霞林默君心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系

关键词： PASMCs 异常增殖肺高压 CaN/NFAT MCT 信号通路

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葡萄糖胺对肺病生理之影响

葡萄糖胺对肺病生理之影响

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：庄昆翰福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室

葡萄糖胺,一种自然产生且高度聚集在结缔组织的胺基单醣,作为补充物被广泛运用在关节炎的治疗上。近来,葡萄糖胺已开始因其潜在的抗炎特质而被运用在某些炎症疾病的治疗上。然而,葡萄糖胺在病理及生理上的角色及其参与的分子机制未见报... 详细信息

葡萄糖胺,一种自然产生且高度聚集在结缔组织的胺基单醣,作为补充物被广泛运用在关节炎的治疗上。近来,葡萄糖胺已开始因其潜在的抗炎特质而被运用在某些炎症疾病的治疗上。然而,葡萄糖胺在病理及生理上的角色及其参与的分子机制未见报导。本系列研究的目标就是要厘清葡萄糖胺如何扮演一个抗炎和抗癌的角色及其可能在细胞生长上造成的细胞毒性和机制。使用气管内滴入脂多醣所诱发的大鼠肺部发炎模型,我们注意到葡萄糖胺能减缓肺水肿和中性粒细胞浸润以及肺泡及肺组织中的细胞激素(TNF-、IL-1和IFN-)、趋化激

关键词：细胞周期停滞信号通路乳癌细胞肺泡上皮细胞抑制细胞增殖高剂量细胞凋亡母细胞瘤细胞毒性

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正常胃上皮细胞及胃癌细胞钾通道特性

正常胃上皮细胞及胃癌细胞钾通道特性

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：黄赛阳林达岑林默君福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系心血管病离子通道信号调控福建省高校重点实验室

目的:比较正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和AGS)中钾电流特征。方法:利用全细胞膜片钳技术记录,比较正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和AGS)中钾电流的差别;利用Q-PCR技术观察正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和... 详细信息

目的:比较正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和AGS)中钾电流特征。方法:利用全细胞膜片钳技术记录,比较正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和AGS)中钾电流的差别;利用Q-PCR技术观察正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(HGC-27和AGS)中钾通道mRNA表达情况。结果:1.钙激活延迟整流钾通道(KCa)、电压依赖性钾通道(KV)、内向整流钾通道(KIR)以及双孔型钾通道(K2P)的特异抑制剂TEA(2.5mmol)、4-AP(10mmol)、BaCl2(5μmol)以及Propafenone(100μmol)可分别抑制阶跃脉冲引起的钾电流,提示三种细胞中均存在四种不同钾通道介导的钾电流;***-1中钾通道丰富,钾电流大小呈IKCa=IK2P> IKV=IKIR趋势,HGC-27中钾电流大小呈IKCa=IKV>IK2P=IKIR趋势,AGS中钾电流大小呈IK2P=IKIR>IKCa=IKV趋势:3.胃癌细胞HGC-27和AGS相较GES-1四种钾通道引起的钾电流均显著下调(P<0.01);***在多个细胞中发挥主导作用,在胞内低钙情况下,GES-1中的IKCa显著高于HGC-27和AGS,进一步在三种细胞中加入A23187(1μmol)将细胞内游离钙离子浓度共同提升至高钙水平(2mM)后,观察到三种细胞引起的IKCa均显著升高(P<0.01),且其中HGC-27和AGS的IKCa可提升至与GES-1同一水平,提示胃癌细胞中的KCa对钙的敏感性可能高于正常胃上皮细胞;5.q-PCR结果提示胃癌细胞KCa在转录组水平总体呈低表达与低钙情况下膜片钳结果一致。结论:正常胃上皮细胞和胃癌细胞中均存在四种不同的钾通道,胃癌细胞中四种钾通道功能均减弱;胃癌细胞中钙激活延迟整流钾通道数量降低,但对钙的敏感性可能升高,在钾通道中呈主导作用。

关键词：胃癌钙激活延迟整流钾通道钾通道膜片钳抑制剂

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