检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2011年第4期6卷 241-245页

作者：梁菲菲黄连真陈婉南林旭福建医科大学分子医学研究中心消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建福州350004

目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293... 详细信息

目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293A细胞包装重组腺病毒。用重组腺病毒感染Huh7细胞并以IFN-α诱导,收获细胞蛋白,Western blot验证TP257蛋白在细胞中的表达。细胞蛋白进行免疫沉淀,SDS-PAGE分离后通过质谱鉴定差异蛋白。结果构建的重组腺病毒AD-TP257能有效感染Huh7细胞并大量表达TP257蛋白。Huh7细胞感染AD-TP257后以IFN-α处理,并通过免疫沉淀筛选到4种差异蛋白,其中3种经肽质量指纹图谱鉴定分别为热休克蛋白60、组蛋白HIST1H2BC和肌凝蛋白调节轻链12A。结论 TP257抗IFN-α效应可能与它和特定肝细胞蛋白结合并相互作用有关。

关键词：乙型肝炎病毒 DNA聚合酶 α-干扰素免疫沉淀

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幽门螺杆菌促肝细胞增殖及分子机制的初步研究

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海峡预防医学杂志 2012年第5期18卷 1-4页

作者：林小玲陈燕凌强华陈婉南林旭福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建省肿瘤微生物学重点实验室福州350004

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对肝细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法以不同量的Hp标准株NCTC11637与HepG2肝细胞共培养,CCK-8法检测细胞的增殖情况并确定最佳Hp作用剂量。用Affymetrix人类基因表达谱芯片检测Hp与HepG2共培养对HepG2细胞... 详细信息

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对肝细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法以不同量的Hp标准株NCTC11637与HepG2肝细胞共培养,CCK-8法检测细胞的增殖情况并确定最佳Hp作用剂量。用Affymetrix人类基因表达谱芯片检测Hp与HepG2共培养对HepG2细胞基因表达谱的影响,并选取5个差异表达基因以半定量RT-PCR技术验证。结果 MOI比值(细菌与细胞个数比)在0.15∶1～0.075∶1时,Hp对HepG2细胞具有明显的促增殖作用;HepG2细胞经MOI比值为0.15∶1Hp处理后有35个基因转录发生变化:ICAM-1等19个基因上调,SLC38A4等16个基因下调,这些变化基因涉及细胞骨架/基质、DNA结合蛋白及转录因子等;5个基因表达情况与表达谱芯片检测结果完全吻合。结论一定剂量的幽门螺杆菌可促进肝细胞增殖,这与Hp导致HepG2细胞基因转录调控有关基因的表达变化有关。

关键词：幽门螺杆菌基因芯片肝细胞增殖肝癌

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MALDI-TOF MS在快速检测碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌及其同源性分析中的应用

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中国微生态学杂志 2022年第4期34卷 470-474页

作者：曾建英涂海健林仁贵陈淑娟伦永志莆田市第五医院检验科福建莆田351100 莆田学院医学微生态学福建省高校重点实验室福建莆田351100 消化道恶性肿瘤教育部重点实验室(福建医科大学) 福建福州350122 莆田学院附属医院检验科福建莆田351100

目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKp)特异性峰,并进行同源性分析。方法收集30株CRKp临床分离株,采用法国梅里埃VITEK 2 Compact分析仪进行细菌鉴定和药敏试验、利用改良碳青... 详细信息

目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKp)特异性峰,并进行同源性分析。方法收集30株CRKp临床分离株,采用法国梅里埃VITEK 2 Compact分析仪进行细菌鉴定和药敏试验、利用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶;利用MALDI-TOF MS技术筛选CRKp菌株特异性峰,采用MALDI-TOF MS进行同源性分析,多位点序列分型(MLST)方法作为验证。结果30株CRKp株mCIM均为阳性,其中24株含有共同特异性峰,特异性达到80%,符合区分阈值。蛋白质质量峰聚类分析显示,30株CRKp株分为三大簇,同时MLST结果表明,ST11/A型为27株、ST15/B型为2株,而ST2193/D型仅有1株。结论MALDI-TOF MS在CRKp鉴定中具有精准、快速的优点。MALDI-TOF MS能够有效进行CRKp同源性分析,并应用于院内感染流行暴发的监测。

关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性多位点序列分型院内感染

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基于秀丽隐杆线虫模型研究钩吻素己所致肠道毒性及其分子机制

基于秀丽隐杆线虫模型研究钩吻素己所致肠道毒性及其分子机制

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：陈小鹰吴亚娇鲍文强张东城李楚涛陈梦婷朱安消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建医科大学基础医学院科研中心

目的钩吻(Glsemium elegans Benth。)是马钱科胡蔓藤属常绿木质藤本植物,具有攻毒、消肿、止痛和祛风功效,临床用于治疗湿疹、疔疮、风湿痹痛、神经痛等。钩吻同时有剧毒,且中毒剂量与治疗剂量接近,故临床用药易引起中毒,甚至导致患者... 详细信息

目的钩吻(Glsemium elegans Benth。)是马钱科胡蔓藤属常绿木质藤本植物,具有攻毒、消肿、止痛和祛风功效,临床用于治疗湿疹、疔疮、风湿痹痛、神经痛等。钩吻同时有剧毒,且中毒剂量与治疗剂量接近,故临床用药易引起中毒,甚至导致患者死亡。钩吻中毒时的消化系统症状为口咽灼痛、恶心、呕吐、腹痛、腹泻。钩吻素己是钩吻的主要毒性成分为,但其毒效应和毒性机制不明。本研究拟基于肠腔型模式生物秀丽隐杆线虫,从肠道渗透性和氧化损伤角度揭示钩吻素己所致肠道毒性及其分子机制。方法 (1)采用0、12.5、25、50、100、200、400、800μM钩吻素己分别处理线虫48、72 h,通过体长和体宽检测生长发育情况。(2)基于化合物活性基团,通过Pharmapper进行蛋白靶点钩钓。(3)50μM钩吻素己处理线虫72 h后进行mRNA-seq,以│Log2FC│≥1、q≤0.05为条件,筛选与对照组的差异表达基因。(4)通过头部摆动频率和身体弯曲次数评价线虫运动行为能力。(5)使用食用色素亮蓝指示肠道渗透性,检测35个肠道结构相关基因表达量。(6)通过肠道自发荧光和ROS含量评价氧化应激状况,检测22个氧化-抗氧化相关基因表达量。(7)分子对接预测钩吻素己与SKN-1/DAF-16通路关键蛋白的结合情况。(8)GFP标记DAF-16蛋白并观察其核转位比例。(9)GFP分别标记SKN-1b和GST-4p,观察抗氧化关键蛋白的荧光强度。(10)GFP分别标记HSP-4和HSP-6p,观察内质网和线粒体介导的未折叠蛋白反应。结果 (1)钩吻素己显著抑制线虫生长发育,使其体长和体宽下降。(2)Pharmapper共钩钓221个蛋白靶点,mRNA-seq筛选出731个差异表达基因。GO和KEGG富集条目包含氧化还原过程、有机阳离子转运、跨膜转运等。(3)GSEA分析显示线虫运动行为相关基因总体呈抑制状态。行为学检测发现头部摆动频率和身体弯曲次数下降。(4)亮蓝染料从肠腔渗透至体腔,线虫肠道渗透显著升高,调控肠道发育的gem-4、hmp-1、fil-2、pho-1基因表达异常。(5)肠道脂褐素和ROS上调,sod-2和isp-1基因表达下调。(6)钩吻素己与SKN-1/DAF-16通路的AAP-1、AGE-1、AKT-1、AKT-2、DAF-2、DAF-16、PDK-1、SGK-1蛋白可稳定结合。荧光镜下可见SKN-1蛋白表达上调,DAF-16核转位异常。(7)内质网未折叠蛋白反应标志物HSP-4下调,线粒体未折叠蛋白反应标志物HSP-6p上调。结论钩吻素己可致秀丽隐杆线虫肠道渗透性增加,其毒性机制涉及肠道发育基因紊乱、SKN-1/DAF-16通路介导的氧化抗氧化失衡、未折叠蛋白反应异常。

关键词：秀丽隐杆线虫钩吻素己肠道毒性渗透性氧化应激未折叠蛋白反应

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IDH1基因在肝内胆管癌细胞HuCCT1增殖与迁移中的作用及其初步机制

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解放军医学杂志 2024年第2期49卷 194-203页

作者：林美佳雷宇清叶洲杰朱丽萍王心睿黄雄飞福建医科大学基础医学院病理学系福建福州350004 国家卫健委非人灵长类生育调节技术评价重点实验室/福建省妇幼保健院福建福州350000 福建医科大学妇儿临床医学院福建福州350004 福建省儿童医院心脏外科福建福州350011 福建省妇幼保健院福建福州350001 福建省儿童医院福建福州350011 福建医科大学附属医院福建省妇幼保健院医学研究中心福建福州350001 福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建福州350108

目的探讨异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)在肝内胆管癌(iCCA)细胞HuCCT1增殖与迁移中的作用及其可能的分子机制。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建IDH1基因敲除的HuCCT1细胞(HuCCT1^(IDH1-/-));CCK-8法和克隆形成实验检测IDH1野生型HuCCT1(Hu... 详细信息

目的探讨异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)在肝内胆管癌(iCCA)细胞HuCCT1增殖与迁移中的作用及其可能的分子机制。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建IDH1基因敲除的HuCCT1细胞(HuCCT1^(IDH1-/-));CCK-8法和克隆形成实验检测IDH1野生型HuCCT1(HuCCT1^(WT))细胞和HuCCT1^(IDH1-/-)细胞的增殖能力;细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。生物信息学方法分析上述两种HuCCT1细胞的转录组测序结果,Western blotting验证转录组信息通路相关蛋白的表达。结果与HuCCT1细胞比较,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞增殖和克隆形成数目明显减少(P<0.05),阻滞在G_(2)/M期细胞的比例明显增加(P<0.01),划痕愈合率明显降低(P<0.01),迁移细胞数目(P<0.001)和侵袭细胞数目(P<0.05)明显减少;q RT-PCR检测结果显示,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞IDH1、Vimentin、MMP-9和调控G_(2)/M期增殖相关基因Cyclin A2、Cyclin B1及CDK1 mRNA表达水平降低(P<0.05),编码E-cadherin的CDH1 mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blotting检测结果显示,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞中E-cadherin表达水平升高(P<0.05),N-cadherin、Vimentin及MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05)。转录组测序结果显示,HuCCT1^(WT)与HuCCT1^(IDH1-/-)存在1476个差异表达基因(DEGs);基因本体论(GO)分析显示上述DEGs显著富集在炎症反应、细胞信号转导和细胞代谢等生物学过程;KEGG通路分析显示上述DEGs显著富集在Wnt、MAPK、Rap1、Hippo、TNF等与肿瘤细胞增殖和侵袭转移密切相关的信号通路。Western blotting验证结果显示,与HuCCT1^(WT)比较,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞Wnt信号通路的Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论IDH1基因参与调控iCCA细胞HuCCT1的迁移、侵袭及EMT过程,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：肝内胆管癌异柠檬酸脱氢酶1 细胞迁移细胞侵袭转录组

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全腹腔镜与辅助腹腔镜下远端胃癌根治术的近期疗效和安全性研究

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肿瘤防治研究 2018年第11期45卷 900-904页

作者：林春霖朱广伟郑炜黄永建杨树钢叶建新福建医科大学附属第一医院胃肠外科二区福州350005 福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福州350000

目的探讨全腹腔镜与辅助腹腔镜下远端胃癌根治术的近期疗效及安全性。方法回顾性分析福建医科大学附属第一医院胃肠外科二区2016年2月—2017年8月收治的行腹腔镜远端胃癌根治术患者80例,根据手术方式分为全腹腔镜组(45例)和辅助腹腔镜组... 详细信息

目的探讨全腹腔镜与辅助腹腔镜下远端胃癌根治术的近期疗效及安全性。方法回顾性分析福建医科大学附属第一医院胃肠外科二区2016年2月—2017年8月收治的行腹腔镜远端胃癌根治术患者80例,根据手术方式分为全腹腔镜组(45例)和辅助腹腔镜组(35例),比较两组患者的手术相关指标。结果在术中指标方面,两组患者的手术时长和淋巴结清扫总数比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),但全腹腔镜组的切口长度和术中出血量均短于(少于)辅助腹腔镜组,差异具有统计学意义(均P<0.05);在术后恢复指标方面,两组患者的术后排气时间、术后住院天数及术后总并发症比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论全腹腔镜下远端胃癌根治术具有术中出血少、手术切口长度较短、对机体损伤轻、愈合的瘢痕小等优点易于被患者所接受。因此,全腹腔镜下远端胃癌根治术疗效更好且安全可行。

关键词：胃癌全腹腔镜辅助腹腔镜远端胃癌根治术

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蛋白质犹素修饰及其生理学与病理学作用的研究进展

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福建医科大学学报 2022年第6期56卷 459-469页

作者：许静(综述) 吴淑香林旭(审校) 福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福州350122 福建医科大学基础医学院肿瘤微生物学福建省重点实验室福州350122

蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)在细胞的生命活动过程中起重要作用,如蛋白质降解、基因表达、信号转录调节、细胞周期进展、应激反应和炎症的发生、发展等。常见的PTM包括糖基化、甲基化、磷酸化、乙酰化、泛... 详细信息

蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)在细胞的生命活动过程中起重要作用,如蛋白质降解、基因表达、信号转录调节、细胞周期进展、应激反应和炎症的发生、发展等。常见的PTM包括糖基化、甲基化、磷酸化、乙酰化、泛素化和类泛素化等。

关键词：犹素修饰犹素蛋白质生理学病理学翻译后修饰

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同源重组修复蛋白Rad51在癌症中的作用

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生命的化学 2022年第10期42卷 1874-1880页

作者：郑云峰杨帆郭泽庚福建医科大学附属协和医院胃外科福州350001 福建医科大学附属协和医院呼吸内科福州350001 福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福州350108

Rad51重组酶作为同源重组的核心因子,在DNA损伤修复过程中发挥着关键作用。Rad51在多种肿瘤组织中的表达异常增高,其功能失调与肿瘤的发生、进展、放疗抵抗及化疗耐药等密切相关。此外,Rad51基因多态性及表达变化会导致癌症风险增加,显... 详细信息

Rad51重组酶作为同源重组的核心因子,在DNA损伤修复过程中发挥着关键作用。Rad51在多种肿瘤组织中的表达异常增高,其功能失调与肿瘤的发生、进展、放疗抵抗及化疗耐药等密切相关。此外,Rad51基因多态性及表达变化会导致癌症风险增加,显著影响患者生存预后。有效下调Rad51基因表达、降低肿瘤同源重组修复能力、逆转肿瘤治疗耐受,具有潜在的临床价值。在此,本文将对Rad51的结构、功能及其在癌症治疗中的研究进展进行综述。

关键词： Rad51 同源重组修复 DNA双链断裂肿瘤

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剪接因子SF3B4在肺腺癌肺内转移中高表达及其临床意义

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福建医科大学学报 2024年第6期58卷 367-376页

作者：余绍斌张培培肖寒陈舒晨福建医科大学附属协和医院胸外科福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建医科大学附属协和医院病理科

目的利用空间蛋白组学技术筛选肺腺癌肺内转移与多原发肺腺癌的差异蛋白，探讨剪接因子3B亚基4(SF3B4)的表达特征及其临床意义。方法采用空间蛋白组学技术分析肺腺癌样本中肿瘤细胞富集区域的蛋白质表达，结合生物信息学工具和数据库... 详细信息

目的利用空间蛋白组学技术筛选肺腺癌肺内转移与多原发肺腺癌的差异蛋白，探讨剪接因子3B亚基4(SF3B4)的表达特征及其临床意义。方法采用空间蛋白组学技术分析肺腺癌样本中肿瘤细胞富集区域的蛋白质表达，结合生物信息学工具和数据库，对SF3B4在泛癌种中的表达模式及其与肺腺癌预后和肿瘤进展的相关性进行综合评估。结果共鉴定出8 736种蛋白质，筛选出437种差异表达显著的蛋白质，SF3B4在肺内转移癌中上调最显著，与肺腺癌的高分期、分化及预后差密切相关。基因本体功能注释和京都基因与基因组百科全书功能分析揭示上调蛋白富集于糖酵解、碳代谢及核糖核蛋白复合体通路，而下调蛋白与细胞外基质重塑及结构分子活性相关。结论系统性筛选出与肺腺癌肺内转移相关的差异蛋白，确认SF3B4的高表达与不良预后、肿瘤进展及信号通路激活相关，为肺腺癌肺内转移的诊断和治疗提供新线索。

关键词：肺腺癌肺内转移多原发肺腺癌剪接因子SF3B4 空间蛋白组学鉴别诊断

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乙型肝炎病毒通过抑制AGE-Rs表达促进AGEs诱导的肝癌细胞增殖

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福建医科大学学报 2021年第2期55卷 99-103页

作者：王标陈艳福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室福建省肿瘤微生物学重点实验室福州350122

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对晚期糖基化终产物受体(AGE-Rs)表达及AGEs诱导下肝癌细胞增殖的影响。方法利用HepG2.2.15细胞或肝癌细胞HepG2瞬时转染1.2倍HBV基因组,采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹法(Western-blot),从mRNA水... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对晚期糖基化终产物受体(AGE-Rs)表达及AGEs诱导下肝癌细胞增殖的影响。方法利用HepG2.2.15细胞或肝癌细胞HepG2瞬时转染1.2倍HBV基因组,采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹法(Western-blot),从mRNA水平和蛋白水平检测HBV对AGE-Rs表达的影响。使用AGEs(100μg/mL)处理细胞,采用CCK-8法比较HepG2和HepG2.2.15细胞在AGEs诱导下的增殖情况。结果在HepG2.2.15细胞或瞬时转染HBV的HepG2细胞中,AGE-R1和AGE-R3的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),而AGE-R2表达水平无变化。细胞增殖实验表明,在AGEs诱导下,HepG2.2.15细胞的增殖能力强于HepG2细胞(P<0.05)。结论HBV可以抑制肝癌细胞AGE-R1和AGE-R3的表达,并促进AGEs诱导下肝癌细胞的增殖。

关键词：乙型肝炎病毒晚期糖基化终产物细胞增殖肝癌细胞

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