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IL-21和CCL19修饰可提高NKP30 CAR-T细胞对肺癌的杀伤效率并促进其肿瘤浸润

南方医科大学学报 2024年第10期44卷 1926-1936页

作者：周智锋柳硕岩李洁羽陈明秋林辉陈宇杰陈伟杰林军鹏周航郑庆丰福建医科大学肿瘤临床医学院//福建省肿瘤医院肿瘤免疫研究室福建福州350014 福建医科大学基础医学院福建福州350100 福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院//福建省肿瘤医院胸部外科福建福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院//福建省肿瘤医院胸部肿瘤放疗科福建福州350014

目的探讨细胞因子IL-21和趋化因子CCL19修饰的NKP30 CAR-T细胞是否增强对肺癌的杀伤和浸润作用。方法在NKP30 CAR基础上融合基因IL-21和CCL19构建IL-21-CCL19 NKP30 CAR;CAR-T细胞的培养使用CD3CD28单抗及细胞因子IL-2刺激;流式细胞术... 详细信息

目的探讨细胞因子IL-21和趋化因子CCL19修饰的NKP30 CAR-T细胞是否增强对肺癌的杀伤和浸润作用。方法在NKP30 CAR基础上融合基因IL-21和CCL19构建IL-21-CCL19 NKP30 CAR;CAR-T细胞的培养使用CD3CD28单抗及细胞因子IL-2刺激;流式细胞术检测免疫细胞表型;迁移实验检测IL-21对免疫细胞的迁移作用;乳酸脱氢酶(LDH)及成球实验检测CAR-T细胞的杀伤及浸润能力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测IFN-γ的分泌数量;ELISA检测IL-21及CCL19的分泌情况;体内实验中,将肿瘤细胞显微注射到斑马鱼卵黄囊,构建斑马鱼移植瘤模型,24 h后将免疫细胞注射至同样部位,体式荧光显微镜拍摄荧光。结果NKP30配体(B7H6)在正常组织及血液细胞不表达,在肺癌细胞上高表达(90%以上)。IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞与NKP30 CAR-T细胞和常规T细胞相比,具有更强的增殖能力、迁移能力及中心记忆T细胞的形成(P<0.001),免疫抑制分子CTLA4与PD1显著降低(P<0.005),对肺癌细胞具有更强的杀伤能力(P<0.001),伴随IFN-γ数量明显增加(P<0.001)。IL-21-CCL19 CAR-T细胞杀伤肺癌细胞中产生大量细胞因子IL‑21(3152.33±526.74 pg/mL)和趋化因子CCL19(1853±211.95 pg/mL)。体内实验中,CAR-T细胞和普通T细胞比较,具有较强的杀伤能力和增殖能力,但2种CAR-T细胞无明显差异(P>0.05)。结论IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞更容易浸润到肿瘤内部,有效杀伤肿瘤细胞,同时产生更多的记忆T细胞。

关键词：肺癌 NKP30 嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞 IL-21 CCL19

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中性粒细胞/淋巴细胞比值联合随机血糖对脓毒症预测价值

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中华急诊医学杂志 2024年第5期33卷 636-642页

作者：余广炜林增杰涂福泉郑秋英项靖楠魏增玉吴文伟林晓红福建医科大学附属协和医院急诊科福州350001 福建省血管衰老重点实验室(福建医科大学) 福州350001 福建医科大学第一临床医学院福州350001

目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(ratio of neutrophil-lymphocyte,NLR)联合入院随机血糖对脓毒症患者血培养阳性的预测价值。方法采用单中心、回顾性队列研究方法,根据2016年美国危重病学会/欧洲危重病医学会脓毒症及脓毒性休克定义... 详细信息

目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(ratio of neutrophil-lymphocyte,NLR)联合入院随机血糖对脓毒症患者血培养阳性的预测价值。方法采用单中心、回顾性队列研究方法,根据2016年美国危重病学会/欧洲危重病医学会脓毒症及脓毒性休克定义及诊断标准3.0收集2019年1月至2021年12月福建医科大学附属协和医院急诊科连续收治的住院时间大于24 h的脓毒症患者。统计入院时的年龄、性别、序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)、感染来源、中心粒细胞与淋巴细胞比值及血培养结果等。依据血培养结果将患者分为血培养阳性组(革兰阳性组,革兰阴性组),血培养阴性组,比较组间各指标差异。采用多因素logistic回归分析血培养阳性的独立危险因素。利用受试者工作曲线(receiver operating characteristic,ROC)评价NLR联合入院随机血糖对脓毒症患者血培养阳性的预测价值。结果共纳入脓毒症患者265例,其中62例血培养阳性(革兰阳性患者15例,革兰阴性患者37例,真菌患者10例),血培养阳性率为23.4%。血培养阳性组的糖尿病史患者数、中性粒细胞计数、降钙素原、血糖和NLR高于血培养阴性组(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,入院随机血糖(OR=1.116,95%CI:1.051~1.186,P<0.001)及NLR(OR=1.039,95%CI:1.015~1.064,P=0.001)是脓毒症患者血培养阳性的独立危险因素。对血培养阳性组及革兰阴性菌血流感染患者,NLR联合入院血糖的AUC分别为0.819(95%CI:0.761~0.877,P<0.001)和0.871(95%CI:0.813~0.928,P<0.001)。结论NLR联合入院随机血糖对脓毒症患者血培养阳性和革兰阴性菌血流感染均具有预测价值。

关键词：血流感染血培养血糖中性粒细胞与淋巴细胞比值脓毒症

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基于检验数据和机器学习构建并验证术前肝细胞癌微血管浸润的预测模型

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中华检验医学杂志 2025年第1期48卷 65-75页

作者：于洲林丽金陈雅芝林天生欧启水黄金兰福建医科大学附属第一医院检验科、福建省检验医学重点实验室、福建医科大学基因诊断研究中心、福建省临床免疫学检验临床医学研究中心福州350005 福建医科大学第一临床医学院福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心检验科福州350212 福建医科大学省立临床医学院、福建省立医院、福州大学附属省立医院肝胆外科福州350001

目的利用机器学习方法,基于检验指标建立并验证术前肝细胞癌(HCC)微血管浸润(MVI)的预测模型。方法纳入2019年1月至2023年12月在福建医科大学附属第一医院经术后病理确诊为HCC的患者629例,将2019年1月至2022年12月患者纳入至训练集(n=46... 详细信息

目的利用机器学习方法,基于检验指标建立并验证术前肝细胞癌(HCC)微血管浸润(MVI)的预测模型。方法纳入2019年1月至2023年12月在福建医科大学附属第一医院经术后病理确诊为HCC的患者629例,将2019年1月至2022年12月患者纳入至训练集(n=464),将2023年1—12月患者纳入内部验证集(n=165)。2023年1—12月在福建省立医院经术后病理确诊为HCC的患者190例作为外部验证集。收集所有患者年龄、性别、肿瘤大小及术前检验指标,根据术后病理是否存在MVI分为MVI阳性组和MVI阴性组。在训练集中利用Boruta算法和LASSO回归筛选出2组间与结局变量相关的指标,随后应用多因素逻辑回归、决策树(DT)、随机森林(RF)、极度梯度提升(XGboost)、K近邻(KNN)、支持向量机(SVM)、轻量梯度提升(LGBM)和朴素贝叶斯(Naive Bayes)等8种机器学习算法构建模型,在训练集和内部验证集中通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,筛选出曲线下面积(AUC)最佳的模型,并在外部验证集中进一步验证预测效能。通过校准曲线和临床决策曲线分别评估模型预测值与真实值的符合程度及模型的临床受益程度。结果经过筛选最终纳入肿瘤大小、甲胎蛋白、异常凝血酶原、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、肌酐、载脂蛋白A1、总胆红素共8个指标用于构建HCC术前MVI预测模型。在应用8种机器学习方法在训练集中构建模型时,XGboost算法构建的模型预测MVI的AUC为0.820,内部验证集中AUC为0.803,外部验证集中为0.758。此外,XGboost模型预测乙型肝炎表面抗原阳性HCC患者术前MVI的AUC为0.817,预测男性、高龄患者术前MVI的AUC分别为0.779和0.790。校准曲线可见预概率值曲线与实际发生概率曲线较为接近,临床决策曲线说明其在0.3~0.8的阈值概率范围内应用,可获得净收益。结论基于XGboost方法联合8个检验指标构建了HCC患者术前MVI预测模型,具有较好的预测效能。

关键词：肝肿瘤肝细胞癌微血管浸润预测模型极度梯度提升机器学习

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复合性弥漫大B细胞淋巴瘤和CD5阴性套细胞淋巴瘤1例

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中华病理学杂志 2025年第4期54卷 397-399页

作者：李鑫静唐林波刘元英王晓江陈燕坪福建医科大学附属龙岩第一医院病理科龙岩364000 福建医科大学附属龙岩第一医院肿瘤放疗科龙岩364000 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院病理科福州350014

报道复合性弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)和CD5阴性套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)1例。患者男,83岁。乏力半个月、发热半天于2021年5月入院,行腹股沟淋巴结及骨髓活检。镜下观察,淋巴结结构完全破... 详细信息

报道复合性弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)和CD5阴性套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)1例。患者男,83岁。乏力半个月、发热半天于2021年5月入院,行腹股沟淋巴结及骨髓活检。镜下观察,淋巴结结构完全破坏,由2个区域构成,颜色稍浅区见片状异型大细胞,圆形或不规则形泡状核,可见突出的核仁,核分裂象易见,免疫组织化学呈CD20、PAX5、bcl-6、MUM1阳性,CD5、cyclin D1和SOX11阴性,诊断为DLBCL;颜色较深区淋巴样细胞大小一致,中等大小,核略不规则,无明显核仁,表达CD20、PAX5、cyclin D1和SOX11标志物,CD5、bcl-6和MUM1阴性,诊断为CD5阴性MCL。2个区域均可见散在EB病毒编码的RNA阳性细胞。荧光原位杂交(FISH)检测显示MCL呈CCND1基因重排阳性,DLBCL呈重排阴性。Ig基因重排检测提示2个区域肿瘤细胞具有相同的克隆峰。骨髓活检组织内见CD5阴性MCL累及。DLBCL合并CD5阴性MCL罕见,这种复合性淋巴瘤给诊断及治疗带来极大的挑战,通常需要完整切除病变淋巴结并应用包含CD5、Cyclin D1和SOX11的免疫组织化学组合才能明确诊断。治疗上尚无统一的标准,应同时考虑合并的不同淋巴瘤种类以制定最佳治疗方案。

关键词：泡状核骨髓活检弥漫大B细胞淋巴瘤

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基于微流控芯片式数字PCR乙型肝炎病毒RNA检测方法的构建与评价

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中华检验医学杂志 2025年第1期48卷 103-109页

作者：黄群芳谢如冰兰艳平荀振刘灿欧启水福建医科大学附属第一医院检验科、福建省检验医学重点实验室、福建医科大学基因诊断研究中心、福建省临床免疫学检验临床医学研究中心福州350005 福建医科大学第一临床医学院福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心检验科福州350212

目的建立基于微流控芯片式数字PCR(cdPCR)的乙型肝炎病毒(HBV)RNA检测方法,并评估其在慢性HBV感染者中的应用。方法选取福建医科大学附属第一医院的135例慢性HBV感染者,根据HBV DNA含量分为HBV DNA>100 IU/ml组(85例)和HBV DNA≤100 ... 详细信息

目的建立基于微流控芯片式数字PCR(cdPCR)的乙型肝炎病毒(HBV)RNA检测方法,并评估其在慢性HBV感染者中的应用。方法选取福建医科大学附属第一医院的135例慢性HBV感染者,根据HBV DNA含量分为HBV DNA>100 IU/ml组(85例)和HBV DNA≤100 IU/ml组(50例),同时选取健康体检者及其他病毒感染者作为对照组(15例)。设计HBV前C/C区特异性引物和探针,优化微流控cdPCR检测方法,并评估其线性范围、检出限、特异性及精密度。使用自建方法和2种市售试剂盒分别检测患者血清HBV RNA含量。采用Pearson相关性分析对HBV RNA与其他HBV标志物的关系进行评估。结果优化后自建微流控cdPCR方法的变性时间为10 s,退火/延伸温度为62℃,引物和探针浓度分别为0.3和0.2μmol/L。其线性范围为10^(3)~10^(7)拷贝/ml,检出限为10^(2)拷贝/ml,10^(4)和10^(7)拷贝/ml质粒标准品的批内变异系数(CV)分别为1.06%和0.82%,批间CV分别为0.75%和0.44%。特异性实验显示,其他病原体感染者和健康体检者的血清中均未检出阳性信号。自建微流控cdPCR方法在HBV DNA>100 IU/ml组的检出率为81.18%(69/85),高于市售试剂盒B的64.71%(55/85)(P<0.0167)。在HBV DNA≤100 IU/ml组中,3种方法的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。HBV RNA与HBV DNA、乙型肝炎表面抗原及乙型肝炎e抗原均呈正相关(r=0.67、0.53、0.44,P均<0.001)。结论成功建立了微流控cdPCR定量检测HBV RNA的方法,该方法灵敏、特异,且在低浓度病毒载量样本中也具有良好的检测能力。

关键词：聚合酶链反应微流控芯片式数字PCR 乙型肝炎病毒 RNA

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2021—2022年胸部手术后肺部炎症患者病原菌鉴定及其耐药性分析

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中国微生态学杂志 2024年第12期36卷 1459-1462页

作者：杨百华谢建忠施姗曹桥英林辉福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院胸部肿瘤放疗科福建福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院感染科福建中医药大学附属人民医院医学影像科福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院胸部肿瘤外科

目的鉴定导致患者胸部手术后肺部炎症的病原菌,测定其对常见抗菌药物的敏感性,为及时制定和调整抗感染治疗方案提供参考依据。方法以2021年1月至2022年12月在福建省肿瘤医院接受胸部手术后发生肺部炎症的患者为研究对象,无菌采集患者痰... 详细信息

目的鉴定导致患者胸部手术后肺部炎症的病原菌,测定其对常见抗菌药物的敏感性,为及时制定和调整抗感染治疗方案提供参考依据。方法以2021年1月至2022年12月在福建省肿瘤医院接受胸部手术后发生肺部炎症的患者为研究对象,无菌采集患者痰液或肺泡灌洗液样本进行病原体鉴定,采用Mueller-Hinton琼脂平板法和Kirby-Bauer纸片扩散法测定主要病原菌对常见抗菌药物的敏感性。结果累计分离到146株病原菌,其中革兰阳性菌5株(3.42%)、革兰阴性菌129株(88.36%)、真菌12株(8.22%)。革兰阴性菌中,肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌分别占31.01%、29.46%和17.83%。肺炎克雷伯菌对替加环素100.00%敏感,对呋喃妥因耐药率最高(57.60%);鲍曼不动杆菌对多黏菌素B 100.00%敏感,对氨曲南耐药率最高(86.84%);铜绿假单胞菌对阿米卡星和美罗培南耐药率最低,均为8.70%。结论革兰阴性菌是引发胸部手术后肺部炎症的主要病原菌,应加强胸部手术后肺部炎症患者抗菌药物耐药性的监测,加强检验科和临床科室之间的沟通,为合理选用抗生素提供更多依据。

关键词：致病菌耐药性肺部炎症胸部手术

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儿童糖尿病酮症酸中毒合并急性胰腺炎表现伴广泛性肠坏死1 例

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中华小儿外科杂志 2025年第3期46卷 256-259页

作者：谢斯琦刘兰李亚东庄小津雷英方一凡张炳福建省儿童医院(上海儿童医学中心福建医院) 福建医科大学妇儿临床医学院普外科/新生儿外科福州350003 福建省儿童医院(上海儿童医学中心福建医院) 福建医科大学妇儿临床医学院检验科福州350003 福建省儿童医院(上海儿童医学中心福建医院) 福建医科大学妇儿临床医学院病理科福州350003 福建省儿童医院(上海儿童医学中心福建医院) 福建医科大学妇儿临床医学院内分泌科福州350003

患儿女,11岁8个月,汉族,以“体重减轻1周,多饮2 d,加重伴意识障碍5 h”为代主诉,于2022年8月18日就诊于福建省儿童医院。1周前患儿无明显诱因出现体重下降,由近65 kg减轻至57 kg,家属代诉其平素喜甜食,不喜饮水,2 d前食入较多葡萄及6瓶2... 详细信息

患儿女,11岁8个月,汉族,以“体重减轻1周,多饮2 d,加重伴意识障碍5 h”为代主诉,于2022年8月18日就诊于福建省儿童医院。1周前患儿无明显诱因出现体重下降,由近65 kg减轻至57 kg,家属代诉其平素喜甜食,不喜饮水,2 d前食入较多葡萄及6瓶250 ml甜饮后出现多饮、口干。

关键词：急性胰腺炎儿童糖尿病酮症酸中毒肠坏死

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Chir99021调控Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠牙髓干细胞成骨诱导分化的机制

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解剖学报 2024年第1期55卷 67-72页

作者：谢惠兰方芳林毅福建省立医院口腔科福建医科大学省立临床医学院福州350000

目的探讨Chir99021对大鼠牙髓干细胞(DPSCs)成骨诱导分化的影响及机制。方法原代分离大鼠DPSCs,利用荧光免疫法进行验证。设置不同浓度的Chir99021,通过CCK-8检测细胞增殖情况挑选最适浓度。利用茜素红染色验证细胞成骨诱导分化。最后通... 详细信息

目的探讨Chir99021对大鼠牙髓干细胞(DPSCs)成骨诱导分化的影响及机制。方法原代分离大鼠DPSCs,利用荧光免疫法进行验证。设置不同浓度的Chir99021,通过CCK-8检测细胞增殖情况挑选最适浓度。利用茜素红染色验证细胞成骨诱导分化。最后通过Real-time PCR、Western blotting检测成骨诱导分化相关基因与蛋白无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、无翅型MMTV整合位点家族成员3A(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、轴抑制蛋白2抗体(Axin2)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的mRNA和蛋白表达情况。结果牙本质涎磷蛋白(DSPP)和干细胞标记物波形蛋白(vimentin)阳性表达,说明大鼠DPSCs分离成功。大鼠DPSCs成骨诱导后钙沉积物显著上升,加入糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的小分子抑制剂Chir99021后钙沉积物明显减少。大鼠DPSCs成骨诱导分化后Wnt1、Wnt3a、β-catenin、Axin2、OCN和DMP1表达明显上升,而加入Chir99021后Wnt1、Wnt3a、β-catenin、Axin2、OCN和DMP1蛋白表达均显著下降。结论Chir99021对诱导7 d后的大鼠DPSCs成骨诱导分化有一定的抑制作用。

关键词：牙髓干细胞成骨诱导分化 Chir99021 实时定量聚合酶链反应大鼠

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胰岛β细胞衰老与2型糖尿病的研究进展

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中华内分泌代谢杂志 2024年第8期40卷 705-709页

作者：郑瑶陈刚林纬福建医科大学省立临床医学院福建省立医院内分泌科福州350001

2型糖尿病是一种发病机制复杂,以胰岛素抵抗、β细胞数量减少与功能障碍为特征的疾病。细胞衰老是细胞应对各种应激刺激而发生永久性增殖阻滞的过程。本文对胰岛β细胞衰老与2型糖尿病的研究进展进行综述,以期对胰岛β细胞衰老的机制,2... 详细信息

2型糖尿病是一种发病机制复杂,以胰岛素抵抗、β细胞数量减少与功能障碍为特征的疾病。细胞衰老是细胞应对各种应激刺激而发生永久性增殖阻滞的过程。本文对胰岛β细胞衰老与2型糖尿病的研究进展进行综述,以期对胰岛β细胞衰老的机制,2型糖尿病中的β细胞功能障碍,以及靶向衰老机制的β细胞衰老与2型糖尿病的治疗策略有进一步了解。

关键词： β细胞衰老糖尿病,2型细胞再生去分化转分化

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不同预防策略对弥漫大B细胞淋巴瘤中枢复发的疗效分析

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中国实验血液学杂志 2024年第5期32卷 1401-1406页

作者：曲双廖丽昇郑艳彬王杰松何鸿鸣陈碧云孙红福建医科大学省立临床医学院福建省立医院血液科福建福州350001 福建省肿瘤医院淋巴瘤科福建福州350001 福建医科大学省立临床医学院福建省立医院药学部福建福州350001

目的:比较大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)和来那度胺作为不同的预防中枢神经系统(CNS)复发策略在初治弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的预防疗效。方法:回顾性分析福建省立医院和福建省肿瘤医院2012年1月-2022年6月初治CNS复发高风险的DLBCL患者资... 详细信息

目的:比较大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)和来那度胺作为不同的预防中枢神经系统(CNS)复发策略在初治弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的预防疗效。方法:回顾性分析福建省立医院和福建省肿瘤医院2012年1月-2022年6月初治CNS复发高风险的DLBCL患者资料,根据预防方案将患者分为HD-MTX组和来那度胺组。每组根据CNS-IPI评分和/或睾丸累犯将患者进一步分为高危组和中危组,评估不同治疗组及危险亚组CNS无复发生存率、治疗相关不良反应,以及不同预防策略对总生存率和无进展生存(PFS)率的影响。结果:CNS复发高风险DLBCL患者共200例其中HD-MTX组120例来那度胺组80例。根据HD-MTX预防时间的不同将HD-MTX组患者又分为诱导化疗结束后和化疗间歇期两组,两组分别80例和40例。中位随访48(14-133)个月,HD-MTX组和来那度胺组4年CNS无复发生存率分别93.6%和90.4%(P>0.05);4年PFS率分别为57.2%和69.4%(P>0.05),来那度胺组PFS有改善的趋势;4年总生存率分别为68.8%和75.6%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。进一步亚组分析显示,HD-MTX组和来那度胺组中的高危患者4年CNS无复发生存率分别为91.7%和83.4%(P>0.05),未显示出CNS复发风险差异;而4年PFS率分别为49.5%和64.2%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。HD-MTX组共收集248个周期进行不良反应分析,发生粒细胞减少伴感染有25个周期(占10.1%);来那度胺组在240个周期中有20个周期发生粒细胞减少伴感染(占8.3%),两组均未发生治疗相关死亡。结论:与HD-MTX相比,来那度胺联合免疫化疗在改善预后的同时可兼顾中枢预防是一种安全、耐受性良好的中枢预防策略。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤中枢神经系统预防

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