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第八届全国神经外科年会

作者：陈春美王锐杨卫忠石松生杨意堃陈琰陈靖房新蓉宋施委福建医科大学附属协和医院神经外科脊髓脊柱组福建省神经外科研究所

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中华实验外科杂志 2008年第4期25卷 471-473页

作者：石松生杨卫忠陈春美王春华易海波陈晓斌蔡冬生杨意堃福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所福州350001

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS）在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制。方法运用MACO法建立脑缺血模型，闭塞1h后分别经右侧... 详细信息

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS）在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制。方法运用MACO法建立脑缺血模型，闭塞1h后分别经右侧颈内动脉缓慢注入重组病毒载体（rAAV-AsnNOS、rAAV-AsiNOS和rAAV-LaeZ），继续闭塞大脑中动脉，每只转染病毒滴度为1×10^10个病毒颗粒／ml，并于分别缺血早期（缺血5h）和缺血晚期（缺血25h）时处死模型，流式细胞术（FCM）检测硝基酪氨酸（NT）阳性细胞百分比和细胞凋亡率，逆转录反应系统（RT-PCR）分析nNOS、iNOS，p38MAPK，Caspase-3 mRNA的表达。结果在脑缺血早期，rAAV-AsnNOS组的NT阳性百分比、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组的低均降低，差异有统计学意义；在脑缺血晚期，rAAV-AsiNOS组的NT阳性百分率、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组低，差异有统计学意义。结论在体内缺血动物模型中，rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS重组病毒载体能够分别在缺血早期和晚期通过抑制NOS表达，从而抑制p38MAPK和Caspase-3基因的表达，抑制缺血后神经细胞凋亡的发生。

关键词：脑缺血一氧化氮合酶脱噬作用重组腺相关病毒载体反义寡核苷酸类

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显微手术治疗血栓性脑动脉瘤(附21例报告)

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中国神经精神疾病杂志 2008年第9期34卷 557-558页

作者：杨卫忠石松生陈建屏倪天瑞陈春美王锐梁日生张国良曾涛陈阵任保刚谢海树宋施委福建省神经外科研究所福州350001 福建医科大学附属协和医院神经外科

目的探讨进一步提高血栓性脑动脉瘤的治疗效果。方法本组21例血栓性脑动脉瘤均在气管插管全麻下施行手术，行动脉瘤颈夹闭术7例，瘤颈塑形后夹闭12例，其中夹闭后切除动脉瘤16例。另2例行动脉瘤包裹加固术。结果全部病例手术结束后均即... 详细信息

目的探讨进一步提高血栓性脑动脉瘤的治疗效果。方法本组21例血栓性脑动脉瘤均在气管插管全麻下施行手术，行动脉瘤颈夹闭术7例，瘤颈塑形后夹闭12例，其中夹闭后切除动脉瘤16例。另2例行动脉瘤包裹加固术。结果全部病例手术结束后均即时清醒，术后偏瘫加重2例，24h后出现不同程度偏瘫4例，CT显示局部血管痉挛以致相应的局限性低密度灶，出院时均有明显的恢复。随访6～39个月，恢复良好17例，轻残3例，重残1例，无死亡。结论瘤颈央闭术仍是血栓性脑动脉瘤的最佳治疗方法，对有局部占位效应明最的巨大型血栓性动脉瘤，在不造成附加损伤的前提下应切开动脉瘤剥离出血栓或切除动脉瘤，以促进术后神经功能的恢复。

关键词：显微手术治疗血栓性脑动脉瘤

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NOS反义RNA重组腺相关病毒载体体内提高脑细胞耐缺血能力的实验研究

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中国神经精神疾病杂志 2008年第5期34卷 291-295页

作者：杨卫忠陈春美王春华石松生陈建屏黄勇蔡冬生福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所福州350001

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV—AsnNOS和rAAV-AsiNOS）提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制。方法应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗... 详细信息

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV—AsnNOS和rAAV-AsiNOS）提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制。方法应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗死侧的基底节区，转染病毒滴度为2×10^9mL～，并将SD大鼠分为4组：即rAAV-AsnNOS组，rAAV-AsiNOS组，rAAV—LacZ组和对照组；处理后运用MACO建立缺血模型，每组分为缺血早期和缺血晚期，流式细胞术（FCM）检测NT阳性细胞百分比和细胞凋亡率，逆转录反应系统（RT-PCR）分析nNOS、iNOS，p38MAPK，Caspase-3 mRNA的表达。结果一定剂量的重组病毒载体转染到大鼠海马区域，无神经损伤症状；转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血早期（缺血1～6h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV—AsiNOS组降低；转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血晚期（缺血24—72h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低，差异有统计学意义。结论转染重组病毒载体后动物模型脑神经细胞能够耐受缺血损伤，转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达，转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血晚期抑制iNOS、038MAPK和Caspase-3的表达，从而在缺血后抑制神经细胞凋亡的发生。

关键词：脑缺血一氧化氮合酶凋亡重组腺相关病毒载体

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VHL基因与家族性血管母细胞瘤研究进展

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国际神经病学神经外科学杂志 2008年第6期35卷 545-548页

作者：贾建文杨卫忠陈春美福建医科大学附属协和医院神经外科福建省协和医院神经外科研究所福建省福州市350001

希佩尔-林道病(von Hippel-Lindau disease,VHL)是一种常染色体显性遗传病,以发生多器官肿瘤为特征,家族性血管母细胞瘤是其在中枢神经系统的一种表现形式,它是由于VHL基因的突变引起的。VHL基因是一种重要的抑癌基因,它通过VHL蛋白(pV... 详细信息

希佩尔-林道病(von Hippel-Lindau disease,VHL)是一种常染色体显性遗传病,以发生多器官肿瘤为特征,家族性血管母细胞瘤是其在中枢神经系统的一种表现形式,它是由于VHL基因的突变引起的。VHL基因是一种重要的抑癌基因,它通过VHL蛋白(pVHL)对elonginABC的抑制作用来发挥对相关细胞生长基因的调控。VHL基因突变在家族性血管母细胞瘤中有很高的检出率,因而针对VHL基因的研究可能为家族性血管母细胞瘤的治疗带来新的思路及方法。

关键词： VHL基因缺氧诱导因子家族性血管母细胞瘤

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NOS、p38MAPK、Caspase-3介导大鼠脑缺血神经细胞凋亡可能通路的实验研究

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国际神经病学神经外科学杂志 2008年第2期35卷 107-111页

作者：陈春美杨卫忠王春华石松生易海波陈晓斌蔡冬生杨意堃福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所福建福州350001

目的探讨脑缺血后细胞凋亡发生的可能机制以及神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS），p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated proteinkinase p38．p38MAPK）和半光氨酸蛋白酶-3（caspase-3）在脑缺血后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法采用线栓法闭塞大鼠大脑中动脉（middle cerebral artery occlusion，MACO）建立脑缺血SD大鼠模型，应用透射电镜观察脑缺血对脑组织超微结构的影响，流式细胞仪方法（FCM）分别定量检测细胞凋亡率，半定量RT—PCR检测nNOS、iNOS，p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达水平。结果透视电镜下脑缺血6h出现核固缩，缺血12h出现细胞核分裂，缺血24h出现凋亡小体；FCM检测细胞凋亡百分率随着缺血时间延长而增加，缺血72h达到高峰，约70．37％；RT—PCR产物的琼脂糖凝胶电泳显示nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的特异性片段大小分别为501、342、250和342bp，但mRNA。表达量不一致，nNOSmRNA主要在缺血早期表达，iNOS，p38MAPK和Caspase-3 mRNA在缺血中晚期表达，并在缺血3～5d，后三种基因的表达量达到高峰。结论脑缺血区域发生典型的神经细胞凋亡现象，nNOS来源的NOS在缺血早期发挥神经毒性作用，INOS来源的NOS在缺血晚期发挥神经毒性作用；NOS，p38MAPK和Caspase-3三种基因的相互关系可能构成介导缺血神经细胞凋亡的通路之一。

关键词：脑缺血凋亡 NOS p38MAPK Caspase-3

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热休克因子1及多种热休克蛋白在人良性脑膜瘤中的表达

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中国临床神经外科杂志 2008年第11期13卷 661-663页

作者：王锐杨卫忠石松生王春华任宝刚陈春美福建医科大学附属协和医院神经外科福建福州350001 福建省神经外科研究所福建福州350001

目的探讨人良性脑膜瘤细胞中热休克因子1(HSF1)及热休克蛋白(HSP)HSP27、HSP70和HSP90的表达。方法应用免疫组化法和western blot法检测15例人脑膜瘤原代培养细胞中HSF1、HSP27、HSP70和HSP90蛋白的表达。结果15例人脑膜瘤中,HSF1蛋白... 详细信息

目的探讨人良性脑膜瘤细胞中热休克因子1(HSF1)及热休克蛋白(HSP)HSP27、HSP70和HSP90的表达。方法应用免疫组化法和western blot法检测15例人脑膜瘤原代培养细胞中HSF1、HSP27、HSP70和HSP90蛋白的表达。结果15例人脑膜瘤中,HSF1蛋白以单体形式存在(分子量为80kD左右),阳性率为100%(15/15),HSP27、HSP70和HSP90阳性率分别为40%(6/15)、46.7%(7/15)和53.3%(8/15)。结论人良性脑膜瘤存在HSF1蛋白表达,而HSP27、HSP70和HSP90组成型表达水平低。

关键词：脑膜瘤热休克蛋白热休克因子 western blot法免疫组织化学

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神经导航辅助显微外科手术切除颅内病变(附389例报告)

神经导航辅助显微外科手术切除颅内病变(附389例报告)

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第一届全国计算机辅助外科学术会议

作者：杨卫忠陈春美石松生张国良倪天瑞陈建屏梁日生福州福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所

目的探讨神经导航系统辅助显微手术切除颅内病变的应用.方法总结了2004年9月～2006年6月我科神经导航辅助显微外科手术切除颅内病变389例的导航定位准确性和临床疗效.结果 389例手术机显定位误差0.8～3.1mm,寻找病灶成功率100％;299... 详细信息

目的探讨神经导航系统辅助显微手术切除颅内病变的应用.方法总结了2004年9月～2006年6月我科神经导航辅助显微外科手术切除颅内病变389例的导航定位准确性和临床疗效.结果 389例手术机显定位误差0.8～3.1mm,寻找病灶成功率100％;299例脑肿瘤全切除279例,占93.3％,46例动脉瘤全部夹闭成功,脑AVM40例全切除,4例次全切除,术后均未出现严重并发症.结论神经导航系统在显微手术中定位准确,可以实时准确的指示术区的有关解剖结构,并引导手术操作,有效地减少了创伤,提高了手术疗效.

关键词：神经导航显微手术颅内病变

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一氧化氮和一氧化氮合酶在大鼠局灶性脑缺血中的表达特点

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中国神经精神疾病杂志 2007年第6期33卷 335-339页

作者：杨卫忠陈春美王春华石松生雷军荣张永亮福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所福州350001

目的建立脑缺血SD大鼠模型,探讨一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血模型中的表达特点。方法应用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,根据缺血不同时间分为8组,设立假手术组和正常对照组,每组各有6只大鼠。应用硝酸... 详细信息

目的建立脑缺血SD大鼠模型,探讨一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血模型中的表达特点。方法应用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,根据缺血不同时间分为8组,设立假手术组和正常对照组,每组各有6只大鼠。应用硝酸还原酶法测定脑组织NO的含量,流式细胞术(FCM)定量检测硝基酪氨酸(NT)表达,化学比色法测定脑组织NOS的活性,免疫组织化学方法定位检测eNOS、nNOS和iNOS表达位置,逆转录反应系统(RT-PCR)半定量分析eNOS、nNOS和iNOS的 mRNA在脑缺血区域的表达。结果神经功能缺失评分发现缺血时间越长,神经功能缺失越明显;脑组织中NO含量与缺血时间正相关;缺血1h后NT阳性细胞百分比开始明显升高(9.50%);缺血0.5h时NOS的活性开始升高,缺血3d达到高峰[0.94nmol/(***)];免疫组织化学提示eNOS在神经细胞和血管内皮细胞胞浆均有表达,nNOS和iNOS抗体主要在神经细胞胞浆中表达;RT-PCR半定量分析在缺血早期(0.5h^6h),随着缺血时间延长,eNOS和nNOS表达增加,iNOS未见表达或低表达;缺血中晚期(6h^5d),iNOS高表达,并与缺血时间呈正相关,eNOS和nNOS表达明显减少。结论脑缺血时间延长,NOS的活性升高,NO在体内特异性代谢产物NT量增加,神经功能缺失越明显;NOS在缺血早期以eNOS和nNOS为主,在缺血晚期以iNOS为主。

关键词：脑缺血一氧化氮内皮型一氧化氮合酶神经元型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶

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应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片筛选胶质瘤相关基因

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中华实验外科杂志 2007年第5期24卷 554-556页

作者：杨卫忠陈春美石松生王锐王春华倪天瑞陈建屏梁日生福建医科大学附属协和医院神经外科福建省神经外科研究所福州350001

目的应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片技术筛选胶质瘤相关基因。方法抽提5例胶质瘤和10例正常脑组织的总RNA并逆转录为cDNA,其中Cy5、Cy3的dNTP分别掺入胶质瘤和正常脑组织的cDNA,混合后杂交含22000个人类基因人类高密度Oligo基因芯片... 详细信息

目的应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片技术筛选胶质瘤相关基因。方法抽提5例胶质瘤和10例正常脑组织的总RNA并逆转录为cDNA,其中Cy5、Cy3的dNTP分别掺入胶质瘤和正常脑组织的cDNA,混合后杂交含22000个人类基因人类高密度Oligo基因芯片,经过洗片和扫描,获得荧光信号图像并用计算机分析,随机抽取3种差异表达基因用PCR验证它们胶质瘤和正常脑组织中的差异表达。结果从22000条基因中筛选出差异表达基因242条,其中123条表达上调,119条表达下调,包括细胞周期蛋白、细胞凋亡、细胞骨架和运动蛋白等相关基因。结论基因芯片技术的胶质瘤基因表达谱分析能够高通量筛选胶质瘤相关基因,并高效对基因功能进行研究,有助于认识肿瘤发病机制。

关键词：胶质瘤基因表达

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