检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1105-1110页

作者：徐建萍胡建达李静刘庭波林敏辉福建医科大学医学技术与工程学院检验系福建福州350004 福建医科大学附属协和医院血液病研究所、福建省血液病学重点实验室福建福州350001

本研究探讨stathmin1基因和蛋白在急性白血病初治、复发和缓解患者中的表达及其意义。应用FQ-PCR和Western blot检测25例正常人和76例急性白血病患者外周血细胞中stathmin1 mRNA和stathmin1蛋白的表达水平。结果显示,在正常人体内检测不... 详细信息

本研究探讨stathmin1基因和蛋白在急性白血病初治、复发和缓解患者中的表达及其意义。应用FQ-PCR和Western blot检测25例正常人和76例急性白血病患者外周血细胞中stathmin1 mRNA和stathmin1蛋白的表达水平。结果显示,在正常人体内检测不出stathmin1蛋白表达,其mRNA在正常人体内则低水平表达。急性白血病初治患者stathmin1 mRNA表达高于正常人(P<0.05),急性白血病复发者stathmin1 mRNA表达显著高于初治者(P<0.05),急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1 mRNA表达无显著差别(P>0.05)。急性白血病初治患者stathmin1蛋白表达的阳性率为89%,stathmin1蛋白在急性白血病患者缓解后表达明显下降或不表达,急性白血病复发者stathmin1蛋白表达与初治者无显著差别(P>0.05),急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1蛋白表达无显著差别(P>0.05)。结论:stathmin1蛋白和mRNA在急性白血病初治及复发患者体内高表达,而在缓解后体内仍有弱表达的患者,具有一定的复发风险,因此stathmin1可能成为判断微残留白血病的一个新的生物学指标。

关键词：急性白血病 stathmin1蛋白 stathmin1基因微残留白血病

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前言——老年人恶性血液病化疗的强度问题

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实用老年医学 2014年第6期28卷 443-443页

作者：陈志哲福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建医科大学附属协和医院

为什么要讨论老年人血液系统恶性肿瘤化疗的强度问题？这是因为：（1）某些血液肿瘤较多发生在老年人，比如多发性骨髓瘤（MM）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、急性髓性白血病（AML）。〉50％的AML患者年龄〉60岁，AML患者中位年龄是64岁... 详细信息

为什么要讨论老年人血液系统恶性肿瘤化疗的强度问题？这是因为：（1）某些血液肿瘤较多发生在老年人，比如多发性骨髓瘤（MM）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、急性髓性白血病（AML）。〉50％的AML患者年龄〉60岁，AML患者中位年龄是64岁，CLL初诊时〉85％的患者〉55岁，中位年龄为72岁。

关键词：恶性血液病肿瘤化疗老年人强度慢性淋巴细胞白血病多发性骨髓瘤急性髓性白血病患者年龄

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miR-20a海绵载体构建及在白血病细胞株Jurkat中的表达

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中国实验血液学杂志 2012年第5期20卷 1056-1062页

作者：吴顺泉徐珍珍林君战榕福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建医科大学附属协和医院

本研究构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立Jurkat-S稳定细胞株,为进一步研究的miR-20a功能及应用干扰技术治疗奠定基础。设计、合成1对含有2个重复针对miR-20a成熟序列第9-12碱基错配的序列,并带有酶切位点,退火后连接到pCDNA3.0-L表... 详细信息

本研究构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立Jurkat-S稳定细胞株,为进一步研究的miR-20a功能及应用干扰技术治疗奠定基础。设计、合成1对含有2个重复针对miR-20a成熟序列第9-12碱基错配的序列,并带有酶切位点,退火后连接到pCDNA3.0-L表达载体上;载体双酶切后再与退火产物连接,重复4次后进行酶切及荧光素酶活性鉴定;亚克隆到慢病毒表达载体,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染Jurkat细胞,建立稳定细胞株;应用实时PCR和Western blot技术分别检测Jurkat-S稳定细胞中P21及E2F1 mRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较。结果表明,成功构建了针对miR-20a基因的海绵载体,病毒滴度为5×107TU/ml;建立了稳定转染的Jurkat-S细胞株。有效干扰验证显示,miR-20a海绵能明显上调P21及E2F1的mRNA及蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立稳定干扰miR-20a表达的Jurkat-S细胞株。

关键词： miR-20a miRNA海绵 Jurkat细胞

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全反式维甲酸和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化前后微小RNA表达变化

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中华血液学杂志 2012年第7期33卷 546-551页

作者：吴勇李先芳杨景辉廖晓莹陈元仲福建医科大学协和医院福建省血液病研究所福建省血液学重点实验室福州350001

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化前后微小RNA（miRNA，miR）表达变化。方法采用全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）诱导APL细胞系NB4细胞分化，瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态，流式细胞术检测细胞表面标志CDllb的... 详细信息

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化前后微小RNA（miRNA，miR）表达变化。方法采用全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）诱导APL细胞系NB4细胞分化，瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态，流式细胞术检测细胞表面标志CDllb的表达，用实时定量lit-PCR检测miRNA表达谱miR-15b、miR-16、miR-34a、miR-107、miR-124a、miR-146、miR-155、miR-181a、miR-223、miR．342、let＇／c等miRNA的表达水平，用2法计算miRNA相对表达水平。收集15例APL初诊和15例APL缓解期患者骨髓单个核细胞（MNC），用RT-PCR检测MNCmiRNA的表达水平，用2法计算miRNA表达水平。结果ATRA作用NB4细胞96h，miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平均显著上调，分别为对照组的3．40、4．22、5．41、20．03和5．29倍，As203作用NB4细胞96h，miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平也显著上调，分别为对照组的3．62、2．49、2．58、4．27和1．94倍，除miR-15b外，ATRA处理组miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平上调程度均高于As：O，处理组，其中尤以miR-223为甚。ATRA和As。O，治疗后缓解期APL患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223和miR-342表达水平（2值）分别为0．4137、0．6367、0．1260、0．0522、0．6611和0．0280，而APL初诊患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223、miR-342表达水平分别为0．0751、0．2022、0．0425、0．3064、0．1733和0．0090，APL缓解期miR-15b、miR-16、miR．107、miR-223和miR．342表达水平高于APL初诊者（P值均〈0．05），而APL缓解期miR-181a表达水平低于APL初诊者（P〈0．05）。结论特定miRNA参与APL细胞分化过程。

关键词：细胞系,NtM 白血病,早幼粒细胞,急性细胞分化微小RNA

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Bmi-1 shRNA慢病毒表达载体的构建及稳转U266细胞株的建立

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中国实验血液学杂志 2012年第2期20卷 473-477页

作者：徐珍珍吴顺泉战榕福建省血液病学重点实验室福建省血液病研究所福建医科大学附属协和医院

本研究构建Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,建立U266-li稳定细胞株,为下一步Bmi-1的功能研究及应用RNAi技术治疗打下基础。设计、合成1对针对Bmi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,... 详细信息

本研究构建Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,建立U266-li稳定细胞株,为下一步Bmi-1的功能研究及应用RNAi技术治疗打下基础。设计、合成1对针对Bmi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染U266细胞,建立稳定细胞株;应用实时PCR和Western blot技术分别检测U266稳定细胞中Bmi-1及P14 mRNA和蛋白水平的表达,并与对照组进行比较。结果表明,成功构建了针对Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,病毒滴度为5×107 TU/ml;建立稳定转染的U266细胞株。有效干扰验证显示,shBmi-1能明显降低Bmi-1的mRNA及蛋白水平,而P14的mRNA及蛋白水平则都上调,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定干扰Bmi-1表达的U266细胞株。

关键词： Bmi-1基因 RNA干扰 U266细胞

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老年急性髓系白血病诱导缓解化疗的疗效及预后分析

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中华血液学杂志 2012年第2期33卷 79-83页

作者：郑志海胡建达刘庭波陈鑫基李静陈步远郑晓云福建医科大学附属协和医院血液科福州350001 福建省血液病研究所福州350001 福建省血液病学重点实验室福州350001

目的探讨老年急性髓系白血病（AML）诱导缓解化疗的疗效及预后。方法回顾性分析2003年1月至2010年7月收治的156例年龄≥60岁AML患者的临床资料，其中104例接受以阿糖胞苷为基础的诱导缓解化疗方案，包括DA方案、IA方案、CAG方案，52例... 详细信息

目的探讨老年急性髓系白血病（AML）诱导缓解化疗的疗效及预后。方法回顾性分析2003年1月至2010年7月收治的156例年龄≥60岁AML患者的临床资料，其中104例接受以阿糖胞苷为基础的诱导缓解化疗方案，包括DA方案、IA方案、CAG方案，52例接受姑息治疗。比较接受诱导缓解化疗与姑息治疗患者的预后差异，并对患者预后因素进行单因素和多因素分析。结果145例（93％）患者获得随访，其中接受诱导缓解化疗组96例，姑息治疗组49例，中位生存期分别为316d和37d，两者差异具有统计学意义（P〈0．01）。未接受诱导缓解化疗、入院时白细胞计数高（≥100×10^9／L）、高危核型、Charlson合并症指数（CCI）评分≥2均是影响预后的独立危险因素。结论诱导缓解化疗可改善老年AML患者的预后，延长中位生存期。未接受诱导缓解化疗、具有高白细胞计数（≥100×10’／L）、高危核型、CCI评分≥2的患者预后不良。

关键词：白血病髓细胞性急性老年人诱导化疗预后

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黄芩苷对高致瘤HL-60细胞裸鼠移植瘤模型的体内抑瘤作用和机制探讨

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中国实验血液学杂志 2012年第5期20卷 1066-1071页

作者：郑静胡建达黄毅陈英玉李静陈步远福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建医科大学附属协和医院福建省立医院福建福州350001

本研究旨在探讨黄芩苷对高致瘤人白血病HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的体内抑瘤作用及其作用机制。制备高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为6组:阴性对照组(注射5%NaHCO3),黄芩苷25、50和100 mg/kg剂量组,联合用药组(黄芩... 详细信息

本研究旨在探讨黄芩苷对高致瘤人白血病HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的体内抑瘤作用及其作用机制。制备高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为6组:阴性对照组(注射5%NaHCO3),黄芩苷25、50和100 mg/kg剂量组,联合用药组(黄芩苷50 mg/kg+VP16 2 mg/kg)和VP16 4 mg/kg阳性对照组,每组10只裸鼠。采用腹腔注射方式给药,14 d后每组处死5只裸鼠,对剥取的瘤块称重计算抑瘤率;通过电子显微镜观察瘤组织超微结构,病理组织学观察裸鼠各主要脏器结构改变,瘤块组织蛋白检测信号转导通路指标。观察裸鼠生存时间。结果表明,黄芩苷可抑制裸鼠HL-60细胞皮下移植瘤的生长,呈剂量依赖性。瘤组织病理组织学和透射电子显微镜检查结果显示,黄芩苷组和联合用药组的肿瘤坏死和细胞凋亡现象较阴性对照组多见。黄芩苷可能通过抑制Akt活性,下调p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达来抑制裸鼠异种移植瘤的增长。联合用药组裸鼠中位生存时间明显长于阴性对照组(P<0.05)。结论:黄芩苷可抑制高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的生长,诱导瘤组织中HL-60细胞的凋亡,其机制之一可能与抑制Akt活性并下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关;黄芩苷与VP16联用可明显提高荷瘤裸鼠的中位生存期,具有协同抗高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的作用。

关键词：黄芩苷 HL-60细胞移植瘤模型 PI3K/Akt信号通路 BABL/c裸鼠

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直接接触骨髓基质HS-5细胞可降低HEL细胞对药物的敏感性

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中国实验血液学杂志 2012年第4期20卷 818-822页

作者：黄慧芳陆荣陈萍林振兴吴勇陈元仲福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建福州350001

本研究探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制。采用人急性红白血病HEL细胞株与HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围的造血微环境,应用CCK-8法检测HEL细胞对Ara-C,DNR,VP16,MTX等化疗药物... 详细信息

本研究探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制。采用人急性红白血病HEL细胞株与HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围的造血微环境,应用CCK-8法检测HEL细胞对Ara-C,DNR,VP16,MTX等化疗药物的敏感性,流式细胞术检测HEL细胞周期时相分布,实时RT-PCR方法检测p19、p21、p27、MDR1、ABCG2、Bcl-2等基因的mRNA表达,Western blot方法检测p-AktSer473、p-GSK3βSer9、p-STAT3Tyr705、Bcl-2、cleaved-Notch1V1754及Hes1等蛋白表达。结果表明,与HS-5细胞共培养后的HEL细胞对4种化疗药物的敏感性均显著降低。在共培养24 h时,HEL细胞阻滞于G0/G1期,G0/G1期的细胞比例明显增多。PCR结果显示,p21基因的转录水平随着共培养时间的延长逐渐上调;p19基因的mRNA水平在12 h时明显下调,随后又恢复;其它基因的改变均无统计学意义。Western blot结果表明,共培养后HEL细胞的p-AktSer473、p-GSK3βSer9、cleaved-Notch1V1754蛋白及Bcl-2蛋白表达上调,Hes1蛋白表达下调,p-STAT3Tyr705表达无明显变化。结论:直接接触骨髓基质HS-5细胞可增强HEL细胞对化疗药物的抵抗作用。

关键词：白血病骨髓基质HS-5细胞 HEL细胞药物敏感性

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全反式维甲酸与三氧化二砷对NB4细胞CD44v6表达的调节

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中国实验血液学杂志 2012年第1期20卷 33-37页

作者：黄慧芳陈萍陆荣林振兴吴勇陈元仲福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建福州350001

黏附分子CD44v6与急性髓系白血病(AML)疾病进展密切相关。本研究探讨全反式维甲酸(ATRA)及三氧化二砷(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞CD44v6及其相关的PI3K/Akt信号通路的影响。应用显微镜观察检查和流式细胞术检测NB4细胞... 详细信息

黏附分子CD44v6与急性髓系白血病(AML)疾病进展密切相关。本研究探讨全反式维甲酸(ATRA)及三氧化二砷(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞CD44v6及其相关的PI3K/Akt信号通路的影响。应用显微镜观察检查和流式细胞术检测NB4细胞的分化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染色流式细胞术检测NB4细胞凋亡;实时RT-PCR检测NB4细胞CD44v6 mRNA的表达;Western blot检测NB4细胞CD44v6蛋白的表达及PI3K/Akt信号通路的变化。结果显示:在ATRA诱导NB4细胞分化过程中,CD44v6的转录明显受抑制,但CD44v6蛋白表达无明显增减,PI3K/Akt信号通路被激活。在As2O3诱导NB4细胞凋亡过程中,CD44v6的转录水平及蛋白表达均明显下调,PI3K/Akt信号通路受抑。结论:ATRA与As2O3对NB4细胞CD44v6表达的影响不同。此研究结果为从干预白血病细胞和造血微环境相互关联角度进一步揭示ATRA和As2O3的作用机制奠定了实验基础。

关键词：全反式维甲酸三氧化二砷 CD44v6 NB4细胞造血微环境

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Hippo信号通路核心元件MST1在急性白血病患者中的表达及意义

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中国实验血液学杂志 2012年第3期20卷 527-530页

作者：谢水玲沈建箴付海英吴淡森王小婷曹登敏福建医科大学附属协和医院血液科福建省血液病研究所福建省重点实验室

本研究旨在探讨Hippo信号通路核心元件MST1基因在急性白血病患者中的表达情况及其与白血病发生、发展的关系。采用实时定量PCR检测50例初治急性白血病患者、33例正常人、23例完全缓解缓解患者及12例难治/复发患者的MST1基因的表达情况,... 详细信息

本研究旨在探讨Hippo信号通路核心元件MST1基因在急性白血病患者中的表达情况及其与白血病发生、发展的关系。采用实时定量PCR检测50例初治急性白血病患者、33例正常人、23例完全缓解缓解患者及12例难治/复发患者的MST1基因的表达情况,采用Western blot进一步验证其蛋白的表达水平,结合临床资料对患者的预后因素进行分析。结果表明,与正常人相比,急性白血病初治患者MST1基因的表达水平明显减低(P<0.05),完全缓解前后差异有统计学意义(P<0.05),难治/复发患者与初治患者MST1基因表达水平无明显差异(P>0.05),完全缓解患者与正常人MST1表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:MST1基因的低表达与急性白血病的发病及预后相关。

关键词：急性白血病 MST1基因 Hippo信号通路

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