检索结果-内蒙古大学图书馆

福建师范大学学报（自然科学版） 2019年第2期35卷 89-96页

作者：刘逸煊刘家伶郭凯黄敏黄鹭强彭家礼陈由强苏经迁福建师范大学南方生物医学研究中心福建福州350117 福建师范大学生命科学学院福建福州350117 福建省天然免疫生物学重点实验室福建福州350117 福建师范大学南方海洋研究院福建福州350117 福建省微藻物质改良工程技术研究中心福建福州350117 台湾海洋大学海洋生物研究所台湾台北20224

通过已构建的THP1-Lucia/NF-κB细胞筛选系统,对岩藻黄素、虾青素、β-胡萝卜素和玉米黄质等4种海洋来源的类胡罗卜素化合物进行抗炎活性筛选,结果发现岩藻黄素具有良好的抗炎活性.在此基础,进一步研究岩藻黄素对NF-κB信号通路的调控机... 详细信息

通过已构建的THP1-Lucia/NF-κB细胞筛选系统,对岩藻黄素、虾青素、β-胡萝卜素和玉米黄质等4种海洋来源的类胡罗卜素化合物进行抗炎活性筛选,结果发现岩藻黄素具有良好的抗炎活性.在此基础,进一步研究岩藻黄素对NF-κB信号通路的调控机制,结果揭示了岩藻黄素能通过抑制IκB-α的细胞质降解和NF-κB蛋白的磷酸化,进而抑制由LPS诱导的细胞炎症因子的产生,从而达到抗炎效果.

关键词：类胡萝卜素岩藻黄素 LPS 抗炎活性 NF-κB

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CRISPR/Cas9介导的酿酒酵母ADH2基因中断及反义RNA干扰GPD1的表达

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现代食品科技 2018年第10期34卷 64-71页

作者：刘奎梁丽敏李振辉叶浩盈潘艳飞何文锦陈由强薛婷福建师范大学海洋生物医药与制品产业化开发技术公共服务平台福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心福建福州350117

CRISPR/Cas9是一个简单、高效的用于靶向目的基因和无标记的基因组工程的工具。本文通过构建酿酒酵母沉默组件PGK-SGPD1-CYC1,使甘油-3-磷酸脱氢酶I(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPD1)基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域... 详细信息

CRISPR/Cas9是一个简单、高效的用于靶向目的基因和无标记的基因组工程的工具。本文通过构建酿酒酵母沉默组件PGK-SGPD1-CYC1,使甘油-3-磷酸脱氢酶I(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPD1)基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在中断乙醇脱氢酶Ⅱ(alcohol dehydrogenase Ⅱ,ADH2)基因的同时,定点敲入GPD1基因的反义干扰组件,从而特定地干扰GPD1的表达。采用高效的酵母化学转化法将反应组件敲入酿酒酵母Y1H中,CRISPR/Cas9介导的同源重组效率达43.48%,由此获得了ADH2基因中断和GPD1反义干扰的酿酒酵母突变株。发酵实验结果表明,酿酒酵母突变菌株SG1-1与出发菌株Y1H相比,乙醇产率提高了9.07%,甘油产率下降了12.05%,乙酸产率下降了12.30%,结果表明通过中断ADH2基因及插入GPD1反义干扰组件,既能够中断ADH2基因的功能,减少乙醇转化为乙醛,同时也能在一定程度上干扰GPD1基因的表达,提高乙醇产率。

关键词：酿酒酵母中断乙醇脱氢酶Ⅱ基因中断甘油-3-磷酸脱氢酶Ⅰ

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三角褐指藻PtCryP基因的克隆及敲除载体构建

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福建轻纺 2019年第12期 8-16页

作者：赵靖悦龚林雷娜娜陈由强何文锦福建师范大学生命科学学院海洋生物医药与制品产业化开发技术公共服务平台福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心

文章旨在获得三角褐指藻中隐花色素PtCryP的全长序列并进行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系统的pKS diaCas-sgRNA质粒,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了三角褐指的敲除载体,并通过DNA测序确定插入了sgRNA序列。PtCry... 详细信息

文章旨在获得三角褐指藻中隐花色素PtCryP的全长序列并进行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系统的pKS diaCas-sgRNA质粒,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了三角褐指的敲除载体,并通过DNA测序确定插入了sgRNA序列。PtCryP基因的开放阅读框全长为1575 bp,编码524个氨基酸,预测的等电点8.30,理论分子量58.98 kD。通过结构域分析,隐花色素蛋白的典型结构域存在于PtCryP蛋白中。本研究首次构建了三角褐指藻PtCryP的CRISPR/Cas9敲除载体,为下一步三角褐指藻CryP的表达和功能研究奠定基础。

关键词：三角褐指藻 PtCryP基因生物信息学分析 CRISPR/Cas9

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利用研磨仪快速提取基因组DNA用于PCR

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生物技术通讯 2019年第5期30卷 668-673页

作者：胡荣飞陈璐瑶张小妮吴均坚何文锦陈由强薛婷福建师范大学生命科学学院海洋生物医药与制品产业化开发技术公共服务平台福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心

目的:采用机械法破碎细胞壁释放DNA,以达到快速用于PCR的目的。方法:用全自动研磨仪破碎细胞,设计16个频率和时间的组合,探究不同研磨频率和研磨时间的组合对DNA提取的影响,并将每个组合提取的DNA进行PCR。同时,利用研磨仪结合液氮进行... 详细信息

目的:采用机械法破碎细胞壁释放DNA,以达到快速用于PCR的目的。方法:用全自动研磨仪破碎细胞,设计16个频率和时间的组合,探究不同研磨频率和研磨时间的组合对DNA提取的影响,并将每个组合提取的DNA进行PCR。同时,利用研磨仪结合液氮进行研磨,以此来提取完整的基因组DNA。结果:不同的研磨频率和研磨时间的组合提取的DNA经PCR扩增后,均能得到目的条带。综合考虑选出DNA快速提取的最佳组合为研磨频率60 Hz,研磨2 min。直接研磨不能提取出完整的基因组DNA,若利用研磨仪结合液氮进行研磨,则可以快速提取出完整的基因组DNA,研磨条件为40 Hz,研磨2 min。在茂源链霉菌、三角褐指藻和酿酒酵母中利用研磨仪研磨法快速提取的DNA均实现了目的片段的扩增,最后用该方法提取的DNA在茂源链霉菌中实现了4023 bp较大片段的扩增。结论:建立了快速提取DNA用于PCR的方法,该方法在茂源链霉菌、三角褐指藻和酿酒酵母中均取得成功,证明该方法具有普遍的适用性,该方法提取的DNA也适用于较大目的片段的PCR实验。

关键词：研磨仪研磨 DNA快速提取 PCR 茂源链霉菌三角褐指藻酿酒酵母

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三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因克隆、过表达载体构建及生物信息学分析

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福建农业科技 2019年第9期50卷 1-7页

作者：雷娜娜叶浩盈赵靖悦龚林胡荣飞何文锦陈由强薛婷福建师范大学生命科学学院海洋生物医药与制品产业化开发技术公共服务平台福建福州350117 福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心福建福州350117

通过RT-PCR的方法克隆三角褐指藻的△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA序列,利用双酶切技术构建重组表达载体,并对该基因进行相关的生物信息学分析。结果表明:三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA全长为834 bp,编码278个氨基酸,预测的等电点... 详细信息

通过RT-PCR的方法克隆三角褐指藻的△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA序列,利用双酶切技术构建重组表达载体,并对该基因进行相关的生物信息学分析。结果表明:三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA全长为834 bp,编码278个氨基酸,预测的等电点为9-13,理论分子量32348-91。△5-脂肪酸延长酶基因中存在1个内含子,该酶属于ELO系列延长酶,可能定位于内质网中,包含多个跨膜区域和保守区域。亲缘关系分析表明,三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶与假微型海链藻的亲缘关系最近。试验还成功构建了三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因过表达重组质粒pPha-T1-5e,为下一步三角褐指藻中相关油脂代谢基因的表达和功能验证奠定基础。

关键词：三角褐指藻 △5-脂肪酸延长酶克隆生物信息学分析载体构建

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