检索结果-内蒙古大学图书馆

东南园艺 2023年第1期11卷 1-6页

作者：周平岳晶晶颜少宾郭瑞金光福建省农业科学院果树研究所/福建省落叶果树工程技术研究中心福建福州350013 福建农林大学基因组与生物技术中心/福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室/作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室福建福州350002

镁离子转运蛋白(Magnesium transporter,MGT)是植物体内镁离子吸收运输的重要转运子。为系统研究番木瓜MGT家族(CpMGTs)特征,鉴定了基因家族成员并分析其蛋白特征和基因转录模式。结果表明番木瓜基因组含5个CpMGT家族成员(CpMGTa-CpMGT... 详细信息

镁离子转运蛋白(Magnesium transporter,MGT)是植物体内镁离子吸收运输的重要转运子。为系统研究番木瓜MGT家族(CpMGTs)特征,鉴定了基因家族成员并分析其蛋白特征和基因转录模式。结果表明番木瓜基因组含5个CpMGT家族成员(CpMGTa-CpMGTe),氨基酸数387~491个,分子量43.95~54.84 KD,定位于细胞核、细胞质、叶绿体、过氧化物酶体等亚细胞结构。基于转录组测序,发现CpMGTs的表达具有组织特异性,成熟叶、幼花与根器官中优势表达的CpMGT不同。根、花器官中CpMGTc表达具有性别差异性;CpMGTb和CpMGTd跨季节转录变化在雌雄番木瓜幼花中也存在特定差别。这些发现揭示CpMGTs表达模式及性别差异性表达特征,为研究基因功能奠定基础。

关键词：番木瓜镁离子转运蛋白表达性别

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CRISPR/Cas9编辑Badh2基因改良优质粳稻品种香味性状

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福建农业学报 2020年第5期35卷 465-473页

作者：吴明基林艳刘华清付艳萍宋亚娜王锋福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

【目的】利用基因编辑技术编辑水稻香味基因,改良优质粳稻香味性状。【方法】构建CRISPR/Cas9-BADH基因编辑载体,转化优质粳稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134,测序鉴定3个优质粳稻品种的香味基因Betaine aldehyde dehydrogenase 2(Badh2)... 详细信息

【目的】利用基因编辑技术编辑水稻香味基因,改良优质粳稻香味性状。【方法】构建CRISPR/Cas9-BADH基因编辑载体,转化优质粳稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134,测序鉴定3个优质粳稻品种的香味基因Betaine aldehyde dehydrogenase 2(Badh2)突变体并分析潜在脱靶效应,利用气相色谱-质谱联用技术测定不同遗传背景badh2突变体稻米的2-乙酰-1-吡咯啉(2-acetyl-1-pyrroline,2AP)含量。【结果】转化获得的30株T0代中有24株为badh2突变体,其中53.33%为杂合型突变,16.67%为纯合型突变,10%为双等位突变类型。T1代非转基因植株内共鉴定获得7种纯合badh2突变基因型。在5个预测位置上未检测到脱靶事件的发生,说明设计的sgRNA具有高度特异性。所有Badh2移码突变体稻米的2AP含量都达到或高于稻花香的水平,但不同品种来源的badh2突变体间2AP含量差异极显著。【结论】本研究提供了一个能够高效诱导水稻Badh2突变的CRISPR/Cas9定向编辑靶点,改良了生产上大面积推广的3个优质水稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134的香味性状,发现了不同遗传背景的水稻badh2突变体间2AP含量差异显著,为基于定向编辑Badh2基因的方法培育适合生产应用的香稻品种、提高育种效率提供科学依据。

关键词：水稻香味 Badh2 CRISP/CAS9 2-乙酰-1-吡咯啉

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OsTZF9基因过量表达调控水稻多种生长发育表型

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福建农业科技 2021年第11期52卷 1-6页

作者：周淑芬刘宝张迪福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

RRTZF基因在植物的生长发育和逆境胁迫中起着重要作用。OsTZF9基因是水稻RRTZF基因家族的一员,为分析OsTZF9基因的生物学功能,构建了由Ubiqutin启动子驱动的植物过表达载体pCXUN-TZF9,通过农杆菌介导法获得了转基因再生植株6个克隆。进... 详细信息

RRTZF基因在植物的生长发育和逆境胁迫中起着重要作用。OsTZF9基因是水稻RRTZF基因家族的一员,为分析OsTZF9基因的生物学功能,构建了由Ubiqutin启动子驱动的植物过表达载体pCXUN-TZF9,通过农杆菌介导法获得了转基因再生植株6个克隆。进一步分析转基因植株后代的表型发现,与野生型日本晴相比,OsTZF9基因过表达植株的株高、分糵数、有效穗数、穗长和千粒重均下降;与转基因阴性分离株相比,OsTZF9基因过表达植株抽穗期推迟。

关键词：水稻 OsTZF9基因过量表达表型分析

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水稻OsBI-1L-8基因启动子功能分析

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福建农业学报 2020年第5期35卷 474-479页

作者：陈睿于法科李清贤单贞福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

【目的】分析水稻OsBI-1L-8基因启动子的结构与功能,解析OsBI-1L-8基因的表达特性及生物学功能,进一步了解OsBI-1L家族在水稻生命进程中的作用机理。【方法】利用BDGP、Softberry及Promoter 2.0预测分析水稻OsBI-1L-8启动子大小,以日本... 详细信息

【目的】分析水稻OsBI-1L-8基因启动子的结构与功能,解析OsBI-1L-8基因的表达特性及生物学功能,进一步了解OsBI-1L家族在水稻生命进程中的作用机理。【方法】利用BDGP、Softberry及Promoter 2.0预测分析水稻OsBI-1L-8启动子大小,以日本晴基因DNA为模板扩增pOsBI-1L-8,PlantCARE分析序列中顺序调控元件。构建pOsBI-1L-8::GUS载体,导入水稻,组织化学染色法检测pOsBI-1L-8在水稻中的时空表达特征。【结果】通过预测分析并克隆pOsBI-1L-8长度为1258 bp,该区域含有光信号、缺氧胁迫应答及激素调节等顺式作用元件。pOsBI-1L-8驱动的GUS报告基因仅表达于水稻抽穗期的茎结合部位、根茎过渡区和雄蕊。【结论】pOsBI-1L-8为组织特异型启动子,推测OsBI-1L-8可能在水稻生长及雄蕊发育中起重要作用。

关键词：水稻 OsBI-1L-8 启动子表达特征 GUS活性

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水稻胚特异表达基因Os08PTS启动子的克隆及分析

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福建农业科技 2021年第3期52卷 6-10页

作者：颜静宛林智敏周淑芬陈子强福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

为分析编码磷脂酰肌醇转移蛋白基因Os08PTS在水稻种子发育中的功能及利用Os08PTS启动子进行遗传改良。依据T-DNA插入位点信息,克隆Os08PTS基因启动子,并利用生物信息学手段分析Os08PTS启动子的顺式作用元件特征,同时构建启动子与GUS融... 详细信息

为分析编码磷脂酰肌醇转移蛋白基因Os08PTS在水稻种子发育中的功能及利用Os08PTS启动子进行遗传改良。依据T-DNA插入位点信息,克隆Os08PTS基因启动子,并利用生物信息学手段分析Os08PTS启动子的顺式作用元件特征,同时构建启动子与GUS融合表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因植株,验证启动子的表达特征。结果表明:Os08PTS基因启动子片段中包含启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box,以及光调控元件、赤霉素应答元件、生长素反应元件、参与防御和应激反应相关元件等多个与生长发育或者逆境胁迫相关的顺式作用元件,还含有与分生组织表达以及胚乳表达相关元件等。进一步构建Os08PTS启动子的GUS融合载体,并获得水稻遗传转化植株。Os08PTS启动子序列能够驱动Os08PTS基因在水稻茎和种子胚的表达,该启动子具有驱动下游基因转录的活性。

关键词：水稻启动子 GUS染色

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植物乳杆菌R23胞内抗氧化酶高效提取与保存技术研究

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福建农业科技 2022年第3期53卷 1-6页

作者：任香芸何志刚林晓姿李维新梁璋成汪媛媛福建省农业科学院农业工程技术研究所福建福州350003 福建省农产品(食品)加工重点实验室福建福州350013 福建西陇生物技术有限公司福建福州350015

为获得植物乳杆菌R23高活力胞内抗氧化酶,以蛋白质含量、菌量和超氧化物歧化酶(SOD)活力为主要指标,对该菌胞内抗氧化酶提取、保存等技术进行研究。结果表明,超声波法可有效破碎植物乳杆菌R23菌体细胞并保持理想的酶活力,在功率400 W、... 详细信息

为获得植物乳杆菌R23高活力胞内抗氧化酶,以蛋白质含量、菌量和超氧化物歧化酶(SOD)活力为主要指标,对该菌胞内抗氧化酶提取、保存等技术进行研究。结果表明,超声波法可有效破碎植物乳杆菌R23菌体细胞并保持理想的酶活力,在功率400 W、工作总时间20 min和变幅杆φ2 mm时,获得的蛋白质含量较高且SOD活力最大(47.06 U·g^(-1));酶提取液在4℃冷藏12 h或-20℃冻藏24 h均有利于保持酶活力。有无二氧化硫胁迫下植物乳杆菌R23生长量均与蛋白质含量变化相对应,因此可用蛋白质含量指示菌体生长量,用于胞内抗氧化酶活力的计算。

关键词：植物乳杆菌细胞破碎抗氧化酶菌量蛋白质含量

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水稻arf1基因3′-UTR片段的克隆和验证

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应用与环境生物学报 2019年第2期25卷 414-419页

作者：苏军管其龙陈子强陈在杰福建省农业科学院生物技术研究所福建省农业遗传工程重点实验室福州350003

终止子是一段位于基因编码之后的序列,作为一种调控信号调控DNA的转录终止和RNA的释放,在基因工程技术应用中通常被构建在目的基因下游,用以调控基因的转录和表达.现有常用的终止子很少,克隆和验证新的终止子是植物基因工程技术发展的需... 详细信息

终止子是一段位于基因编码之后的序列,作为一种调控信号调控DNA的转录终止和RNA的释放,在基因工程技术应用中通常被构建在目的基因下游,用以调控基因的转录和表达.现有常用的终止子很少,克隆和验证新的终止子是植物基因工程技术发展的需要.通过生物信息学分析和Realtime-PCR表达验证,筛选出候选基因腺苷酸核糖基化作用因子(Similar to ADP-ribosylation factor1,arf1)基因,克隆了水稻arf1基因3′-UTR.结果显示,所克隆3′-UTR片段含有8个多聚信号元件和4个UE片段.将3′-UTR与gus基因融合后分别与玉米泛素启动子Ubiquitin和花椰菜花叶病毒(CaMV)启动子35S连接构建植物表达载体验证3′-UTR调控表达效果.烟草瞬时表达显示3′-UTR融合的gus基因在35S和Ubi启动子驱动下,在烟草叶片中能正常表达;3′-UTR调控下的gus基因在水稻根、茎、叶、花和种子中均可稳定表达,且表达量与T-Nos终止子相当.本研究表明所克隆的3′-UTR可替代T-nos终止子,可为植物基因工程技术的应用提供新的调控元件.(图5表3参29)

关键词：水稻 3′-UTR 终止子克隆表达

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水稻温敏雄性不育突变体mh86s的鉴定及基因克隆

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福建农业科技 2020年第1期51卷 1-5页

作者：杨绍华刘华清王锋福建省农业遗传工程重点实验室/福建省农业科学院生物技术研究所

光/温敏核雄性不育基因在水稻杂种优势利用中发挥着重要作用。发掘光/温敏核雄性不育突变体及其基因有助于更好地了解水稻中光/温敏核雄性不育的机制并丰富遗传资源。本研究在籼稻材料明恢86的转基因后代中鉴定了1个雄性不育突变体,该... 详细信息

光/温敏核雄性不育基因在水稻杂种优势利用中发挥着重要作用。发掘光/温敏核雄性不育突变体及其基因有助于更好地了解水稻中光/温敏核雄性不育的机制并丰富遗传资源。本研究在籼稻材料明恢86的转基因后代中鉴定了1个雄性不育突变体,该突变体在正常生长季表现为雄性不育,花药较野生型小,淡白色,镜检无花粉,孕穗期低温处理后育性恢复,为1个温敏雄性不育突变体,命名为mh86s。利用突变体mh86s分别和其野生亲本明恢86及籼稻材料93-11杂交,构建F 2遗传群体,遗传分析表明雄性不育性状由1对隐性核基因控制。采用图位克隆技术将该温敏雄性不育基因定位在第2染色体分子标记Indel7.38和SNP3之间49.8 kb的物理区间内。在该定位区间内包含已克隆的温敏雄性不育基因tms5。测序结果表明,突变体mh86s中tms5基因和野生型相比,第2外显子1个碱基发生了替换(G-T),导致推测的161位氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸。利用突变体mh86s和携带tms5基因的温敏不育系HD9802S杂交,F 1表现为温敏雄性不育。据此推断突变体mh86s中的温敏雄性不育基因为tms5的新等位基因,命名为tms5-mh86。研究结果丰富了tms5基因资源,有助于解析tms5基因结构与功能,相应的分子标记亦可用于tms5-mh86的标记辅助选择。

关键词：温敏雄性核不育基因定位水稻

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利用基因组编辑技术定点突变IPA1基因创制水稻新株型材料

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福建农业学报 2019年第8期34卷 867-872页

作者：刘华清孙庆山杨绍华周淑芬王锋福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室

【目的】水稻株型改良是提高水稻产量的一个有效途径。水稻理想株型基因IPA1是一个调控水稻株型的关键基因,利用基因组编辑技术(TALENs技术)定点突变水稻IPA1基因,了解IPA1基因不同序列变异的株型效应,为进一步利用IPA1基因创制实用型... 详细信息

【目的】水稻株型改良是提高水稻产量的一个有效途径。水稻理想株型基因IPA1是一个调控水稻株型的关键基因,利用基因组编辑技术(TALENs技术)定点突变水稻IPA1基因,了解IPA1基因不同序列变异的株型效应,为进一步利用IPA1基因创制实用型水稻新株型材料奠定基础。【方法】利用TALENs技术定点突变优良恢复系明恢86的IPA1基因,通过测序鉴定突变体,种植于标准小区,调查分析其株型相关性状。【结果】利用TALENs技术获得了8种不同序列突变的水稻ipa1突变体,并通过转基因植株自交结合PCR分析筛选到去除了TALENs表达框,获得4种不含外源转基因成分的纯合突变体材料(IPA1基因表达区分别缺失2、4、16、23 bp)。表型分析发现,IPA1基因突变能够显著改变水稻的株高、有效穗数、穗长及穗粒数等性状。与野生型比较,缺失移码突变体株高降低7.9%~11.4%,有效穗数增加46.9%~68.4%,穗长短24.2%~29.3%,穗粒数减少31%~34%,结实率和千粒重差异不明显。【结论】利用TALENs技术定点突变水稻IPA1基因能够明显改变水稻株高、有效穗数、穗长及穗粒数等主要性状,产生水稻新株型。

关键词：水稻 IPA1基因基因组编辑突变体新株型

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水稻OsPLATZ14基因启动子的克隆及表达分析

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福建农业学报 2019年第10期34卷 1137-1143页

作者：陈睿陈建民吴明基杨绍华胡昌泉福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

【目的】研究pOsPLATZ14的结构及时空表达模式,对深入研究OsPLATZ14基因功能、了解PLATZ转录因子在水稻生长发育进程的作用具有重要意义。【方法】利用BDGP、FPROM及Cister预测分析pOsPLATZ14大小,以水稻日本晴基因DNA为模板扩增pOsPLAT... 详细信息

【目的】研究pOsPLATZ14的结构及时空表达模式,对深入研究OsPLATZ14基因功能、了解PLATZ转录因子在水稻生长发育进程的作用具有重要意义。【方法】利用BDGP、FPROM及Cister预测分析pOsPLATZ14大小,以水稻日本晴基因DNA为模板扩增pOsPLATZ14;应用PlantCARE分析序列中的顺序作用元件,构建pOsPLATZ14::GUS载体,转化水稻获得转基因植株;通过GUS组织化学染色法分析pOsPLATZ14在水稻中的时空表达特征。【结果】经PCR扩增获得pOsPLATZ14长度为1 899 bp,该区域含有光信号、逆境响应及激素应答等多种顺式作用元件。pOsPLATZ14驱动的GUS报告基因在水稻种子萌发期,苗期根、茎、叶,抽穗期的根、茎、叶、花穗、小花、叶夹角、茎结合部位、根茎过渡区及成熟期种子均有明显表达。【结论】pOsPLATZ14为组成型启动子,其下游调控基因OsPLATZ14可能在水稻生长发育过程中起重要作用。

关键词：水稻 PLATZ转录因子启动子pOsPLATZ14 表达分析 GUS活性

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