检索结果-内蒙古大学图书馆

福建农业科技 2022年第3期53卷 1-6页

作者：任香芸何志刚林晓姿李维新梁璋成汪媛媛福建省农业科学院农业工程技术研究所福建福州350003 福建省农产品(食品)加工重点实验室福建福州350013 福建西陇生物技术有限公司福建福州350015

为获得植物乳杆菌R23高活力胞内抗氧化酶,以蛋白质含量、菌量和超氧化物歧化酶(SOD)活力为主要指标,对该菌胞内抗氧化酶提取、保存等技术进行研究。结果表明,超声波法可有效破碎植物乳杆菌R23菌体细胞并保持理想的酶活力,在功率400 W、... 详细信息

为获得植物乳杆菌R23高活力胞内抗氧化酶,以蛋白质含量、菌量和超氧化物歧化酶(SOD)活力为主要指标,对该菌胞内抗氧化酶提取、保存等技术进行研究。结果表明,超声波法可有效破碎植物乳杆菌R23菌体细胞并保持理想的酶活力,在功率400 W、工作总时间20 min和变幅杆φ2 mm时,获得的蛋白质含量较高且SOD活力最大(47.06 U·g^(-1));酶提取液在4℃冷藏12 h或-20℃冻藏24 h均有利于保持酶活力。有无二氧化硫胁迫下植物乳杆菌R23生长量均与蛋白质含量变化相对应,因此可用蛋白质含量指示菌体生长量,用于胞内抗氧化酶活力的计算。

关键词：植物乳杆菌细胞破碎抗氧化酶菌量蛋白质含量

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番木瓜镁离子转运蛋白家族基因鉴定及转录特征分析

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东南园艺 2023年第1期11卷 1-6页

作者：周平岳晶晶颜少宾郭瑞金光福建省农业科学院果树研究所/福建省落叶果树工程技术研究中心福建福州350013 福建农林大学基因组与生物技术中心/福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室/作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室福建福州350002

镁离子转运蛋白(Magnesium transporter,MGT)是植物体内镁离子吸收运输的重要转运子。为系统研究番木瓜MGT家族(CpMGTs)特征,鉴定了基因家族成员并分析其蛋白特征和基因转录模式。结果表明番木瓜基因组含5个CpMGT家族成员(CpMGTa-CpMGT... 详细信息

镁离子转运蛋白(Magnesium transporter,MGT)是植物体内镁离子吸收运输的重要转运子。为系统研究番木瓜MGT家族(CpMGTs)特征,鉴定了基因家族成员并分析其蛋白特征和基因转录模式。结果表明番木瓜基因组含5个CpMGT家族成员(CpMGTa-CpMGTe),氨基酸数387~491个,分子量43.95~54.84 KD,定位于细胞核、细胞质、叶绿体、过氧化物酶体等亚细胞结构。基于转录组测序,发现CpMGTs的表达具有组织特异性,成熟叶、幼花与根器官中优势表达的CpMGT不同。根、花器官中CpMGTc表达具有性别差异性;CpMGTb和CpMGTd跨季节转录变化在雌雄番木瓜幼花中也存在特定差别。这些发现揭示CpMGTs表达模式及性别差异性表达特征,为研究基因功能奠定基础。

关键词：番木瓜镁离子转运蛋白表达性别

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水稻arf1基因3′-UTR片段的克隆和验证

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应用与环境生物学报 2019年第2期25卷 414-419页

作者：苏军管其龙陈子强陈在杰福建省农业科学院生物技术研究所福建省农业遗传工程重点实验室福州350003

终止子是一段位于基因编码之后的序列,作为一种调控信号调控DNA的转录终止和RNA的释放,在基因工程技术应用中通常被构建在目的基因下游,用以调控基因的转录和表达.现有常用的终止子很少,克隆和验证新的终止子是植物基因工程技术发展的需... 详细信息

终止子是一段位于基因编码之后的序列,作为一种调控信号调控DNA的转录终止和RNA的释放,在基因工程技术应用中通常被构建在目的基因下游,用以调控基因的转录和表达.现有常用的终止子很少,克隆和验证新的终止子是植物基因工程技术发展的需要.通过生物信息学分析和Realtime-PCR表达验证,筛选出候选基因腺苷酸核糖基化作用因子(Similar to ADP-ribosylation factor1,arf1)基因,克隆了水稻arf1基因3′-UTR.结果显示,所克隆3′-UTR片段含有8个多聚信号元件和4个UE片段.将3′-UTR与gus基因融合后分别与玉米泛素启动子Ubiquitin和花椰菜花叶病毒(CaMV)启动子35S连接构建植物表达载体验证3′-UTR调控表达效果.烟草瞬时表达显示3′-UTR融合的gus基因在35S和Ubi启动子驱动下,在烟草叶片中能正常表达;3′-UTR调控下的gus基因在水稻根、茎、叶、花和种子中均可稳定表达,且表达量与T-Nos终止子相当.本研究表明所克隆的3′-UTR可替代T-nos终止子,可为植物基因工程技术的应用提供新的调控元件.(图5表3参29)

关键词：水稻 3′-UTR 终止子克隆表达

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水稻温敏雄性不育突变体mh86s的鉴定及基因克隆

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福建农业科技 2020年第1期51卷 1-5页

作者：杨绍华刘华清王锋福建省农业遗传工程重点实验室/福建省农业科学院生物技术研究所

光/温敏核雄性不育基因在水稻杂种优势利用中发挥着重要作用。发掘光/温敏核雄性不育突变体及其基因有助于更好地了解水稻中光/温敏核雄性不育的机制并丰富遗传资源。本研究在籼稻材料明恢86的转基因后代中鉴定了1个雄性不育突变体,该... 详细信息

光/温敏核雄性不育基因在水稻杂种优势利用中发挥着重要作用。发掘光/温敏核雄性不育突变体及其基因有助于更好地了解水稻中光/温敏核雄性不育的机制并丰富遗传资源。本研究在籼稻材料明恢86的转基因后代中鉴定了1个雄性不育突变体,该突变体在正常生长季表现为雄性不育,花药较野生型小,淡白色,镜检无花粉,孕穗期低温处理后育性恢复,为1个温敏雄性不育突变体,命名为mh86s。利用突变体mh86s分别和其野生亲本明恢86及籼稻材料93-11杂交,构建F 2遗传群体,遗传分析表明雄性不育性状由1对隐性核基因控制。采用图位克隆技术将该温敏雄性不育基因定位在第2染色体分子标记Indel7.38和SNP3之间49.8 kb的物理区间内。在该定位区间内包含已克隆的温敏雄性不育基因tms5。测序结果表明,突变体mh86s中tms5基因和野生型相比,第2外显子1个碱基发生了替换(G-T),导致推测的161位氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸。利用突变体mh86s和携带tms5基因的温敏不育系HD9802S杂交,F 1表现为温敏雄性不育。据此推断突变体mh86s中的温敏雄性不育基因为tms5的新等位基因,命名为tms5-mh86。研究结果丰富了tms5基因资源,有助于解析tms5基因结构与功能,相应的分子标记亦可用于tms5-mh86的标记辅助选择。

关键词：温敏雄性核不育基因定位水稻

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水稻OsPLATZ14基因启动子的克隆及表达分析

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福建农业学报 2019年第10期34卷 1137-1143页

作者：陈睿陈建民吴明基杨绍华胡昌泉福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003

【目的】研究pOsPLATZ14的结构及时空表达模式,对深入研究OsPLATZ14基因功能、了解PLATZ转录因子在水稻生长发育进程的作用具有重要意义。【方法】利用BDGP、FPROM及Cister预测分析pOsPLATZ14大小,以水稻日本晴基因DNA为模板扩增pOsPLAT... 详细信息

【目的】研究pOsPLATZ14的结构及时空表达模式,对深入研究OsPLATZ14基因功能、了解PLATZ转录因子在水稻生长发育进程的作用具有重要意义。【方法】利用BDGP、FPROM及Cister预测分析pOsPLATZ14大小,以水稻日本晴基因DNA为模板扩增pOsPLATZ14;应用PlantCARE分析序列中的顺序作用元件,构建pOsPLATZ14::GUS载体,转化水稻获得转基因植株;通过GUS组织化学染色法分析pOsPLATZ14在水稻中的时空表达特征。【结果】经PCR扩增获得pOsPLATZ14长度为1 899 bp,该区域含有光信号、逆境响应及激素应答等多种顺式作用元件。pOsPLATZ14驱动的GUS报告基因在水稻种子萌发期,苗期根、茎、叶,抽穗期的根、茎、叶、花穗、小花、叶夹角、茎结合部位、根茎过渡区及成熟期种子均有明显表达。【结论】pOsPLATZ14为组成型启动子,其下游调控基因OsPLATZ14可能在水稻生长发育过程中起重要作用。

关键词：水稻 PLATZ转录因子启动子pOsPLATZ14 表达分析 GUS活性

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利用基因组编辑技术定点突变IPA1基因创制水稻新株型材料

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福建农业学报 2019年第8期34卷 867-872页

作者：刘华清孙庆山杨绍华周淑芬王锋福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室

【目的】水稻株型改良是提高水稻产量的一个有效途径。水稻理想株型基因IPA1是一个调控水稻株型的关键基因,利用基因组编辑技术(TALENs技术)定点突变水稻IPA1基因,了解IPA1基因不同序列变异的株型效应,为进一步利用IPA1基因创制实用型... 详细信息

【目的】水稻株型改良是提高水稻产量的一个有效途径。水稻理想株型基因IPA1是一个调控水稻株型的关键基因,利用基因组编辑技术(TALENs技术)定点突变水稻IPA1基因,了解IPA1基因不同序列变异的株型效应,为进一步利用IPA1基因创制实用型水稻新株型材料奠定基础。【方法】利用TALENs技术定点突变优良恢复系明恢86的IPA1基因,通过测序鉴定突变体,种植于标准小区,调查分析其株型相关性状。【结果】利用TALENs技术获得了8种不同序列突变的水稻ipa1突变体,并通过转基因植株自交结合PCR分析筛选到去除了TALENs表达框,获得4种不含外源转基因成分的纯合突变体材料(IPA1基因表达区分别缺失2、4、16、23 bp)。表型分析发现,IPA1基因突变能够显著改变水稻的株高、有效穗数、穗长及穗粒数等性状。与野生型比较,缺失移码突变体株高降低7.9%~11.4%,有效穗数增加46.9%~68.4%,穗长短24.2%~29.3%,穗粒数减少31%~34%,结实率和千粒重差异不明显。【结论】利用TALENs技术定点突变水稻IPA1基因能够明显改变水稻株高、有效穗数、穗长及穗粒数等主要性状,产生水稻新株型。

关键词：水稻 IPA1基因基因组编辑突变体新株型

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水稻生物学特性对稻田甲烷排放的影响

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农学学报 2020年第2期10卷 75-80页

作者：沈学良田光蕾周元昌王缨福建农林大学/作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室福州350002 福建省农业遗传工程重点实验室/福建省农业科学院生物技术研究所福州350003

为了阐明水稻品种与稻田甲烷排放的关系,为培育低甲烷水稻品种提供科学依据。本研究从水稻植株形态特征和生物学特性等方面,论述水稻植株与甲烷排放的关系。水稻根系主要通过根系分泌物和根系泌氧能力二个方面影响甲烷气体的生成和氧化... 详细信息

为了阐明水稻品种与稻田甲烷排放的关系,为培育低甲烷水稻品种提供科学依据。本研究从水稻植株形态特征和生物学特性等方面,论述水稻植株与甲烷排放的关系。水稻根系主要通过根系分泌物和根系泌氧能力二个方面影响甲烷气体的生成和氧化;水稻分蘖特性主要影响甲烷气体的排放;水稻叶片则通过光合作用和蒸腾作用二个方面分别影响甲烷气体的产生和排放;水稻籽粒的灌浆特性主要通过与根系争夺碳水化合物而影响甲烷的产量。这些因素既相互独立又相互协调影响水稻稻田的甲烷排放。

关键词：水稻甲烷生物学特性根系分蘖叶片籽粒品种

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利用分子标记辅助选择改良闽恢3301稻瘟病抗性

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南方农业学报 2019年第8期50卷 1665-1670页

作者：田大刚杨小双陈子强陈在杰林艳王锋福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室福州350003 福建农林大学植物保护学院福州350002

【目的】改良三系杂交籼稻强势恢复系闽恢3301的稻瘟病抗性,以提高其在生产中的应用价值。【方法】以75-1-127和C101A51为稻瘟病主效基因Pi9和Pi2的供体亲本,以闽恢3301为受体亲本,通过杂交、多代回交和自交,结合分子标记辅助选择和田... 详细信息

【目的】改良三系杂交籼稻强势恢复系闽恢3301的稻瘟病抗性,以提高其在生产中的应用价值。【方法】以75-1-127和C101A51为稻瘟病主效基因Pi9和Pi2的供体亲本,以闽恢3301为受体亲本,通过杂交、多代回交和自交,结合分子标记辅助选择和田间选择的方法,将供体亲本的Pi9和Pi2基因导入闽恢3301中,改良其稻瘟病抗性。利用21个福建近年流行的稻瘟菌菌株及其混合菌液对闽恢3301改良系进行人工接种抗性鉴定,并连续两年在上杭茶地病圃进行田间自然诱发抗性鉴定。将闽恢3301改良系和闽恢3301分别与三系不育系荟丰A和广8A及两系不育系GRD-7S进行测配,考察其农艺性状,以闽恢3301为父本的杂交组合为对照。【结果】通过利用Pi2/9分子标记对抗病基因进行跟踪选择,最终获得含Pi9和Pi2的闽恢3301改良系(闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2)各20份。除闽恢3301-Pi9对SH17004菌株表现为中感外,闽恢3301-Pi9对其他20个稻瘟病菌株及于2016和2017年在田间自然诱发鉴定中均表现出抗病,且闽恢3301-Pi2对21个稻瘟病菌株及于2016和2017年在田间自然诱发鉴定中均表现出抗病或高抗,二者抗性达到甚至超过两供体亲本75-1-127和C101A51的抗性水平,但闽恢3301对7个稻瘟病菌株表现感病,对1个菌株表现中感,对其他菌株则表现中抗或抗病,且田间自然诱发鉴定中均表现高感,说明闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2抗性水平得到有效提高。除RGD-7S×闽恢3301-Pi9和RGD-7S×闽恢3301-Pi2组合的单株产量分别极显著(P<0.01)高于相应的对照组合外,其他以闽恢3301改良株系为父本的杂交组合在株高、穗长、分蘖数、千粒重、单株产量和结实率上无显著差异(P>0.05),表明闽恢3301-Pi2和闽恢3301-Pi9在培育稻瘟病抗性杂交水稻组合上具有广阔的应用前景。【结论】闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2抗性得到有效提高的同时在农艺性状和配合力等方面保持了闽恢3301及其组合的主要特性,说明利用Pi9和Pi2基因可有效改良闽恢3301的稻瘟病抗性,不仅拓宽了稻瘟病抗谱,还不影响闽恢3301的配合力,二者可作为新的水稻材料进行推广应用。

关键词：闽恢3301 稻瘟病抗性分子标记辅助选择 Pi9 Pi2 农艺性状

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利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻新材料

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福建农业学报 2019年第5期34卷 503-508页

作者：范美英梅法庭朱义旺林雅容赵丽丽田光蕾王锋福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室福建福州350003 福建农林大学作物科学学院福建福州350002

【目的】通过CRISPR/Cas9基因组编辑技术遗传改良优质粳稻秀水134来创制糯稻新材料。【方法】构建靶向水稻直链淀粉合成主效基因Wx的CRISPR/Cas9表达载体,并通过农杆菌介导秀水134的遗传转化。【结果】共获得了45个转基因株系,其中41个... 详细信息

【目的】通过CRISPR/Cas9基因组编辑技术遗传改良优质粳稻秀水134来创制糯稻新材料。【方法】构建靶向水稻直链淀粉合成主效基因Wx的CRISPR/Cas9表达载体,并通过农杆菌介导秀水134的遗传转化。【结果】共获得了45个转基因株系,其中41个株系发生靶定位置的碱基修改,突变率达到91.1%。通过表型考察和直链淀粉含量分析获得了糯稻新材料。【结论】该方法可以创制直链淀粉明显降低的糯稻新材料,为糯稻育种研究提供重要的材料基础。

关键词： CRISPR/Cas9 Wx 糯稻

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新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin在毕赤酵母中的表达

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福建畜牧兽医 2021年第2期43卷 19-21页

作者：张丽娟吴唯维李素一陈华柯翎陈叙林晨韬福建省农业科学院生物技术研究所福州350003 福建师范大学生命科学学院福州350007 福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心福州350117 福建师范大学福建省特色海洋生物资源可持续利用重点实验室福州350117

前期采用差减杂交的方法筛选到新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin,其基因全长为477 bp,编码159个氨基酸,理论分子量约17.4 kDa。为了获得具活性的大量表达的抗菌肽,本研究利用毕赤酵母表达了elecilin。首先将elecilin基因克隆至酵母分泌表达载... 详细信息

前期采用差减杂交的方法筛选到新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin,其基因全长为477 bp,编码159个氨基酸,理论分子量约17.4 kDa。为了获得具活性的大量表达的抗菌肽,本研究利用毕赤酵母表达了elecilin。首先将elecilin基因克隆至酵母分泌表达载体pPICZaA,构建了重组分泌表达质粒pPICZaA-elecilin,电击转化毕赤酵母X-33。经Zeocin筛选和PCR鉴定,获得重组酵母菌,通过甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定,证实诱导后的培养基中存在与预期分子量大小相一致的蛋白,能被His-tag单克隆抗体识别,表明利用酵母成功表达了欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin。这为进一步研究该抗菌肽的功能及作为饲料添加剂的应用奠定了基础。

关键词：欧洲鳗鲡抗菌肽表达毕赤酵母

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