为制备抗鸭1型甲肝病毒亚型（subtype of duck hepatitis A virus type 1,DHAV-1a）结构蛋白VP1的单克隆抗体（monoclonal antibodies,MAbs）,本研究以pGEX-VP1重组蛋白免疫BALB/C小鼠,同时以纯化浓缩的全病毒作为包被抗原建立了筛选抗...
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为制备抗鸭1型甲肝病毒亚型（subtype of duck hepatitis A virus type 1,DHAV-1a）结构蛋白VP1的单克隆抗体（monoclonal antibodies,MAbs）,本研究以pGEX-VP1重组蛋白免疫BALB/C小鼠,同时以纯化浓缩的全病毒作为包被抗原建立了筛选抗VP1蛋白阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA方法,经融合、筛选制备杂交瘤细胞及鉴定MAbs的稳定性、特异性、腹水效价和中和活性等生物学活性,获得了2株持续且稳定分泌抗体的杂交瘤细胞（1A2和5G3）。MAbs腹水ELISA效价分别为1:2～5×10～3和1:2×10～3。亚类鉴定均为IgG1/κ型。Western blot表明2株MAbs均能与鸭1型甲肝病毒亚型VP1蛋白和DHAV-1a全病毒发生特异性反应。特异性试验表明2株MAbs能与鸭1型甲肝病毒（duck hepatitis A virus type 1,DHAV-1）和DHAV-1a发生交叉反应。中和试验表明其中5G3株具有中和活性。因此,特性鉴定结果表明2株MAbs的ELISA效价均较高、特异性强和稳定性好,均能与DHAV-1和DHAV-1a全病毒发生特异性反应,其中一株具有中和活性。
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