检索结果-内蒙古大学图书馆

中国机械工程 2010年第23期21卷 2830-2835页

作者：叶勇徐西鹏华侨大学石材加工研究福建省重点实验室泉州362021 重庆电子工程职业学院重庆401331

在传统离散单元法和刚性单元重叠(ORC)方法的基础上,提出了一种新的构建不规则颗粒形状的方法——改进ORC方法。用三种方法分别对Si3N4陶瓷进行了离散元建模和切削模拟分析,从加工后的材料表面质量、刀具前端切屑分布状态及主切削力大... 详细信息

在传统离散单元法和刚性单元重叠(ORC)方法的基础上,提出了一种新的构建不规则颗粒形状的方法——改进ORC方法。用三种方法分别对Si3N4陶瓷进行了离散元建模和切削模拟分析,从加工后的材料表面质量、刀具前端切屑分布状态及主切削力大小三方面讨论了三种方法之间的关系,分析了改进ORC方法的先进性。在此基础上,对细晶类花岗石和粗晶类花岗石进行了不同参数下的弯曲和切削模拟实验,计算了弯曲强度和主切削力大小并进行了试验验证。试验结果与模拟结果表明:样本为均匀性较好的非连续性材料时,适宜用传统离散单元法进行建模;样本为细晶类花岗石时,适宜用传统离散单元法和改进ORC方法进行建模;样本为粗晶类花岗石时,只适合用改进ORC方法或ORC方法进行建模。

关键词：花岗石离散单元法(DEM) 颗粒形状切削力改进ORC方法

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米曲霉pyrG基因克隆及其同源转化系统的建立

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食品科学 2010年第11期31卷 202-205页

作者：王金良陈宏文华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

建立以乳清酸核苷-5'-磷酸脱羧酶基因(pyrG)为选择标志,以米曲霉为宿主菌的同源转化系统。以米曲霉基因组为模板,通过PCR扩增获得pyrG基因,将该片段与表达载体pMD18-T相连,转化大肠杆菌DH5α,经蓝白斑筛选、PCR快速筛选、酶切和测... 详细信息

建立以乳清酸核苷-5'-磷酸脱羧酶基因(pyrG)为选择标志,以米曲霉为宿主菌的同源转化系统。以米曲霉基因组为模板,通过PCR扩增获得pyrG基因,将该片段与表达载体pMD18-T相连,转化大肠杆菌DH5α,经蓝白斑筛选、PCR快速筛选、酶切和测序验证,获得重组质粒pMD-pyrG,完成pyrG基因的克隆。序列分析表明该基因与米曲霉KBN616的pyrG基因编码序列的同源性为99.9%,两者经推导的氨基酸的同源性为99.6%。以米曲霉pyrG营养缺陷株为受体菌,通过PEG/CaCl2诱导的原生质体转化方法,将重组质粒导入该受体菌,使米曲霉pyrG缺陷株发生基因转化,成为pyrG+,由此成功建立了以pyrG为筛选标记基因、同型米曲霉pyrG基因缺陷株为受体菌的基因转化系统。

关键词：重组质粒克隆同源转化系统

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罗伊氏乳杆菌培养基优化及其生长代谢研究

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食品科学 2010年第13期31卷 174-179页

作者：陈国肖雅琴陈宏文华侨大学化工学院工业生物技术福建省高校重点实验室福建厦门361021

罗伊氏乳杆菌的MRS培养基是富培养基,简化培养基组分,优化培养基组成和培养条件是微生物工业化培养的重要基础。本实验在传统MRS培养基基础上,首先对氮源进行单因素优化,然后采用Plackett-Burman和中心组合试验设计对影响罗伊氏乳杆菌CG... 详细信息

罗伊氏乳杆菌的MRS培养基是富培养基,简化培养基组分,优化培养基组成和培养条件是微生物工业化培养的重要基础。本实验在传统MRS培养基基础上,首先对氮源进行单因素优化,然后采用Plackett-Burman和中心组合试验设计对影响罗伊氏乳杆菌CG001生长的MRS培养基和培养条件进行筛选优化,并在最优条件下研究该菌的生长代谢情况。结果表明:酵母膏质量浓度、葡萄糖质量浓度、硫酸锰质量浓度和温度是影响菌体质量浓度的4个关键因素;经响应面法分析确定该菌的最优培养条件为:酵母膏质量浓度20g/L,葡萄糖质量浓度20g/L,醋酸钠质量浓度7g/L,柠檬酸铵质量浓度1g/L,磷酸氢二钾质量浓度3g/L,硫酸镁质量浓度0.2g/L,硫酸锰质量浓度为0.23g/L,吐温-80质量浓度1g/L,初始pH6.2,培养温度38.6℃,最终菌体质量浓度达0.984g/L,相对优化前提高1.102倍。发酵罐中菌体生长曲线呈S型,4～12h菌体处于对数生长期,之后趋于平衡,葡萄糖的代谢与菌体的生长速率相对应。

关键词：罗伊氏乳杆菌 Plackett-Burman设计中心组合设计响应面优化

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壳聚糖基非病毒基因载体研究新进展

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化工进展 2010年第8期29卷 1485-1492页

作者：刘决照辛梅华李明春华侨大学材料科学与工程学院福建省高校功能材料重点实验室福建厦门361021

壳聚糖是自然界中广泛存在的天然阳离子多糖,生物相容性和生物降解性能好、安全无毒,作为非病毒基因载体具有潜在的应用价值,但壳聚糖溶解性差、靶向性弱和转染率低等缺点限制了其应用。针对这些缺点,研究者对壳聚糖进行修饰改性,制备... 详细信息

壳聚糖是自然界中广泛存在的天然阳离子多糖,生物相容性和生物降解性能好、安全无毒,作为非病毒基因载体具有潜在的应用价值,但壳聚糖溶解性差、靶向性弱和转染率低等缺点限制了其应用。针对这些缺点,研究者对壳聚糖进行修饰改性,制备了一系列壳聚糖衍生物作为基因载体。本文就近年来改性壳聚糖衍生物用作非病毒基因载体的研究结果作简要综述,重点介绍其细胞毒性和转染能力。

关键词：壳聚糖改性壳聚糖非病毒载体细胞毒性转染能力

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阿魏酸酯酶产生菌的培养条件优化

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华侨大学学报（自然科学版） 2010年第4期31卷 426-429页

作者：范韵敏李夏兰方柏山华侨大学工业生物技术福建省高校重点实验室福建泉州362021

通过均匀设计法和二次多项式逐步回归,对产阿魏酸酯酶的培养基配方进行优化,得出优化的培养基配方(质量分数):0.30%KH2PO4,0.60%Na2HPO4.7H2O,0.01%NaCl,0.80%酵母粉,1.33%麦糟.在此基础上,用单因素法考察发酵条件对产酶的影响,确定最... 详细信息

通过均匀设计法和二次多项式逐步回归,对产阿魏酸酯酶的培养基配方进行优化,得出优化的培养基配方(质量分数):0.30%KH2PO4,0.60%Na2HPO4.7H2O,0.01%NaCl,0.80%酵母粉,1.33%麦糟.在此基础上,用单因素法考察发酵条件对产酶的影响,确定最佳条件:初始pH值为6.0,培养温度为28℃,摇床转速为210 ***-1,发酵时间为68 h,装液量为75 mL,接种量为5%,麦糟粒径为0.054 mm.采用优化的培养基组分进行最优发酵培养,优化后的阿魏酸酯酶酶活达到119.36μkat.L-1,比优化前提高了32倍.

关键词：阿魏酸酯酶麦糟优化均匀设计

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固定化细胞生物制氢研究进展

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华侨大学学报（自然科学版） 2010年第2期31卷 121-125页

作者：蔡剑伟方柏山华侨大学工业生物技术福建省高校重点实验室福建泉州362021

综述现有的生物制氢技术研究中,利用光合生物制氢和利用厌氧菌发酵制氢的研究进展.其中,固定化细胞生物制氢菌类包括光合细菌、发酵细菌和混合菌培养等.阐述固定化细胞生物制氢中包埋法和吸附法载体及发酵制氢所用的原料,最后展望固定... 详细信息

综述现有的生物制氢技术研究中,利用光合生物制氢和利用厌氧菌发酵制氢的研究进展.其中,固定化细胞生物制氢菌类包括光合细菌、发酵细菌和混合菌培养等.阐述固定化细胞生物制氢中包埋法和吸附法载体及发酵制氢所用的原料,最后展望固定化细胞生物制氢的发展方向.

关键词：固定化生物制氢光合细菌厌氧菌混合菌包埋吸附

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辅酶依赖型和不依赖型甘油脱水酶的比较

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华侨大学学报（自然科学版） 2010年第5期31卷 542-547页

作者：杨仲丽方柏山余劲聪王庆花李梓君华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

实验比较源自肺炎克氏杆菌(***)和丁酸梭状芽孢杆菌(***)中的甘油脱水酶(GDHt)的辅酶依赖特性.采用生物信息学的方法,对两种酶的异同点进行分析,发现两种酶结构上相似性较低、亲缘性较远、分属于两个不同的家族.SMART数据库搜索结果表明... 详细信息

实验比较源自肺炎克氏杆菌(***)和丁酸梭状芽孢杆菌(***)中的甘油脱水酶(GDHt)的辅酶依赖特性.采用生物信息学的方法,对两种酶的异同点进行分析,发现两种酶结构上相似性较低、亲缘性较远、分属于两个不同的家族.SMART数据库搜索结果表明,***中不依赖辅酶的甘油脱水酶及其再激活酶,分别属于gly-Radical和Radical-SAM家族,多序列比对得到的一段富含半胱氨酸残基C**C**C的保守序列正是其共同特征.

关键词：肺炎克氏杆菌丁酸梭状芽孢杆菌辅酶甘油脱水酶维生素B12 依赖性

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采用易错PCR对粘质沙雷氏菌几丁质酶C进行定向进化

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华侨大学学报（自然科学版） 2010年第1期31卷 58-64页

作者：刘治江贺淹才李红然刘嘉施腾鑫华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

以重组***21(DE3)pLysS/pET22b-Chi C为亲本,采用易错聚合酶链反应(PCR)技术,对粘质沙雷氏菌几丁质酶C基因(Chi C)进行定向进化研究.经过两轮易错PCR后,建立突变体文库,进行平板初筛、包涵体复性及酶活检测复筛,获得一酶活较高的突变酶(... 详细信息

以重组***21(DE3)pLysS/pET22b-Chi C为亲本,采用易错聚合酶链反应(PCR)技术,对粘质沙雷氏菌几丁质酶C基因(Chi C)进行定向进化研究.经过两轮易错PCR后,建立突变体文库,进行平板初筛、包涵体复性及酶活检测复筛,获得一酶活较高的突变酶(Mut-Chi C),其催化活性为亲本重组酶的1.9倍,比活力为出发菌酶活的3.3倍.对突变酶的酶学性质进行初步研究,其最适pH值为5.0,最适温度为60℃,而出发菌该酶的最适温度为40℃.进化酶基因经DNA测序并通过软件与亲本型酶基因进行分析比对,表明突变酶Mut-Chi C基因发生点突变,使4处氨基酸被取代,且均为有义突变.

关键词：粘质沙雷氏菌几丁质酶C 分子定向进化易错聚合酶链反应包涵体

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应用易错PCR定向进化甘油脱氢酶

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华侨大学学报（自然科学版） 2010年第6期31卷 661-666页

作者：李梓君方柏山杨仲丽刘嘉华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-... 详细信息

经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-74,其酶活力是亲本重组酶的2.73倍.通过软件对突变体gldA-74酶基因和亲本重组酶基因进行分析对比,发现突变体gldA-74酶基因发生了一处点突变(A964T),该突变使一处氨基酸被取代.将亲本重组酶和进化酶的高效表达产物经Ni柱纯化后,酶学性质的测定结果表明,甘油的Km值由0.58 mmol.L-1升高至0.63 mmol.L-1,而NAD的Km值由0.74 mmol.L-1升高至0.77mmol.L-1,并且酶的最适pH值由原来的11.5升高至12.5,而最适温度由65℃降至55℃.

关键词：甘油脱氢酶克雷伯杆菌定向进化易错聚合酶链式反应

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O-季铵化改性壳聚糖固载环糊精的制备及其载药性能

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化工进展 2010年第9期29卷 1705-1709页

作者：毛扬帆李明春辛梅华谢钦钦华侨大学材料科学与工程学院福建省高校功能材料重点实验室福建厦门361021

对壳聚糖进行O-季铵化改性,并与羧甲基-β-环糊精在均相条件下进行缩合反应,制得O-季铵化壳聚糖固载环糊精(QCSCD),用FTIR、EA和SEM对产物进行表征。以酮洛芬为模型药物,研究其载药及药物释放行为。结果表明,季铵盐基团的引入提高了QCSC... 详细信息

对壳聚糖进行O-季铵化改性,并与羧甲基-β-环糊精在均相条件下进行缩合反应,制得O-季铵化壳聚糖固载环糊精(QCSCD),用FTIR、EA和SEM对产物进行表征。以酮洛芬为模型药物,研究其载药及药物释放行为。结果表明,季铵盐基团的引入提高了QCSCD的载药量,为3.97mg/mg,并且改变了QCSCD的pH响应性能。与壳聚糖固载环糊精相反,QCSCD在模拟胃液中的释放速率很快,而在模拟肠液中具有缓释性能。

关键词：壳聚糖季铵化环糊精载药性能

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