检索结果-内蒙古大学图书馆

福建农林大学学报（自然科学版） 2013年第3期42卷 225-229页

作者：章松柏宋国威杨靓吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002 长江大学农学院湖北荆州434025

分别建立了水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)病株的dsRNA基因组检测法和单头介体褐飞虱带毒的RT-PCR法,并结合生物学接种试验,对介体传毒特性进行了初步分析.结果显示:dsRNA基因组鉴定法可以从0.5 g病株样品中快速检测到RRSV,RT-PCR法可以灵敏... 详细信息

分别建立了水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)病株的dsRNA基因组检测法和单头介体褐飞虱带毒的RT-PCR法,并结合生物学接种试验,对介体传毒特性进行了初步分析.结果显示:dsRNA基因组鉴定法可以从0.5 g病株样品中快速检测到RRSV,RT-PCR法可以灵敏地应用于褐飞虱带毒、传毒情况的检测;饲毒后褐飞虱成虫、若虫的带毒率分别为75.0%、68.2%,传毒率分别为50.0%、32.5%,说明褐飞虱种群传播RRSV的能力很强,是高度亲和的群体.

关键词： RT-PCR dsRNA基因组检测法水稻锯齿叶矮缩病毒褐飞虱

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植物病原物的群体遗传学

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遗传 2012年第2期34卷 157-166页

作者：祝雯詹家绥福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州350002 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室福州350002

品种单一化、生产密集型和一年多茬的现代农业特点导致病原物呈现出进化速度加快、致病力增强及流行风险增大趋势。深入研究病原物群体遗传学对认识病害的流行、有效选育和使用抗性品种乃至控制病害具有重要意义。文章阐述了植物病原物... 详细信息

品种单一化、生产密集型和一年多茬的现代农业特点导致病原物呈现出进化速度加快、致病力增强及流行风险增大趋势。深入研究病原物群体遗传学对认识病害的流行、有效选育和使用抗性品种乃至控制病害具有重要意义。文章阐述了植物病原物群体遗传学的研究目标和内容、突变、基因迁移、基因重组、随机遗传漂变和自然选择5大遗传机制在植物病原物进化过程中的作用,以及目前植物病原物群体遗传学研究的现状。

关键词：植物病原物群体遗传进化机制

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病原物诱导型植物启动子的研究方法

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生物技术通报 2012年第11期28卷 32-37页

作者：马睿陈华民吴茂森吴祖建何晨阳福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州350002 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

植物启动子是控制基因转录的DNA序列之一,按其表达方法可分为组成型(或非特异性)表达和诱导型(或特异性)表达启动子两种类型。当受到病原物侵染时,植物通常通过诱导型启动子中的W-box、RAV1 AAT和WRKY等元件/位点、调控下游基因的表达,... 详细信息

植物启动子是控制基因转录的DNA序列之一,按其表达方法可分为组成型(或非特异性)表达和诱导型(或特异性)表达启动子两种类型。当受到病原物侵染时,植物通常通过诱导型启动子中的W-box、RAV1 AAT和WRKY等元件/位点、调控下游基因的表达,作出相应的应答反应。近年来,通过计算机预测与试验测定方法的有效结合,发掘和鉴定出了一些病原物诱导型启动子,并进行了调控功能的解析。此外,在通过转基因方法改良植物抗病性的途径中,利用病原物诱导型启动子可以实现对抗病功能相关基因表达的精准控制,避免由组成型启动子持续驱动基因表达、对植株本身带来的负效应。结合本室对水稻启动子OsBTF3-p的研究结果,重点对近年来国内外有关病原物诱导型启动子及其调控元件/位点的研究方法和应用进展作一综述。

关键词：诱导型启动子调控元件转基因途径

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海洋细菌的分离、鉴定及抗烟草花叶病毒活性分析

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福建农林大学学报（自然科学版） 2012年第3期41卷 281-285页

作者：韩凤英谢荔岩连玲丽林奇英福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002 山东省农业管理干部学院山东济南250100 福建农林大学生命科学学院福建福州350002

从福建霞浦海域分离、筛选到6株对烟草花叶病毒(TMV)具有体外钝化活性的菌株,其中,菌株9和10的抑制率较高,分别达95.26%和92.18%.进一步测定2株菌对TMV的抑制增殖活性,结果表明,菌株9和10可明显抑制TMV的增殖,其抑制率分别为36.29%和35.... 详细信息

从福建霞浦海域分离、筛选到6株对烟草花叶病毒(TMV)具有体外钝化活性的菌株,其中,菌株9和10的抑制率较高,分别达95.26%和92.18%.进一步测定2株菌对TMV的抑制增殖活性,结果表明,菌株9和10可明显抑制TMV的增殖,其抑制率分别为36.29%和35.08%.通过对2株菌的形态特征、生理生化反应及16S rDNA序列的分析,将菌株9鉴定为蜡样芽孢杆菌,菌株10鉴定为水生海洋芽孢杆菌.

关键词：海洋细菌抗烟草花叶病毒活性分离鉴定

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运用代谢组学研究RSV与水稻的互作初探

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激光生物学报 2012年第4期21卷 352-359页

作者：徐飞谢荔岩丁新伦林奇英福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒重点实验室福建福州350002

水稻条纹叶枯病严重威胁着我国的水稻生产,该病由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起。目前,对水稻与RSV互作机制的认识还较少,这是制定有效措施来对RSV进行防控的一大障碍。代谢组学是新近发展起来的一种研究手段,它通过考察生... 详细信息

水稻条纹叶枯病严重威胁着我国的水稻生产,该病由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起。目前,对水稻与RSV互作机制的认识还较少,这是制定有效措施来对RSV进行防控的一大障碍。代谢组学是新近发展起来的一种研究手段,它通过考察生物体系包括细胞、组织或整个生物体在受到刺激或扰动后,在代谢水平上的应答,来研究一系列的生物现象。运用代谢组学对水稻与RSV的互作进行了初步探索。GC-MS分析表明,RSV的侵染能显著影响水稻的代谢谱,且在代谢组水平上,不同抗感性的水稻对RSV的响应存在着差异。与NIST质谱数据库中的信息比较,从武育粳3号健康植株中鉴定到内源性代谢物12种、武育粳3号发病植株中11种、KT95-418健康植株中9种、KT95-418发病植株中14种。

关键词：水稻条纹病毒代谢组 GC-MS

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水稻草状矮缩病毒P2基因多克隆抗体的制备及应用

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中国农学通报 2012年第30期28卷 1-5页

作者：杨靓邓萍王开放刘妍刘小娟吴祖建福建农林大学植物保护学院/福建省植物病毒学重点实验室/福建农林大学植物病毒研究所福州350002

为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上。将重组载体转化*** Rosetta,经IPTG诱导后获得分... 详细信息

为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上。将重组载体转化*** Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29kDa含HIS标签的融合蛋白。以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到l:8192。并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础。

关键词：水稻草状矮缩病毒 P2基因原核表达多克隆抗体

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水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白的原核表达、抗血清制备及初步应用

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激光生物学报 2012年第6期21卷 546-550页

作者：丁新伦谢荔岩潘贤吴祖建福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒重点实验室福建福州350002

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白由基因组片段S10编码。从RRSV福建沙县分离物(RRSV-F)中获取该病毒的全基因组,根据RRSV泰国分离物核苷酸序列设计特异性引物获得S10编码区,利用Directional TOPO克隆技术,将S10连接至克隆表达载体pET100/D-TOP... 详细信息

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白由基因组片段S10编码。从RRSV福建沙县分离物(RRSV-F)中获取该病毒的全基因组,根据RRSV泰国分离物核苷酸序列设计特异性引物获得S10编码区,利用Directional TOPO克隆技术,将S10连接至克隆表达载体pET100/D-TOPO构建重组质粒,并进行了序列测定和分析。重组质粒经IPTG诱导在BL21star(DE3)***中高效表达约35 kD Pns10蛋白。将Pns10蛋白免疫新西兰大白兔制备了特异性的抗血清,间接ELISA法测定抗血清效价为1∶7 680,Western blot分析表明抗血清特异性强。表达产物及抗血清在Pns10蛋白的结构和功能研究中具有重要的应用价值,制备的抗血清可用于水稻病株和传播介体的检测以及病毒病的诊断。

关键词：水稻齿叶矮缩病毒(RRSV) Pns10蛋白原核表达抗血清制备和应用

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病毒被限制在昆虫中肠是灰飞虱不属于南方水稻黑条矮缩病毒有效介体的原因

病毒被限制在昆虫中肠是灰飞虱不属于南方水稻黑条矮缩病毒有效介...

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中国植物病理学会2012年学术年会

作者：贾东升陈红燕毛倩卓刘启飞魏太云福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室

近年来,南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV）在我国南方稻区大面积发生,给农业生产带来了巨大的损失。SRBSDV属于呼肠孤病毒科斐济病毒属的一个暂定种,由白背飞虱以持久增殖型方式高效传播。我们... 详细信息

近年来,南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV）在我国南方稻区大面积发生,给农业生产带来了巨大的损失。SRBSDV属于呼肠孤病毒科斐济病毒属的一个暂定种,由白背飞虱以持久增殖型方式高效传播。我们在田间调查和实验过程中发现灰飞虱也可以低效带毒,但不能有效传毒。为了明确SRBSDV在灰飞虱体内的侵染机理,本研究应用病毒编码蛋白抗体与荧光素的交联物,包括P9-1-rhodamine和P10-FITC,通过免疫荧光标记技术系统比较分析了SRBSDV在灰飞虱和白背飞虱体内的侵染循回过程。介体饲毒后2d,SRBSDV在70%白背飞虱个体的中肠上皮细胞建立初侵染点,而在灰飞虱体内检测不到病毒。饲毒后4d,SRBSDV可以初次侵染灰飞虱中肠上皮细胞,其侵染率仅5%;而此时SRBSDV在20%的白背飞虱体内已从初侵染部位向周围扩散。饲毒后8d,SRBSDV在84%的白背飞虱体内大量扩散,且45%的白背飞虱唾液腺已有病毒侵染;而此时灰飞虱体内的病毒仍然局限于中肠内部的扩散,在唾液腺中检测不到病毒,即使饲毒后14d和25d病毒仍然不能到达灰飞虱的唾液腺。为了明确是否SRBSDV从灰飞虱中肠释放到血淋巴过程受到阻碍,在饲毒后25d,我们通过免疫荧光标记和荧光定量PCR技术在灰飞虱血淋巴中均未检测到病毒。综合以上结果,认为SRBS-DV在灰飞虱体内可以侵入、复制并扩散,但由于受到中肠侵入屏障的阻碍而使灰飞虱带毒率低,由于受到中肠释放屏障的阻碍而使病毒无法从中肠向血淋巴扩散,从而使病毒无法扩散到达唾液腺,最终灰飞虱不能有效地传播病毒。该研究结果为评估灰飞虱携带SRBSDV向北扩散的风险提供了理论基础。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒白背飞虱灰飞虱病毒复制传播屏障

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南方水稻黑条矮缩病毒的病毒原质组分分析

南方水稻黑条矮缩病毒的病毒原质组分分析

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中国植物病理学会2012年学术年会

作者：毛倩卓刘启飞贾东升魏太云福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室

南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridea)斐济病毒属(Fijivirus)的一个暂定种,由介体白背飞虱以持久增殖型方式传播。植物呼肠孤病毒均可在介体昆虫体内形成提供病毒复制... 详细信息

南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridea)斐济病毒属(Fijivirus)的一个暂定种,由介体白背飞虱以持久增殖型方式传播。植物呼肠孤病毒均可在介体昆虫体内形成提供病毒复制和子代病毒粒体装配的场所一病毒原质(viroplasm)。目前已知SRBSDV编码的P9-1蛋白是形成病毒原质的组分之一。本研究通过免疫胶体金标记技术对SRBSDV侵染的白背飞虱唾液腺及其原代培养细胞进行电镜切片观察,发现病毒侵染形成的病毒原质呈现出深、浅两种纤维致密状的形态,标记P9-1蛋白的胶体金颗粒主要分布在浅色区域,其间散布着只有内壳蛋白的未成熟病毒粒子;而标记P5蛋白的胶体金颗粒主要分布在深色区域,并且有成熟的病毒粒子散布在其中。因此,推测南方水稻黑条矮缩病毒P9-1蛋白是viroplasm形成初期的主要组成成分,是病毒复制的关键场所;而在viroplasm形成的后期,P5蛋白是主要组成成分,负责病毒粒子的装配。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒病毒原质 P5蛋白 P9-1蛋白

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水稻矮缩病毒在不同介体内的侵染循回差异的机制研究

水稻矮缩病毒在不同介体内的侵染循回差异的机制研究

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中国植物病理学会2012年学术年会

作者：陈倩张鹏谢联辉魏太云福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室

水稻矮缩病毒（Rice dwarf virus,RDV）是引起水稻矮缩病的病原,造成多种水稻品种的矮化和减产,由主要介体黑尾叶蝉和次要介体二点黑尾叶蝉、二条黑尾叶蝉和电光叶蝉以持久性增殖型方式在体内循回并经卵传播。导致介体对病毒的亲和性的... 详细信息

水稻矮缩病毒（Rice dwarf virus,RDV）是引起水稻矮缩病的病原,造成多种水稻品种的矮化和减产,由主要介体黑尾叶蝉和次要介体二点黑尾叶蝉、二条黑尾叶蝉和电光叶蝉以持久性增殖型方式在体内循回并经卵传播。导致介体对病毒的亲和性的机制目前尚不知晓,但持久性增殖型传播病毒在中肠的复制和从中肠扩散至内脏肌肉细胞及唾液腺能力直接决定了介体的传毒能力。先前的研究表明,RDV编码的非结构蛋白Pns10形成的包裹病毒粒体的小管不仅可沿着叶蝉培养细胞膜突起一肌动蛋白纤维构成的丝状伪足在细胞间扩散,还可穿越带毒介体肠道上皮细胞含有大量肌动蛋白（actin）纤维束的微绒毛,并沿着中肠表面内脏肌肉的actin纤维移动,确认了小管具有协助病毒在介体内扩散的能力。本研究比较了RDV在黑尾叶蝉（暴发区）、二条黑尾叶蝉（暴发区）和电光叶蝉（无病区）亲和性差异介体内的侵染循回过程,验证Pns10是病毒的介体传毒关键因子,探究RDV利用Pns10小管突破主要介体与次要介体侵染屏障的机理。结果发现在饲毒后的主要介体黑尾叶蝉内大量RDV分布于滤室、中肠、马氏管、唾液腺泡、输卵管和卵萼;Pns10小管可穿越肠道上皮细胞微绒毛和基底膜,到达表面肌肉,在收集到的血淋巴浆细胞和唾液腺泡上也可看到大量的Pns10小管积累。而次要介体二条黑尾叶蝉内,大部分RDV分布于后肠和马氏管、唾液腺和输卵管,滤室、中肠和表面肌肉都未检测到病毒,Pns10小管也分布于上皮细胞微绒毛。另一次要介体电光叶蝉无法带毒。由此,我们得出以下结论:①病毒在主要介体黑尾叶蝉内的分布比次要介体二条黑尾叶蝉广,这种分布差异与病毒对介体的亲和性差别是吻合的;②病毒和Pns10小管在生殖器官的积累为Pns10小管协助RDV经卵传毒提供证据;③来自无病区的电光叶蝉无法带毒再次强调了虫系与地区间的密切关系。

关键词：水稻矮缩病毒 Pns10蛋白管状结构叶蝉

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