检索结果-内蒙古大学图书馆

福建农林大学学报（自然科学版） 2011年第2期40卷 151-155页

作者：范国成高芳銮黄美英谢荔岩吴祖建林奇英谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建福州350002 福建省农业科学院果树研究所福建福州350013 福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002

为构建携带水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)主要内层衣壳蛋白S3基因和外层衣壳蛋白S8基因的重组杆状病毒,将目的基因(S3和S8)分别亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual多角体启动子(PH)和p10启动子的下游.经酶切和确证性序... 详细信息

为构建携带水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)主要内层衣壳蛋白S3基因和外层衣壳蛋白S8基因的重组杆状病毒,将目的基因(S3和S8)分别亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual多角体启动子(PH)和p10启动子的下游.经酶切和确证性序列测定,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组杆粒rbpFBDS3-S8,采用脂质体转染法,将rbpF-BDS3-S8转染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf9细胞包装病毒,PCR筛选鉴定重组病毒.结果表明:Sf9昆虫细胞被侵染72 h后,倒置显微镜下观察到细胞增大,培养液和细胞内出现颗粒状物质,部分细胞破裂甚至裂解,说明S3和S8基因已整合到重组杆状病毒基因组中,这为开展RGDV主要结构蛋白在昆虫细胞中的表达及其功能研究奠定了基础.

关键词：水稻瘤矮病毒外层衣壳蛋白内层衣壳蛋白杆状病毒表达系统 Sf9昆虫细胞

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植物病原真菌对几类重要单位点杀菌剂的抗药性分子机制

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中国农业科学 2014年第17期47卷 3392-3404页

作者：詹家绥吴娥娇刘西莉陈凤平福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室中国农业大学农学与生物技术学院植物病理系福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室

单位点杀菌剂是植物病害管理的重要组成部分,随着单位点杀菌剂的大量、广泛使用,抗性问题也随之产生。目前为止,有植物病原菌对各大类单位点杀菌剂均具抗性的报道。本文作者主要阐述了生产中常用的5类单位点杀菌剂,包括苯并咪唑类杀菌剂... 详细信息

单位点杀菌剂是植物病害管理的重要组成部分,随着单位点杀菌剂的大量、广泛使用,抗性问题也随之产生。目前为止,有植物病原菌对各大类单位点杀菌剂均具抗性的报道。本文作者主要阐述了生产中常用的5类单位点杀菌剂,包括苯并咪唑类杀菌剂(MBCs)、二甲酰亚胺类杀菌剂(DCFs)、14α-脱甲基酶抑制剂(DMIs)、QoIs和琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHIs)的作用机理及抗性分子机制的研究进展,并进一步论述了抗药性产生的机理及抗性治理原则。MBCs作用于β-微管蛋白,抗性主要与靶标蛋白基因的点突变有关,突变造成的氨基酸变化多集中于第50、167、198、200和240等5个位置,主要突变位点为第198位,同一菌株通常只发生一个氨基酸变异,不同位点的点突变甚至同一位点的不同氨基酸替代均会引起抗性水平的差异;DCFs的作用靶标尚不清楚,病原真菌对其抗性可能与双元组氨酸激酶OS基因的点突变有关;DMIs通过抑制14α-脱甲基酶最终影响麦角甾醇的合成,抗性主要与Cyp51的点突变或过量表达或运输体的过量表达相关,Cyp51点突变是抗DMI的主要机制,同一突变对不同的三唑类杀菌剂敏感性表现不尽相同,不同位置的点突变在同一病原菌中对不同三唑类杀菌剂的敏感性影响也不同。点突变数量在不同的真菌中表现不同,有单个发生,也有多个同时发生,且对抗药性具有积累效应;QoIs作用于电子传递链的复合物III,抗性主要与Cytb的点突变有关,与抗性相关的点突变主要发生在Cytb的120—155和255—280两个编码区,其中G143A和F129L为最主要的点突变;SDHIs作用于电子传递链的复合物II,抗性主要与SdhB、SdhC或SdhD的点突变有关,大部分病原真菌对SDHIs的抗性与SdhB点突变有关,SdhB点突变发生位置比较单一,在多种病原菌中突变均发生在相同的组氨酸上即H272,而SdhC和SdhD突变位点比较多。

关键词：植物病原真菌单位点杀菌剂抗药性分子机制

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水稻OsAGO家族成员特征及对RGDV和SRBSDV的响应

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植物保护学报 2024年第3期51卷 636-644页

作者：魏莹林冬煊刘鸿飞徐荣荣朱永生吴建国赵珊珊福建农林大学虫媒介病毒研究中心福建省植物病毒学重点实验室闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室福州350002 福建省农业科学院水稻研究所福州350002

为初步探究OsAGO家族在水稻抗病毒通路中的功能,对水稻OsAGO蛋白的基因组结构、系统发育关系、氨基酸序列及水稻瘤矮病毒(rice gall dwarf virus,RGDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black streaked dwarf virus,SRBSDV)侵染后... 详细信息

为初步探究OsAGO家族在水稻抗病毒通路中的功能,对水稻OsAGO蛋白的基因组结构、系统发育关系、氨基酸序列及水稻瘤矮病毒(rice gall dwarf virus,RGDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black streaked dwarf virus,SRBSDV)侵染后的转录组数据进行分析,同时采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术对这2种病毒侵染后OsAGO基因的相对表达量变化进行验证。结果表明,19个水稻OsAGO蛋白的外显子数量、内含子数量及编码区长度存在较大差异,且这19个OsAGO蛋白均匀分布在3个分支中;OsAGO蛋白PAZ结构域中与小RNA结合相关的YF(酪氨酸-苯丙氨酸)基序在OsAGO2、OsAGO3和OsAGO5中变成了YY(酪氨酸-酪氨酸),OsAGO蛋白PIWI结构域中与OsAGO蛋白切割活性相关的DDX(X代表H或D,即天冬氨酸-天冬氨酸-组氨酸/天冬氨酸)基序在OsAGO13中替换为LDH(亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸)基序,而在OsAGO17中不包含YF基序且DDX基序替换为HDR(组氨酸-天冬氨酸-精氨酸)基序。RGDV侵染后OsAGO5和OsAGO12基因的转录组分析结果与qPCR结果一致,其中OsAGO5上调表达,OsAGO12下调表达;SRBSDV侵染后OsAGO1a、OsAGO1b、OsAGO1c、OsAGO1d和OsAGO4b基因的转录组分析结果与qPCR结果一致,均上调表达。表明大多数OsAGO均能响应RGDV和SRBSDV的侵染。

关键词：水稻 RNA沉默 AGO蛋白水稻瘤矮病毒南方水稻黑条矮缩病毒

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Pathway Tools可视化分析水稻基因表达谱

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激光生物学报 2008年第3期17卷 371-377页

作者：张晓婷谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室

后基因组时代的到来使基因转录组学、蛋白质组学和代谢组学等高通量、多层次的生物研究手段广泛应用于植物科学研究,从海量数据中有效挖掘必要的生物信息成为当今组学研究的瓶颈问题。RiceCyc(http://***/pathway/)及其核心软件Pathway ... 详细信息

后基因组时代的到来使基因转录组学、蛋白质组学和代谢组学等高通量、多层次的生物研究手段广泛应用于植物科学研究,从海量数据中有效挖掘必要的生物信息成为当今组学研究的瓶颈问题。RiceCyc(http://***/pathway/)及其核心软件Pathway Tools是水稻代谢途径分析的有效工具。通过搜索TIGR(ht-tp://***/tdb/e2k1/osa1/)数据库,用Pathway Tools软件的omics viewer工具将耐盐品种FL478和其不耐盐亲本IR29在盐处理条件相对对照条件下的110个差异表达基因可视化展示在包含362条代谢途径信息的RiceCyc细胞代谢图上,从整体水平上分析了二者对盐胁迫反应的不同。结果表明,在相同的盐胁迫条件下,FL478相对IR29反应明显较快,前者中被诱导的代谢途径主要是能量循环过程如磷酸戊糖途径、糖酵解和三羧酸循环(TCA循环),以及核糖的分解、碳水化合物的利用途径;而后者中表达出现差异的基因主要涉及植物激素的生物合成,细胞结构组分代谢及次级代谢等途径;类黄酮合成途径在IR29中被明显诱导而在FL478中没有变化。

关键词：水稻基因表达谱代谢途径分析 RiceCyc数据库 PathwayTools

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水稻瘤矮病毒P8蛋白的结构分析及其表达

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中国生物工程杂志 2009年第8期29卷 51-56页

作者：高芳銮范国成沈建国谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建省植物病毒学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所福州350002 福建省农业科学院果树研究所福州350013 福建出入境检验检疫局福州350001

为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDVP8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌***21... 详细信息

为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDVP8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌***21(DE3),在IPTG诱导下表达。利用表达的融合蛋白免疫家兔,制备了抗血清,并以RGDV、水稻矮缩病毒(RDV)、水稻条纹病毒(RSV)、水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)4种病毒作为供试材料进行特异性检测。分析显示P8蛋白在C端位置有一个典型的跨膜螺旋区,整个蛋白也具有Phytoreo P8家族共有的典型结构域Phytoreo P8 domain。SDS-PAGE和蛋白印记分析表明,RGDVP8融合蛋白分子量约为73kDa,以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清,为水稻瘤矮病毒的快速检测及P8蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词：水稻瘤矮病毒 P8蛋白结构分析融合蛋白抗血清

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病原物诱导型植物启动子的研究方法

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生物技术通报 2012年第11期28卷 32-37页

作者：马睿陈华民吴茂森吴祖建何晨阳福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州350002 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

植物启动子是控制基因转录的DNA序列之一,按其表达方法可分为组成型(或非特异性)表达和诱导型(或特异性)表达启动子两种类型。当受到病原物侵染时,植物通常通过诱导型启动子中的W-box、RAV1 AAT和WRKY等元件/位点、调控下游基因的表达,... 详细信息

植物启动子是控制基因转录的DNA序列之一,按其表达方法可分为组成型(或非特异性)表达和诱导型(或特异性)表达启动子两种类型。当受到病原物侵染时,植物通常通过诱导型启动子中的W-box、RAV1 AAT和WRKY等元件/位点、调控下游基因的表达,作出相应的应答反应。近年来,通过计算机预测与试验测定方法的有效结合,发掘和鉴定出了一些病原物诱导型启动子,并进行了调控功能的解析。此外,在通过转基因方法改良植物抗病性的途径中,利用病原物诱导型启动子可以实现对抗病功能相关基因表达的精准控制,避免由组成型启动子持续驱动基因表达、对植株本身带来的负效应。结合本室对水稻启动子OsBTF3-p的研究结果,重点对近年来国内外有关病原物诱导型启动子及其调控元件/位点的研究方法和应用进展作一综述。

关键词：诱导型启动子调控元件转基因途径

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白背飞虱消化道的组织学与形态学观察

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中国科技论文在线精品论文 2015年第9期8卷 899-906页

作者：王海涛毛倩卓贾东升廖珍凤魏太云福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州 350002

研究使用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)及透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)对白背飞虱(Sogatella furcifera)消化道系统的超微结构进行观察.白背飞虱消化道由食道、前憩室、中肠和后肠组成.在结构上食道和前憩室属于前肠,肠壁细胞层薄,内容物较少;中肠肠壁细胞层较厚,微绒毛结构呈杆状,排列紧密,细胞核呈椭圆形,细胞分化程度较高;后肠与中肠相连,在形态上以两侧对称的一对马氏管作为分界线,后肠具有较大的肌肉层,肠壁细胞层有较多的线粒体等细胞器;直肠由多种类型的上皮细胞构成,细胞核相对于中肠较小.研究将为探究病毒在白背飞虱体内的侵染机制奠定理论基础.

关键词：植物病理学白背飞虱消化道组织形态学超微结构

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水稻齿叶矮缩病毒的研究进展

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中国科技论文在线精品论文 2015年第9期8卷 878-884页

作者：丁作美张超吴祖建吴建国福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州 350002

水稻齿叶矮缩病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)是水稻齿叶矮缩病的病原,也是重要的水稻病毒之一,它隶属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒属(Oryzavirus),是该属的典型成员,由介体褐飞虱(Nilaparvata lugens)(brown planthopper,BPH)以持久增殖型方式传播,它既能在宿主水稻中繁殖,也能在媒介昆虫体内繁殖.该病毒结构具有双层蛋白外壳,表面有刺突蛋白,有10条双链RNA(double strand RNA,dsRNA)基因组片段,是双链RNA病毒.围绕近年来国内外有关RRSV的研究进展,这里综述了RRSV病毒自身特性,包括病毒粒子、基因组、蛋白组结构功能,RRSV介体褐飞虱特性以及防治措施,并提出了RRSV研究过程中涉及的一些问题.

关键词：植物病理学水稻齿叶矮缩病毒综述褐飞虱双链RNA 防治措施

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利用酵母双杂交系统研究水稻条纹病毒三个功能蛋白的互作

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Journal of Agricultural Science and Technology 2007年第1期1卷 5-11,34页

作者：鹿连明秦梅玲谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建省植物病毒学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所福州350002

通过RT—PCR扩增获得水稻条纹病毒（Rice stripe virus，RSV）的CP、SP和NSvc4基因，分别将其与酵母双杂交载体pGADT7和pGBK77相连，构建了重组子pGAD-CP、pGBK—CP、pGAD—SP、pGBK-SP、***4、pGBK-NSnv4。利用酵母双杂交系统研究了CP、SP、NSvc4三个蛋白的自激活、蛋白自身以及三个蛋白两两之间的互作情况。结果发现：RSV的CP、SP和NSvc4三个蛋白都不具有自激活现象；CP蛋白自身能够发生互作，SP和NSvc4蛋白未观察到自身互作现象；而CP、SP和NSvc4三个蛋白两两之间也未检测到互作现象的存在。该研究结果初步明确了RSV的CP、SP和NSvc4三个蛋白之间的关系，为追一步研究适三种蛋白的功能及RSV的致病机制奠定了基础。

关键词：水稻条纹病毒酵母双杂交蛋白互作

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水稻条纹病毒主要基因在Sf9细胞系中的定位及其功能研究

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中国科技论文在线精品论文 2015年第9期8卷 885-891页

作者：陈红燕魏太云贾东升福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州 350002

通过免疫荧光标记技术对水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)编码蛋白在草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞Sf 9中的定位进行分析,共聚焦显微镜下观察到NS2蛋白聚集在细胞膜上,NSvc2的N端部分蛋白(NSvc2-N)以囊泡状结构分布在细胞... 详细信息

通过免疫荧光标记技术对水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)编码蛋白在草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞Sf 9中的定位进行分析,共聚焦显微镜下观察到NS2蛋白聚集在细胞膜上,NSvc2的N端部分蛋白(NSvc2-N)以囊泡状结构分布在细胞质,NSvc3蛋白形成颗粒状的内含体聚集在细胞质中,NS4蛋白弥散分布在整个细胞中,NSvc4蛋白形成伸出细胞表面的丝状结构.根据RSV编码蛋白在昆虫细胞内的定位可以初步推测其在介体昆虫体内具备的功能.

关键词：植物病理学水稻条纹病毒草地贪夜蛾细胞亚细胞定位

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