检索结果-内蒙古大学图书馆

食品与生物技术学报 2024年第5期43卷 138-145页

作者：杨敏仪罗雯倩贾荣业刘宇轩王荣智福建农林大学生命科学学院福建福州350002 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室福建福州350002 福建农林大学福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建福州350002

采用甲醛法制备了糠氨酸完全抗原,通过交叉验证确保了多克隆抗体的特异性,从而建立了基于该抗体的糠氨酸间接竞争酶联免疫吸附测定(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测方法。结果显示,建立的ic-ELIS... 详细信息

采用甲醛法制备了糠氨酸完全抗原,通过交叉验证确保了多克隆抗体的特异性,从而建立了基于该抗体的糠氨酸间接竞争酶联免疫吸附测定(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测方法。结果显示,建立的ic-ELISA检测方法有效检测范围为12.20~2143.42 ng/mL,最低检测限为2.69 ng/mL。该方法操作简便、迅速,成本低廉,同时具备高灵敏度和优异特异性,为高效检测食品中糠氨酸质量浓度提供了新的选择,具有一定实际应用价值。

关键词：糠氨酸动物免疫多克隆抗体 ic-ELISA

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真菌靶标N⁃肉豆蔻酰基转移酶的研究进展

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福建农林大学学报（自然科学版） 2023年第5期52卷 573-581页

作者：林染荀曾菀林刘梦昕王森史嘉鹏许海波范治彪汪世华王宇福建农林大学福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建农林大学生命科学学院福建福州350002

介绍了在生物体内特别是在病原真菌中,参与介导N⁃肉豆蔻酰化进程中的关键蛋白,即N⁃肉豆蔻酰基转移酶的作用。同时阐述了N⁃肉豆蔻酰基转移酶可作为具有广泛应用前景的抗真菌新型靶标的原因。此外,还总结了N⁃肉豆蔻酰基转移酶的催化作用机... 详细信息

介绍了在生物体内特别是在病原真菌中,参与介导N⁃肉豆蔻酰化进程中的关键蛋白,即N⁃肉豆蔻酰基转移酶的作用。同时阐述了N⁃肉豆蔻酰基转移酶可作为具有广泛应用前景的抗真菌新型靶标的原因。此外,还总结了N⁃肉豆蔻酰基转移酶的催化作用机理,以及抑制该酶活性的小分子化合物的结构基础,并展望了基于该酶结构开发抗真菌药物的研究前景。

关键词：抗真菌靶标 N⁃肉豆蔻酰化 N⁃肉豆蔻酰基转移酶抑制剂作用机制

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耐低温玉米秸秆高效腐解真菌菌株的筛选及评价

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菌物研究 2023年

作者：杨会敏李伟汪世华尹文兵福建农林大学生命科学学院福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室

利用平板快速筛选方法结合低温发酵培养对耐低温生长的45个真菌菌株进行了筛选，获得能在低温条件下同时产生漆酶、纤维素酶、半纤维素酶或过氧化物酶等多种木质素纤维素酶的菌株。结果发现：在20℃条件下进行液体发酵培养10 d后，这些... 详细信息

利用平板快速筛选方法结合低温发酵培养对耐低温生长的45个真菌菌株进行了筛选，获得能在低温条件下同时产生漆酶、纤维素酶、半纤维素酶或过氧化物酶等多种木质素纤维素酶的菌株。结果发现：在20℃条件下进行液体发酵培养10 d后，这些菌株产生的漆酶活性可达7.47 U/mL（L2431）和7.2 U/mL（X1957），纤维素酶活可达239 U/mL （L743）和167 U/mL（L259），半纤维素酶活可达179.3 U/mL （YF133-2）、120 U/mL （H2501）和113 U/mL （L2419），过氧化物酶活可达为25.1 U/mL（L2431）、24.9 U/mL（2423）和15.9 U/mL（L2431）；然后选择在低温条件能产生多种木质素纤维素酶的6株菌株进行玉米秸秆的低温腐解效果评价，分别在处理10 d、20 d、30 d、40 d和50 d时测定其产生的木质素纤维素酶活性及其玉米秸秆种各组分的降解率，发现这些菌株在低温条件下产生各种木质素纤维素酶活性达到最大值的时间并不完全一致，且对玉米秸秆各组分的降解率存在着显著的差异，但对玉米秸秆组分的总降解解率均随着时间的延长而增加，在处理50 d后的木质素降解率为24.1%-44.6%，纤维素降解率为19.3%-26.3%，半纤维素降解率为18.2%-25.1%，玉米秸秆总降解率为61.8%-87%。本研究筛选到的在低温下环境生长较快且产酶能力较强和高效腐解玉米秸秆的真菌菌株，将对我国东北寒冷地区玉米秸秆还田措施具有积极的推动作用和应用前景。

关键词：真菌菌株平板筛选木质纤维素酶玉米秸秆降解

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蛋白激酶Cla4对黄曲霉生长发育、毒素合成和致病力的影响

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菌物学报 2021年第1期40卷 174-188页

作者：秦岭李晓雯李丁赵家儒汪世华袁军福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建农林大学生命科学学院福建福州350002

黄曲霉Aspergillusflavus是机会性的动物和植物致病性丝状真菌,保守的PAK(p21-activated protein kinases)样蛋白激酶对信号传导、细胞周期进程和细胞形态发生具有重要作用。通过同源重组方法构建敲除突变株(ΔAflcla4),研究Aflcla4基... 详细信息

黄曲霉Aspergillusflavus是机会性的动物和植物致病性丝状真菌,保守的PAK(p21-activated protein kinases)样蛋白激酶对信号传导、细胞周期进程和细胞形态发生具有重要作用。通过同源重组方法构建敲除突变株(ΔAflcla4),研究Aflcla4基因对黄曲霉营养生长、分生孢子产生、菌核形成、黄曲霉毒素合成、耐受性和致病性等方面的影响。与野生型菌株相比,ΔAflcla4菌株菌丝生长速度显著降低,出现无规则分叉,分生孢子产量及色素含量明显减少;细胞壁胁迫及渗透胁迫条件下ΔAflcla4菌株的敏感性增加;突变体对花生及玉米种子的侵染能力下降,产毒能力也显著降低;突变体无法形成菌核,以应对外界不利环境变化。结果表明,黄曲霉PAK样激酶Cla4通过调节相关基因的表达进而影响生长发育、黄曲霉毒素合成及致病性,在黄曲霉中发挥重要的生物学功能。

关键词：黄曲霉 PAK激酶生长发育黄曲霉毒素生物合成侵染性

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黄曲霉Ste50衔接子蛋白对生长发育及致病性的影响

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微生物学报 2021年第8期61卷 2481-2494页

作者：袁军秦岭赵家儒王银春汪世华福建农林大学生命科学学院福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建福州350002

【目的】Ste50是真菌中重要的衔接子蛋白,在多个MAPK级联通路中起重要的信号衔接与传递作用。本研究鉴定出了黄曲霉AflSte50蛋白,并发现了其对黄曲霉的生长、产孢、致病能力和响应渗透压胁迫等方面的影响。【方法】首先通过生物信息学... 详细信息

【目的】Ste50是真菌中重要的衔接子蛋白,在多个MAPK级联通路中起重要的信号衔接与传递作用。本研究鉴定出了黄曲霉AflSte50蛋白,并发现了其对黄曲霉的生长、产孢、致病能力和响应渗透压胁迫等方面的影响。【方法】首先通过生物信息学方法在黄曲霉NRRL 3357中鉴定出ste50基因,并通过同源重组的方法构建了ste50基因的敲除和互补突变体菌株。而后,对基因敲除在黄曲霉生长发育、次级代谢产物合成和胁迫响应等方面的作用进行了研究。【结果】与野生型相比,ΔAflste50菌株生长速度和AFB1合成量降低且不能产生菌核,同时对花生、玉米种子的致病能力下降。该基因在渗透胁迫条件下正调控MAP激酶的磷酸化水平,但对细胞壁胁迫无响应。【结论】Ste50(AFLA002340)是黄曲霉衔接子蛋白,影响黄曲霉的生长、发育和AFB_(1)的合成,能够响应渗透压胁迫,在HOG通路中发挥作用。

关键词：黄曲霉衔接子蛋白 AFB1 致病性

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2种石房蛤毒素完全抗原交联方法的比较及多克隆抗体的制备

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生物安全学报 2022年第2期31卷 185-190页

作者：陈睿高烨宏赵学楠杨敏仪吴惠娟王荣智汪世华生物农药与化学生物学教育部重点实验室福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建农林大学生命科学学院福建福州350002

【目的】探究石房蛤毒素(STX)完全抗原制备方法和STX多克隆抗体免疫方案。【方法】通过碳二亚胺法(EDC)和高碘酸盐法(periodate reaction)2种交联方法,将小分子石房蛤毒素与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)和孔血蓝蛋白(KLH)分别进... 详细信息

【目的】探究石房蛤毒素(STX)完全抗原制备方法和STX多克隆抗体免疫方案。【方法】通过碳二亚胺法(EDC)和高碘酸盐法(periodate reaction)2种交联方法,将小分子石房蛤毒素与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)和孔血蓝蛋白(KLH)分别进行交联,制备了6种形式STX完全抗原,并对交联物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定和紫外吸收峰迁移变化鉴定。分别将EDC法和高碘酸盐法交联的STX-BSA、STX-KLH 4种完全抗原作为免疫原,对Balb/c小鼠进行免疫,获得STX多克隆抗体。通过间接ELISA法,对不同方法制备的多克隆抗体进行分析比较。【结果】在石房蛤毒素完全抗原的制备中,在交联方法的选择上,EDC法较高碘酸盐法更具优势;而在免疫原的选择上,STX-BSA完全抗原效果最好。【结论】本研究探究了2种制备STX完全抗原的方法,为今后多克隆抗体生产以及特异性单克隆抗体筛选提供数据支撑。

关键词：贝类毒素 STX毒素蛋白交联完全抗原 ELISA

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利用第三代纳米孔长读段测序技术构建和注释蜜蜂球囊菌的全长转录组

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中国农业科学 2021年第4期54卷 864-876页

作者：杜宇祝智威王杰王秀娜蒋海宾范元婵范小雪陈华枝隆琦蔡宗兵熊翠玲郑燕珍付中民陈大福郭睿福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建农林大学生命科学学院福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室(福建农林大学) 福建农林大学蜂疗研究所

【目的】利用第三代纳米孔(nanopore)长读段测序技术对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)的纯化菌丝(Aam)和孢子(Aas)进行测序,构建和注释球囊菌的高质量全长转录组。【方法】通过Oxford Nanopore PromethION平台对Aam和Aas进行... 详细信息

【目的】利用第三代纳米孔(nanopore)长读段测序技术对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)的纯化菌丝(Aam)和孢子(Aas)进行测序,构建和注释球囊菌的高质量全长转录组。【方法】通过Oxford Nanopore PromethION平台对Aam和Aas进行测序。利用Guppy软件对原始读段(raw reads)进行碱基识别(base calling),通过过滤短片段和低质量原始读段得到有效读段(clean reads)。通过识别两端引物鉴定全长转录本序列。通过比对Nr、Swissprot、KOG、eggNOG、Pfam、GO和KEGG数据库获得全长转录本的注释信息。分别利用CPC、CNCI、CPAT、Pfam 4种方法对长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)进行预测,取四者的交集作为高可信度的lncRNA。【结果】Aam和Aas的纳米孔测序分别测得6 321 704和6 259 727条原始读段,经质控得到5 669 436和6 233 159条有效读段,其中包含的全长有效读段分别为4 497 102(79.32%)和4 963 101(79.62%)条。共鉴定到9 859和16 795条非冗余全长转录本,N50分别为1 482和1 658 bp,平均长度分别为1 187和1 303 bp,最大长度分别为6 472和6 815 bp。Venn分析结果显示有6 512条非冗余全长转录本为菌丝和孢子所共有,分别有3 347和10 283个非冗余全长转录本为二者特有。此外,在球囊菌菌丝和孢子中共鉴定到20 142条全长转录本,其中分别有20 809、11 151、17 723、12 164、11 340和9 833条全长转录本可注释到Nr、KOG、eggNOG、Pfam、GO和KEGG数据库。注释全长转录本数量最多的物种是球囊菌、Polytolypa hystricis和荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)。GO数据库注释结果显示,上述全长转录本可注释到45个功能条目,涉及细胞组件、细胞和细胞器等细胞组分相关条目;催化活性、结合和转运器活性等分子功能相关条目;以及细胞进程、代谢进程和单一组织进程等生物学进程相关条目。KEGG数据库注释结果显示,上述全长转录本还可注释到抗生素的生物合成、核糖体、氨基酸的生物合成、碳代谢和剪接体等49条通路。此外,鉴定到648条高可信度的lncRNA,包含480条基因间区lncRNA、119条反义链lncRNA和49条正义链lncRNA。【结论】构建和注释了球囊菌的首个高质量全长转录组,为探究球囊菌转录组的复杂性,完善参考基因组的序列和功能注释信息以及深入开展球囊菌可变剪接体的功能研究提供了关键依据。

关键词：第三代高通量测序技术纳米孔测序全长转录本参考转录组蜜蜂蜜蜂球囊菌

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氮、磷、钾肥用量对水稻纹枯病病斑高度及产量的影响

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福建农林大学学报（自然科学版） 2021年第3期50卷 317-322页

作者：王秀娜董明科汪世华福建农林大学生命科学学院福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建福州350002

以杂交稻T78优2155为材料,在人工移栽模式下,对早稻和晚稻接种纹枯病菌,并研究氮、磷、钾肥用量对水稻纹枯病病斑高度和产量的影响.结果表明:水稻未施肥时纹枯病发生最轻;相同肥料处理在不同年份对纹枯病的影响不同;肥料用量显著影响了2... 详细信息

以杂交稻T78优2155为材料,在人工移栽模式下,对早稻和晚稻接种纹枯病菌,并研究氮、磷、钾肥用量对水稻纹枯病病斑高度和产量的影响.结果表明:水稻未施肥时纹枯病发生最轻;相同肥料处理在不同年份对纹枯病的影响不同;肥料用量显著影响了2019和2020年晚稻的纹枯病发生程度.2020年晚稻在未接种纹枯病菌时,未施肥的产量显著低于施用肥料的处理;氮、磷、钾肥用量未对接菌的水稻产量造成显著影响,且纹枯病严重程度与水稻产量之间无相关性;2019年未接菌早稻未施肥的千粒重显著低于施用肥料的处理.由此可见,合理使用氮、磷、钾肥可以防控水稻纹枯病,且在一定范围内增减其用量不会影响水稻产量.

关键词：氮磷钾水稻纹枯病产量

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黄曲霉中pyrG筛选标记循环利用的方法

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福建农林大学学报（自然科学版） 2021年第2期50卷 270-275页

作者：聂鑫怡薛杨王银春丁霞飞汪世华福建农林大学生命科学学院福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建福州350002

为解决黄曲霉遗传转化操作过程中遗传筛选标记受限及传统URA3/pyrG环出系统存在重复序列残留的问题,以具有尿嘧啶营养缺陷的黄曲霉CA14PTs(Δku70ΔpyrG)菌株为出发菌,利用pyrG筛选标记构建表达HA-SumO的重组菌株GHS(pyrG+),再通过重叠... 详细信息

为解决黄曲霉遗传转化操作过程中遗传筛选标记受限及传统URA3/pyrG环出系统存在重复序列残留的问题,以具有尿嘧啶营养缺陷的黄曲霉CA14PTs(Δku70ΔpyrG)菌株为出发菌,利用pyrG筛选标记构建表达HA-SumO的重组菌株GHS(pyrG+),再通过重叠PCR法构建包含GHS(pyrG+)基因组中pyrG整合位点上、下游片段的融合片段,导入GHS(pyrG+)菌株原生质体,利用DNA同源重组和5-氟乳清酸(5-FOA)的负筛选剔除pyrG筛选标记,重新获得具有尿嘧啶营养缺陷的重组菌株GHS(pyrG-).通过测序分析,确认GHS(pyrG-)重组菌株基因组中的pyrG筛选标记已被剔除且无其他序列残留.免疫杂交分析结果表明,剔除pyrG筛选标记不影响重组菌株的蛋白表达模式.

关键词： pyrG遗传筛选标记循环利用不依赖同向重复序列黄曲霉

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基于第三代长读段测序数据解析蜜蜂球囊菌基因的可变剪切与可变腺苷酸化

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微生物学报 2021年第3期61卷 667-682页

作者：杜宇王杰蒋海宾王秀娜范元婵范小雪祝智威隆琦张文德熊翠玲郑燕珍付中民陈大福郭睿福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 福建农林大学蜂产品加工与应用教育部工程研究中心福建福州350002 福建农林大学生命科学学院福建福州350002 福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室福建福州350002

【目的】蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)是一种专性侵染蜜蜂幼虫的真菌病原,导致的白垩病是严重影响养蜂生产的顽疾,每年给养蜂业造成较大损失。本研究旨在基于已获得的第三代长读段测序数据对球囊菌菌丝(Aam)和孢子(Aas)中... 详细信息

【目的】蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)是一种专性侵染蜜蜂幼虫的真菌病原,导致的白垩病是严重影响养蜂生产的顽疾,每年给养蜂业造成较大损失。本研究旨在基于已获得的第三代长读段测序数据对球囊菌菌丝(Aam)和孢子(Aas)中基因的可变剪切(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行深入分析。【方法】利用Astalavista软件鉴定Aam和Aas中基因的AS事件类型。利用IGV浏览器对部分剪切异构体(isoform)的结构进行可视化。通过TAPIS pipeline对Aam和Aas中基因的APA位点进行鉴定。通过MEME软件对Aam和Aas中全长转录本的APA位点上游50bp的序列特征进行分析并对motif进行鉴定。【结果】在Aam中共鉴定到286次AS事件,包括162次RI(Retained intron),87次A3(Alternative 3'splice-site)、32次A5(Alternative 5'splice-site)和5次SE (Skipping exon);在Aas中共鉴定到559次AS事件,包括305次RI、155次A3、85次A5、13次SE和1次MEE (Mutually exclusive exon)。进一步分析发现,现有参考基因组上的多数注释基因结构并不完整;部分注释基因在菌丝和孢子中转录形成的isoform在数量和结构方面均存在差异;部分isoform在参考基因组中没有对应的注释基因。Aam中共鉴定到2748个基因含有1个及以上的APA位点,其中含有1个APA位点的基因数量最多(726,26.42%);Aas中共鉴定到2768个基因含有1个及以上的APA位点,其中含有5个以上APA位点的基因数量最多(1180,42.63%)。部分基因在菌丝和孢子中含有不同的APA位点数。序列特征分析结果显示,球囊菌全长转录本的3'UTR的上下游表现出明显的碱基倾向性,U和A分别富集在3'UTR的上游和下游。此外,在球囊菌全长转录本的APA位点上游鉴定到4个motif,分别是UCUCCU、UCUUCU、CCCACC和CCCCCU。【结论】本研究通过对球囊菌菌丝和孢子中基因的AS和APA进行深入分析,揭示了球囊菌转录组的复杂性,为完善现有的基因组和转录组注释提供了宝贵信息,也为探究AS和APA在球囊菌的基因表达调控中的作用提供了关键基础。

关键词：长读段测序牛津纳米孔蜜蜂球囊菌可变剪切可变腺苷酸化

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