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福建医科大学学报 2017年第4期51卷 217-222页

作者：刘施佳谢云青龚福生陈路川魏晟宏应敏刚郑秋红福建医科大学教学医院、福建省肿瘤医院、福建省肿瘤生物治疗重点实验室福州350014

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)在治疗术后恶性黑色素瘤(MM)的疗效以及安全性分析。方法收集经病理确诊的MM患者77例,分为治疗组37例和对照组40例。对照组进行单纯手术治疗,治疗组于手术后进行DC-CIK治疗。对2组... 详细信息

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)在治疗术后恶性黑色素瘤(MM)的疗效以及安全性分析。方法收集经病理确诊的MM患者77例,分为治疗组37例和对照组40例。对照组进行单纯手术治疗,治疗组于手术后进行DC-CIK治疗。对2组患者进行生存随访,比较2组患者的生存期、免疫功能和生活质量改善情况,观察不良反应,并进行预后相关因素的单因素和多因素分析。结果治疗组和对照组的中位生存期分别为45和29月,治疗组的总生存期显著高于对照组(P=0.018);2组的无进展生存期差别无统计学意义(P=0.245)。治疗组患者的免疫功能和生活质量均得到显著改善,仅2例发生不良反应,且未达3/4级。是否有淋巴结转移(P=0.008)、是否进行DC-CIK治疗(P=0.02)以及治疗疗程数(P=0.031)是影响MM预后的独立预后因子。结论 DC-CIK细胞免疫治疗可延长MM患者的生存期,提高其免疫功能,改善其生活质量,治疗过程安全性高,无明显副作用;治疗疗程多于4次时,疗效更好。

关键词：黑色素瘤树突细胞细胞因子类杀伤细胞

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出核转运抑制剂的抗肿瘤临床转化研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2016年第1期23卷 106-113页

作者：刘沁颖应敏刚郑秋红福建省肿瘤医院福建医科大学教学医院福建省肿瘤生物治疗重点实验室福建福州350014

真核生物由于双层核膜的存在,蛋白及大分子物质需依赖核质转运受体进行跨核膜转运。核输出蛋白1(exportin1,XPO1)是最重要的出核转运受体之一,负责多种蛋白和RNAs的出核转运。XPO1往往在肿瘤细胞中过量表达,导致多种抑癌基因蛋白及生长... 详细信息

真核生物由于双层核膜的存在,蛋白及大分子物质需依赖核质转运受体进行跨核膜转运。核输出蛋白1(exportin1,XPO1)是最重要的出核转运受体之一,负责多种蛋白和RNAs的出核转运。XPO1往往在肿瘤细胞中过量表达,导致多种抑癌基因蛋白及生长调节蛋白亚细胞定位及功能的紊乱,从而促进了肿瘤的发生发展。XPO1不仅可作为肿瘤患者预后判断的指标,还是抗肿瘤治疗的潜在靶标。近年来,一系列XPO1小分子抑制剂的研发,尤其是高效低毒的SINE系列抑制剂的抗肿瘤临床研究,揭示了XPO1抑制剂在治疗难治性、耐药性、转移复发性血液恶性肿瘤及实体肿瘤的独特疗效,并引起广泛关注。本文就出核转运抑制剂的临床转化研究进展进行综述。

关键词：核输出蛋白1 出核转运受体出核转运信号出核转运抑制剂 SINE

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乳腺Rosai-Dorfman病12例临床病理特征分析

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中华病理学杂志 2016年第8期45卷 556-560页

作者：陈燕坪蒋翔男卢建平张红李小秋陈刚福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院病理科福州350014 福建省肿瘤生物治疗重点实验室复旦大学附属肿瘤医院病理科

目的探讨乳腺Rosai－Dorfman病（Rosai－Dorfman disease, RDD）的病理形态学、诊断及鉴别诊断。方法收集12例乳腺RDD，进行HE染色和免疫组织化学检测，光镜下观察组织学特征及免疫表型，并结合文献进行分析和讨论。结果12例乳腺RDD患... 详细信息

目的探讨乳腺Rosai－Dorfman病（Rosai－Dorfman disease, RDD）的病理形态学、诊断及鉴别诊断。方法收集12例乳腺RDD，进行HE染色和免疫组织化学检测，光镜下观察组织学特征及免疫表型，并结合文献进行分析和讨论。结果12例乳腺RDD患者均为女性，年龄15～55岁，平均37岁，其中右乳7例，左乳5例。1例伴有腋窝淋巴结肿大，其余均为乳腺单发病灶。肿物呈不规则结节状，主要位于乳腺实质内，可累及周围脂肪组织。镜下淋巴细胞、组织细胞弥漫增生伴大量浆细胞浸润，再现淋巴结中的淋巴滤泡及扩张的＂窦＂，形成明暗相间的组织学特征。增生的组织细胞呈梭形或多边形，排列成模糊的席纹状，可有一定程度异型性，间质纤维化及胶原化明显，可见较多的泡沫细胞。特征性窦性组织细胞及淋巴细胞伸入现象较为少见或不明显。免疫组织化学示组织细胞S－100蛋白、CD68、CD163阳性，CD1a阴性。结论乳腺RDD临床上应与各种炎性病变、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、Erdheim－Chester病、IgG4相关硬化性疾病、纤维组织细胞瘤、炎症型恶性纤维组织细胞瘤、霍奇金淋巴瘤等鉴别。低倍镜下明暗相间的组织学特征是诊断乳腺RDD的重要线索，特征性的淋巴细胞伸入现象具有诊断意义，免疫组织化学S－100蛋白、CD68、CD163阳性有助于诊断。

关键词：组织细胞增多症窦乳腺疾病免疫组织化学诊断鉴别

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HSP70-TKD诱导的NK细胞向肿瘤细胞迁移的实验研究

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中国免疫学杂志 2016年第8期32卷 1123-1127页

作者：汪相如陈蓉明龚福生应敏刚郑秋红福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤分子研究室生物治疗重点实验室福州350014

目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天加入2μg/ml TKD,4 d... 详细信息

目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天加入2μg/ml TKD,4 d后用流式细胞仪检测NK细胞表面杀伤性受体CD94/NKG2C的表达情况;应用流式分选将胰腺癌细胞系Colo357和结肠癌细胞系CW2分为HSP70高表达细胞亚系Colo+、CW2+和HSP70低表达细胞亚系Colo-、CW2-;Transwell小室实验检测HSP70-TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的迁移能力,MTT法检测HSP70-TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的杀伤活性。结果:流式结果显示NK细胞在干细胞培养基中培养14天可大量增殖,细胞纯度最高达(92.50±1.25)%;经HSP70-TKD诱导后,NK细胞表面杀伤性受体CD94/NKG2C的表达明显增加;经流式分选后,Colo+、Colo-细胞表面HSP70的表达分别为(78.2±2.2)%和(27.3±1.2)%,而CW2+、CW2-细胞表面HSP70的表达分别为(91.1±2.5)%和(18.2±1.0)%;HSP70-TKD诱导的NK细胞对Colo+迁移率为(68.6±2.8)%,明显高于对Colo-的迁移率(22.8±1.5)%,NK细胞对CW+迁移率为(73.5±2.7)%,明显高于对CW2-的迁移率(18.2±1.3)%;HSP70-TKD诱导的NK细胞对Colo+、Colo-的杀伤活性有显著性差异,当效靶比为20∶1时,杀伤活性分别为(61.2±3.0)%、(24.5±1.5)%,NK对CW2+、CW2-的杀伤活性有显著性差异,当效靶比为20∶1时,杀伤活性分别为(63.8±3.2)%、(22.4±1.8)%。结论:HSP70-TKD诱导的NK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞,在体外易向HSP70表达阳性的肿瘤细胞迁移。

关键词：肿瘤细胞 HSP70-TKD NK细胞迁移

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联合检测EB病毒不同抗体及EB病毒DNA在鼻咽癌血清学诊断中的价值

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现代肿瘤医学 2016年第19期24卷 3045-3048页

作者：叶倩李筱莉陈岩松郭俊英高嫣妮余小龙崔兆磊陈燕福建医科大学教学医院福建省肿瘤生物治疗重点实验室福建省肿瘤医院检验科福建福州350014

目的:评价EB病毒(EBV)抗衣壳抗原VCA-IgA抗体、抗早期抗原EA-IgA抗体、抗立即早期抗原Rta-IgG抗体和EBV-DNA检测在鼻咽癌诊断中的价值。方法:收集160例初治鼻咽癌,133例症状相似的非鼻咽癌患者和163名健康体检者的血清和血浆。采用酶联... 详细信息

目的:评价EB病毒(EBV)抗衣壳抗原VCA-IgA抗体、抗早期抗原EA-IgA抗体、抗立即早期抗原Rta-IgG抗体和EBV-DNA检测在鼻咽癌诊断中的价值。方法:收集160例初治鼻咽癌,133例症状相似的非鼻咽癌患者和163名健康体检者的血清和血浆。采用酶联免疫法检测血清VCA-IgA、EA-IgA和RtaIgG抗体的水平,用实时荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA的相对含量。按鼻咽癌2008临床TNM分期法进行分期,计算不同分组、各临床分期以及鼻咽癌治疗前后的各抗体阳性率、抗体水平以及EB-DNA的检测结果并进行数据分析。结果:鼻咽癌组VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG和EBV-DNA阳性率均高于鼻咽相关疾病组及健康对照组(均P<0.05)。血清VCA-IgA和EA-IgA结果相对A值(即r A或S/CO值)在Ⅰ、Ⅱ期低于Ⅲ、Ⅳ期,差异有统计学意义(P<0.05),但阳性率在各期间比较差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ、Ⅱ期患者Rta-IgG的r A值和阳性率明显低于Ⅲ、Ⅳ期患者(P<0.05);血浆中EBV-DNA阳性率及EBVDNA中位数水平随着临床分期的升高而增高,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗有效(CR+PR)患者的EBV-DNA含量明显低于治疗前水平(P<0.05)。结论:VCA-IgA、EA-IgA、RtaIgG、EBV-DNA检测有助于鼻咽癌的辅助诊断、临床分期预测及疗效评估。

关键词：鼻咽癌抗体 EB病毒DNA 实时荧光定量聚合酶链反应

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EB病毒不同抗体及EB病毒DNA检测在鼻咽癌血清学诊断中的应用

EB病毒不同抗体及EB病毒DNA检测在鼻咽癌血清学诊断中的应用

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2016中国医师协会检验医师年会暨第十一届全国检验与临床学术会议

作者：叶倩福建医科大学教学医院福建省肿瘤生物治疗重点实验室福建省肿瘤医院检验科

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β-catenin过表达鼻咽癌CNE2细胞模型的构建

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中国癌症防治杂志 2016年第4期8卷 201-206页

作者：林可焴苏颖何火聪邹长棪陈超福建省科技厅转化医学重点实验室福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院放射生物学及肿瘤放射治疗学研究室福州350014

目的构建β-catenin真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin并转染鼻咽癌CNE2细胞,检测β-catenin在CNE2细胞中的表达。方法反转录-聚合酶链式扩增反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增目的基因β-catenin,胶回收纯化后克隆至p GEM-T Easy载体,挑选阳性克隆,抽提质粒进行kpn I/xba I双酶切和PCR鉴定,用T4 DNA连接酶将目的基因β-catenin与真核表达载体pc DNA3.1/Hygro(+)连接,构建重组的真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin,转化感受态细胞DH5α,再次抽提质粒进行PCR、kpn I/xba I双酶切和测序鉴定,然后用Fu GENE HD将纯化的pc DNA3.1(+)/β-catenin转染入鼻咽癌CNE2细胞,经Hygromycin B筛选,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)验证转染细胞CNE2/β-catenin中β-catenin的表达。结果 PCR、双酶切及测序鉴定表明,成功构建了真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin;实时荧光定量PCR和Western blot检测表明,与未转染细胞CNE2比较,被转染的CNE2/β-catenin细胞能够上调目的基因β-catenin的表达(P<0.01)。结论成功构建真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin,并能在转染的CNE2/β-catenin细胞上调目的基因β-catenin的表达。

关键词：鼻咽肿瘤真核表达载体 β-catenin 细胞模型

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建立鼻咽癌标本库的经验和体会

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中国癌症防治杂志 2016年第1期8卷 12-15页

作者：陈超潘建基邹长棪宗井凤林可焴何火聪苏颖福建医科大学教学医院福州350014 福建省肿瘤转化医学重点实验室福州350014 福建省肿瘤医院肿瘤研究所放射生物学及肿瘤放射治疗学研究室福州350014 福建省肿瘤医院放疗科福州350014

目的利用我院鼻咽癌的标本资源,建立鼻咽癌标本库,为科学研究提供组织标本。方法收集鼻咽癌患者的组织标本及外周血液。将组织标本置于-196℃液氮中保存;将分别处理后的全血液、白细胞层、血浆和血清于-80℃低温冰箱长期保存。将所有资... 详细信息

目的利用我院鼻咽癌的标本资源,建立鼻咽癌标本库,为科学研究提供组织标本。方法收集鼻咽癌患者的组织标本及外周血液。将组织标本置于-196℃液氮中保存;将分别处理后的全血液、白细胞层、血浆和血清于-80℃低温冰箱长期保存。将所有资料数据信息录入计算机系统。结果目前标本库保存的鼻咽癌组织标本共1 152例,其中原发恶性肿瘤1 151例,复发肿瘤标本1例。鼻咽部正常组织标本95例。鼻咽慢性炎症标本24例。全血液标本、血浆标本、白细胞层标本和血清标本各2 416例。血液标本治疗前1 635例,治疗结束781例,治疗前和治疗结束配对499例。血液标本和组织标本配对614例,其中与治疗前、治疗结束的血液标本均配对者193例。结论初步建立了具有一定规模的鼻咽癌标本库,为标本库的发展积累了一定的经验。

关键词：鼻咽肿瘤标本库组织血液经验

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Wnt10b、β-catenin与鼻咽癌放射敏感性的关系

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福建医药杂志 2016年第6期38卷 81-85页

作者：林可焴苏颖何火聪邹长棪陈超福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤研究所放射生物学及肿瘤放射治疗学研究室福建省科技厅肿瘤转化医学重点实验室福州350014

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法收集对数生长期以及经直线加速器6MV X射线0、2、4、6Gy照后48h的鼻咽癌CNE2细胞和放射抗拒的CNE-2(R743)细胞,RT-PCR方法检测Wnt10b基因、β-catenin基因mRNA的表达,... 详细信息

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法收集对数生长期以及经直线加速器6MV X射线0、2、4、6Gy照后48h的鼻咽癌CNE2细胞和放射抗拒的CNE-2(R743)细胞,RT-PCR方法检测Wnt10b基因、β-catenin基因mRNA的表达,Western blot检测Wnt10b、β-catenin蛋白的表达。结果放射抗拒株CNE-2(R743)细胞的Wnt10b和β-catenin基因mRNA及蛋白的表达均高于放射敏感的CNE 2细胞(P<0.05)。经照射后CNE 2细胞和CNE-2(R743)细胞的Wnt10b和β-catenin的mRNA及蛋白表达量随着照射剂量的增加而增加;在相同照射剂量下放射抗拒株CNE-2(R743)细胞Wnt10b和β-catenin的表达量均高于CNE 2细胞(P<0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号通路可能与鼻咽癌细胞放射敏感性有关。

关键词：鼻咽癌放射敏感性 Wnt/β-catenin信号通路 Wnt10b β-catenin

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乳腺癌患者循环肿瘤细胞检测的临床意义

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中华肿瘤防治杂志 2015年第13期22卷 1009-1013页

作者：龚福生黄伟炜刘健应敏刚郑秋红吴凡李娜妮陈侃宋云飞陈克秀张连伟福建医科大学教学医院.福建省肿瘤医院肿瘤外科研究室福建福州350014 福建医科大学教学医院.福建省肿瘤医院.福建省肿瘤生物治疗重点实验室福建福州350014 福建医科大学教学医院.福建省肿瘤医院乳腺肿瘤内科福建福州350014 福建中医药大学研究生院第一临床医学院福建福州350022

目的探讨流式细胞术检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床意义。方法经梯度稀释后的乳腺癌细胞SKBR-3加入到正常人外周血单个核细胞中,以检验流式细胞术检测CTCs的敏感性。取福建省肿瘤医院2012-03-27... 详细信息

目的探讨流式细胞术检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床意义。方法经梯度稀释后的乳腺癌细胞SKBR-3加入到正常人外周血单个核细胞中,以检验流式细胞术检测CTCs的敏感性。取福建省肿瘤医院2012-03-27-2012-12-26收治的62例乳腺癌患者和同期体检的20名健康女性志愿者7.5mL外周血,分离其单个核细胞,应用流式细胞术进行CTCs检测。结果流式细胞术检测CTCs的敏感性为10-6,特异性为100%。62例乳腺癌患者外周血CTCs阳性率为53.2%(33/62),20名健康女性志愿者CTCs均为阴性,差异有统计学意义,χ2=17.814,P<0.001。乳腺癌患者外周血CTCs阳性率与TNM分期(χ2=9.637,P=0.002)、Ki-67(χ2=7.839,P=0.005)和人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2,χ2=7.629,P=0.006)表达与否相关,而与月经状态、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progestrone receptor,PR)表达与否无关。CTCs阳性率与乳腺癌患者分子亚型相关,χ2=16.862,P=0.001。化疗前乳腺癌患者CTCs阳性率为72.7%(24/33),化疗后CTCs阳性率为30.3%(10/33),差异有统计学意义,P=0.003。结论应用流式细胞术检测乳腺癌患者外周血CTCs具有较高的敏感性和特异性。乳腺癌患者外周血CTCs的阳性率与临床TNM分期、HER-2及Ki-67相关。乳腺癌分子亚型可能与外周血微转移的风险有关。

关键词：乳腺肿瘤循环肿瘤细胞流式细胞术分子亚型

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