检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2012年第9期33卷 715-719页

作者：杨婷陈广华薛胜利乔曼刘慧文田竑乔淑敏陈峰陈志哲孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室福建医科大学附属协和医院血液科福建省血液病学重点实验室

目的比较无血清及含胎牛血清培养基培养的人脐带间充质干细胞（UC-MSC）生物学特性，寻求无血清的UC—MSC培养方法。方法采用胶原酶消化脐带小块。分别采用MesenCult—XF无血清培养基和含胎牛血清的αMEM完全培养基培养UC—MSC。比较两... 详细信息

目的比较无血清及含胎牛血清培养基培养的人脐带间充质干细胞（UC-MSC）生物学特性，寻求无血清的UC—MSC培养方法。方法采用胶原酶消化脐带小块。分别采用MesenCult—XF无血清培养基和含胎牛血清的αMEM完全培养基培养UC—MSC。比较两种方法培养的早期UC-MSC细胞形态、免疫表型、增殖分化潜能、核型及对T淋巴细胞增殖抑制作用的差异。结果用无血清培养基培养制备的悬浮UC—MSC平均细胞直径为26（18—39）μm，含血清完全培养基制备的悬浮UC—MSC平均细胞直径为35（20—61）μm。早期UC—MSC采用无血清培养基培养时连续传代可倍增（5．2±0．2）倍，而采用含胎牛血清的完全培养基培养时传代可倍增（3．5±0．1）倍，UC—MSC采用无血清培养体系传代倍增数明显高于含胎牛血清的培养体系的传代倍增数（P〈0．05）。UC—MSC表达CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA—ABC抗原，不表达CIM5及CD34等造血细胞抗原。无血清培养的UC—MSC按MSC：T细胞比例为1：100、1：10及1：5共培养的放射性核素每分钟闪烁计数（CPM）值分别为（4．57±0．14）×10^4、（2．04±0．16）×10^4和（0．42±0．04）×10^4，含胎牛血清制备的UC—MSC共培养对应的CPM值分别为（5．29±0．18）×10^4、（2．55±0．15）×10^4和（0．52±0．03）×10^4，无血清培养的UC—MSC抑制T细胞增殖作用较含血清培养的UC—MSC抑制作用更明显（P〈0．05）。结论与含胎牛血清的完全培养基相比无血清培养的人UC—MSC细胞直径小、早期传代增殖潜能增加、无异种蛋白。无血清培养基制备的UC—MSC抑制T细胞增殖活性高于含胎牛血清培养基制备的UC—MSC。

关键词：脐带间充质干细胞胎牛血清无血清培养基异种蛋白

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重组hβc基因的慢病毒颗粒的包装及其在NB4细胞过表达研究

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中国实验血液学杂志 2011年第3期19卷 706-710页

作者：杨荣辉吴勇字友梅李先芳廖晓莹陈元仲福建医科大学附属协和医院血液科福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建福州350001

本研究旨在通过慢病毒介导的基因转移方法,使NB4细胞稳定过表达hβc基因,观察过表达hβc基因的NB4细胞在IL-3或GM-CSF作用下分化行为的改变,探讨hβc基因与NB4细胞分化之间的关系。以本实验室前期构建的携带hβc基因ORF的克隆质粒为模板... 详细信息

本研究旨在通过慢病毒介导的基因转移方法,使NB4细胞稳定过表达hβc基因,观察过表达hβc基因的NB4细胞在IL-3或GM-CSF作用下分化行为的改变,探讨hβc基因与NB4细胞分化之间的关系。以本实验室前期构建的携带hβc基因ORF的克隆质粒为模板,用带PmeI和BstBI酶切位点的引物PCR获得目的基因,酶切PCR产物,定向克隆至慢病毒载体***/IRES/***,构建含hβc基因的慢病毒载体,经酶切及测序鉴定其正确性,将构建好的重组质粒与包装质粒一起共转染293T细胞,收集培养液上清,感染NB4细胞,用Western blot鉴定目的基因在NB4细胞中的表达情况。以转染空载体慢病毒的NB4细胞(简称NB4-blank细胞)为对照,观察过表达hβc基因的NB4细胞(简称NB4-hβc细胞)在IL-3、GM-CSF、全反式维甲酸(ATRA)作用下分化行为的改变。结果表明:含有hβc基因的重组慢病毒载体能高效转染NB4细胞,并使NB4细胞稳定过表达hβc基因。NB4-hβc细胞,在IL-3或GM-CSF作用下CD11b表达水平上调,但上调的幅度均低于ATRA作用下的上调幅度,且未观察到形态学改变。NB4-Blank细胞在IL-3或GM-CSF作用下CD11b表达水平无明显变化。结论 :通过慢病毒介导的基因转移方法,成功地使NB4细胞稳定过表达hβc基因,IL-3或GM-CSF在一定程度上能诱导过表达hβc基因的NB4细胞向中性粒细胞分化,但不能使其完全分化成熟。

关键词： hβc基因慢病毒 NB4细胞 IL-3 GM—CSF

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MicroRNA-143在急性白血病患者与正常人骨髓细胞中的差异表达及意义

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中国实验血液学杂志 2011年第2期19卷 308-311页

作者：张媛媛郑永青李小雨吴淡森谢水玲沈建箴福建医科大学附属协和医院血液科福建省血液病研究所福建省重点实验室福建福州350001

microRNA(miR)与急性白血病的发生密切相关。为分析急性白血病患者与正常人骨髓细胞中miR-143的差异表达情况,常规提取50例急性白血病患者及20例正常人骨髓细胞中的总RNA,应用实时荧光定量PCR的方法检测标本中miR-143的表达状况。结果表... 详细信息

microRNA(miR)与急性白血病的发生密切相关。为分析急性白血病患者与正常人骨髓细胞中miR-143的差异表达情况,常规提取50例急性白血病患者及20例正常人骨髓细胞中的总RNA,应用实时荧光定量PCR的方法检测标本中miR-143的表达状况。结果表明:急性白血病患者骨髓细胞中miR-143表达明显下调(p<0.05);化疗缓解后表达明显上调;miR-143的表达与靶基因DNMT3A呈负相关。结论:miR-143在白血病病人骨髓细胞中的表达下调,这可能与白血病的发生发展有关。

关键词：急性白血病 miR-143 骨髓细胞 Q-PCR

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骨髓微环境介导的白血病耐药机制研究进展

引用

中国实验血液学杂志 2011年第3期19卷 848-850页

作者：付冰林艳娟福建医科大学附属协和医院血液科福建省血液病研究所福建省重点实验室福建福州350001

骨髓微环境由骨髓基质细胞、成骨细胞、破骨细胞及其产生的细胞外基质和细胞因子等组成。这些细胞通过分泌可溶性细胞因子和细胞外基质支持造血细胞的生长、增殖、分化。它不仅支持正常和恶性造血细胞的生长,并通过分泌可溶性细胞因子... 详细信息

骨髓微环境由骨髓基质细胞、成骨细胞、破骨细胞及其产生的细胞外基质和细胞因子等组成。这些细胞通过分泌可溶性细胞因子和细胞外基质支持造血细胞的生长、增殖、分化。它不仅支持正常和恶性造血细胞的生长,并通过分泌可溶性细胞因子、细胞黏附作用、上调耐药基因及改变细胞周期等机制庇护白血病细胞所免于化疗药物的杀伤。本文就骨髓微环境介导的几种耐药机制的研究进展作一综述,其中包括可溶性因子介导的耐药,细胞黏附介导的耐药,某些耐药基因的上调,对白血病细胞代谢的调节和肿瘤细胞周期改变等。

关键词：骨髓微环境白血病耐药性

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