检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药导报 2024年第30期21卷 110-114页

作者：张晓迪刘瑞曹猛谢清华吴昊尹文海春旭刘江正空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室陕西西安710032 空军军医大学西京医院急诊科西京创新研究院陕西西安710032

为推动新质生产力发展,贡献新时代高等教育力量,适应实战化教学背景下的教学教育改革要求,解决院校理论授课与实战任务贴合不紧密的问题,在预防医学专业本科生授课中以“化学救援”案例式教学为例,进行以优化人才培养目标,增加实践课程... 详细信息

为推动新质生产力发展,贡献新时代高等教育力量,适应实战化教学背景下的教学教育改革要求,解决院校理论授课与实战任务贴合不紧密的问题,在预防医学专业本科生授课中以“化学救援”案例式教学为例,进行以优化人才培养目标,增加实践课程教学内容,调整教学模式和方法等教学改革与实施。在收集设计典型化学救援案例中,根据实际需求列举关键现实问题,以学员为中心,以问题为导向,以情景式分组讨论形式,提出解决方案,集体总结评价等是课程改革与实施的重要创新。通过以问题为导向的案例式教学课内实践,进行课堂内外有效衔接,为理论知识巩固与实践能力强化提供有效途径,达到显著的育人效果,很好地发挥高等教育在创新人才培养中的示范作用,为新时代新质生产力的形成和发展做出重要贡献。

关键词：化学救援案例式教学实践教学问题式教学

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雾化吸入NaClO致小鼠肺损伤模型的构建及机制研究

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癌变．畸变．突变 2024年第4期36卷 281-287,297页

作者：李佳威郭晓洁师敏婕李文丽刘江正空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室教育部特殊作业环境危害评估与防治重点实验室陕西西安710032 西安建筑科技大学环境与市政工程学院陕西西安710055

目的:建立次氯酸钠(NaClO)消毒剂诱导小鼠肺损伤模型,探讨其吸入毒性机制。方法:将0、75、150、300μg/L的NaClO溶液雾化成细微液滴给小鼠静态吸入染毒5 min,染毒后24 h使用肺功能仪检测小鼠肺功能,眼眶取血,收集肺泡灌洗液(BALF)和肺... 详细信息

目的:建立次氯酸钠(NaClO)消毒剂诱导小鼠肺损伤模型,探讨其吸入毒性机制。方法:将0、75、150、300μg/L的NaClO溶液雾化成细微液滴给小鼠静态吸入染毒5 min,染毒后24 h使用肺功能仪检测小鼠肺功能,眼眶取血,收集肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。采用HE染色观察肺组织结构,透射电镜观察肺组织细胞内线粒体等细胞器形态,TUNNEL染色观察肺组织细胞凋亡情况。BCA法测BALF蛋白浓度,流式细胞术检测BALF中细胞数量,Western blot检测肺组织抗氧化酶、凋亡及自噬相关蛋白的相对表达量,ELISA试剂盒检测血清、BALF和肺组织匀浆中炎症相关蛋白含量,qPCR检测肺组织匀浆炎症和抗氧化酶相关基因的mRNA表达水平,试剂盒检测肺组织匀浆中MDA含量和SOD酶活性。结果:与对照组相比,75μg/L NaClO染毒组小鼠肺BALF中蛋白浓度变化不明显,150和300μg/L NaClO染毒组BALF中蛋白浓度明显升高且细胞数量明显增多(均为P<0.05),故后续选择150μg/L NaClO作为研究浓度。与对照组相比,150μg/L NaClO染毒组肺功能损伤明显(P<0.05),肺组织匀浆中抗氧化酶SOD2和Nrf2的蛋白表达水平降低(P<0.05),SOD2、Nrf2、CAT mRNA的表达水平降低(P<0.05),肺组织中IL-1β和TNF-α在血清、BALF和肺组织匀浆中的浓度均升高(P<0.05),肺组织匀浆中IL-1β和TNF-αmRNA相对表达量升高(P<0.05),凋亡细胞数量明显增加,Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05);且肺组织细胞线粒体明显肿胀,有自噬溶酶体出现,Beclin1蛋白表达水平升高(P<0.05),P62蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论:成功建立了NaClO诱导小鼠肺损伤模型,并发现NaClO可诱导小鼠肺组织发生凋亡、氧化应激、炎症和自噬。

关键词：次氯酸钠肺损伤细胞凋亡氧化应激炎症自噬

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沉默信息调节因子1在急性肺损伤中作用的研究进展

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癌变.畸变.突变 2025年第1期37卷 72-74,80页

作者：邓紫丰师敏婕詹天豪马耀刘建豪马丞飞赵昱舜李嘉刘江正孔德钦空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室教育部特殊作业环境危害评估与防治重点实验室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员大队陕西西安710032 空军军医大学航空航天医学系飞行人员康复与疗养教研室陕西西安710032

急性肺损伤(ALI)是一种常见的危重症,具有高发病率和高死亡率,其发病机制复杂,治疗手段有限。沉默信息调节因子1(SIRT1)是一种高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶,具有调控基因转录、能量代谢和细胞衰老等多种生物... 详细信息

急性肺损伤(ALI)是一种常见的危重症,具有高发病率和高死亡率,其发病机制复杂,治疗手段有限。沉默信息调节因子1(SIRT1)是一种高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶,具有调控基因转录、能量代谢和细胞衰老等多种生物学功能,广泛参与多种生理病理过程。近年来,SIRT1在ALI中的作用逐渐受到关注。本文从调节基因转录、抗衰老和调控氧化应激等三个方面重点介绍了SIRT1的生物学功能,阐述了其在ALI中的表达变化,并从抑制炎症反应、减轻细胞凋亡和焦亡、调控氧化应激等方面解析SIRT1在ALI中发挥保护作用的机制。本文还总结了miRNA、小分子激动剂等通过靶向SIRT1发挥救治作用的研究进展,因此,靶向SIRT1的救治具有巨大临床转化潜力,其深入研究将为ALI提供新的治疗策略和思路。

关键词：急性肺损伤沉默信息调节因子1 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化应激细胞凋亡

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国际禁化武组织化学危害医学防护与救援培训

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中国急救复苏与灾害医学杂志 2023年第10期18卷 1383-1386页

作者：刘江正刘瑞于卫华张伟孔德钦吴昊彭洁王钊张晓迪海春旭李文丽空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室/特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室/陕西省自由基生物学与医学重点实验室陕西西安710032 空军军医大学教务处陕西西安710032

目的为了更好的举办国际禁化武组织(OPCW)化学危害医学防护与救援培训班,进一步帮助和提升禁化武公约成员国履约能力和水平,需要总结前期成功举办培训班的经验和做法。方法从教学内容、教学方法、师资队伍和考核方式等方面系统的总结... 详细信息

目的为了更好的举办国际禁化武组织(OPCW)化学危害医学防护与救援培训班,进一步帮助和提升禁化武公约成员国履约能力和水平,需要总结前期成功举办培训班的经验和做法。方法从教学内容、教学方法、师资队伍和考核方式等方面系统的总结国际医学培训班的教学经验和体会。结果优化教学内容,实践公约宗旨和满足学员诉求;创新教学方法,实现教育理念与国际接轨;精选师资队伍,强化国际视野和政治担当;改革考核方式,突出履约实践能力和过程评价。结论国际培训的成功实施促进了公约成员国之间的交流与合作,上述经验和体会对今后举办类似国际培训班提供了有益的参考和借鉴。

关键词：国际禁化武组织化学危害医学防护培训

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己酮可可碱调节S1PR1修复内皮糖萼在氯气致急性肺损伤中的作用

己酮可可碱调节S1PR1修复内皮糖萼在氯气致急性肺损伤中的作用

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：赵晨茜刘瑞任晓婷刘江正于卫华王钊吴昊海春旭张晓迪空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室

目的氯气（Cl）属窒息性毒剂,中毒事件频发,致急性肺损伤（ALI）甚至窒息死亡,缺乏特效救治药物。本研究探讨己酮可可碱（PTX）对Cl损伤的干预作用,为药物研发和临床救治提供研究思路。材料和方法氯气购自常州市京华气体有限公司,实验分... 详细信息

目的氯气（Cl）属窒息性毒剂,中毒事件频发,致急性肺损伤（ALI）甚至窒息死亡,缺乏特效救治药物。本研究探讨己酮可可碱（PTX）对Cl损伤的干预作用,为药物研发和临床救治提供研究思路。材料和方法氯气购自常州市京华气体有限公司,实验分为:（1）40只雄性SD大鼠随机分为5组,设为对照组、1h组、3 h组、6 h组和12 h组,观察Cl损伤时间效应关系;（2）40只雄性SD大鼠随机分为5组,设为对照组、Cl暴露组、PTX（50 mg/kg）组、PTX（100 mg/kg）组、PTX（200 mg/kg）组,探讨PTX干预机制。（3）大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）设为对照组、Cl暴露组（100ppm×15 min）、Cl暴露（100ppm×15 min）+PTX（40nmol·L-1）组、PTX（40nM）组。大鼠染毒剂量为400ppm×15 min,染毒后立即腹腔注射PTX干预给药,对照组给予同等条件下空气暴露和生理盐水注射。细胞染毒后继续培养1 h进行相关实验。采用透射电镜、H&E染色和免疫荧光观察病理与形态学变化;分子对接实验预测PTX和S1PR1的结合方式;实时定量PCR方法检测相关分子mRNA表达;蛋白质印迹法检测蛋白水平;酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清和肺泡灌洗液（BALF）中相关分子的含量,同时观察肺通透性的变化。结果（1）Cl损伤后3 h,透射电镜下可见肺实变,肺组织炎细胞浸润;血清中eNOs含量显著降低、ET-1以及BALF中炎症因子含量显著增高（P<0.05）。（2）分子对接结果显示PTX可通过静电作用与S1PR1-RAT结合。与暴露组相比,50 mg/kg PTX剂量组肺实变减轻、红细胞和炎症细胞数量减少明显,糖萼主要构成部分得到修复;肺组织中S1PR1和HPA mRNA表达水平显著改善（P<0.05）;血清S1P含量以及S1PR1免疫荧光强度显著升高（P<0.05）;BALF中eNOs与糖萼的主要成分HS、CS和Syndecan-1含量改善,ET-1以及炎症因子含量显著降低（P<0.05）。此外,代表内皮功能的内皮细胞特异性分子-1（ESM-1）给药后显著降低,同时肺通透性显著改善（P<0.05）。（3）PTX 40 nmol·L-1干预细胞后,S1PR1蛋白含量显著恢复,炎症因子显著降低,与体内实验结果一致。结论:PTX在体内可与S1PR1结合,通过调控炎症因子进而修复内皮糖萼,降低肺血管通透性。PTX对Cl引起的ALI有一定的干预作用。研究为Cl中毒特效药筛选提供了研究思路和理论依据。

关键词：氯气急性肺损伤己酮可可碱 S1PR1 糖萼

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己酮可可碱对叔丁基过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

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空军军医大学学报 2023年第3期44卷 210-215页

作者：刘萌萌赵晨茜郭鹏刘江正孔德钦任晓婷刘瑞海春旭张晓迪武警后勤学院卫生勤务系天津300309 空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室陕西西安710032

目的探讨己酮可可碱(PTX)对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激和线粒体功能的影响。方法利用t-BHP诱导建立HUVECs损伤模型,PTX预处理筛选合适的干预剂量;Mito Tracker Green、Mito SOX和Rho 123探针分别检... 详细信息

目的探讨己酮可可碱(PTX)对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激和线粒体功能的影响。方法利用t-BHP诱导建立HUVECs损伤模型,PTX预处理筛选合适的干预剂量;Mito Tracker Green、Mito SOX和Rho 123探针分别检测线粒体质量、活性氧(ROS)和膜电位的改变;设置对照组、t-BHP组、PTX预处理组和单纯PTX组,对照组细胞不做处理,t-BHP组细胞用105μmol/L t-BHP处理,单纯PTX组用1 mg/L PTX处理,PTX预处理组用105μmol/L t-BHP和1 mg/L PTX共同处理。采用MTT法检测细胞的活力;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型谷胱甘肽(GSH)和三磷酸腺苷(ATP)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力;Western blotting法检测细胞中SOD1、SOD2和核转录因子相关因子2(Nrf-2)蛋白表达水平;定磷法检测HUVECs细胞Na^(+),K^(+)-ATPase和Ca^(2+),Mg^(2+)-ATPase的活力。结果霍恩氏法计算并测得HUVECs在t-BHP暴露6 h的半数致死量为105μmol/L;PTX预处理12 h、浓度大于1 mg/L即可升高HUVECs细胞活力(P<0.05);与对照组相比,t-BHP处理后,Mito Tracker Green和Rho 123绿色荧光强度下降,Mito SOX红色荧光强度升高;与t-BHP组相比,PTX预处理组能提高HUVECs细胞活力,降低细胞培养上清中LDH、MDA和GSSG水平,细胞中SOD活力以及Nrf-2蛋白表达水平(P<0.05),升高HUVECs培养上清中GSH水平和GSH/GSSG比值、细胞中SOD1蛋白表达水平、ATP水平以及Na^(+),K^(+)-ATPase和Ca^(2+),Mg^(2+)-ATPase活力(P<0.05)。结论PTX对t-BHP诱导的HUVECs氧化应激和线粒体损伤有保护作用。

关键词：叔丁基过氧化氢氧化应激己酮可可碱线粒体

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盐酸右美托咪定对2-氯乙基乙基硫醚致人支气管上皮细胞损伤的保护作用及机制

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癌变．畸变．突变 2024年第5期36卷 342-348,358页

作者：师敏婕李嘉邓紫丰詹天豪刘建豪赵昱舜李文丽刘江正孔德钦空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室陕西省自由基生物学与医学重点实验室陕西西安710032 陕西中医药大学公共卫生学院陕西西安712046 空军军医大学航空航天医学系飞行人员康复与疗养教研室陕西西安710032

目的:研究盐酸右美托咪定(DEX)对糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)诱导的人支气管上皮细胞损伤的潜在保护作用及机制。方法:使用浓度为1.2 mmol/L的CEES处理BEAS-2B细胞24 h,构建糜烂性毒剂导致细胞损伤的模型。使用不同浓度(0.1~1000... 详细信息

目的:研究盐酸右美托咪定(DEX)对糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)诱导的人支气管上皮细胞损伤的潜在保护作用及机制。方法:使用浓度为1.2 mmol/L的CEES处理BEAS-2B细胞24 h,构建糜烂性毒剂导致细胞损伤的模型。使用不同浓度(0.1~1000μmol/L)的DEX预处理BEAS-2B细胞2 h后加CEES染毒24 h,再用CCK-8法检测细胞活力。选择DEX最佳保护剂量,在光镜下观察细胞形态,使用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率,DHE、MitoSOX和RHOD123荧光探针分别检测细胞内总活性氧(ROS)、线粒体ROS(mtROS)和线粒体膜电位水平,通过试剂盒检测总超氧化物歧化酶(SOD)、CuZn-SOD、Mn-SOD酶活性和谷胱甘肽(GSH)含量变化。结果:与对照组相比,CEES染毒组细胞活力均明显降低(P<0.01),凋亡细胞数显著升高(P<0.01),细胞内总ROS、mtROS水平均明显升高(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.01),总SOD、CuZn-SOD、Mn-SOD酶活性均升高(P<0.01),GSH含量降低(P<0.01)。与CEES染毒组相比,0.1~1000μmol/L DEX干预组细胞活力均升高(P<0.01),其中10μmol/L DEX干预组细胞活力升高最明显(P<0.01),后续用10μmol/L作为DEX干预组的最佳剂量。使用10μmol/L DEX干预显著抑制了CEES诱导的细胞凋亡(P<0.01),DEX干预组ROS和mtROS均降低(P<0.01),线粒体膜电位升高(P<0.05),总SOD、CuZn-SOD酶活力升高(P<0.01),GSH含量升高(P<0.01)。结论:DEX对CEES导致的人支气管上皮细胞损伤具有保护作用,其机制可能与调控线粒体稳态、降低mtROS的产生及增强细胞抗氧化水平有关。

关键词：糜烂性毒剂盐酸右美托咪定线粒体氧化应激活性氧

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线粒体抗氧化剂MitoQ减轻氮芥诱导小鼠急性肝损伤

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空军军医大学学报 2023年第3期44卷 222-228页

作者：刘江正宋德心马丞飞刘思佳赵昱舜刘建豪徐安琦艾多龙子孔德钦海春旭空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室陕西省自由基生物学与医学重点实验室教育部特殊作业环境危害评估与防治重点实验室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员四大队陕西西安710032

目的探讨线粒体抗氧化剂甲磺酸米托醌(MitoQ)对氮芥(HN2)诱导小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用及相关机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、MitoQ对照组、HN2染毒组、MitoQ+HN2组(MitoQ治疗组)。检测指标如下:体质量;血清... 详细信息

目的探讨线粒体抗氧化剂甲磺酸米托醌(MitoQ)对氮芥(HN2)诱导小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用及相关机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、MitoQ对照组、HN2染毒组、MitoQ+HN2组(MitoQ治疗组)。检测指标如下:体质量;血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性;肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达、caspase-3活性、凋亡细胞比例;肝组织HE染色检测病理结构变化;血清血糖水平、血清和肝组织三酰甘油(TG)水平;油红O染色检测肝中性脂肪含量;肝组织丙二醛(MDA)含量、还原型谷胱甘肽和活性氧(ROS)水平;血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)浓度。结果2 mg/kg的HN2腹腔染毒可以成功诱导小鼠发生ALI,同时伴有糖脂代谢紊乱。与HN2染毒组小鼠相比,MitoQ治疗组小鼠血清ALT和AST活性降低(P<0.05),肝病理损伤程度显著减轻,Bax/Bcl-2比值、caspase-3活性和凋亡细胞比例降低(P<0.05),肝组织TG含量明显升高(P<0.05),同时肝组织MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05)。此外,MitoQ干预后小鼠血清TNF-α和IL-6浓度较HN2染毒组显著降低(P<0.05)。结论MitoQ通过抗凋亡、抗氧化和抗炎作用发挥拮抗HN2诱导小鼠ALI的作用,可能是HN2中毒的潜在候选药物。该研究为糜烂性毒剂中毒的临床救治提供了新思路。

关键词：氮芥肝损伤线粒体抗氧化剂甲磺酸米托醌

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肝细胞核因子-1b在糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚诱导急性肺支气管上皮细胞损伤中的作用及其机制

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癌变．畸变．突变 2024年第1期36卷 1-8页

作者：孔德钦刘思佳刘建豪马耀马丞飞赵昱舜周嘉恒师敏婕李嘉刘江正空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室/陕西省自由基生物学与医学重点实验室/教育部特殊作业环境危害评估与防治重点实验室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员二大队陕西西安710032 空军军医大学航空航天医学系飞行人员康复与疗养教研室陕西西安710032

目的:探讨肝细胞核因子-1b(HNF-1b)在糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)诱导人源性肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)损伤中的作用及其机制。方法:用不同浓度(0、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2 mmol/L)的CEES染毒BEAS-2B细胞24 h,使用CCK-8法检测细... 详细信息

目的:探讨肝细胞核因子-1b(HNF-1b)在糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)诱导人源性肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)损伤中的作用及其机制。方法:用不同浓度(0、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2 mmol/L)的CEES染毒BEAS-2B细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力,光镜下观察细胞形态,分别采用DCFH-DA和MitoSOX荧光探针检测细胞总活性氧(ROS)和线粒体ROS水平。Western blot检测BEAS-2B细胞中HNF-1b蛋白的表达。再利用慢病毒感染技术构建过表达HNF-1b的BEAS-2B细胞系,用1 mmol/L CESS处理24 h后,分别采用CCK-8法测定细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,MitoSOX和DHE荧光探针检测线粒体ROS和细胞总ROS水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位。结果:与对照组比较,0.6~1.2 mmol/L CEES染毒后细胞活力均降低(P<0.01);细胞形态发生损伤性改变;0.8~1.2 mmol/L CEES染毒后细胞总ROS和线粒体ROS水平均增加(P<0.01);CEES染毒组细胞HNF-1b蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。慢病毒转染后,与对照组正常细胞相比,CEES染毒组HNF-1b过表达细胞的细胞活力显著增加(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),线粒体膜电位的损伤缓解,且线粒体ROS和细胞内总ROS水平显著降低(P<0.01)。结论:糜烂性毒剂CEES能够导致肺支气管上皮细胞中HNF-1b表达降低,过表达HNF-1b能够减轻CEES诱导的细胞损伤和凋亡,抑制线粒体功能障碍,其机制可能与抗氧化有关。上述结果提示HNF-1b可能是糜烂性毒剂导致肺损伤的新靶点,激活HNF-1b可能是糜烂性毒剂毒性靶点治疗的新策略。

关键词：糜烂性毒剂 2-氯乙基乙基硫醚肝细胞核因子-1b BEAS-2B细胞氧化应激

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来氟米特调控巨噬细胞极化及其机制研究

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癌变.畸变.突变 2025年第2期37卷 121-127,133页

作者：张瑜娇姜晓旭白瑞萍黄新怡王钊吴昊于卫华刘启玲陕西中医药大学公共卫生学院陕西咸阳712046 空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室陕西省自由基生物学与医学重点实验室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院计算机基础教研室陕西西安710032

目的:探讨来氟米特对巨噬细胞极化的影响及其分子机制。方法:200 mmol/L来氟米特分别处理小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)0、1、3、6、12和24 h后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞沉淀中抗炎因子(IL-10、Arg-1、CD206)、促炎因子(TNF-... 详细信息

目的:探讨来氟米特对巨噬细胞极化的影响及其分子机制。方法:200 mmol/L来氟米特分别处理小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)0、1、3、6、12和24 h后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞沉淀中抗炎因子(IL-10、Arg-1、CD206)、促炎因子(TNF-α、IL-6)以及线粒体融合基因(MFN1、MFN2)的mRNA表达水平;ELISA法检测不同时长来氟米特处理后细胞培养上清液抗炎因子含量;DCFH-DA和Mito-LX染色法检测细胞内总活性氧(ROS)和线粒体ROS水平;Mitotracker-Green染色激光共聚焦观察细胞线粒体形态;试剂盒测定细胞内氧化产物丙二醛(MDA)含量。分别采用qPCR和Western blot法测定过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的mRNA和蛋白表达;PPAR-γ抑制剂T0070907(40 mmol/L)预处理细胞4 h后,分别采用qPCR和Western blot法检测细胞抗炎因子的变化。结果:qPCR和ELISA试验检测结果表明,相较于对照组,来氟米特处理1、3、6、12和24 h后细胞的抗炎因子IL-10、Arg-1、CD206的mRNA相对表达水平升高(P<0.05);线粒体融合基因MFN1、MFN2的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),线粒体长度增加(P<0.05),细胞和线粒体内ROS和MDA含量降低(P<0.05)。相较于空白对照组,来氟米特组PPAR-γ的mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),而其抑制剂T0070907可逆转来氟米特诱导抗炎因子升高和促炎因子降低(P<0.05)。结论:线粒体融合激动剂来氟米特可通过降低ROS生成和激活PPAR-γ调控巨噬细胞极化,可能作为抗炎治疗的潜在靶点。

关键词：来氟米特巨噬细胞抗炎过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 线粒体融合

来源：评论

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