检索结果-内蒙古大学图书馆

上海医学 2001年第2期24卷 99-101页

作者：徐明娟崔英王昭梅宋亮年第二军医大学长海医院妇产科上海200433 基础医学部病理生理学教研室

目的　观察糖皮质激素 (Dex)、孕激素 (P)、雌激素 (E)、雄激素 (T)等甾体激素 (10 -10 ～ 10 -6mol/L)对人卵巢癌细胞系 3AO增殖及分化的影响。方法　以不同浓度Dex、E、P、T处理培养的 3AO细胞 ,采用活细胞计数观察细胞增殖情况 ,用... 详细信息

目的　观察糖皮质激素 (Dex)、孕激素 (P)、雌激素 (E)、雄激素 (T)等甾体激素 (10 -10 ～ 10 -6mol/L)对人卵巢癌细胞系 3AO增殖及分化的影响。方法　以不同浓度Dex、E、P、T处理培养的 3AO细胞 ,采用活细胞计数观察细胞增殖情况 ,用氨基氨替比林法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,用酶联免疫法测定 3AO细胞标志抗原CA12 5水平的变化 ;采用完整细胞饱和测定法测定 3AO细胞中糖皮质激素受体 (GR)的表达。结果　Dex对3AO细胞的增殖有明显的抑制作用 ,糖皮质激素受体拮抗剂Ru486可以阻断糖皮质激素对 3AO的增殖抑制作用 ;E、P、T等甾体激素对 3AO细胞的增殖无明显作用 (P >0 .0 5 )。Dex作用后ALP活性较对照明显增加 ,CA12 5水平明显降低 (P <0 .0 0 1) ;而E、P、T作用后ALP活性无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,CA12 5较对照组明显下降(P <0 .0 0 1)。 3AO细胞含有可饱和性高亲和力GR ,最大结合容量为 92 .2 6± 2 3.30fmol/ 10 -6cells ,平衡解离常数为 1.37± 0 .19nmol/L ,特异结合实验表明 ,GR只与糖皮质激素特异结合。结论　糖皮质激素对 3AO细胞系有增殖抑制和诱导分化的作用 ,其调节作用通过GR来介导 ;E、P、T等甾体激素对 3AO细胞无增殖抑制作用。

关键词：甾体激素碱性磷酸酶肿瘤标志抗原卵巢肿瘤

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糖皮质激素对兔脑、肺和肝组织糖皮质激素受体的调节

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 28-29页

作者：王军朱家麟张宝仁郝家骅徐志云谭金兴第二军医大学长海医院胸心外科第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松（Ｄｅｘ）对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比... 详细信息

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松（Ｄｅｘ）对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比较无显著差异。提示糖皮质激素（ＧＣ）对兔不同靶器官ＧＲ的调节存在不同特点。

关键词：糖皮质激素受体脑肺肝

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大鼠浸水应激时胃粘膜损伤和β－内啡肽的关系

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第二军医大学学报 1995年第4期16卷 348-350页

作者：杨秀疆张贤康李少华陈士葆第二军医大学长征医院消化内科第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

本研究应用浸水应激（ＷＩＳ）复制大鼠急性胃粘膜病变（ＡＧＭＬ），并观察其血浆和垂体中β－内啡肽免疫活性物质（ｉｒ－β－ＥＮ）含量的变化。结果表明：随ＷＩＳ时间延长，大鼠胃粘膜跨膜电位（ＰＤ）降低，溃疡指数逐渐增加（Ｐ... 详细信息

本研究应用浸水应激（ＷＩＳ）复制大鼠急性胃粘膜病变（ＡＧＭＬ），并观察其血浆和垂体中β－内啡肽免疫活性物质（ｉｒ－β－ＥＮ）含量的变化。结果表明：随ＷＩＳ时间延长，大鼠胃粘膜跨膜电位（ＰＤ）降低，溃疡指数逐渐增加（Ｐ＜０．０１），粘膜血流量变化不大（Ｐ＞０．０５）；血液β－ＥＰ逐渐升高，２ｈ达峰值（Ｐ＜０．０１），垂体β－ＥＰ含量５ｍｉｎ达高峰后随ＷＩＳ时间增加呈下降趋势，４ｈ含量与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５），垂体β－ＥＰ与胃粘膜溃疡指数负相关（ｒ＝－０．７５，Ｐ＜０．０１）。上述结果提示：ＷＩＳ引起ＡＧＭＬ及其严重程度可能与β－ＥＰ有关。

关键词：浸水应激胃粘膜病变内啡肽

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肿瘤细胞与内皮细胞粘附的定量测定

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 385-386页

作者：江道振王元和卢建第二军医大学长征医院普通外科第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

以往，在体外检测肿瘤细胞或血细胞与内皮细胞粘附率变化的实验中，一般用放射性核素标记靶细胞。常用的核素有１２５Ｉ，５１Ｃｒ，３Ｈ等［１～３］。这些方法往往需要昂贵的设备，还受核素半衰期的影响，且实验中需要将靶细胞与放射... 详细信息

以往，在体外检测肿瘤细胞或血细胞与内皮细胞粘附率变化的实验中，一般用放射性核素标记靶细胞。常用的核素有１２５Ｉ，５１Ｃｒ，３Ｈ等［１～３］。这些方法往往需要昂贵的设备，还受核素半衰期的影响，且实验中需要将靶细胞与放射性核素一起孵育，费时。个别放射性核...

关键词：肿瘤细胞内皮细胞细胞粘附定量分析

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人肝癌SM MC-7721细胞热休克反应时糖皮质激素受体mRNA减少机制初探

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中华内分泌代谢杂志 2002年第6期18卷 478-480页

作者：徐晓辉王学敏向正华郭兴中缪明永徐仁宝第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的　探讨人肝癌SMMC 772 1细胞热休克反应时糖皮质激素受体 (GR)mRNA减少的机制。方法　利用聚合酶链反应 (PCR)从大鼠GRcDNA质粒及人肝癌SMMC 772 1细胞基因组中扩增大鼠GR跨外显子 3 ,4,5片段 (与人GR跨外显子 3 ,4,5片段同源性在 ... 详细信息

目的　探讨人肝癌SMMC 772 1细胞热休克反应时糖皮质激素受体 (GR)mRNA减少的机制。方法　利用聚合酶链反应 (PCR)从大鼠GRcDNA质粒及人肝癌SMMC 772 1细胞基因组中扩增大鼠GR跨外显子 3 ,4,5片段 (与人GR跨外显子 3 ,4,5片段同源性在 89%以上 )及人GR内含子E的DNA片段 ,构建转录质粒 ,并在体外进行转录 ,用地高辛标记反义RNA探针 ,进行细胞原位杂交 ,碱性磷酸酶底物NBT BCIP显色 ,计算机图像分析系统进行扫描半定量分析。结果　人肝癌SMMC 772 1细胞 44℃培养 1h后 ,用跨外显子和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比未经热休克反应组低 ;加放线菌素D后热休克反应组 ,用跨外显子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组低 ,而用内含子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组高 ;加放线菌酮后热休克反应组 ,用跨外显子探针和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比热休克反应组高。结论　热休克反应时GRmRNA转录过程受抑 ,GRmRNA前体成熟过程存在剪接障碍。

关键词：肝癌 SMMC-7721细胞热休克反应糖皮质激素受体 mRNA

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敲低TFAM通过上调ROS/ADAM17促进可溶型MICA生成抑制NK细胞杀伤人肝癌细胞的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第3期37卷 257-264页

作者：吴丹何元方周幸春邢金良刘晓斌延安大学医学院免疫教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院教学实验中心陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFA... 详细信息

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFAM稳定干涉及过表达的肝癌细胞株,与NKL细胞共培养,ELISA检测培养上清中可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)水平及NK细胞活化相关细胞因子的变化;流式细胞术检测肝癌细胞膜MICA的水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测共培养的NKL细胞杀伤活性。调控共培养上清中sMICA的含量后,ELISA及LDH试验检测细胞因子及NKL细胞杀伤功能是否受到影响。调控TFAM干涉或过表达肝癌细胞内的活性氧(ROS)水平和解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)表达,ELISA检测sMICA变化。结果与癌旁组织相比,TFAM在肝癌组织中显著低表达,且TFAM低表达肝癌患者其总生存期和无病生存期均显著低于TFAM高表达肝癌患者。敲低肝癌细胞TFAM后,细胞膜型MICA水平显著降低,而培养上清中的sMICA显著增加,细胞内ROS水平及ADAM17的表达均显著增强;肝癌细胞过表达TFAM后则相反。将TFAM稳定干涉的肝癌细胞与NKL细胞共培养后可显著降低NKL细胞活化细胞因子的分泌及杀伤功能,反之,与TFAM过表达的肝癌细胞与NKL细胞共培养后其活化相关细胞因子的表达及杀伤功能均显著增强。在肝癌细胞与NKL细胞共培养上清中加入MICA中和抗体,可显著恢复肝癌细胞TFAM干涉所导致的NKL细胞活性抑制及杀伤功能减弱;在共培养上清中加入重组MICA后,TFAM过表达所致的NK细胞活化及杀伤功能增强被显著抑制。敲低TFAM引起sMICA生成增加,但中和ROS或者敲低ADAM17后,可显著抑制sMICA生成;TFAM过表达导致sMICA生成减少,加入过氧化氢(H2O2)或者过表达ADAM17后,可显著增加sMICA生成。结论敲低TFAM上调ROS/ADAM17通路促进sMICA生成,抑制NK细胞的杀伤力。

关键词：肝细胞癌线粒体转录因子A(TFAM) 活性氧(ROS) 解整合素金属蛋白酶17(ADAM17) 可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA) 自然杀伤(NK)细胞

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糖皮质激素对人卵巢癌细胞系(3AO)的诱导分化作用

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上海医学 2003年第4期26卷 265-267页

作者：徐明娟崔英方国恩宋亮年王昭梅第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法... 详细信息

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况 ,采用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶 (AKP)活性 ;采用酶联免疫法测定 3AO细胞分化标志抗原CA12 5水平的变化 ;测定GR拮抗剂RU486作用于 3AO细胞后能否阻断糖皮质激素的效应 ,用放射配体结合分析法和定量RT PCR法检测 3AO细胞中GR的表达。结果　Dex对 3AO细胞的增殖有明显抑制作用 ,1× 10 -6 mol/LDex作用 5d后活细胞计数为对照组的 5 6.78% ,同时伴有细胞形态的变化 ;Dex还可使 3AO细胞AKP活性增高 ,这种作用具有时间和剂量依赖性 ;1× 10 -6 ～ 1× 10 -10 mol/LDex作用于3AO细胞后 ,明显抑制卵巢癌细胞标志抗原CA12 5的表达 ;RU486可完全阻断Dex对 3AO细胞活性的诱导作用 ;在细胞中存在高亲和力、低容量GR。结论　Dex对 3AO细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用 ,在 3AO细胞中存在GR ,Dex调节

关键词：糖皮质激素人卵巢癌细胞系诱导分化地塞米松酶联免疫法卵巢肿瘤肿瘤标志抗原

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地塞米松对人卵巢癌细胞糖皮质激素受体的调节

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上海医学 2003年第1期26卷 53-55页

作者：徐明娟方国恩崔英宋亮年王昭梅第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

目的　观察地塞米松调节人卵巢癌细胞系 3AO细胞增殖分化的作用机制及 3AO细胞中糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　①采用氨基安替比林法测定糖皮质激素受体拮抗剂 (RU 4 86 )作用 3AO细胞后阻断糖皮质激素的效应 ;②采用放射配体结合... 详细信息

目的　观察地塞米松调节人卵巢癌细胞系 3AO细胞增殖分化的作用机制及 3AO细胞中糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　①采用氨基安替比林法测定糖皮质激素受体拮抗剂 (RU 4 86 )作用 3AO细胞后阻断糖皮质激素的效应 ;②采用放射配体结合分析法检测 3AO细胞中GR的表达 ;③采用定量RT PCR法检测地塞米松对 3AO细胞中GR的调节作用。结果　①RU 4 86可完全阻断地塞米松对 3AO细胞活性的诱导作用 ;②3AO细胞中存在高亲和力、低容量糖皮质激素受体 ;③地塞米松使GR结合活性明显降低 ,且具有时间依赖性。结论　 3AO细胞中存在GR ,地塞米松调节 3AO细胞增殖分化的作用由GR介导 ,地塞米松可向下调节 3AO细胞GR的结合活性。

关键词：糖皮质激素糖皮质激素受体卵巢癌地塞米松

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骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构瞬时变化研究

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 151-153页

作者：杨勇骥雷长海吴越沙继宏叶煦亭余宏宇夏金辉第二军医大学基础医学部生物物理研究所第二军医大学卫生勤务学系计算机教研室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学基础医学部生理学教研室

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化。方法：采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术，对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定，采用透射电镜对该肌在电刺... 详细信息

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化。方法：采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术，对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定，采用透射电镜对该肌在电刺激后０．８，５．６，８．４ｍｓ及静息期的超微结构变化进行对比研究。结果：骨骼肌组织处于静息期时，其肌膜与肌纤维的间隙较宽，受电刺激后０．８ｍｓ开始至８．４ｍｓ，肌膜与肌细胞间的间隙大大变窄。并发现骨骼肌组织在电刺激后０．８，５．６及８．４ｍｓ时肌浆网前端的膜产生两个圆孔，而当骨骼肌处于静息期时肌浆网膜并无此形态结构。结论：当骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，肌膜在产生去极化的同时产生位移，并与肌纤维的间距发生改变；骨骼肌收缩时肌浆网膜出现小孔。

关键词：骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构

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噬菌体展示耐药突变HIV-1蛋白酶敏感切割位点六肽随机文库的构建

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中国药理学通报 2007年第3期23卷 403-406页

作者：卢海妹周波潘卫贾建安王锦红温宗梅何俊陈露邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行... 详细信息

目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANT-AB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒-1 蛋白酶耐药突变噬菌体展示文库

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