检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2007年第11期27卷 1-5页

作者：沙建平薛耀明陈炫朱永红李时升王晓勤卓凤婷曾展军南方医科大学附属南方医院内分泌科广州510515 暨南大学第一附属医院临床实验中心广州510630 重庆市生物制药工程技术中心第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室重庆400038 第三军医大学附属西南医院麻醉科重庆400038

通过RT-PCR体外扩增目的基因胰岛新生相关蛋白(isletneogenesis associated protein,INGAP),并将其克隆入原核表达载体pET22b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在,洗涤杂蛋白后用尿素溶解,经Heparin... 详细信息

通过RT-PCR体外扩增目的基因胰岛新生相关蛋白(isletneogenesis associated protein,INGAP),并将其克隆入原核表达载体pET22b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在,洗涤杂蛋白后用尿素溶解,经Heparin Agrose亲合柱层析分离后,再用Superdex75凝胶过滤层析进一步纯化。纯化后的INGAP皮下注射免疫家兔,制备兔抗INGAP血清,采用免疫双扩、ELISA评价INGAP的免疫活性。结果显示INGAP表达量高达菌体总蛋白的40%左右,经HPLC测定,分离纯化后的目标蛋白纯度达到98.81%,且具有良好的免疫原性。

关键词：胰岛新生相关蛋白表达纯化免疫原性

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SLC22A4和RUNX1基因的单核苷酸多态性与中国汉族类风湿性关节炎和强直性关节炎的关联分析

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第二军医大学学报 2007年第9期28卷 936-940页

作者：程宁陈蕊雯蔡青段世伟房萌郑桂敏王智华林经安孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学长海医院风湿免疫科上海200433 上海交通大学Bio-X生命科学研究中心上海200031 河北省人民医院风湿免疫科石家庄050051 河北省人民医院老年病实验室石家庄050051 福建医科大学第一附属医院中心实验室福州350005

目的:在中国汉族人群中进行功能候选基因SLC22A4(solute carrier family 22 member 4)和RUNX1(runt-relatedtranscription factor 1)与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)以及强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的关联分析。方法:在104例RA患者和109名正常对照以及278例AS患者和417名正常对照中,用直接测序法对SLC22A4的3个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点和RUNX1的1个SNP进行基因分型,并分析这些等位基因和基因型是否与RA和AS的发病有关。结果:在RA和AS病例-对照组中均没有发现SLC22A4和RUNX1的SNPs在等位基因以及基因型频率上有显著性差异。结论:在中国汉族人群中,SLC22A4和RUNX1不是RA和AS的易感基因。

关键词：类风湿性关节炎强直性脊柱炎多态性,单核苷酸 SLC22A4 RUNX1

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人类乳头瘤病毒与脆性组氨酸三联体基因蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的作用

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新乡医学院学报 2007年第3期24卷 247-249页

作者：田中伟宋向凤冯捷彭振辉毕新岭新乡医学院第一附属医院皮肤科河南卫辉453100 新乡医学院免疫学教研室河南新乡453003 西安交通大学第二医院皮肤科陕西西安710006 第二军医大学长海医院皮肤科上海200433

目的探讨人类乳头瘤病毒(HPV)和脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的作用及其之间的关系。方法用免疫组化SP法检测SCC和癌旁组织皮损中HPV及FHIT蛋白的表达。结果HPV和FHIT蛋白在癌旁正常皮肤鳞状上皮组织、非典... 详细信息

目的探讨人类乳头瘤病毒(HPV)和脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的作用及其之间的关系。方法用免疫组化SP法检测SCC和癌旁组织皮损中HPV及FHIT蛋白的表达。结果HPV和FHIT蛋白在癌旁正常皮肤鳞状上皮组织、非典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中的表达具有明显差异性(P<0.05);且FHIT蛋白在分化不同的肿瘤组织表达具有差异性(P<0.01);HPV和FHIT蛋白在肿瘤组织中的表达呈负相关。结论HPV和FHIT共同参与了SCC的发生,FHIT表达状况与SCC的分化程度有关。

关键词：人类乳头瘤病毒脆性组氨酸三联体基因皮肤鳞状细胞癌

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利用软件Array Designer 2.0设计7种病毒检测基因芯片探针

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解放军预防医学杂志 2006年第2期24卷 110-112页

作者：李志峰陈清俞守义第一军医大学流行病学教研室广州510515

目的设计能同时检测人SARS冠状病毒、尼巴病毒、亨德拉病毒、狂犬病毒、登革病毒、乙脑病毒和西尼罗病毒的基因芯片探针,制备芯片用于对广州野生动物携带这7种病毒的流行病学筛查。方法利用生物学软件DNAStar对7种病毒所有序列进行比对... 详细信息

目的设计能同时检测人SARS冠状病毒、尼巴病毒、亨德拉病毒、狂犬病毒、登革病毒、乙脑病毒和西尼罗病毒的基因芯片探针,制备芯片用于对广州野生动物携带这7种病毒的流行病学筛查。方法利用生物学软件DNAStar对7种病毒所有序列进行比对,获得每种病毒有意义的特异序列,以此作为设计oligo探针的备选序列,利用生物软件Array Designer 2.0设计特异性好、长度均一、Tm值相近的探针。结果每种病毒设计优化选择出10条oligo探针,用来制备基因检测芯片。结论利用GenBank数据库和生物学软件Array Designer 2.0设计病毒基因芯片检测探针,是一种简便、快速、有效的方法。

关键词：基因芯片 oligo探针 Array Designer 2.0软件

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靶向X区的siRNA抑制乙型肝炎病毒基因的表达和复制

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中华检验医学杂志 2006年第12期29卷 1084-1088页

作者：刘家云郝晓柯李庆霞黄红艳马龙洋温伟红贾林涛杨安钢第四军医大学第一附属医院检验科西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室第四军医大学免疫学教研室

目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)X基因的siRNA表达载体,观察其对HBV基因表达和复制的影响。方法设计并合成针对HBVX区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的He... 详细信息

目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)X基因的siRNA表达载体,观察其对HBV基因表达和复制的影响。方法设计并合成针对HBVX区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的HepG22·2·15细胞,潮霉素抗性筛选获得稳定细胞克隆,对所得细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测靶基因mRNA的抑制效果,荧光定量PCR检测HBVDNA。结果成功构建了针对HBVX基因的siRNA表达载体pSUPER-X1和pSUPER-X2,两种siRNA均能明显抑制HepG22·2·15细胞的HBsAg和HBeAg分泌,抑制率分别为97%和88%,RT-PCR结果显示HBV的mRNA表达降低,荧光定量PCR结果证实siRNA能降低HBVDNA拷贝数2个数量级。结论载体产生的针对HBVX基因的siRNA能高效、特异地抑制HBV基因的表达和复制。

关键词：肝炎病毒乙型 RNA 小分子干扰转染聚合酶链反应

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β-淀粉样蛋白(1-42)对PC12细胞的氧化损伤

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中国病理生理杂志 2006年第2期22卷 391-392页

作者：邱小忠余磊秦建强王庆志廖华陆云涛武雷杨俊钟世镇欧阳钧第一军医大学临床解剖学研究所广东省组织构建与检测重点实验室广东广州510515 新乡医学院解剖教研室河南新乡453003

目的:探讨Aβ(1-42)对PC12细胞的氧化损伤作用。方法:利用不同浓度的Aβ(1-42)处理PC12细胞,采用MTT法、抗氧化酶活性测定以及RT-PCR分析观察Aβ(1-42)对PC12细胞的影响,分析Aβ(1-42)与SeGPx、MnSOD基因表达的关系。结果:随着Aβ(1-42... 详细信息

目的:探讨Aβ(1-42)对PC12细胞的氧化损伤作用。方法:利用不同浓度的Aβ(1-42)处理PC12细胞,采用MTT法、抗氧化酶活性测定以及RT-PCR分析观察Aβ(1-42)对PC12细胞的影响,分析Aβ(1-42)与SeGPx、MnSOD基因表达的关系。结果:随着Aβ(1-42)浓度的增加,SeGPx的表达不断下降;0·1μmol/L Aβ(1-42)能诱导MnSOD的活性增加,Aβ(1-42)对PC12的损伤作用能被acetovanilon(一种抑制内源性自由基产生的化合物)所抑制。结论:Aβ(1-42)能介导PC12细胞内源性自由基的产生增多。

关键词：淀粉样β蛋白 PC12细胞线粒体氧化损伤

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Hsp701A基因的RNA干涉对HepG2细胞化疗敏感性的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 606-608,612页

作者：朱青张王刚王立锋王芳张勇杨安钢西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤中心陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院血液内科陕西西安710004 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

目的:研究Hsp701A基因靶向siRNA表达载体对肿瘤细胞化疗药物敏感性的影响。方法:构建Hsp701A靶向小干涉RNA(siRNA)的真核表达载体,并转染HepG2细胞,以证实siRNA真核表达载体RNAi的有效性。用四唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞对白藜芦醇... 详细信息

目的:研究Hsp701A基因靶向siRNA表达载体对肿瘤细胞化疗药物敏感性的影响。方法:构建Hsp701A靶向小干涉RNA(siRNA)的真核表达载体,并转染HepG2细胞,以证实siRNA真核表达载体RNAi的有效性。用四唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞对白藜芦醇、顺铂的敏感性。结果:以构建的Hsp701A基因靶向siRNA的真核表达载体稳定转染HepG2细胞后,两种RNAi组细胞中Hsp701ARNA和蛋白的表达水平均明显下降。Hsp701A基因靶向siRNA真核表达载体转染后,HepG2细胞对不同化疗药物的敏感性有不同程度的增加(P<0.05)。结论:Hsp701A基因的RNA干涉可增强HepG2细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：热休克蛋白701A RNA干涉 HepG2细胞药物敏感性

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靶向X区的siRNA抑制HBV基因的表达和复制

靶向X区的siRNA抑制HBV基因的表达和复制

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第五次全国中青年检验医学学术会议

作者：刘家云郝晓柯李庆霞马龙洋温伟红贾林涛杨安钢第四军医大学第一附属医院检验科第四军医大学第一附属医院检验科第四军医大学生物化学与分子生物学教研室第四军医大学生物化学与分子生物学教研室第四军医大学免疫学教研室第四军医大学生物化学与分子生物学教研室第四军医大学免疫学教研室

RNA干涉(RNA interference,RNAi)是双链RNA(double- strand RNA,dsRNA)介导的、序列特异的转录后基因沉默(post- transcriptional gene silencing,PTGS)现象,广泛存在于线虫、果蝇、植物、真菌及哺乳动物等多种生物体中,具有高效性和特... 详细信息

关键词： HBV 抑制作用培养上清单克隆细胞株潮霉素抗性 siRNA HBsAg HBeAg

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生命的奥秘在于“平衡”——“嘉美康”健能养生器(低、中频高电位治疗仪)

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临床医学工程 2006年第1期 81-82页

作者：曹巧莉广州南都电子科技有限公司高级医学顾问第一军医大学医学免疫系教研室教授

生命的基本单位就是细胞。所有的生命形式,基本上都是以细胞为基础的。细胞是组成人体形态和功能的基本单位,每个细胞也是一个小小的王国,它是更小生物分子的集合体,核酸、蛋白质、多糖、脂类等有机大分子以一定数量和严格的方式,组成

关键词：

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Hsp701A的RNA干涉诱导K562细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 480-482,484页

作者：朱青张王刚王立锋王芳张勇杨安钢西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤中心陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院血液内科陕西西安710004 西安交通大学医学院第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

目的:研究RNA干涉(RNAi)Hsp701A基因的表达及其诱导慢性粒细胞白血病(慢粒)细胞株K562的凋亡。方法:构建Hsp701A基因小干涉RNA(siRNA)的真核表达载体,转染K562细胞并证实RNAi的有效性。用MTT比色法、AnnexinV-FITC/PI染色和流式细胞术,... 详细信息

目的:研究RNA干涉(RNAi)Hsp701A基因的表达及其诱导慢性粒细胞白血病(慢粒)细胞株K562的凋亡。方法:构建Hsp701A基因小干涉RNA(siRNA)的真核表达载体,转染K562细胞并证实RNAi的有效性。用MTT比色法、AnnexinV-FITC/PI染色和流式细胞术,分别检测K562细胞的增殖、凋亡和细胞周期。结果:构建了Hsp701AsiRNA的真核表达载体。将其稳定转染K562细胞后,RNAi组细胞中Hsp701ARNA和蛋白的表达水平明显下降。Hsp701AsiRNA能抑制K562细胞增殖并诱导其细胞凋亡,将其阻滞于G1期。结论:RNAiHsp701A基因诱导的表达有望成为一种新的慢粒的治疗策略。

关键词： RNA干涉热休克蛋白70 慢性粒细胞白血病细胞凋亡

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