检索结果-内蒙古大学图书馆

癌症 2003年第3期22卷 230-234页

作者：杨兴龙张亚历药立波刘新平季少平邢飞跃第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 第一军医大学附属南方医院消化病研究所广东广州510515 第一军医大学全军微循环重点实验室广东广州510515

背景与目的:人源Ndr2(N-mycdown-streamregulator2)基因是本室于1999年从正常人全脑cDNA文库中克隆到的一个新基因犤GenBank,AF159092犦。初步实验表明,Ndr2有可能是一个抑癌基因。为进一步研究该基因的功能,我们拟克隆小鼠的Ndr2的基... 详细信息

背景与目的:人源Ndr2(N-mycdown-streamregulator2)基因是本室于1999年从正常人全脑cDNA文库中克隆到的一个新基因犤GenBank,AF159092犦。初步实验表明,Ndr2有可能是一个抑癌基因。为进一步研究该基因的功能,我们拟克隆小鼠的Ndr2的基因组序列。方法:以小鼠的基因组文库为模板,采用RT-PCR方法扩增Ndr2基因的基因组片段,用310GeneticAnalyzer自动测序仪测序,GenBankBLAST相似性分析其与人源Ndr2基因同源性,PcGene和ORFFinder作读框分析,ProDom软件作结构域分析。结果:经琼脂糖DNA电泳鉴定,获得一约3310bp大小的特异条带,并克隆入pMD18-T载体。BLAST相似性分析结果表明该序列与人源Ndr2基因高度同源(同源性为91.4%),与鼠基因组数据库无同源性。已公布的鼠源Ndr2mRNA序列比较发现该基因有8个外显子,7个内含子。读框分析表明,该序列编码含200个氨基酸的蛋白质。ProDom软件分析发现其含有酰基携带蛋白(ACP)样结构域。结论:本研究克隆了一个鼠的Ndr2基因并已测序。该基因为一新基因,该序列已被GenBank收录(登录号:AY151387)。

关键词：基因 Ndr2 克隆生物信息学

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应用多媒体技术优化生物化学教学

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中国医学教育技术 2003年第5期17卷 263-264页

作者：姜立马文丽冯春琼郭秋野第一军医大学生物化学与分子生物学教研室

通过介绍多媒体技术在生物化学教学过程中的应用,探讨了多媒体技术对生化教学方法上的改进、教学手段中的优化、学生主动学习意识的培养等方面的促进作用,提出了多媒体技术在生物化学教学中的应用势在必行.

关键词：多媒体技术生物化学教学教学方法教学改革计算机辅助教学

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抗VEGF发夹状核酶基因抑制VEGF表达及卵巢癌细胞增殖的实验研究

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癌症 2002年第1期21卷 39-44页

作者：严瑞兰钱新华辛晓燕金明惠宏襄王德堂王健第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032 第一军医大学南方医院小儿科广东广州510060 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

背景与目的:研究表明血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在与上皮性卵巢癌有关的血管形成过程中可能发挥着重要作用。目前,核酶策略已成为一种基因治疗的策略,用于阻断肿瘤形成或肿瘤的生长与转移。VEGF在卵巢肿... 详细信息

背景与目的:研究表明血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在与上皮性卵巢癌有关的血管形成过程中可能发挥着重要作用。目前,核酶策略已成为一种基因治疗的策略,用于阻断肿瘤形成或肿瘤的生长与转移。VEGF在卵巢肿瘤形成中的作用尚不十分清楚。我们试图采用抗VEGF发夹状核酶基因阻断卵巢癌中VEGF的自分泌和/或旁分泌通路,以检测其对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌SKOV3细胞,采用G418筛选获得阳性克隆;RNA斑点杂交检测核酶基因在卵巢癌细胞中的表达;免疫组化、间接免疫荧光染色及流式细胞仪结合免疫荧光检测转染前后卵巢癌细胞中VEGF表达;通过MTT、细胞贴壁克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验及细胞周期分析观察其对卵巢癌细胞增殖的影响。结果:与SKOV3细胞相比,转染后的SKOV3-RZ细胞VEGF表达明显降低(P<0.01);细胞生长减慢,细胞贴壁克隆形成及软琼脂克隆形成率明显降低犤(12.7±1.4)%和(9.4±2.0)%比(30.1±1.9)%和(24.8±1.5)%,P<0.001犦;G1期细胞显著增多(77.6%比57.9%,P<0.01),S期细胞显著减少(17.0%比29.9%,P<0.01)。结论:抗VEGF发夹状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖;

关键词：血管内皮生长因子发夹状核酶基因卵巢肿瘤细胞增殖基因治疗

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RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用

引用

西安医科大学学报 2002年第3期23卷 246-248,261页

作者：刘莉扬马文丽宋艳斌张宝郑文岭西安交通大学分子生物学教研室西安710049 第一军医大学分子生物学研究所广州510515 广州军区总医院分子肿瘤生物研究所广州510010

目的　应用RD PCR技术分离酵母基因。方法　首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物... 详细信息

目的　应用RD PCR技术分离酵母基因。方法　首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的 3’端延伸两个碱基 )作第二次PCR扩增。 5 %PAGE胶分离基因片段 ,选择单带割胶回收 ,做第三次PCR扩增 ,与载体连接 ,最后进行测序分析。结果　采用这种方法分离得到的基因片段 ,经Blast检索分析 ,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签 (EST)。结论　RD PCR技术可以有效地分离EST ,可用于酵母基因表达调控的研究。

关键词： RD-PCR技术基因表达谱酿酒酵母限制性显示技术表达序列标签

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生化教学的主动学习法探讨

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2002年第4期4卷 268-268,273页

作者：姜立马文丽林妮第一军医大学生物化学与分子生物学教研室

生物化学是医学生就学期间一门重要的基础科目,为提高教学质量,并加强学生学习时的主动性,我们探讨了在授课中使用‘主动学习法'进行教学的一些体会.

关键词：生物化学教学主动学习法

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一个表达序列标签的克隆——应用限制性显示技术

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第一军医大学学报 2002年第4期22卷 309-311页

作者：张宝马文丽刘莉扬宋艳斌郑文岭第一军医大学分子生物学研究所广东广州510515 西安交通大学生物化学教研室陕西西安710049 广州军区总医院分子肿瘤研究所广东广州510010

目的应用限制性显示PCR(restrictiondisplaypolymerasechainreaction,RD-PCR)技术分离克隆SH-SY5Y细胞的基因片段。方法从SH-SY5Y细胞中分离提纯mRNA,然后以Oligo(dT18)为锚定引物反转录生成单链cDNA,再以此为模板合成DNA的第二条链;将双链DNA经Sau3AⅠ酶切之后,接上接头,经通用引物和选择性引物扩增后,与载体pMD18相连,克隆、测序。结果分离出一段cDNA,经Blast分析,发现与基因组17号染色体的一段序列具有高度的相似性,运用GenScan分析这段DNA序列,提示这段表达序列标签(expressedsequencetag,EST)可能是一个未知基因的一部分。结论RD-PCR技术是一种简便、有效的分离克隆基因片段的方法,运用生物信息学对EST的染色体定位以及下一步的实验可能具有一定的指导意义。

关键词：表达序列标签克隆限制性显示

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应用ABI PRISM^(TM)310测序仪进行快速且经济的DNA测序

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生物技术通报 2002年第3期18卷 44-44,49页

作者：宋艳斌马文丽郑文岭第一军医大学生物化学与分子生物学教研室广州510515

目的　使DNA测序更快速且经济。方法　根据测序模板的不同采取相应的测序方法 ,视具体情况调整测序反应条件 ,改进仪器的操作方法 ,减少测序反应体系及合理使用试剂。结果　对测序模板、测序条件和仪器操作的优化 ,可缩短测序时间 ;充... 详细信息

目的　使DNA测序更快速且经济。方法　根据测序模板的不同采取相应的测序方法 ,视具体情况调整测序反应条件 ,改进仪器的操作方法 ,减少测序反应体系及合理使用试剂。结果　对测序模板、测序条件和仪器操作的优化 ,可缩短测序时间 ;充分利用试剂 ,可降低测序成本。结论　在保证测序质量的前提下 ,不仅快速而且经济。

关键词： DNA测序测序模板测序条件 ABIPRISM^TM310测序仪

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抗血管内皮生长因子发卡状核酶基因抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖

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肿瘤防治研究 2002年第3期29卷 168-169,172页

作者：严瑞兰钱新华辛晓燕金明惠宏襄王健王德堂第一军医大学南方医院小儿科广州510515 第四军医大学西京医院第四军医大学西京医院分子生物学教研室

目的　观察抗VEGF发卡状核酶基因对卵巢癌细胞增殖的影响。方法　采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发卡状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞 ,通过MTT、细胞贴壁克隆形成试验、软琼脂克隆形成试验及细胞周期分析观察... 详细信息

目的　观察抗VEGF发卡状核酶基因对卵巢癌细胞增殖的影响。方法　采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发卡状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞 ,通过MTT、细胞贴壁克隆形成试验、软琼脂克隆形成试验及细胞周期分析观察其对卵巢癌细胞增殖的影响。结果　转染后的SKOV3 RZ细胞生长减慢 ,细胞贴壁克隆形成及软琼脂克隆形成率明显降低 (P <0 .0 0 1)。G1期细胞显著增多 (P <0 .0 1) ,S期细胞显著减少 (P <0 .0 1)。结论　抗VEGF发卡状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖。

关键词：抗血管内皮生长因子 SKOV3增殖发卡状核酶基因卵巢癌细胞增殖

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DNA芯片在研究酵母基因组中的应用

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医学综述 2002年第4期8卷 187-188页

作者：刘莉扬马文丽马建岗郑文岭第一军医大学分子生物学研究所广东广州510515 西安交通大学分子生物学教研室陕西西安710049 广州军区总医院分子肿瘤生物研究所广东广州510010

人们对酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)分子遗传学方面的认识最早.最先完全了解的基因组序列也是酿酒酵母基因组序列.基因组工程接下来的工作就是阐明酵母基因表达模式和其基因产物的功能.为了得到精确有效的结果,必须寻找一种既系... 详细信息

人们对酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)分子遗传学方面的认识最早.最先完全了解的基因组序列也是酿酒酵母基因组序列.基因组工程接下来的工作就是阐明酵母基因表达模式和其基因产物的功能.为了得到精确有效的结果,必须寻找一种既系统又全面的方法,来解释酵母细胞中基因表达的模式和产物的功能以及产物之间的相互作用.

关键词： DNA芯片技术酵母基因组基因表达

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抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因克隆、测序

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中华眼底病杂志 2002年第2期18卷 150-150页

作者：钟秀风李永平黄树其唐松冯官光中山大学中山眼科中心广州510060 第一军医大学分校分子生物学实验室

肿瘤免疫导向治疗中与抗癌药物、放射性核素偶连的载体单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)的异源性问题是束缚肿瘤免疫导向治疗临床应用的主要障碍，异源McAb的人源化改造是肿瘤免疫导向治疗研究的重点和难点。目前，抗视网膜母细胞... 详细信息

肿瘤免疫导向治疗中与抗癌药物、放射性核素偶连的载体单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)的异源性问题是束缚肿瘤免疫导向治疗临床应用的主要障碍，异源McAb的人源化改造是肿瘤免疫导向治疗研究的重点和难点。目前，抗视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, RB) McAb基因人源化研究尚未见报道，现将我们这方面的部分研究结果报道如下。

关键词：轻链可变区基因克隆视网膜母细胞瘤免疫学单克隆抗体序列分析 RB 免疫治疗

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