检索结果-内蒙古大学图书馆

NT_3基因修饰施万细胞促进移植的神经干细胞在损伤脊髓内分化为神经元样细胞

解剖学报 2005年第6期36卷 577-581页

作者：郭家松曾园山李海标黄文林中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室第一军医大学分校广州510315 中山大学中山医学院肿瘤防治中心广州510080

目的探讨神经营养素-3(NT-3)基因修饰施万细胞(SCs)对植入全横断性脊髓损伤处的神经干细胞(NSCs)分化为神经元样细胞的影响。方法将NSCs单独移植或与NT-3基因修饰SCs、LacZ基因修饰SCs和SCs联合移植到全横断性脊髓损伤处,67 d后用免疫... 详细信息

目的探讨神经营养素-3(NT-3)基因修饰施万细胞(SCs)对植入全横断性脊髓损伤处的神经干细胞(NSCs)分化为神经元样细胞的影响。方法将NSCs单独移植或与NT-3基因修饰SCs、LacZ基因修饰SCs和SCs联合移植到全横断性脊髓损伤处,67 d后用免疫组织化学方法观测NSCs的分化,并计算其中神经元样细胞的分化率。结果NSCs在损伤脊髓内可分化为神经元样细胞和神经胶质样细胞,与未基因修饰的SCs的作用相比,NT-3基因修饰的SCs能更有效地提高NSCs向神经元样细胞的分化率,而LacZ基因修饰的SCs与未修饰SCs没有明显区别。结论NT-3基因修饰SCs能促进NSCs在损伤脊髓内向神经元样细胞分化。

关键词：神经干细胞神经营养素-3 基因修饰施万细胞分化神经元样细胞脊髓损伤免疫组织化学大鼠

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HBc颗粒样呈现载体研究进展

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热带医学杂志 2004年第2期4卷 215-217页

作者：田泽维刘朝霞董文其空军广州医院传染病中心广州510600 第一军医大学分校检验教研室广州510315 第一军医大学热带病研究室广州510515

HBc核壳是由240或180个HBc单体组成的对称性颗粒,免疫原性强,是机体CTL识别的主要靶抗原之一,且具有高表达率、高效装配的特点,作为颗粒样呈现载体能于颗粒表面呈现融合抗原肽,维持天然构象,并增强其免疫原性,在HIV、HBV、HCV、疟原虫... 详细信息

HBc核壳是由240或180个HBc单体组成的对称性颗粒,免疫原性强,是机体CTL识别的主要靶抗原之一,且具有高表达率、高效装配的特点,作为颗粒样呈现载体能于颗粒表面呈现融合抗原肽,维持天然构象,并增强其免疫原性,在HIV、HBV、HCV、疟原虫等疫苗研究中得到广泛研究与应用,是具有巨大研究潜力和应用价值的疫苗载体,本文就HBc核壳结构特点及其作为颗粒样免疫载体的应用作一综述。

关键词： HBc 颗粒样呈现载体

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稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株的筛选与鉴定

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第一军医大学学报 2003年第11期23卷 1174-1176,1180页

作者：田泽维董文其刘朝霞解放军第458医院全军肝病研究中心广东广州510602 第一军医大学热带病研究室广东广州510515 第一军医大学分校检验教研室广东广州510315

目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blottin... 详细信息

目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测、鉴定重组细胞表达产物。结果筛选所得稳定表达细胞株经RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测均呈阳性反应,而阴性对照及空白对照未出现相应阳性反应。结论筛选获得稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组细胞株,命名为NS/HBc-Mep。为建立HBc-Mep特异的cELISA及CTL活性测定等实验方法提供可靠的靶细胞。

关键词：重组NS-1细胞株筛选鉴定乙型肝炎病毒核心抗原多表位复合基因杂合HBc颗粒

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HBc与HBV多表位复合基因在肝癌细胞中的转染与表达

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热带医学杂志 2003年第1期3卷 25-27页

作者：田泽维董文其刘朝霞李明黄建生第一军医大学热带病研究室广州510515 第一军医大学分校检验教研室广州510315

目的观察HBc与HBV多表位复合基因在肝癌细胞株nepG2细胞内表达情况。方法将构建的HBc与HBV多表位复合基因真核表达质粒pHBcMep以Lipofectamine介导转染HepG2细胞,通过间接免疫荧光、Western-blot检测表达产物。结果经G418筛选的阳性转... 详细信息

目的观察HBc与HBV多表位复合基因在肝癌细胞株nepG2细胞内表达情况。方法将构建的HBc与HBV多表位复合基因真核表达质粒pHBcMep以Lipofectamine介导转染HepG2细胞,通过间接免疫荧光、Western-blot检测表达产物。结果经G418筛选的阳性转染细胞经间接免疫荧光染色后在紫外光激发时发出明显的荧光,而未转染质粒或转染pcDNA3.1的HepG2细胞则无明显荧光。Western-hot结果显示表达产物约为33kDa,并能与抗preS2多抗特异性结合。结论HBc与HBV多表位复合基因在肝癌细胞内获得正确表达。

关键词： HBc HBV 多表位复合基因肝癌转染表达

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移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

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解剖学报 2003年第2期34卷 113-117页

作者：郭家松曾园山李海标丁英吴立志陈穗君第一军医大学分校广州510315 中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室广州510080

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。　方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,... 详细信息

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。　方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,同时用体视学方法观测脑干红核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。　结果　移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内 ,部分神经干细胞分化为GFAP、NF 2 0 0和GAP 4 3阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金标记的神经元胞体 ,脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻 ,红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组 ,大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。　结论　神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞 ,能减轻脊髓的继发性损伤 ,保护受损伤的神经元。

关键词：移植神经干细胞脊髓全横断结构功能修复脊髓损伤

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HCVC区与HBc融合蛋白在大肠杆菌中表达及鉴定

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热带医学杂志 2003年第4期3卷 411-413,465页

作者：刘朝霞田泽维张彦明第一军医大学分校检验教研室广州510315 解放军第458医院全军肝病研究中心广州510602 第一军医大学热带病研究室广州510515

目的HCVC119与HBc融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定。方法PCR扩增HCVC1～119编码序列并取代HBc脊区基因,杂合HBc基因定向克隆至pET28b+NheⅠ/XhoⅠ位点,经双酶切及核酸序列测定筛选、鉴定阳性克隆。工程菌BL21(RIL)-pET28-BCc经IPTG诱... 详细信息

目的HCVC119与HBc融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定。方法PCR扩增HCVC1～119编码序列并取代HBc脊区基因,杂合HBc基因定向克隆至pET28b+NheⅠ/XhoⅠ位点,经双酶切及核酸序列测定筛选、鉴定阳性克隆。工程菌BL21(RIL)-pET28-BCc经IPTG诱导后,10%SDS-PAGE电泳及Westernblot检测、鉴定目的蛋白。结果重组子经NheⅠ/XhoⅠ双酶切获得约880bp目的基因片段,DNA序列测定证实HCVC119基因正确插入并取代HBc脊区基因,杂合基因与HBVadr亚型及HCV日本株相应序列同源性超过97%,工程菌BL21(RIL)-pET28-BCc经IPTG诱导后表达约33kDa目的蛋白,并与HCV血清呈阳性反应。结论正确克隆、表达了HCVC119与HBc融合蛋白pBCc。

关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒核心蛋白表达鉴定

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不同靶细胞在基因治疗中枢神经损伤中的应用

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解剖科学进展 2003年第2期9卷 159-163页

作者：郭家松曾园山李海标中山医科大学组织胚胎学教研室神经科学研究室第一军医大学分校解剖学教研室广东广州510315

近年来基因治疗逐步运用到CNS损伤及再生的研究中 ,获得理想的靶细胞是CNS基因治疗的一个关键问题。一般认为能用于基因修饰并植入CNS内进行基因治疗的理想靶细胞应具备以下几个要素 :容易被修饰、具有表达和分泌转基因产物的能力、具... 详细信息

近年来基因治疗逐步运用到CNS损伤及再生的研究中 ,获得理想的靶细胞是CNS基因治疗的一个关键问题。一般认为能用于基因修饰并植入CNS内进行基因治疗的理想靶细胞应具备以下几个要素 :容易被修饰、具有表达和分泌转基因产物的能力、具有在体外及移植后在宿主内生存的能力 ,以及基因修饰前已经具有促神经元生长的固有特性等等。目前运用于CNS基因治疗的靶细胞主要是雪旺细胞、成纤维细胞、星形胶质细胞、神经干细胞和成肌细胞。本文对这些靶细胞本身在中枢神经再生方面的作用。

关键词：靶细胞基因治疗中枢神经损伤神经再生神经元

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NT-3基因修饰施万细胞与神经干细胞联合移植治疗全横断脊髓损伤的实验研究

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解剖学报 2003年第5期34卷 466-466页

作者：郭家松曾园山李海标李晓君中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室第一军医大学分校广州510315 中山大学中山医学院生理学教研室

为探索一种治疗急性脊髓损伤的新策略,本实验先用核荧光标记培养的神经干细胞(NSCs);再用含神经营养素-3基因的腺病毒(AdvNT-3)感染培养的施万细胞(SCs),简称NT-3-SCs.然后建立大鼠全横断脊髓损伤模型,向损伤处分别移植NSCs、SCs+NSCs和... 详细信息

为探索一种治疗急性脊髓损伤的新策略,本实验先用核荧光标记培养的神经干细胞(NSCs);再用含神经营养素-3基因的腺病毒(AdvNT-3)感染培养的施万细胞(SCs),简称NT-3-SCs.然后建立大鼠全横断脊髓损伤模型,向损伤处分别移植NSCs、SCs+NSCs和NT-3-SCs+NSCs.所有动物存活60d后,进行爬网格测验和BBB评分.接着在脊髓横断处远端组织内注射荧光金(FG),动物再存活7d.在处死动物前检测皮质运动诱发电位(CMEP)和皮质体感诱发电位(CSEP).

关键词： NT-3 基因修饰施万细胞神经干细胞联合移植治疗全横断脊髓损伤实验研究

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护理工作中潜在法律问题与护理质量

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护士进修杂志 2001年第8期16卷 622-622,629页

作者：曾丽芳曾爱芳孙晓嘉第一军医大学分校护理研究室广东广州510315

随着法律知识的普及和人们法律意识的增强,人们运用法律保护自己的正当权益已渐成常识,对医疗纠纷、差错事故不再局限于卫生部颁发的事故处理办理,可通过民事诉讼的方法来解决,这就要求每位护士不仅应该熟知国家法律法规,而不能停留在... 详细信息

随着法律知识的普及和人们法律意识的增强,人们运用法律保护自己的正当权益已渐成常识,对医疗纠纷、差错事故不再局限于卫生部颁发的事故处理办理,可通过民事诉讼的方法来解决,这就要求每位护士不仅应该熟知国家法律法规,而不能停留在用过去的护理道德观来评价自己的护理行为;同时更应熟悉自己实践工作中与法律有关的潜在性问题,以便自觉地遵纪守法,更好地履行自己的责任,避免医疗纠纷,维护正常医疗秩序,必要时保护自己的一切合法权益,维护法律的尊严.下面将护理工作中常见的潜在性法律问题阐述如下:

关键词：护理工作侵权行为法律问题护理质量

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吗啡备用根大鼠脊髓后角提取液两种分子量组分的生物活性测定及其电泳分析

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解剖学报 2001年第1期32卷 21-25,T006页

作者：邢斌曾园山郭家松陈穗君中山医科大学组织学胚胎学教研室神经科学研究室广州510089 第一军医大学分校广州510315

目的　探讨备用根大鼠手术侧和非手术侧脊髓后角组织 >10 k D和 10 k D组分作用的 DRG神经突起的生长密度 ,比非手术侧 >10 k D组分 ,非手术侧 10 k D组分提取液作用的 DRG神经突起生长密度 ,又比备用根大鼠手术侧 >10 k D组... 详细信息

目的　探讨备用根大鼠手术侧和非手术侧脊髓后角组织 >10 k D和 <10 k D两种分子量组分提取液 ,对鸡胚背根节 (DRG)神经突起的促生长作用 ,以及应用吗啡后对此作用的影响。　方法　应用超滤器制备提取液、组织培养和 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等技术 ,分离和检测神经营养活性物质。　结果　备用根大鼠手术侧脊髓后角提取液 >10 k D组分作用的 DRG神经突起的生长密度 ,比非手术侧 >10 k D组分 ,非手术侧 <10 k D组分和手术侧 <10 k D组分的生长密度明显增大。应用吗啡的备用根大鼠手术侧脊髓后角组织 >10 k D组分提取液作用的 DRG神经突起生长密度 ,又比备用根大鼠手术侧 >10 k D组分的大。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现 ,两组动物手术侧和非手术侧 >10 k D组分样品的电泳图谱区带数目大致相同 ,但两组动物手术侧分子量约 6 7k D、31k D和 16 k D的 3条区带吸收峰面积百分比 ,较非手术侧的高。　结论　吗啡具有进一步增强去传入纤维支配的脊髓后角组织 >10 k D组分提取液促进 DRG神经突起的生长效应。两组动物手术侧 >10 k D组分提取液分子量约 6 7k D、31k D和16 k D3种蛋白质含量有增高的趋势 ,尤其是吗啡组动物手术侧约 6 7k

关键词：组织培养备用根模型吗啡大鼠脊髓后角提取液分子量生物活性电泳分析

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