检索结果-内蒙古大学图书馆

第一军医大学学报 2001年第6期21卷 414-417页

作者：陈清申洪俞守义王雅贤第一军医大学流行病学教研室广东广州510515 第一军医大学病理学教研室广东广州510515

目的　探索较量理想的定量分析产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）毒力表达的方法。方法　采用ＥＬＩＳＡ对ＥＴＥＣ毒力因子的表达进行定量分析，并对ＥＴＥＣ毒力基因ｍＲＮＡ采用快速ＲＮＡ提取、ＲＮＡ－ＤＮＡ杂交方法进行检测，用阳性... 详细信息

目的　探索较量理想的定量分析产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）毒力表达的方法。方法　采用ＥＬＩＳＡ对ＥＴＥＣ毒力因子的表达进行定量分析，并对ＥＴＥＣ毒力基因ｍＲＮＡ采用快速ＲＮＡ提取、ＲＮＡ－ＤＮＡ杂交方法进行检测，用阳性单位定量分析杂交反应产物的相对含量。结果ＥＴＥＣ两类毒力因子的表达均明显受环境因素的调控；毒力基因ｍＲＮＡ表达与毒力因子表达高度相关；用ＲＮＡ－ＤＮＡ杂交法定量分析ＥＴＥＣ毒力表达变化比ＥＬＩＳＡ法敏感和特异。结论用阳性单位对ｍＲＮＡ杂交反应产物进行定量分析的方法研究ＥＴＥＣ毒力表达可靠、实用。

关键词：大肠杆菌毒力抗原细菌酶联免疫吸附测定 ETEC

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对喹诺酮类药物耐药的志贺菌gyrA基因突变的研究

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第一军医大学学报 2001年第12期21卷 935-937页

作者：向前俞守义王红第一军医大学南方医院医教部广东广州510515 第一军医大学流行病学教研室广东广州510515

目的研究福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法对38株耐药的福氏志贺菌gyrA基因的N末端编码区进行PCR扩增后,用SSCP方法检测突变,然后测序。结果福氏志贺菌gyrA基因PCR-SSCP显示有8株突变,测序结果揭示存在2个导致氨基酸改变的基... 详细信息

目的研究福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法对38株耐药的福氏志贺菌gyrA基因的N末端编码区进行PCR扩增后,用SSCP方法检测突变,然后测序。结果福氏志贺菌gyrA基因PCR-SSCP显示有8株突变,测序结果揭示存在2个导致氨基酸改变的基因点突变:83位TCG(Ser)→TTG(Leu)突变和87位GAC(Asp)→GGC(Gly)突变。结论gyrA基因点突变与福氏志贺菌对喹诺酮类药物的高水平耐药有密切关系。

关键词：志贺菌属 gyrA基因喹诺酮类耐药性基因突变

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产毒性大肠杆菌毒素在豚鼠肠道定位的免疫组织化学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2001年第1期10卷 46-49页

作者：陈清申洪王雅贤俞守义第一军医大学流行病学教研室广州510515 第一军医大学病理学教研室广州510515

研究利用免疫组织化学方法对产毒性大肠杆菌 (ETEC)感染豚鼠小肠组织中 ETEC肠毒素的定位进行了研究。本研究结果表明 ,发病豚鼠从空肠到回肠明显充血、肿胀 ,但盲肠、结肠和直肠外观与对照组差别不明显。光镜下见到发病动物肠组织病变... 详细信息

研究利用免疫组织化学方法对产毒性大肠杆菌 (ETEC)感染豚鼠小肠组织中 ETEC肠毒素的定位进行了研究。本研究结果表明 ,发病豚鼠从空肠到回肠明显充血、肿胀 ,但盲肠、结肠和直肠外观与对照组差别不明显。光镜下见到发病动物肠组织病变主要出现在空肠和回肠 ,以回肠最为严重。主要病理改变为水肿、炎症细胞浸润和充血。病变部位可以出现在粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜层。取回肠组织切片作免疫组织化学显示 ETEC不耐热肠毒素 (L T)和耐热肠毒素 (ST) ,可见回肠粘膜表层、粘膜肌层、肌层及浆膜层均呈 L T和 ST阳性反应 ,分布弥漫。空白对照和正常豚鼠回肠组织均呈阴性结果。本研究表明 ,ETEC主要作用于空肠和回肠 ,尤其是回肠 ;回肠组织各层都有病变 ,且与肠毒素的分布一致。

关键词：产毒性大肠杆菌毒素豚鼠肠道定位免疫组织化学

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组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞

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第一军医大学学报 2001年第1期21卷 57-59页

作者：王雪萍徐德忠李远贵闫永平罗深秋第四军医大学流行病学教研室陕西西安710032 第一军医大学细胞生物学教研室广东广州510515

目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细胞纯度达９... 详细信息

目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细胞纯度达９５％以上。结论组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞简便易行，可获得符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。

关键词：滋养层细胞绒毛膜细胞培养组织块法

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空肠弯曲菌、沙门氏菌的16SrDNA的PCR-RDB检测方法的研究

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中国人兽共患病杂志 2001年第1期17卷 33-35页

作者：白薇聂军孙勇南京军区军事医学研究所南京210002 第一军医大学流行病学教研室第一军医大学附属南方医院

目的　建立一种可一次性检测多种腹泻致病菌的快速诊断方法。方法　根据原核生物 16SrDNA独特的序列特性 ,以 16SrDNA为模板 ,用PCR结合RDB方法来检测腹泻病原菌。结果　肠道常见致泻病原菌均可扩增出同样大小的片段 ,而特定的病原菌仅... 详细信息

目的　建立一种可一次性检测多种腹泻致病菌的快速诊断方法。方法　根据原核生物 16SrDNA独特的序列特性 ,以 16SrDNA为模板 ,用PCR结合RDB方法来检测腹泻病原菌。结果　肠道常见致泻病原菌均可扩增出同样大小的片段 ,而特定的病原菌仅与其相应的探针杂交 ,敏感性试验可检测出约 12 0 μg/ml的DNA。结论　利用原核生物 16SrDNA序列特异性而建立起来的PCR -RDB方法具有特异性高、重复性好、灵敏度高等优点。

关键词：空肠弯曲菌沙门氏菌 PCR-RDB 16SrNDA 腹泻

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SELEX法筛选炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的研究

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军事医学科学院院刊 2001年第2期25卷 111-114页

作者：甄蓓宋亚军郭兆彪王津张敏丽俞守义杨瑞馥第一军医大学流行病学教研室广州510515 军事医学科学院微生物学流行病学研究所北京100071

目的 :利用SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)体外筛选技术 ,寻找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子 (aptamer)。方法 :体外合成长度为 78个核苷酸的随机DNA库 ,通过SELEX技术 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株... 详细信息

目的 :利用SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)体外筛选技术 ,寻找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子 (aptamer)。方法 :体外合成长度为 78个核苷酸的随机DNA库 ,通过SELEX技术 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R的芽孢为靶标进行 15轮的筛选 ,利用生物素亲和素显色系统判断寡核苷酸与芽孢的结合活性。结果 :随着筛选轮数的增加 ,PCR扩增电泳条带逐渐单纯 ,寡核苷酸与芽孢结合后显色 ,D值提高了 9倍以上 ,D值随适配子结合量的增加而递增。结论 :已初步筛选到与炭疽芽孢具有亲和力的适配子。

关键词： SELEX 芽孢杆菌炭疽牙孢适配子

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2000年东莞市麻疹病毒流行株基因型分析

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中华流行病学杂志 2001年第5期22卷 355-358页

作者：朱建琼彭志强雷满根王红郑少敏李润深陈清叶临湘广东省东莞市卫生防疫站计划免疫科 523000 第一军医大学流行病学教研室东莞市厚街医院防疫科同济医科大学流行病学教研室

目的　了解东莞市麻疹病毒 (measlesvirus,MV)流行株的基因型。方法　 2 0 0 0年 4～ 7月间东莞市发生有 5 5例患者的麻疹流行 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法直接检测麻疹病人急性期唾液中的麻疹病毒核糖核酸 (RNA)的N基因和M... 详细信息

目的　了解东莞市麻疹病毒 (measlesvirus,MV)流行株的基因型。方法　 2 0 0 0年 4～ 7月间东莞市发生有 5 5例患者的麻疹流行 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法直接检测麻疹病人急性期唾液中的麻疹病毒核糖核酸 (RNA)的N基因和M基因 ,对任意选取的 5份RT PCR阳性标本和疫苗株沪 191的N基因扩增片段进行核酸序列测定 ,并进行序列系统树分析。结果　用RT PCR方法直接检测的阳性率为 87.3% ;用血清抗 MV IgMELISA方法检测的阳性率为70 .9% ,抗 MV IgM阴性的病人唾液中有 6 8.8%的标本MV RNA阳性。序列分析结果表明此流行株的基因型与世界麻疹病毒流行株不同 ,差异为 1.4%～ 11.7% ,可归属于H基因型。结论　 2 0 0 0年东莞市麻疹病毒流行株核酸序列完全相同 ,为H基因型 ,说明本次流行的麻疹病毒具有同源性 ,来源于同一传染源。

关键词：麻疹病毒核糖核酸基因型

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福氏2a志贺菌痢暴发的RAPD分析

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中国人兽共患病杂志 2001年第6期17卷 26-28页

作者：郝加虎叶冬青王红钟文龙夏桂枝吴爱军俞守义安徽医科大学公共卫生学院流行病学教研室合肥230032 第一军医大学流行病学教研室广东省江门市卫生防疫站

目的　探讨江门一起菌痢暴发的特异传染源。方法　对 8株福氏 2a志贺菌进行RAPD分析。结果　此次菌痢暴发期间分离的 8株福氏 2a志贺菌具有两种不同的RAPD特征 (RTⅠ、RTⅡ型 ) ,其中 2株病例密切接触者分离株J9810 1(RTⅡ型 )和J982 6... 详细信息

目的　探讨江门一起菌痢暴发的特异传染源。方法　对 8株福氏 2a志贺菌进行RAPD分析。结果　此次菌痢暴发期间分离的 8株福氏 2a志贺菌具有两种不同的RAPD特征 (RTⅠ、RTⅡ型 ) ,其中 2株病例密切接触者分离株J9810 1(RTⅡ型 )和J982 6(RTⅠ型 )分属不同克隆。结论　本次暴发偶合有部分散发病例。相对于质粒分析而言 ,RAPD分析具有更高的分辨率 ,它提供的遗传学信息更为丰富、直接。

关键词：福氏2a志贺菌 RAPD 细菌性痢疾

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南方战区海军某部队外出训练时腹泻病原体分析

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第一军医大学学报 2001年第2期21卷 123-125页

作者：吴敏陈清徐鹏辉俞守义第一军医大学流行病学教研室广东广州510515 北京医学高等专科学校北京100071

目的进一步了解部队腹泻病原的分布特点。方法采集某外出训练部队腹泻病人、正常人粪便标本和外环境标本检测常见致泻病原体。结果检出致泻病原体１１种，腹泻病人的病原阳性率为６９．８３％，病原作顺位依次为Ａ组轮状病毒、克... 详细信息

目的进一步了解部队腹泻病原的分布特点。方法采集某外出训练部队腹泻病人、正常人粪便标本和外环境标本检测常见致泻病原体。结果检出致泻病原体１１种，腹泻病人的病原阳性率为６９．８３％，病原作顺位依次为Ａ组轮状病毒、克雷伯菌属和弧菌属，以前较少报道的沙雷氏菌属、变形杆菌属、普罗菲登斯菌属和枸橼菌属均有一定的检出率。正常人的病原阳性率为６３．４５％，检出的病原体种类较病人少，主要为克雷伯氏菌属、大肠杆菌属和轮状病毒；两种以上病原混合携带现象较多见。克雷伯菌属在该监测人群中有较高检出率，弧菌在外环境和腹泻病人标本中有较高的检出率。结论Ａ组轮找病毒、弧菌是引起南方战区部队腹泻的主要病原体，条件致病菌是部队外出训练时重要的腹泻病原菌；病人与正常人病原检出率接近。

关键词：南方部队腹泻病病原学

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实践教学对于学习流行病学方法的重要性

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西北医学教育 2001年第1期9卷 22-23页

作者：陈清吴敏俞守义第一军医大学流行病学教研室

通过分析实践教学对军队医学生学习流行病学方法的效果，论述了在部队开展实践教学对于军队临床专业学生学习流行病学理论和方法的重要性。

关键词：实践教学流行病学方法

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