检索结果-内蒙古大学图书馆

中国公共卫生 1999年第3期15卷 184-185页

作者：吴爱军王红俞守义第一军医大学流行病学教研室

采用６０Ｃｏγ源照射、３Ｈ－ＴｄＲ掺入等方法，探测不同方法处理的两株放射敏感性不同的人纤维肉瘤组织细胞ＤＮＡ合成情况。结果发现，辐射对该两种细胞ＤＮＡ合成具有明显的抑制作用，在低剂量范围照射时ＤＮＡ合成随剂量增加出现... 详细信息

采用６０Ｃｏγ源照射、３Ｈ－ＴｄＲ掺入等方法，探测不同方法处理的两株放射敏感性不同的人纤维肉瘤组织细胞ＤＮＡ合成情况。结果发现，辐射对该两种细胞ＤＮＡ合成具有明显的抑制作用，在低剂量范围照射时ＤＮＡ合成随剂量增加出现一快速下降的陡相，高剂量范围时合成下降平缓。两种细胞在照射后３小时ＤＮＡ合成达到最低值，两种细胞间ＤＮＡ合成差异不明显。

关键词：电离辐射纤维肉瘤细胞 DNA合成抑制作用

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多重聚合酶链反应检测产毒性大肠杆菌三种毒力基因

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中华传染病杂志 1999年第2期17卷 88-90页

作者：赵敏王国卿王红王雅贤俞守义空军总医院感染控制科第一军医大学基础部流行病学教研室

目的提高普通的单基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的时效。方法以ＥＴＥＣ４４８１３（ＳＴｐ＋）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴｈ＋）和ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ＋）三个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠... 详细信息

目的提高普通的单基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的时效。方法以ＥＴＥＣ４４８１３（ＳＴｐ＋）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴｈ＋）和ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ＋）三个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌多重ＰＣＲ扩增系统。结果杂交工程株Ｈ１０９０７（ＳＴｐ＋），ＰＳＬＭ００４（ＳＴｈ＋）和ＰＭＭ０３０（ＬＴ＋），杂交的结果都是阳性，５４株菌株经ＰＣＲ检测，其中ＬＴ＋８株、ＳＴｐ＋２株、ＳＴｈ＋７株、ＬＴ＋＋ＳＴｐ＋１０株、ＬＴ＋＋ＳＴｈ＋１０株、ＳＴｐ＋＋ＳＴｈ＋４株和ＬＴ＋＋ＳＴｐ＋＋ＳＴｈ＋１３株。结论用一次ＰＣＲ扩增可检测和鉴别ＥＴＥＣ，比单基因ＰＣＲ更加快速、经济。

关键词：聚合酶链反应产毒性大肠杆菌毒力基因

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3组套式PCR用于检测及区分霍乱弧菌O1群古典型、埃尔托型和O_(139)群

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中国公共卫生 1999年第8期15卷 733-734页

作者：芮勇宇蔡初的俞守义李建基王红钟豪杰第一军医大学流行病学教研室广东省卫生防疫站

针对霍乱弧菌肠毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因设计两对引物，建立套式ＰＣＲ，可特异扩增霍乱弧菌Ｏ１群古典型、埃尔托型和Ｏ１３９群；针对霍乱弧菌毒力协调菌毛Ａ亚单位（ＴｃｐＡ）基因设计两对引物，外引物可特异扩增霍乱弧菌... 详细信息

针对霍乱弧菌肠毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因设计两对引物，建立套式ＰＣＲ，可特异扩增霍乱弧菌Ｏ１群古典型、埃尔托型和Ｏ１３９群；针对霍乱弧菌毒力协调菌毛Ａ亚单位（ＴｃｐＡ）基因设计两对引物，外引物可特异扩增霍乱弧菌Ｏ１群古典型、埃尔托型和Ｏ１３９群，内引物只能特异扩增霍乱弧菌Ｏ１群埃尔托型和Ｏ１３９群；针对Ｏ１３９群特异基因设计两对引物，建立套式ＰＣＲ，可特异扩增Ｏ１３９群。先利用针对ｃｔｘＡ基因设计的套式ＰＣＲ进行初筛，再进一步用另外两组套式ＰＣＲ，可检测及区分霍乱弧菌Ｏ１群古典型、埃尔托型和Ｏ１３９群。对４８株ＥＶＣ，２株ＣＶＣ，６株Ｏ１３９群和３３株非Ｏ１非Ｏ１３９群进行检测，扩增结果与设计均一致。套式ＰＣＲ检测的敏感性可达到１～１０ＣＦＵ。本文建立的方法简单、快速、特异和敏感，有较大的应用价值。

关键词：霍乱弧菌聚合酶链反应分型霍乱

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产肠毒素大肠杆菌的热敏肠毒素B亚基(LT-B)和耐热肠毒素(ST)基因融合及其表达

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生物工程学报 1999年第4期15卷 439-443页

作者：徐兵张兆山李淑琴舒东俞守义黄翠芬北京生物工程研究所北京100071 第一军医大学流行病学教研室广州510515

采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的耐热肠毒素（ＳＴ）基因和热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ Ｂ）基因融合抗原的疫苗候选株。将ＳＴ基因的５’端与ＬＴ Ｂ基因的３’端连接，并置于同一阅读... 详细信息

采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的耐热肠毒素（ＳＴ）基因和热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ Ｂ）基因融合抗原的疫苗候选株。将ＳＴ基因的５’端与ＬＴ Ｂ基因的３’端连接，并置于同一阅读框。编码ＳＴ的基因是通过ＰＣＲ从ｐＳＬＭ００４质粒中扩增得到的，含有ＳＴ的ｐｒｏ序列（其编码ＳＴ前体的ｐｒｏ区域），并应用寡核苷酸定点突变技术将编码ＳＴ的第１４位氨基酸残基发生突变，使ＳＴ的第１４位氨基酸残基Ａｌａ突变为Ｌｅｕ。在所构建的结构中，于ＬＴ Ｂ和ｐｒｏ ＳＴ之间分别插入了不同长度的氨基酸Ｌｉｎｋｅｒｓ。表达的融合多肽同时具有ＳＴ和ＬＴ Ｂ的抗原性，并保留结合ＧＭ１神经节苷脂的能力，且无ＬＴ和ＳＴ的生物毒性。表达的融合蛋白免疫动物，能诱导产生相应的特异性抗体。

关键词：产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因融合基因表达

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霍乱弧菌O139群菌苗研究进展