检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2004年第14期8卷 2648-2649,F010页

作者：代广辉徐如祥王峰姜晓丹杜谋选蔡颖谦邹雨矽解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东省广州市510282

目的:将新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养、诱导、分化为神经干细胞,并且移植到兔脊髓横断性损伤模型中,观察移植的细胞是否能够存活及分化。方法:兔骨髓基质细胞取自成年兔的股骨或髂骨,体外培养、诱导、分化为神经干细胞,将兔制成脊... 详细信息

目的:将新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养、诱导、分化为神经干细胞,并且移植到兔脊髓横断性损伤模型中,观察移植的细胞是否能够存活及分化。方法:兔骨髓基质细胞取自成年兔的股骨或髂骨,体外培养、诱导、分化为神经干细胞,将兔制成脊髓全横断模型。伤后2周将神经干细胞手术方法直视下移植到受损脊髓缺损处,伤后12周将兔行甲醛灌注留取神经干细胞移植处作为标本,行病理及免疫组化染色。并设立脊髓损伤空白对照组(移植后不行神经干细胞移植)。结果:移植组与对照组相比,移植组移植部位存在大量5-溴-2-脱氧尿苷(bromodeoxyuridine/5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)染色阳性的细胞,表明移植的细胞在体内可以存活;同时,移植组脊髓损伤部位存在神经元特异性烯醇化酶抗体(neuron-specificendase,NSE)、胶质原性纤维酸性蛋白抗体(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)染色阳性的细胞,表明移植的细胞可以分化为具有神经元或胶质细胞特征的细胞。

关键词：脊髓损伤/治疗干细胞神经系统/细胞学骨髓细胞移植

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源于成人骨髓神经干细胞诱导分化的实验研究(英文)

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中国临床康复 2003年第22期7卷 3069-3071,F003页

作者：姜晓丹徐如祥张世忠柯以铨解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东省广州市510282

目的研究成人骨髓分离培养神经干细胞的可行性,为进一步自体移植治疗脑退行病变的临床应用奠定基础。方法以20例成年男/女性(28～48岁)骨髓自愿捐献者为取材对象,骨穿术后经梯度密度离心分离获取的成人骨髓基质细胞用“Cytokine·... 详细信息

目的研究成人骨髓分离培养神经干细胞的可行性,为进一步自体移植治疗脑退行病变的临床应用奠定基础。方法以20例成年男/女性(28～48岁)骨髓自愿捐献者为取材对象,骨穿术后经梯度密度离心分离获取的成人骨髓基质细胞用“Cytokine·神经干细胞培养液”培养,确定神经干细胞的最佳体外生存环境。以细胞克隆方法判断神经干细胞增殖;以巢蛋白(Nestin),神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质原性纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学方法分别鉴定神经干细胞、神经元和神经胶质细胞。所涉及的细胞因子主要有脑源性神经营养因子(BDNF)、白血病抑止因子(LIF)(10μg/L)和维A酸(RA)(0.5mg/L)等。结果成人骨髓基质细胞在相应培养条件下快速分裂增殖为神经干细胞,并由含粗大胞质颗粒的多个神经干细胞组成岛屿状细胞球(神经球),该细胞球表达特殊的神经干细胞Nestin抗原;进一步将这些细胞球分离成单细胞并重新以克隆密度培养,单个的细胞又很快变成岛屿状神经球。神经干细胞球进一步分化,则可见到有的细胞胞体增大并出芽、逐渐发育成为较成熟的长突起细胞,长突起相互连接、交织成网,分化的长突起细胞表达NSE或GFAP。结论成年人骨髓在一定条件诱导下可以生成神经干细胞;用人骨髓组织诱导神经干细胞作为种子细胞具有可行性。

关键词：成人骨髓移植神经干细胞实验细胞分化脑退行病变

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大鼠脑组织细胞培养的形态学观察

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神经解剖学杂志 2004年第4期20卷 419-423页

作者：李战辉刘振华姜晓丹刘亚杰第一军医大学珠江医院全军神经科学研究所广州510282

为观察原代培养 SD大鼠大脑组织 ,包括神经干细胞在内的各种细胞的形态 ,取新生大鼠 ,无菌操作下取出整个大脑 ,制备成单细胞悬液 ,接种培养 ,免疫细胞化学鉴定各类细胞的同时用光镜和扫描电镜对不同阶段和种类的细胞进行形态学观察。... 详细信息

为观察原代培养 SD大鼠大脑组织 ,包括神经干细胞在内的各种细胞的形态 ,取新生大鼠 ,无菌操作下取出整个大脑 ,制备成单细胞悬液 ,接种培养 ,免疫细胞化学鉴定各类细胞的同时用光镜和扫描电镜对不同阶段和种类的细胞进行形态学观察。结果显示 :在体外培养出神经元、胶质细胞和神经干细胞 ;神经细胞在体外的发育时程跟体内基本一致 ,神经干细胞在体外 2 0 d左右分化成熟 ,获取了神经细胞和干细胞体外培养的光镜和扫描电镜形态。结果提示 ,成体神经细胞体外分离、培养的条件关键点在于尽可能贴近自然 ,由此可保证细胞培养的质量 ,获得可靠的神经干细胞、神经元和胶质细胞。为各类神经细胞提供了形态学资料。

关键词：大鼠脑组织细胞培养形态学神经干细胞神经细胞

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光动力疗法对人胃癌细胞MGC-803的杀伤性干预

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中国临床康复 2006年第9期10卷 133-135页

作者：周广军黄宗海俞金龙厉周丁涟沭徐如祥姜晓丹解放军第一军医大学珠江医院普通外科广东省广州市510282 解放军第一军医大学全军神经医学研究所广东省广州市510282

目的:观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用,探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法:实验于2004-03/2004-12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司;MGC-803人胃腺癌细... 详细信息

目的:观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用,探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法:实验于2004-03/2004-12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司;MGC-803人胃腺癌细胞株购于中山大学实验动物中心。①分别使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,浓度分别为0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mmol/L,给予相同剂量的激光辐照。②使用相同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,给予不同剂量的激光辐照,能量分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100J/cm2。③使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,浓度分别为0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mmol/L,不予激光辐照。④给予不同剂量的激光辐照培养MGC-803胃癌细胞,能量分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100J/cm2,不给予5-氨基乙酰丙酸。以上4个实验均以四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力,以不加5-氨基乙酰丙酸、无激光辐照培养的细胞作为空白对照,细胞存活率=处理组细胞吸光度值/对照组细胞吸光度值×100%。⑤培养MGC-803胃癌细胞,随机分为4组,即单纯MGC-803胃癌细胞组、单纯5-氨基乙酰丙酸组、单纯给予激光组及光动力学治疗组,使用吖啶橙-溴化乙锭染色法检测细胞凋亡情况。结果:①5-氨基乙酰丙酸浓度不同、激光辐射剂量相同:随5-氨基乙酰丙酸浓度逐渐递增,MGC-803细胞的存活率逐渐下降,各组细胞存活率之间差异有显著性意义(F=266.39,P<0.01);但在浓度到达2.0mmol/L后,细胞存活率不再随着5-氨基乙酰丙酸的浓度的增加而下降。②激光能量不同、5-氨基乙酰丙酸浓度相同:随着激光剂量的增加MGC-803细胞存活率显著下降,各组细胞存活率之间差异有显著性意义(F=226.31,P<0.01)。③5-氨基乙酰丙酸浓度不同、不给激光辐射:各组细胞存活率之间差异均无显著性意义(F=0.79,P=0.54)。④激光辐射剂量不同、不给5-氨基乙酰丙酸:各组细胞存活率之间差异均无显著性意义(F=0.61,P=0.66)。⑤只有光动力学治疗组出现细胞凋亡现象,而其他细胞组基本无凋亡细胞。结论:在较低的浓度范围内,5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-氨基乙酰丙酸浓度的增加而增加,在较高浓度时则存在饱和现象,而且杀伤力与光剂量成正比。单纯激光不能产生光动力效应,5-氨基乙酰丙酸本身对细胞无毒性作用。5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗能够有效的治疗胃癌,光动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡是其可能作用途径之一。

关键词：光化学疗法胃肿瘤乙酰丙酸类脱噬作用

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干细胞移植治疗缺血性脑损伤的策略

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中国临床康复 2004年第4期8卷 708-709页

作者：陈镇洲徐如祥姜晓丹解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所实验室广东省广州市510282

缺血性脑损伤在临床上占有重要的地位,干细胞移植是目前有可能实现对缺血坏死区结构与功能重建的方法之一。当前干细胞治疗缺血性脑损伤的主要策略有:激活脑内成体神经干细胞自身修复机制;外源干细胞脑内移植;基因修饰的干细胞脑内移植... 详细信息

缺血性脑损伤在临床上占有重要的地位,干细胞移植是目前有可能实现对缺血坏死区结构与功能重建的方法之一。当前干细胞治疗缺血性脑损伤的主要策略有:激活脑内成体神经干细胞自身修复机制;外源干细胞脑内移植;基因修饰的干细胞脑内移植。作用机制上,重建神经环路并不总是功能恢复的首要条件。

关键词：干细胞移植治疗缺血性脑损伤神经组织

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大鼠骨髓细胞体外诱导分化神经细胞的演变规律

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第4期25卷 295-298,303页

作者：李战辉刘振华姜晓丹徐如祥第一军医大学珠江医院中国人民解放军神经医学研究所广东广州510282

【目的】摸索从全骨髓诱导培养分化神经细胞的方法,并从神经巢蛋白(nestin)和神经核蛋白(NeuN)两种标记物上观察其分化的演变规律。【方法】抽取SD大鼠骨髓做全骨髓细胞培养,采用免疫细胞化学和荧光激活细胞计数仪(FACS)追踪由骨髓到神... 详细信息

【目的】摸索从全骨髓诱导培养分化神经细胞的方法,并从神经巢蛋白(nestin)和神经核蛋白(NeuN)两种标记物上观察其分化的演变规律。【方法】抽取SD大鼠骨髓做全骨髓细胞培养,采用免疫细胞化学和荧光激活细胞计数仪(FACS)追踪由骨髓到神经元样细胞不同阶段nestin和NeuN的表达趋势,给予定性、定量分析。【结果】免疫细胞化学检测,细胞培养5d时对上述抗体呈弱阳性,逐渐增强,培养第15天细胞呈典型nestin强阳性反应,而NeuN强阳性反应在25～30d达到高峰,发育成为神经元样细胞。FACS同步追踪显示了nestin和NeuN在培养第5天时即有表达,前者3.4%,后者2.5%。随着骨髓细胞的分化,在15d时nestin阳性细胞为22.7%,达到高峰,随后下降。NeuN于30d达到高峰为41.2%,而此时nestin阳性细胞为5.9%。【结论】从神经干细胞和神经细胞特征性标记物演变探知骨髓细胞的分化发育规律;骨髓细胞可分化为神经细胞;骨髓源性神经前体细胞早期亦有nestin和NeuN的表达。

关键词：大鼠骨髓细胞体外诱导分化神经细胞神经核蛋白

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向大鼠垂体引入神经追踪剂的手术方法

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解剖学杂志 2000年第1期23卷 92-93页

作者：刘伟解飞鞠躬第一军医大学珠江医院耳鼻咽喉科广州510282 第四军医大学全军神经科学研究所

向大鼠垂体引入追踪剂行神经束路追踪研究要求对垂体有足够的暴露范围和暴露时间,应用慢运输追踪剂要求术后有足够长的存活期.在研究大鼠垂体前叶神经纤维起源中,在参照Woynforth介绍的经咽旁入路垂体切除术的同时,我们采用了一些辅助措... 详细信息

向大鼠垂体引入追踪剂行神经束路追踪研究要求对垂体有足够的暴露范围和暴露时间,应用慢运输追踪剂要求术后有足够长的存活期.在研究大鼠垂体前叶神经纤维起源中,在参照Woynforth介绍的经咽旁入路垂体切除术的同时,我们采用了一些辅助措施,使向垂体前叶引入逆行慢运输追踪剂荧光金手术过程中的安全性和术后动物存活率和存活质量达到比较理想的效果.

关键词：垂体神经追踪剂引入手术方法

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向大鼠垂体引入神经追踪剂的手术方法

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解剖学杂志 2000年第5期23卷 486-488页

作者：刘伟鞠躬第一军医大学珠江医院耳鼻咽喉科广州510282 第四军医大学全军神经科学研究所

向大鼠垂体引入追踪剂行神经束路追踪研究要求对垂体有足够的暴露范围和暴露时间，应用慢运输追踪剂要求术后有足够长的存活期。在研究大鼠垂体前叶神经纤维起源中，在参照Woynforth介绍的经咽旁入路垂体切除术的同时，我们采用了一些... 详细信息

向大鼠垂体引入追踪剂行神经束路追踪研究要求对垂体有足够的暴露范围和暴露时间，应用慢运输追踪剂要求术后有足够长的存活期。在研究大鼠垂体前叶神经纤维起源中，在参照Woynforth介绍的经咽旁入路垂体切除术的同时，我们采用了一些辅助措施，使向垂体前叶引入逆行慢运输追踪剂荧光金手术过程中的安全性和术后动物存活率和存活质量达到比较理想的效果。1 材料与方法1.1 手术采用SD大鼠20只，雌雄不拘，体重介于250～350 gm。大鼠在戊巴比妥钠腹膜腔内注射麻醉下(30 mg／kg)，仰卧位固定于手术台上。行气管切开，用8／0丝线将气管软骨环与皮肤缝合作成气管-皮肤瘘。在颈左侧肩甲舌骨肌投影部位作直切口，分离皮下组织显露该肌肉，经此肌肉向内下方向分离达咽旁。用剥离子将咽推向右侧，暴露颅底兰线(Blue suture line)和其吻侧的颅底骨面，并用拉钩保持该区域的直视状态和将颈内、外动脉拉向一侧加以保护。

关键词：垂体引入神经追踪剂手术方法垂体显微手术

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神经干细胞分化调节机制

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中国临床神经科学 2002年第3期10卷 324-328页

作者：姜晓丹徐如祥柯以铨杨志林张世忠第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所

哺乳类中枢神经系统 (CNS)干细胞是具有自我更新能力及多分化潜能的祖细胞。它可以产生CNS内不同种类细胞 (包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞 )。它在体内或体外 ,自行增殖 ,此即为“自我更新”。近年来 ,由于选择性培养方法的... 详细信息

哺乳类中枢神经系统 (CNS)干细胞是具有自我更新能力及多分化潜能的祖细胞。它可以产生CNS内不同种类细胞 (包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞 )。它在体内或体外 ,自行增殖 ,此即为“自我更新”。近年来 ,由于选择性培养方法的改进和选择性标记物检查CNS干细胞等技术的应用 ,使干细胞生物学取得了长足进步。

关键词：神经干细胞神经细胞球细胞分化

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持续性植物状态患者意识状态与氨基酸类神经递质水平的关系

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中国临床康复 2004年第4期8卷 629-631页

作者：郭燕舞周媛张世忠徐如祥解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所神经外科广东省广州市510282 解放军第一军医大学珠江医院肿瘤科广东省广州市510282

目的:应用高效液相色谱分析法检测持续性植物状态(persistentvegetativestate,PVS)患者脑脊液中氨基酸类神经递质,观察其与临床表现的相关性。方法:46例PVS患者按照PVS评分的不同分为3组,与20例对照患者同期采集脑脊液,分别检测天冬氨... 详细信息

目的:应用高效液相色谱分析法检测持续性植物状态(persistentvegetativestate,PVS)患者脑脊液中氨基酸类神经递质,观察其与临床表现的相关性。方法:46例PVS患者按照PVS评分的不同分为3组,与20例对照患者同期采集脑脊液,分别检测天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸的含量。结果:在该实验条件下,4种氨基酸在25min内得以较好分离。对照组4种氨基酸含量分别为:(3.54±1.02),(3.12±0.87),(14.9±3.23),(16.2±4.35)mmo/L。PVS组4种递质水平均高于对照组,且递质水平与PVS评分呈负相关,PVS评分<6分组4种氨基酸含量分别为:(7.92±2.40),(5.80±1.34),(33.80±7.60),(45.70±9.51)mmo/L,与对照组的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PVS患者脑脊液中氨基酸类神经递质与临床表现有一定的相关性。

关键词：持续性植物状态意识状态氨基酸类神经递质 PVS 诊断脑脊液

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