检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第2期9卷 152-154页

作者：丁涟沭徐如祥姜晓丹黄涛许忠袁军陈镇洲蔡颖谦邹雨汐杜谋选徐宗俊解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所神经外科广东省广州市510282 解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所检验科广东省广州市510282

目的:探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力(ALA-PDT)对人脑胶质瘤细胞U251的治疗作用。方法:实验于2003-01/2004-05在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所完成。将不同浓度的5-ALA加入到细胞培养基中,随之以激光辐照;固定... 详细信息

目的:探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力(ALA-PDT)对人脑胶质瘤细胞U251的治疗作用。方法:实验于2003-01/2004-05在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所完成。将不同浓度的5-ALA加入到细胞培养基中,随之以激光辐照;固定浓度的5-ALA给予不同剂量的激光辐射。MTT法测定细胞存活率。结果:激光能量恒定于25.0J/cm时,ALA-PDT对U251细胞的杀伤力2在较低5-ALA浓度范围内,随着5-ALA的浓度的增高而增强。各组与对照组间相比较,差异均有显著性意义(F=770.12,P=0.0000)。在较高5-ALA浓度范围内,则存在着饱和现象;相同的5-ALA浓度下,细胞生存率随着激光能量的增加而下降。单用5-ALA或激光处理,均不对细胞造成显著杀伤。结论:5-ALA本身对细胞无明显毒性作用,其介导的PDT是很有前途的胶质瘤治疗方法。

关键词：光化学疗法脑肿瘤神经胶质瘤

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高温高湿环境下猫颅脑火器伤后细菌生长特点

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第一军医大学学报 2004年第2期24卷 201-203页

作者：郭燕舞朱红胜徐如祥第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东广州510282 解放军422医院神经外科广东湛江524005

目的研究高温高湿环境下猫颅脑火器伤后创面及周围组织细菌生长特点。方法杂种猫23只随机分为常温枪伤对照组(伤后立即取材，A组)、常温枪伤组(伤后6h取材，B组)、高温高湿枪伤组(伤后6h取材，C组)和空白对照组(D组)，分别取创面及周... 详细信息

目的研究高温高湿环境下猫颅脑火器伤后创面及周围组织细菌生长特点。方法杂种猫23只随机分为常温枪伤对照组(伤后立即取材，A组)、常温枪伤组(伤后6h取材，B组)、高温高湿枪伤组(伤后6h取材，C组)和空白对照组(D组)，分别取创面及周围组织进行细菌培养并计数。结果 A、B、C组其创面组织、伤道壁5mm内组织、伤道壁5～10mm内组织细菌含量无统计学差异(P>0．05)，各组内随着离伤道距离的增加细菌含量减少(P<0．01)。3组创面组织、伤道壁5mm内组织细菌含量与D组比较差异显著(P<0．01)。结论高温高湿环境对颅脑火器伤6h内的细菌生长情况无显著影响，颅脑火器伤后6h内细菌繁殖未进入高速增长期，进行清创仍是安全的。

关键词：高温高湿猫颅脑火器伤细菌生长细菌感染

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大鼠骨髓基质干细胞诱导分化神经细胞的实验研究

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中国综合临床 2005年第7期21卷 577-579页

作者：袁军徐如祥姜晓丹黄涛蔡颖谦邹雨汐杜谋选第一军医大学珠江医院解放军神经医学研究所广州510282

目的探讨骨髓源性神经干细胞分化为神经细胞的可行性,为中枢神经组织损伤修复寻找种子细胞的理想来源。方法无菌取成熟大鼠长骨骨髓,密度梯度离心分离后获得骨髓基质细胞,在神经干细胞培养液及细胞因子等条件下诱导其分化为神经元样细胞... 详细信息

目的探讨骨髓源性神经干细胞分化为神经细胞的可行性,为中枢神经组织损伤修复寻找种子细胞的理想来源。方法无菌取成熟大鼠长骨骨髓,密度梯度离心分离后获得骨髓基质细胞,在神经干细胞培养液及细胞因子等条件下诱导其分化为神经元样细胞,通过免疫细胞化学方法对诱导后细胞进行鉴定。结果骨髓基质细胞能在神经干细胞条件培养基中增殖、分化,表达巢蛋白抗体抗原,在适宜诱导分化因子及条件下进一步分化为神经元样细胞,免疫细胞化学检测可见有神经细胞特异性核蛋白抗体抗原表达阳性。结论在适宜培养条件及诱导因子联合作用下,骨髓基质细胞可成功诱导出神经元样细胞。

关键词：骨髓基质细胞神经干细胞细胞培养

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红藻氨酸对海马CA1区突触传递的作用

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第一军医大学学报 2003年第7期23卷 652-654页

作者：刘智良徐如祥姜晓丹尹震罗成义杜谋选邹雨汐第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东广州510282 空军总医院神经外科北京100036

目的研究激活海马红藻氨酸(kainate,KA)受体对CA1区兴奋性和抑制性突触递质的作用。方法对成年大鼠海马脑片CA1区锥体细胞采用“盲法”全细胞电压钳记录,分别检测和分析KA (10 μmol/L)对CA1传入纤维引出的兴奋性突触后电流和抑制性突... 详细信息

目的研究激活海马红藻氨酸(kainate,KA)受体对CA1区兴奋性和抑制性突触递质的作用。方法对成年大鼠海马脑片CA1区锥体细胞采用“盲法”全细胞电压钳记录,分别检测和分析KA (10 μmol/L)对CA1传入纤维引出的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的影响。结果KA受体的激活不仅显著性抑制抑制性突触后电流(P<0.01),而且同时显著性抑制兴奋性突触后电流(P<0.01)。结论KA受体通过激活同时抑制海马CA1区神经元兴奋性和抑制性突触的传入,对海马神经元动力学的平衡产生影响,从而促进癫痫的形成。

关键词：红藻氨酸海马 CAl区兴奋性突触后电流抑制性突触后电流

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光动力疗法对人胃癌细胞MGC-803的杀伤性干预

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中国临床康复 2006年第9期10卷 133-135页

作者：周广军黄宗海俞金龙厉周丁涟沭徐如祥姜晓丹解放军第一军医大学珠江医院普通外科广东省广州市510282 解放军第一军医大学全军神经医学研究所广东省广州市510282

目的:观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用,探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法:实验于2004-03/2004-12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司;MGC-803人胃腺癌细... 详细信息

目的:观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用,探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法:实验于2004-03/2004-12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司;MGC-803人胃腺癌细胞株购于中山大学实验动物中心。①分别使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,浓度分别为0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mmol/L,给予相同剂量的激光辐照。②使用相同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,给予不同剂量的激光辐照,能量分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100J/cm2。③使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞,浓度分别为0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mmol/L,不予激光辐照。④给予不同剂量的激光辐照培养MGC-803胃癌细胞,能量分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100J/cm2,不给予5-氨基乙酰丙酸。以上4个实验均以四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力,以不加5-氨基乙酰丙酸、无激光辐照培养的细胞作为空白对照,细胞存活率=处理组细胞吸光度值/对照组细胞吸光度值×100%。⑤培养MGC-803胃癌细胞,随机分为4组,即单纯MGC-803胃癌细胞组、单纯5-氨基乙酰丙酸组、单纯给予激光组及光动力学治疗组,使用吖啶橙-溴化乙锭染色法检测细胞凋亡情况。结果:①5-氨基乙酰丙酸浓度不同、激光辐射剂量相同:随5-氨基乙酰丙酸浓度逐渐递增,MGC-803细胞的存活率逐渐下降,各组细胞存活率之间差异有显著性意义(F=266.39,P<0.01);但在浓度到达2.0mmol/L后,细胞存活率不再随着5-氨基乙酰丙酸的浓度的增加而下降。②激光能量不同、5-氨基乙酰丙酸浓度相同:随着激光剂量的增加MGC-803细胞存活率显著下降,各组细胞存活率之间差异有显著性意义(F=226.31,P<0.01)。③5-氨基乙酰丙酸浓度不同、不给激光辐射:各组细胞存活率之间差异均无显著性意义(F=0.79,P=0.54)。④激光辐射剂量不同、不给5-氨基乙酰丙酸:各组细胞存活率之间差异均无显著性意义(F=0.61,P=0.66)。⑤只有光动力学治疗组出现细胞凋亡现象,而其他细胞组基本无凋亡细胞。结论:在较低的浓度范围内,5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-氨基乙酰丙酸浓度的增加而增加,在较高浓度时则存在饱和现象,而且杀伤力与光剂量成正比。单纯激光不能产生光动力效应,5-氨基乙酰丙酸本身对细胞无毒性作用。5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗能够有效的治疗胃癌,光动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡是其可能作用途径之一。

关键词：光化学疗法胃肿瘤乙酰丙酸类脱噬作用

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大鼠骨髓细胞体外诱导分化神经细胞的演变规律

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第4期25卷 295-298,303页

作者：李战辉刘振华姜晓丹徐如祥第一军医大学珠江医院中国人民解放军神经医学研究所广东广州510282

【目的】摸索从全骨髓诱导培养分化神经细胞的方法,并从神经巢蛋白(nestin)和神经核蛋白(NeuN)两种标记物上观察其分化的演变规律。【方法】抽取SD大鼠骨髓做全骨髓细胞培养,采用免疫细胞化学和荧光激活细胞计数仪(FACS)追踪由骨髓到神... 详细信息

【目的】摸索从全骨髓诱导培养分化神经细胞的方法,并从神经巢蛋白(nestin)和神经核蛋白(NeuN)两种标记物上观察其分化的演变规律。【方法】抽取SD大鼠骨髓做全骨髓细胞培养,采用免疫细胞化学和荧光激活细胞计数仪(FACS)追踪由骨髓到神经元样细胞不同阶段nestin和NeuN的表达趋势,给予定性、定量分析。【结果】免疫细胞化学检测,细胞培养5d时对上述抗体呈弱阳性,逐渐增强,培养第15天细胞呈典型nestin强阳性反应,而NeuN强阳性反应在25～30d达到高峰,发育成为神经元样细胞。FACS同步追踪显示了nestin和NeuN在培养第5天时即有表达,前者3.4%,后者2.5%。随着骨髓细胞的分化,在15d时nestin阳性细胞为22.7%,达到高峰,随后下降。NeuN于30d达到高峰为41.2%,而此时nestin阳性细胞为5.9%。【结论】从神经干细胞和神经细胞特征性标记物演变探知骨髓细胞的分化发育规律;骨髓细胞可分化为神经细胞;骨髓源性神经前体细胞早期亦有nestin和NeuN的表达。

关键词：大鼠骨髓细胞体外诱导分化神经细胞神经核蛋白

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抑制p38MAPK通路对大鼠癫痫发作引起海马神经元损伤的保护作用

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中国临床康复 2004年第16期8卷 3063-3065,i002页

作者：刘智良徐如祥尹震罗成义戴宜武杜谋选邹雨汐解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所神经外科广东省广州市510282 解放军空军总医院神经外科北京市100036

目的:探讨抑制p38MAPK通路对减轻红藻氨酸诱导的颞叶癫痫发作引起大鼠海马神经元所造成损害的作用和机制。方法:经侧脑室给予不同剂量(0,0.01,0.1,1μg)SB203580(p38MAPK特异性抑制剂)预处理,30min后再予红藻氨酸制作大鼠颞叶癫痫持续... 详细信息

目的:探讨抑制p38MAPK通路对减轻红藻氨酸诱导的颞叶癫痫发作引起大鼠海马神经元所造成损害的作用和机制。方法:经侧脑室给予不同剂量(0,0.01,0.1,1μg)SB203580(p38MAPK特异性抑制剂)预处理,30min后再予红藻氨酸制作大鼠颞叶癫痫持续状态模型。7d后采用Nissl染色方法观察海马各区的锥体细胞和颗粒细胞的情况。结果:红藻氨酸注射7d后CA3区可见大量锥体细胞缺失,尚存细胞变性,伴局限性颗粒细胞增多,呈放射状分布。CA1区受累较轻,但也存在一定程度的细胞脱失。预先给予SB203580(0.1μg以上剂量)处理的动物以上变化明显减轻。假手术大鼠海马各区有大量正常致密锥体细胞,未见细胞脱失。结论:大鼠侧脑室内注射红藻氨酸引起全身痉挛性癫痫持续状态对海马神经元造成损害,而抑制p38MAPK通路,对海马神经元起一定保护作用。

关键词：脑疾病癫痫持续状态红藻氨酸海马

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持续性植物状态患者意识状态与氨基酸类神经递质水平的关系

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中国临床康复 2004年第4期8卷 629-631页

作者：郭燕舞周媛张世忠徐如祥解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所神经外科广东省广州市510282 解放军第一军医大学珠江医院肿瘤科广东省广州市510282

目的:应用高效液相色谱分析法检测持续性植物状态(persistentvegetativestate,PVS)患者脑脊液中氨基酸类神经递质,观察其与临床表现的相关性。方法:46例PVS患者按照PVS评分的不同分为3组,与20例对照患者同期采集脑脊液,分别检测天冬氨... 详细信息

目的:应用高效液相色谱分析法检测持续性植物状态(persistentvegetativestate,PVS)患者脑脊液中氨基酸类神经递质,观察其与临床表现的相关性。方法:46例PVS患者按照PVS评分的不同分为3组,与20例对照患者同期采集脑脊液,分别检测天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸的含量。结果:在该实验条件下,4种氨基酸在25min内得以较好分离。对照组4种氨基酸含量分别为:(3.54±1.02),(3.12±0.87),(14.9±3.23),(16.2±4.35)mmo/L。PVS组4种递质水平均高于对照组,且递质水平与PVS评分呈负相关,PVS评分<6分组4种氨基酸含量分别为:(7.92±2.40),(5.80±1.34),(33.80±7.60),(45.70±9.51)mmo/L,与对照组的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PVS患者脑脊液中氨基酸类神经递质与临床表现有一定的相关性。

关键词：持续性植物状态意识状态氨基酸类神经递质 PVS 诊断脑脊液

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骨髓基质细胞诱导分化为去甲肾上素能神经元的实验研究

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中国临床康复 2004年第22期8卷 4476-4477,i002页

作者：蔡颖谦陈剑荣姜晓丹丁涟沭解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东省广州市510280

目的:研究骨髓源性神经干细胞在体外培养及诱导分化的神经元样细胞,能否分泌去甲肾上素神经递质成分,进而初步推断是否具有神经元的生化特征。方法:分离新西兰大白兔骨髓基质细胞(bonemarrowstemcells,BMSCs),在体外应用神经干细胞培养... 详细信息

目的:研究骨髓源性神经干细胞在体外培养及诱导分化的神经元样细胞,能否分泌去甲肾上素神经递质成分,进而初步推断是否具有神经元的生化特征。方法:分离新西兰大白兔骨髓基质细胞(bonemarrowstemcells,BMSCs),在体外应用神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化,采用免疫细胞化学方法进行鉴定;并应用高效液相色谱法(highper-formanceliquidchromatograpy,HPLC)检测其去甲肾上素神经递质的含量。结果:BMSCs培养14d可见大而圆细胞,免疫细胞化学鉴定Nestin抗原阳性;培养20d可见长突起神经元样细胞,神经核蛋白(NeuN)免疫细胞化学检查阳性,高效液相检测BMSCs、空白神经干细胞培养液未测到去甲肾上素神经递质,经体外培养增殖7,14d的神经干细胞及培养液、体外诱导分化20d的神经元样细胞及培养液则均可检测到去甲肾上腺素(noradrenaline,NE),培养第7,14,20天每107细胞中NE水平分别为:(4.270±0.376),(14.203±0.771),(45.970±4.902)μg/L,第7,14天NE含量小于第20天(F=172.44,P=0.011)。而且随着BMSCs培养天数的增加,其所含的NE浓度也渐增加(P<0.05)。结论:兔BMSCs能在体外增殖,并表达Nestin抗原;而且,在适宜条件下能分化成神经元样细胞,表达成熟神经元特异性核蛋白NeuN,并合成。

关键词：骨髓基质细胞细胞分化去甲肾上素神经元实验神经递质

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缺血缺氧及再灌注后海马神经元损伤的时间窗特性

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中国临床康复 2005年第5期9卷 73-75页

作者：许忠徐如祥姜晓丹黄涛丁涟沭袁军刘宝松解放军第一军医大学珠江医院神经外科全军神经医学研究所广东省广州市510282 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室重庆市400042

目的:探讨缺血缺氧及再灌注损伤后大鼠海马神经元在伤后不同时间的凋亡及死亡特性,阐明神经元损伤发生的时间窗特征。方法:实验于2004-05/06在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所进行。体外培养胚胎大鼠海马神经元,模拟临床缺血... 详细信息

目的:探讨缺血缺氧及再灌注损伤后大鼠海马神经元在伤后不同时间的凋亡及死亡特性,阐明神经元损伤发生的时间窗特征。方法:实验于2004-05/06在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所进行。体外培养胚胎大鼠海马神经元,模拟临床缺血过程致神经元缺氧损伤,采用AnnexinV联合PI标记和流式细胞检测技术观察伤后不同时间点的凋亡与死亡情况。结果:海马神经元缺氧损伤后,其细胞损伤的形式为凋亡和坏死同时存在;模拟缺血15,30min,1.0,1.5,2.0,2.5和3.0h,其坏死率分别为(1.37±0.12)%,(3.71±0.34)%,(16.47±1.27)%,(18.73±2.02)%,(19.77±2.32)%,(22.13±2.12)%和(28.78±2.69)%,相互间差异有显著性意义(P<0.05),各时间点的凋亡率分别为(6.23±1.67)%,(6.56±2.38)%,(6.73±2.42)%,(6.95±1.89)%,(7.16±2.82)%,(6.93±2.56)%和(7.23±2.89)%,凋亡率无明显变化(P>0.05)。各时间点再恢复糖和氧供应后至24h,海马神经元存活率进一步明显下降,坏死率进一步增多,各时间点神经元坏死率分别为(6.98±1.23)%,(8.46±1.37)%,(17.68±2.97)%,(20.79±3.16)%,(21.67±3.05)%,(35.53±3.33)%和(50.22±4.19)%,差异亦有显著性意义(P<0.05);凋亡率亦逐渐增多,模拟缺血15,30min,1.0,1.5和2.0h时间点的再灌注24h。

关键词：脑缺血脑缺氧再灌注损伤海马神经元时间

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