检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第10期47卷 1059-1068页

作者：王潇张梦洁邓芳殷骏倪兵陆军军医大学(第三军医大学):高原军事医学系病理生理学教研室全军高原医学重点实验室教育部极端环境医学重点实验室重庆

目的旨在探讨低氧环境对精细胞分化及精子纤毛微管稳定性的影响及其分子机制,以明确低氧条件对雄性生殖功能的潜在危害。方法采用48只8周龄SPF级健康雄性SD大鼠(体质量300~399 g),由陆军军医大学实验动物研究所提供。大鼠实验设计如下:... 详细信息

目的旨在探讨低氧环境对精细胞分化及精子纤毛微管稳定性的影响及其分子机制,以明确低氧条件对雄性生殖功能的潜在危害。方法采用48只8周龄SPF级健康雄性SD大鼠(体质量300~399 g),由陆军军医大学实验动物研究所提供。大鼠实验设计如下:①氧浓度梯度实验:设置21%常氧对照、13.5%、11.8%、10.4%氧浓度,分别模拟海拔3500、4500、5500 m低氧环境,持续暴露2个月,每组样本量为6只;②氧暴露时间梯度实验:在10.4%氧浓度下暴露0、0.5、1.0、2.0个月,每组样本量为6只。采用流式分选技术分离圆形精细胞,并采用以下方法测量相关指标:①转录组测序,分析低氧胁迫下精子分化障碍及纤毛结构异常的基因表达谱变化;②Western blot,检测关键蛋白CEP290、RING 1A、H2AK119ub的表达水平;②荧光漂白恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching/FRAP),监测微管组装动力学,评估低氧对微管稳定性的即时影响。结果实验结果显示,在氧浓度梯度实验中,10.4%氧浓度暴露2个月后,大鼠睾丸生精小管中精原细胞、次级精母细胞及圆形精细胞的比例显著增加(P<0.05),分别为21%常氧组的(1.33±0.04)倍、(1.06±0.01)倍、(1.60±0.02)倍;而初级精母细胞和长形精细胞的比例显著降低(P<0.05),分别为21%常氧组的(0.89±0.01)倍、(0.88±0.0002)倍。这种变化呈现出明显的氧浓度依赖性。在时间梯度实验中,暴露于10.4%氧浓度0.5个月时,精原细胞、次级精母细胞及圆形精细胞的比例开始增加(P<0.05),分别为0个月对照组的(1.11±0.03)倍、(1.04±0.01)倍、(1.29±0.003)倍;而初级精母细胞和长形精细胞的比例在暴露1个月后开始显著降低(P<0.05),分别为0个月对照组的(0.94±0.03)倍、(0.95±0.008)倍。暴露于10.4%氧浓度2个月的大鼠,其附睾内精子尾部畸形率显著增加(P<0.0001),畸形率从21%常氧组的(12.1±1.7)%上升至(30.8±3.7)%。精母细胞系G2暴露于1%低氧环境中24 h后,FRAP显示微管组装速率降低,微管动态不稳定性增加,荧光恢复最大值从21%常氧组的(0.37±0.02)倍下降至(0.29±0.01)倍。转录组测序结果显示,低氧环境下纤毛基体关键分子CEP290的转录水平上调,上调倍数为21%常氧组的(1.81±0.11)倍;而PRC1复合体成员RING 1A、RING 1B、CBX2、PHC1及PCGF1的表达水平下调,分别为21%常氧组的(0.74±0.02)倍、(0.73±0.01)倍、(0.78±0.02)倍、(0.71±0.01)倍、(0.86±0.03)倍。Western blot验证结果显示,CEP290蛋白表达水平在低氧组上调,RING 1A蛋白表达水平下调。ChIPqPCR实验显示,RING 1A及其产物H2AK119ub在CEP290启动子区的结合显著减少(P<0.0001),结合强度分别为21%常氧组的(0.38±0.02)倍、(0.52±0.06)倍。而在siRING 1A组G2细胞中,H2AK119ub在CEP290启动子区的结合显著减少(P<0.0001),结合强度为对照组的(0.74±0.06)倍,同时CEP290 mRNA水平显著上升(P<0.0001),上调倍数为(3.35±0.37)倍。结论低氧环境通过RING 1AH2AK119ub-CEP290信号轴抑制精子纤毛微管稳定性,影响精细胞分化,导致精子发生障碍。

关键词：低氧精子生成纤毛微管稳定性 RING 1A

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神经质对官兵抑郁症状的影响:负性自动思维与心理应激反应的中介效应

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海军军医大学学报 2022年第7期43卷 821-826页

作者：葛奇奇周晓娜刘韵资苏文君王伟海军军医大学(第二军医大学)心理系军事应激心理学教研室上海200433

目的探讨神经质、抑郁症状、负性自动思维、心理应激反应之间的关系,揭示神经质影响抑郁症状的作用机制。方法采用滚雪球抽样法选择642名官兵作为研究对象,采用横断面调查设计,分别使用艾森克个性问卷、自动思维问卷、心理应激自评问... 详细信息

目的探讨神经质、抑郁症状、负性自动思维、心理应激反应之间的关系,揭示神经质影响抑郁症状的作用机制。方法采用滚雪球抽样法选择642名官兵作为研究对象,采用横断面调查设计,分别使用艾森克个性问卷、自动思维问卷、心理应激自评问卷、抑郁-焦虑-压力自评量表调查官兵的神经质、负性自动思维、心理应激反应和抑郁症状。采用Pearson相关分析和结构方程模型分析神经质、负性自动思维、心理应激反应和抑郁症状之间的关系。结果回收有效问卷555份,有效回收率为86.45%。相关分析结果显示,神经质、负性自动思维、心理应激反应及3个抑郁症状(抑郁、焦虑、压力)得分均呈两两正相关(P均<0.01)。以负性自动思维与心理应激反应为中介变量,构建以神经质为自变量、以抑郁症状为因变量的中介模型,模型各项拟合指数良好(χ^(2)/df=0.980,规范拟合指数为0.996,塔克-刘易斯指数为1.000,比较拟合指数为1.000,近似误差均方根为0.000,标准化均方根残差为0.011,赤池信息量准则为35.877)。负性自动思维的中介效应为0.077,心理应激反应的中介效应为0.061,2个中介变量的链式中介效应为0.017,总间接效应为0.155,总间接效应占总效应(0.286)的54.20%。结论在官兵中,神经质能预测抑郁症状,并且负性自动思维与心理应激反应在神经质对抑郁症状的影响中起链式中介作用。

关键词：神经质抑郁症状负性自动思维心理应激结构方程模型军事人员

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小分子化合物在神经元重编程中的应用研究进展

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生理学报 2025年第1期77卷 181-193页

作者：戴子为刘红袁一旻张静宜秦尚尧苏志达海军军医大学基础医学院神经生物学教研室分子神经生物学教育部重点实验室海军军医大学麻醉系疼痛治疗学研究室

神经元重编程是将非神经元成体细胞转分化为神经元的一项创新性技术，能够补充、替代丢失或受损的神经元，为中枢神经系统再生修复提供了一种潜在的有效策略。在细胞内高表达转录因子是诱导神经元重编程一种常用的重要手段，但其重编程... 详细信息

神经元重编程是将非神经元成体细胞转分化为神经元的一项创新性技术，能够补充、替代丢失或受损的神经元，为中枢神经系统再生修复提供了一种潜在的有效策略。在细胞内高表达转录因子是诱导神经元重编程一种常用的重要手段，但其重编程效率比较低，且导入外源基因可能引起宿主基因组不稳定或诱发基因突变，从而限制了它们未来的临床转化应用。相对于转录因子，小分子化合物在神经元重编程领域具有得天独厚的优势，能够克服传统转录因子诱导神经元重编程的诸多局限性，具有更好的应用前景。本文就近年来小分子化合物介导的神经元重编程的相关研究进展及其在中枢神经系统再生修复中的应用进行简要综述。

关键词：小分子化合物神经元重编程中枢神经系统神经再生修复

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基于SARIMA、LSTM的西藏某医院肺结核病例数据的预测模型建立与初步应用

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陆军军医大学学报 2025年

作者：肖国栋陈兴书罗勇军陆军军医大学陆军卫勤训练基地军事医学地理学教研室陆军军医大学基础医学院学员三大队

目的基于西藏某医院肺结核病人确诊时间序列，采用季节自回归差分移动平均模型(SARIMA)、长短期记忆神经网络(LSTM)以及二者组合模型中的最适模型对西藏某医院肺结核确诊情况进行预测，验证模型的准确性，为结核病的防控措施制定提供... 详细信息

目的基于西藏某医院肺结核病人确诊时间序列，采用季节自回归差分移动平均模型(SARIMA)、长短期记忆神经网络(LSTM)以及二者组合模型中的最适模型对西藏某医院肺结核确诊情况进行预测，验证模型的准确性，为结核病的防控措施制定提供参考依据。方法以西藏某医院2004—2018年月病例数据为建模数据，构建SARIMA模型、LSTM模型以及SARIMA-LSTM组合模型。比较3种模型对数据的验证结果与实际值的误差指标，选择最适模型进行预测。结果通过Python软件建立的SARIMA模型最终评价指标为MSE=411.50，RMSE=20.29，MAE=17.41，MAPE=0.42；LSTM模型最终评价指标为MSE：313.49，RMSE：17.71，MAE：15.21，MAPE：0.37，LSTM模型评价指标均小于SARIMA模型，说明LSTM模型预测效果优于SARIMA模型。为研究组合模型的预测效果，构建SARIMA-LSTM模型，利用LSTM学习SARIMA模型的前期生成数据与实际值的误差，生成预测误差序列，从而得到组合模型验证结果。最终组合模型评价指标为MSE：461.50，MAE：18.42，RMSE：21.48，MAPE：0.45，对比发现LSTM模型对该院肺结核数据的验证效果最佳。最终，采用LSTM模型对该院病例数据进行预测，预测结果显示该医院长期肺结核确诊情况均值趋于62例，具有潜在的应用价值。

关键词：肺结核自回归移动平均模型长短期记忆神经网络模型组合模型

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我国老年长期照护的现状及未来发展的思考

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海军军医大学学报 2024年第3期45卷 255-259页

作者：周璇周兰姝海军军医大学(第二军医大学)护理系上海200433

我国人口老龄化形势日益严峻,老年长期照护已然成为我国重要的公共卫生问题。笔者通过回顾分析,从照护需求、照护体系、照护模式、照护人力等方面梳理了我国老年长期照护的现实问题,并提出展望,明确老年长期照护未来发展的机遇,以期为... 详细信息

我国人口老龄化形势日益严峻,老年长期照护已然成为我国重要的公共卫生问题。笔者通过回顾分析,从照护需求、照护体系、照护模式、照护人力等方面梳理了我国老年长期照护的现实问题,并提出展望,明确老年长期照护未来发展的机遇,以期为老年护理学科的发展提供参考。

关键词：老年人长期照护老年护理多学科合作数字健康

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丝氨酸蛋白酶抑制剂E2通过调节上皮间质转化促进黑色素瘤细胞增殖和侵袭

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解剖学杂志 2025年第2期48卷 143-148,181页

作者：陈珂欣汪子愉吴敏靓王宇翀熊俊薛春雨海军军医大学第一附属医院整形外科上海200433 海军军医大学影像医学系病理学教研室上海200433

目的:探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库分析和临床样本的免疫组织化学染色分析SERPINE2在黑痣、黑色素瘤原发灶和转移灶中的表达情况。敲低黑色素瘤A375细胞中SERPINE2... 详细信息

目的:探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库分析和临床样本的免疫组织化学染色分析SERPINE2在黑痣、黑色素瘤原发灶和转移灶中的表达情况。敲低黑色素瘤A375细胞中SERPINE2的表达,RT-qPCR和免疫印迹检测SERPINE2 mRNA和蛋白表达,CCK8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,免疫印迹检测E-钙黏蛋白(CDH1)、N-钙黏蛋白(CDH2)、SNAI1、基质金属蛋白酶3(MMP3)和基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达。结果:TCGA数据库分析显示SERPINE2在黑色素瘤中的表达高于正常组织,免疫组织化学染色显示SERPINE2在黑色素瘤原发灶和转移灶中高表达,敲低SERPINE2可抑制A375细胞的增殖和侵袭,影响上皮间质转化通路分子的表达,其中CDH1的蛋白表达明显增加,CDH2、SNAI1、MMP3和MMP9的蛋白表达明显减少。结论:SERPINE2能促进黑色素瘤细胞增殖和侵袭,其机制涉及调节上皮间质转化相关分子的表达,靶向SERPINE2可作为抑制黑色素瘤进展的一种有前途的策略。

关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂E2 黑色素瘤增殖侵袭上皮间质转化

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低氧联合辐照对小鼠骨髓造血细胞的影响作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第7期47卷 681-690页

作者：杨欣海陈芳全勇胡梦佳芦玉凯陈乃成许杨王崧王军平陆军军医大学(第三军医大学):军事预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=4... 详细信息

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=43),7 Gy单纯辐照组(7 Gy组,n=12)、7 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+7 Gy组,n=12)、7 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+7 Gy+Hy组,n=12)、6 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+6 Gy+Hy,n=10);Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组于常压低氧舱内进行7 d预处理(氧浓度12%),其余组小鼠在正常氧环境中饲养;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照6 Gy;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照7 Gy;Control组、6 Gy组、7 Gy组小鼠全程正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+6 Gy组小鼠辐照损伤后继续低氧饲养24 h后恢复正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠辐照后持续低氧环境饲养。Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠制备骨髓细胞悬液,采用全自动细胞计数仪计数小鼠骨髓有核细胞数量,采用HE染色观察小鼠骨髓腔病理形态改变,采用流式细胞术检测造血干/祖细胞(Lin^(-)Sca1^(+)c-Kit^(+),LSK)、髓系祖细胞(myeloid progenitor,MP)以及成熟T/B髓系细胞数量;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠从低氧预处理后开始持续监测30 d的生存率;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠采取尾血,使用全自动血液分析仪检测红细胞(red blood cell,RBC)、白细胞(white blood cell,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(platelet,PLT)等的动态变化;Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠于辐照后17 d处死后获取骨髓细胞悬液并进行单细胞测序及分析。结果①与Control组相比,6 Gy组小鼠辐照后全骨髓有核细胞数量显著减少(P<0.01),HE染色显示骨髓血窦扩张明显、红细胞溢出;与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组小鼠骨髓腔内细胞密度增加,有核细胞数减少程度明显减轻(P<0.01);②流式细胞术检测结果显示与Control组比较,6 Gy组骨髓LSK、MP与成熟T/B/髓系细胞数量均显著降低(P<0.05);与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组单纯辐照造成的LSK、MP的数量减少能得到显著抑制(P<0.01);③与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy组经过低氧辐照后24 h复常氧治疗显著提高了小鼠生存率(P<0.01);与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠经持续低氧治疗未能显著改善小鼠生存率;Hy-7 d+7 Gy组与Hy-7 d+7 Gy+Hy组之间的生存率差异虽未达到统计学显著性(P=0.12),但在整个观察周期内Hy-7 d+7 Gy组始终表现出存活数量优势;④血常规检测结果显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠较6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组WBC水平得到更快的恢复(P<0.05);经低氧预处理后,Hy-7 d+6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组辐照前RBC及HGB水平更高;而相比于6 Gy组及Hy-7 d+6 Gy+Hy组,Hy-7 d+6 Gy组PLT恢复更显著且迅速(P<0.05);⑤通过单细胞转录组数据分析进行细胞亚群比例推测,相比于6 Gy组Hy-7 d+6 Gy组小鼠长期造血干细胞(long-term hematopoietic stem cell,LT-HSC)、短期造血干细胞(short-term hematopoietic stem cell,ST-HSC)数量减少得到抑制,与流式细胞术结果一致;拟时序分析显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠数据与Control组相似,表现出分化程度低且自我更新能力强的LSK较多;差异基因分析及KEGG通路富集表明,6 Gy组氧化磷酸化通路活跃度显著高于其他组,而Hy-7 d+6 Gy组则富集于染色质重塑和mRNA监视等通路。结论低氧预处理可减轻小鼠骨髓造血细胞放射损伤,辐照后恢复常氧治疗有助

关键词：低氧预处理骨髓造血干/祖细胞急性放射损伤造血功能单细胞转录组技术

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寄生虫感染所致肝纤维化的疾病负担及病理特征

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中国热带医学 2023年第10期23卷 1058-1062,1098页

作者：何兴海军军医大学热带病学教研室上海200433

血吸虫、肝吸虫、包虫等寄生虫以肝脏为主要寄生或致病脏器,肝纤维化是这些寄生虫感染后宿主的主要病理特征以及宿主致病致死的主要原因。寄生虫感染所致肝纤维化在全球仍有较重的疾病负担,并由于其独特的疾病特征使得寄生虫感染所致肝... 详细信息

血吸虫、肝吸虫、包虫等寄生虫以肝脏为主要寄生或致病脏器,肝纤维化是这些寄生虫感染后宿主的主要病理特征以及宿主致病致死的主要原因。寄生虫感染所致肝纤维化在全球仍有较重的疾病负担,并由于其独特的疾病特征使得寄生虫感染所致肝纤维化动物模型在肝纤维化研究中具有独特地位。寄生虫感染所致肝纤维化区别于其他类型肝纤维化的最本质特征就是寄生虫分泌的各类虫源分子是肝纤维化的始动因素,虫源致病分子包括蛋白、核酸、脂质、代谢小分子等类型。虫源致病分子在宿主肝脏内诱导形成2型免疫或炎症微环境,虽然对寄生虫感染后肝脏内2型免疫的启动、维持及消退过程进行了深入研究,但诸多核心机制仍不明确。慢性炎症最终激活星状细胞等类型细胞转分化为肌成纤维细胞(myofibroblast,MF)并促使肝纤维化的形成;清除寄生虫后MF可能发生逆分化、凋亡、衰老等转归过程,肝纤维有可能发生逆转。深入研究MF的激活及转归过程是有效预防和治疗肝纤维化的基础。本文综述了寄生虫感染所致宿主肝纤维化的疾病负担及病理特征。

关键词：寄生虫肝纤维化致病机制

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经典型及劳力型热射病大鼠心肌损伤对比研究

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陆军军医大学学报 2023年第17期45卷 1779-1789页

作者：张伯翼罗雪罗珍王泽泽谭雨龙何根林李萍申婷婷刘晓倩杨学森陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)极端环境医学教育部重点实验室重庆400038

目的比较劳力型热射病(exertional heat stroke, EHS)与经典型热射病(classical heat stroke, CHS)大鼠动物模型心肌损伤的差异,为热射病心肌损伤的临床治疗提供可能的实验室依据。方法 80只SD大鼠按随机数表法随机分为对照组(n=10)、... 详细信息

目的比较劳力型热射病(exertional heat stroke, EHS)与经典型热射病(classical heat stroke, CHS)大鼠动物模型心肌损伤的差异,为热射病心肌损伤的临床治疗提供可能的实验室依据。方法 80只SD大鼠按随机数表法随机分为对照组(n=10)、运动对照组(EXC,n=10)、经典热射病组(CHS,n=30)和劳力型热射病组(EHS,n=30)。对照组和EXC组大鼠置于温度(25±0.5)℃,相对湿度(50±5)%环境中;EHS组和CHS组大鼠置于模拟热气候动物舱内,舱内环境温度(39±0.5)℃,相对湿度(50±5)%;EHS组和EXC组大鼠给予跑台运动处理,跑步速度设置为12 m/min,坡度为0°,每运动8 min休息2 min,以监测大鼠直肠温度等。核心体温达到42.3℃或出现瘫倒(掐尾反射消失)作为热射病的开始,之后将大鼠移至常温环境复温。采用超声心动图仪检测大鼠心功能指标,生化法检测血清心肌酶(AST、LDH、CK-MB、CK)水平,苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠心肌组织病理,TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡情况。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织中醌氧化还原酶1(Nrf2)、切割半胱天冬氨酸蛋白酶(Cl-Caspase-3)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)、促凋亡蛋白(Bax)、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达水平。结果与CHS组大鼠比较,EHS组大鼠热射病潜伏期显著缩短(P<0.01),且诱发热射病所需的热负荷显著减少(P<0.01)。CHS组大鼠的脱水率显著大于EHS组(P<0.01),但EHS组大鼠的脱水速率显著高于CHS组(P<0.01)。两组大鼠热射病发生时的直肠温度无显著差异(P>0.05)。超声心动图提示,EHS组大鼠的左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)显著低于CHS组大鼠(P<0.05)。EHS组大鼠的AST和LDH水平显著高于CHS组大鼠(P<0.01)。两组大鼠均出现急性心肌损伤的病理改变,表现为心肌细胞水肿、肌纤维排列混乱、断裂,可见炎性浸润,且EHS组心肌损伤病理评分高于CHS组(P<0.05),EHS组心肌细胞凋亡比率亦显著高于CHS组(P<0.05)。氧化应激相关信号通路中,EHS组大鼠心肌组织的蛋白质表达水平显著高于CHS组。结论高温同时复合运动有更高的热射病易感性,EHS介导的心功能异常及心肌细胞凋亡较CHS更重,且可能与氧化应激相关信号通路活化相关。

关键词：经典型热射病劳力型热射病心肌损伤超声心动图凋亡

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血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒抑制机体辐射感染

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陆军军医大学学报 2025年第6期47卷 602-612页

作者：熊太农李陈文娅陈银韩松伶王成王军平陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系复合伤研究所重庆陆军军医大学(第三军医大学)创伤与化学中毒全国重点实验室重庆

目的通过制备能够靶向白细胞的血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(platelet membrane modified catalase/silica nanoparticles,PCNP),为辐射感染并发症的防治提供有效策略。方法利用血小板膜、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及二氧... 详细信息

目的通过制备能够靶向白细胞的血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(platelet membrane modified catalase/silica nanoparticles,PCNP),为辐射感染并发症的防治提供有效策略。方法利用血小板膜、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及二氧化硅制备PCNP以及过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(catalase/silica nanoparticles,CNP),并通过细胞存活实验、溶血实验以及小鼠尾静脉给药后急性毒性实验初步评估PCNP生物安全性;培养基、FITC标记的PCNP(FITC^(+)PCNP)及FITC标记的CNP(FITC^(+)CNP)分别与人外周血B淋巴细胞(AHH-1)和小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)共孵育,分为对照组、FITC^(+)PCNP组及FITC^(+)CNP组,利用激光共聚焦观察细胞内荧光强度来评价PCNP的白细胞靶向功能;将AHH-1分为对照组、辐照组、血小板膜组、CNP(100μg/mL)组和PCNP(100μg/mL)组,与培养基、培养基、血小板膜混悬液、CNP或PCNP溶液共孵育后进行6 Gy Co~(60)γ射线辐照,通过检测羟自由基等活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平及细胞凋亡情况评估纳米粒体外减轻白细胞放射损伤的作用;20只C57BL/6雄性小鼠(体质量18~20 g)简单随机抽样分为(n=10):辐照组与10mg/kg PCNP组,小鼠尾静脉注射生理盐水或PCNP后2 h时进行5 Gy Co~(60)γ射线全身辐照,辐照后2 h时再腹腔注射多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant Acinetobacter baumannii MDR-AB),通过检测主要脏器细菌载量评估纳米药物抑制辐照后感染效应。结果PCNP水合粒径为91.3 nm,其在低于400μg/mL的浓度下未表现出明显的细胞毒性及溶血毒性;小鼠尾静脉注射PCNP(20mg/kg)后体质量正常增长,心、肝、脾、肺、肾等主要脏器组织未出现病理改变;在AHH-1和RAW264.7细胞中,与FITC^(+)CNP组相比,PCNP的靶向性都具有显著优势[(15.45±3.48)%vs(9.33±2.03)%,P<0.01;(11.25±2.08)%vs(7.06±0.71)%,P<0.001];细胞防护能力检测实验中,与辐照组相比,PCNP能有效降低AHH-1细胞ROS水平[(22.73±3.71)%vs(60.90±9.08)%,P<0.001]及凋亡率[(9.84±0.92)%vs(38.96±3.62)%,P<0.001];小鼠辐照后细菌定植实验表明PCNP干预的小鼠脾脏MDR-AB定植数量显著少于辐照组[(17.50±1.38)×10~4 vs(13.20±2.29)×10~6 CFU/g,P<0.001]。结论PCNP能有效抑制机体辐射感染并发症,其对白细胞的直接保护作用可能是抗感染作用的主要机制。

关键词：辐射感染过氧化氢酶白细胞靶向血小板膜修饰纳米粒

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