检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 509-513页

作者：龚小卫姜勇第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室广州510515

信号蛋白的亚细胞定位和激活后移位已成为细胞信号转导研究中的重要内容.MAPK信号通路是真核细胞中的重要信号转导系统.MAPK在细胞中有着相对固定的定位,在适宜的刺激作用下会移位入核并产生相应的生理效应.目前认为,MAPK的磷酸化状态... 详细信息

信号蛋白的亚细胞定位和激活后移位已成为细胞信号转导研究中的重要内容.MAPK信号通路是真核细胞中的重要信号转导系统.MAPK在细胞中有着相对固定的定位,在适宜的刺激作用下会移位入核并产生相应的生理效应.目前认为,MAPK的磷酸化状态及与其他蛋白质,如上游激酶、磷酸酶和下游底物之间的相互作用,可能在其特异性定位与激活后移位中起作用.MAPK的定位与移位机制的阐明,有助于进一步揭示MAPK的生理功能.

关键词：丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 亚细胞定位移位磷酸化蛋白质-蛋白质相互作用

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钙依赖性粘附素及其信号转导

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生理科学进展 2000年第4期31卷 353-356页

作者：闫文生姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

钙依赖性粘附素介导的粘附连接在决定和维持发育及成年机体的组织结构中起着重要作用。钙依赖性粘附素结合的特异性取决于其细胞外段 ,但完整的生理性粘附还需其胞质尾段与胞质相关蛋白以及细胞骨架的相互作用和联系。粘附连接的调节涉... 详细信息

钙依赖性粘附素介导的粘附连接在决定和维持发育及成年机体的组织结构中起着重要作用。钙依赖性粘附素结合的特异性取决于其细胞外段 ,但完整的生理性粘附还需其胞质尾段与胞质相关蛋白以及细胞骨架的相互作用和联系。粘附连接的调节涉及到钙依赖性粘附素基因表达、聚集和磷酸化以及缝隙连接通讯等 ;此外 ,钙依赖性粘附素连环素复合体还参与信号转导过程。

关键词：钙依赖性粘附素粘附连接信号转导

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报告基因技术的理论基础及其应用

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生理科学进展 2002年第4期33卷 361-363页

作者：刘志锋姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

报告基因技术广泛地应用于监测细胞的信号转导和基因表达,通过把转录控制元件剪接到报告基因,可以直观地"报道"细胞内与基因表达有关的信号级联.这种检测具有敏感性高、方便、可靠而且适用于大规模检测等优点.随着报告基因技... 详细信息

报告基因技术广泛地应用于监测细胞的信号转导和基因表达,通过把转录控制元件剪接到报告基因,可以直观地"报道"细胞内与基因表达有关的信号级联.这种检测具有敏感性高、方便、可靠而且适用于大规模检测等优点.随着报告基因技术及其检测方法的不断改进,荧光素酶、绿色荧光蛋白以及新近克隆出的红色荧光蛋白作为无害性的检测工具,将在检测活体组织和细胞基因表达方面得到越来越广泛的应用.此外,在研究疾病发生的分子机制,基因治疗和药物开发方面,报告基因技术也将发挥出重要作用.本文对报告基因技术的基础理论、常用报告基因的种类和特点,以及其目前的主要应用作了概括性介绍.

关键词：报告基因荧光蛋白信号检测基因表达

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丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)生物学功能的结构基础

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 5-11页

作者：龚小卫姜勇第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室广州510515

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,能对广泛的细胞外刺激发生反应.蛋白激酶的空间构象是其功能的重要决定因素.对MAPK蛋白结构的研究表明, MAPK的结构与功能之间具有密切的关系.尽管MAPK各亚族的结构非常相似... 详细信息

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,能对广泛的细胞外刺激发生反应.蛋白激酶的空间构象是其功能的重要决定因素.对MAPK蛋白结构的研究表明, MAPK的结构与功能之间具有密切的关系.尽管MAPK各亚族的结构非常相似,但也存在着一些差异,这些差异是不同亚族对不同的细胞外刺激产生特异性反应的结构基础.某些关键性结构,例如Loop 12,在MAPK对上游激酶的作用、下游底物的选择以及亚细胞定位中都具有重要作用.进一步深入研究MAPK的空间结构,探讨MAPK的生物学功能与其空间构象之间的关系,对于开发新的MAPK通路抑制剂用于治疗某些严重疾病有着重要的临床意义.

关键词：丝裂原活化蛋白激酶,Loop 12,结构-功能关系

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TLR4全长及其截断体重组腺病毒的制备和功能鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第3期20卷 352-357页

作者：宋革孙学刚秦清和邓鹏刘靖华姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

制备脂多糖(LPS)Toll样受体4(TLR4)全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(ATLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒并鉴定其功能.用PCR方法扩增TLR4及△TLR4基因片段,酶切后亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成带有目的基因的穿梭载体pAdTrack-TLR4和pAdTr... 详细信息

制备脂多糖(LPS)Toll样受体4(TLR4)全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(ATLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒并鉴定其功能.用PCR方法扩增TLR4及△TLR4基因片段,酶切后亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成带有目的基因的穿梭载体pAdTrack-TLR4和pAdTrack-△TLR4.用BJ5183细菌同源重组法将目的基因重组于腺病毒骨架载体中;将重组腺病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后,用脂质体法转染HEK-293细胞进行腺病毒的包装扩增.将重组腺病毒感染CHO-K1细胞,采用荧光毒酶报告基因方法检测其对LPS诱导NF-κB激活的影响.酶切及测序表明,TLR4全长及其截断体△TLR4的重组腺病毒载体构建正确.荧光素酶报告基因检测结果表明,TLR4全长及其截断体的重组腺病毒感染细胞对LPS诱导的反应具有不同的影响,Ad-△TLR4明显抑制了LPS引起的NF-κB激活(P＜0.05),Ad-TLR4则使LPS引起的NF-κB活性增强(P＜0.05).LPS对细胞的激活作用依赖于TLR4的结构完整性.

关键词：腺病毒 TLR4基因报告基因 NF-κB

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肿瘤坏死因子α通过丝裂原活化蛋白激酶激酶6诱导LA795肺腺癌细胞凋亡

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中华结核和呼吸杂志 2003年第2期26卷 88-92页

作者：刘爱华邓鹏姜勇第一军医大学南方医院呼吸科广州510515 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室

目的　为了研究肿瘤坏死因子α(TNF α)诱导肺癌细胞凋亡的分子机制 ,寻找肺癌基因治疗的新方法。方法　建立TNF α诱导LA795肺腺癌细胞凋亡的细胞模型 ;使用人胚肾 2 93包装细胞制备丝裂原活化蛋白激酶激酶 6 (mitogen activatedprotei... 详细信息

目的　为了研究肿瘤坏死因子α(TNF α)诱导肺癌细胞凋亡的分子机制 ,寻找肺癌基因治疗的新方法。方法　建立TNF α诱导LA795肺腺癌细胞凋亡的细胞模型 ;使用人胚肾 2 93包装细胞制备丝裂原活化蛋白激酶激酶 6 (mitogen activatedproteinkinasekinase 6 ,MKK6 )及其结构活性和无活性突变体的重组腺病毒 ;使用激酶活性测定法检测细胞内MKK6的激酶活性。结果　TNF α刺激可明显诱导LA795肺腺癌细胞MKK6激活 ;用TNF α刺激肺腺癌细胞可明显诱导细胞凋亡 ;MKK6结构活性突变体也可明显诱导LA795细胞凋亡 ;而MKK6无活性突变体可明显抑制TNF α诱导的LA795细胞凋亡。结论　TNF α诱导LA795肺腺癌细胞凋亡是通过MKK6发挥作用的。

关键词：肿瘤坏死因子α 丝裂原活化蛋白激酶肺腺癌细胞凋亡

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Retro-Tet:一种基于逆转录病毒的诱导性基因表达系统

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中国生物化学与分子生物学报 2001年第4期17卷 420-424页

作者：龚小卫姜勇第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室广州510515

Retro-Tet基因表达系统是一种新型的高效、稳定、无毒、具有严密开/关功能的可诱导性真核细胞基因表达系统.该系统兼备了逆转录病毒基因表达系统和Tet-off/Tet-on基因表达系统的优点,在稳定表达细胞系的筛选、基因的表达与调控及基因功... 详细信息

Retro-Tet基因表达系统是一种新型的高效、稳定、无毒、具有严密开/关功能的可诱导性真核细胞基因表达系统.该系统兼备了逆转录病毒基因表达系统和Tet-off/Tet-on基因表达系统的优点,在稳定表达细胞系的筛选、基因的表达与调控及基因功能研究等方面得到了成功的应用,同时也为基因治疗提供了一种理想的基因载体系统.

关键词：诱导性基因表达系统基因调控基因治疗

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云芝多糖对脑、肝组织的抗氧化作用研究

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中国药理学通报 2001年第6期17卷 628-631页

作者：莫永炎陈瑗周玫姜勇第一军医大学病理生理学教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广州510515

目的　探讨中药云芝多糖对脑、肝组织抗氧化作用的影响及机制。方法　以SD大鼠和昆明小鼠为动物模型 ,采用Fe H2 O2 诱导大脑皮层组织和肝组织匀浆的脂氢过氧化反应及黄嘌呤氧化酶体系释放自由基超氧阴离子 (O·2 ) ,以改良的邻苯... 详细信息

目的　探讨中药云芝多糖对脑、肝组织抗氧化作用的影响及机制。方法　以SD大鼠和昆明小鼠为动物模型 ,采用Fe H2 O2 诱导大脑皮层组织和肝组织匀浆的脂氢过氧化反应及黄嘌呤氧化酶体系释放自由基超氧阴离子 (O·2 ) ,以改良的邻苯三酚自氧化法、DNTB直接法测定脑组织抗氧化酶活性及原位杂交法检测脑组织硒谷胱甘肽过氧化物酶 (SeG Px)mRNA表达。结果　云芝多糖有提高脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)、SeGPx和非硒谷胱甘肽过氧化物酶 (non SeGPx)抗氧化酶活性 ,增加SeGPxmRNA表达 ,降低脑、肝组织Fe H2 O2 引发的脂氢过氧化反应和黄嘌呤氧化酶体系产生的O·2 。结论　云芝多糖可提高鼠大脑皮层、肝组织的抗氧化作用 ,对开发应用多糖类药物防治神经系统疾病。

关键词：云芝多糖大脑皮层抗氧化作用肝组织药物

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脑星形胶质细胞生物学功能研究进展

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生理科学进展 2002年第1期33卷 71-73页

作者：莫永炎姜勇陈瑗第一军医大学病理生理学教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广州510515

脑星形胶质细胞是中枢神经系统 (CNS)内在数目占绝对优势的一类大胶质细胞 ,被认为在神经元的整个发育过程中起重要作用。本文主要就参与星形胶质细胞调节神经元活动的主要功能分子 ,星形胶质细胞在中枢神经系统的生物学功能。

关键词：星形胶质细胞神经元中枢神经系统生物学功能脑

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带Tat标记质粒载体的构建及其转导融合蛋白进入细胞的研究

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第3期19卷 354-358页

作者：孙学刚宋革刘靖华李红乐邢飞跃张丽华秦清和姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

采用点突变技术构建了带6×His、Tat和Flag多个标记的pET-HTF的质粒载体,利用基因重组技术构建pET-HTF-EGFP融合蛋白载体.酶切和DNA测序证明,所构建的pET-HTF和pET-HTF-EGFP载体正确.BL21(DE3)表达融合蛋白,用Ni2+分离柱纯化His-Tat... 详细信息

采用点突变技术构建了带6×His、Tat和Flag多个标记的pET-HTF的质粒载体,利用基因重组技术构建pET-HTF-EGFP融合蛋白载体.酶切和DNA测序证明,所构建的pET-HTF和pET-HTF-EGFP载体正确.BL21(DE3)表达融合蛋白,用Ni2+分离柱纯化His-Tat-Flag-EGFP蛋白,并加入培养的NIH3T3细胞.荧光显微镜观察显示,His-Tat-Flag-EGFP融合蛋白进入细胞.带His、Tat和Flag标记的质粒载体pET-14b-HTF表达的融合蛋白能够进入细胞,该载体为进行蛋白质功能研究和基因治疗研究提供了一个重要工具.

关键词： Tat 蛋白转导增强型绿色荧光蛋白

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