检索结果-内蒙古大学图书馆

生理科学进展 2003年第1期34卷 71-73页

作者：赵善超侯凡凡姜勇第一军医大学南方医院肾内科和中国人民解放军肾脏病研究所第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

晚期糖基化终产物受体 (RAGE)是一种膜蛋白 ,属于免疫球蛋白家族 ,由 4 0 0多个氨基酸组成 ,分子量为 35kD ,分胞外段、跨膜段和胞内段 ,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达。RAGE作为信... 详细信息

晚期糖基化终产物受体 (RAGE)是一种膜蛋白 ,属于免疫球蛋白家族 ,由 4 0 0多个氨基酸组成 ,分子量为 35kD ,分胞外段、跨膜段和胞内段 ,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达。RAGE作为信号转导受体介导晚期糖基化终产物 (AGE)和其配体在细胞表面结合 ,激活细胞内多种信号转导机制 ,在糖尿病慢性并发症、透析相关性淀粉样变 (DRA)、阿尔采末病 (AD)、动脉粥样硬化等疾病发生中起重要作用。对RAGE结构和功能的认识可能为这些疾病的防治提供新的靶位。

关键词：晚期糖基化终产物受体结构-功能研究信号转导

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Toll样受体4与心血管疾病

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国外医学（生理病理科学与临床分册） 2003年第6期23卷 627-629页

作者：黄浩刘靖华姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

Toll样受体是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体 ,在天然免疫反应中具有重要的作用。TLR4是介导LPS信号跨膜转导的主要受体 ,对于革兰氏阴性菌的感染性炎症至关重要。由于心血管疾病的发生和发展与感染密切相关 ,近来 ,有关TLR4及... 详细信息

Toll样受体是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体 ,在天然免疫反应中具有重要的作用。TLR4是介导LPS信号跨膜转导的主要受体 ,对于革兰氏阴性菌的感染性炎症至关重要。由于心血管疾病的发生和发展与感染密切相关 ,近来 ,有关TLR4及其介导的信号转导在心血管疾病发病中的作用受到人们的关注。深入研究TLR4在心血管疾病中作用 ,不仅能极大地扩展我们对病原体与宿主免疫反应之间相互作用复杂性的认识 ,更能为进一步揭示心血管疾病的发病机制 ,寻求有效的防治措施提供重要的理论基础。

关键词： TLR4 动脉粥样硬化病毒性心肌炎心力衰竭

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人His-AWP1融合蛋白表达载体的构建及其在原核生物的表达

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中华神经医学杂志 2003年第2期2卷 123-125,144页

作者：莫永炎曹永宽刘亚伟龚小卫姜勇第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室广东广州510515

目的获取人His-AWP1融合蛋白,为下阶段深入研究AWP1的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础方法应用逆转录聚合酶链反府(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞系中克隆AWP1 cDNA,并将其重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒DET-14... 详细信息

目的获取人His-AWP1融合蛋白,为下阶段深入研究AWP1的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础方法应用逆转录聚合酶链反府(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞系中克隆AWP1 cDNA,并将其重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒DET-14b中。经酶节、序列鉴定,选择正确重组克隆,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA His柱纯化和SDS-PAGE分离蛋门。结果克隆到一个627 bp的AWP1 cDNA片段.重组质粒目的DNA测序正确.纯化出了一个分子量约为38 kD的融合蛋白。结论用基因工程方法在原核细胞表达并成功纯化出His-AWP融合蛋白。

关键词： ECV304细胞 AWP1 His-融合蛋白原核生物表达

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用T7噬菌体筛选系统筛选TLR4胞浆内段的结合蛋白

用T7噬菌体筛选系统筛选TLR4胞浆内段的结合蛋白

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2003年中国博士后生命科学学术研讨会暨院士论坛

作者：刘靖华赵克森姜勇李志杰刘亚伟赵善超黄浩龚小卫秦清和邓鹏孙学刚第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州 510515

为了研究hTLR4的功能及筛选与其相互作用的蛋白,以hTLR4胞浆内段为靶蛋白,通过结合→洗脱→扩增3个步骤,用T7噬茵体展示筛选系统筛选了人肺cDNA文库,结果获得了9个与靶蛋白hTLR4C有结合关系的序列,其中6个克隆序列编码的蛋白为已知蛋白... 详细信息

为了研究hTLR4的功能及筛选与其相互作用的蛋白,以hTLR4胞浆内段为靶蛋白,通过结合→洗脱→扩增3个步骤,用T7噬茵体展示筛选系统筛选了人肺cDNA文库,结果获得了9个与靶蛋白hTLR4C有结合关系的序列,其中6个克隆序列编码的蛋白为已知蛋白或与已知蛋白序列高度同源。在已知蛋白中,有与细胞外抗氧化还原反应、炎症反应、抗肿瘤、重金属解毒等密切相关的硒蛋白;有参与各种膜性细胞器、蛋白质和mRNA转运的细胞内马达(motor)蛋白KIF4;有与RNA的加工、代谢,包括剪接、转运、蛋白质翻译、核转运和RNA降解等有关的DEAD-box蛋白。这些发现为我们下一步研究TLR4介导的信号转导及其功能提供了新的切入点。

关键词： Toll样受体4 蛋白质相互作用噬菌体结合蛋白

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用T7噬菌体展示筛选系统筛选与靶蛋白相结合的蛋白

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中国病理生理杂志 2003年第12期19卷 1666-1666页

作者：刘靖华李志杰刘亚伟黄浩邓鹏秦清和赵善超赵克森姜勇第一军医大学病理生理学教研室第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

目的:建立有效的T7噬菌体筛选系统,筛选与靶蛋白(信号分子)有结合关系的多肽或蛋白.方法:以p38MAPK、PRAK为靶蛋白,分别用不同的介质(ELISA平板和Ni-NTA亲和树脂),通过结合-洗脱-扩增3个步骤,筛选噬菌体cDNA文库(T7人肝和/或人肺cDNA文... 详细信息

目的:建立有效的T7噬菌体筛选系统,筛选与靶蛋白(信号分子)有结合关系的多肽或蛋白.方法:以p38MAPK、PRAK为靶蛋白,分别用不同的介质(ELISA平板和Ni-NTA亲和树脂),通过结合-洗脱-扩增3个步骤,筛选噬菌体cDNA文库(T7人肝和/或人肺cDNA文库).结果:选择第四轮筛选后的洗脱噬菌体单个噬斑克隆,经EDTA处理后利用特异性PCR引物扩增插入片断,回收PCR产物并进行顺序,将获得的序列在美国国立卫生院(NIH)的GenBank数据库中进行同源序列比较,获得若干编码蛋白的序列.在这些蛋白中有激酶、转录因子、细胞骨架相关蛋白和离子通道相关蛋白等.结论:T7噬菌体展示筛选系统是用来筛选新的结合蛋白一个非常简单、快速和有效的工具,筛选的p38和PRAK结合蛋白对进一步研究MAPK信号转导通路的复杂功能和调节机制提供了很好的机会.

关键词： T7噬菌体示筛选系统筛选靶蛋白

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报告基因技术的理论基础及其应用

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生理科学进展 2002年第4期33卷 361-363页

作者：刘志锋姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广州510515

报告基因技术广泛地应用于监测细胞的信号转导和基因表达,通过把转录控制元件剪接到报告基因,可以直观地"报道"细胞内与基因表达有关的信号级联.这种检测具有敏感性高、方便、可靠而且适用于大规模检测等优点.随着报告基因技... 详细信息

报告基因技术广泛地应用于监测细胞的信号转导和基因表达,通过把转录控制元件剪接到报告基因,可以直观地"报道"细胞内与基因表达有关的信号级联.这种检测具有敏感性高、方便、可靠而且适用于大规模检测等优点.随着报告基因技术及其检测方法的不断改进,荧光素酶、绿色荧光蛋白以及新近克隆出的红色荧光蛋白作为无害性的检测工具,将在检测活体组织和细胞基因表达方面得到越来越广泛的应用.此外,在研究疾病发生的分子机制,基因治疗和药物开发方面,报告基因技术也将发挥出重要作用.本文对报告基因技术的基础理论、常用报告基因的种类和特点,以及其目前的主要应用作了概括性介绍.

关键词：报告基因荧光蛋白信号检测基因表达

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脑星形胶质细胞生物学功能研究进展

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生理科学进展 2002年第1期33卷 71-73页

作者：莫永炎姜勇陈瑗第一军医大学病理生理学教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广州510515

脑星形胶质细胞是中枢神经系统 (CNS)内在数目占绝对优势的一类大胶质细胞 ,被认为在神经元的整个发育过程中起重要作用。本文主要就参与星形胶质细胞调节神经元活动的主要功能分子 ,星形胶质细胞在中枢神经系统的生物学功能。

关键词：星形胶质细胞神经元中枢神经系统生物学功能脑

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p38 MAPK红色荧光蛋白融合载体的构建及表达

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第一军医大学学报 2002年第2期22卷 171-173页

作者：龚小卫秦清和王静珍姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体.方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38 MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞.在荧光显微镜下观察结果.结果重组质粒... 详细信息

目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体.方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38 MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞.在荧光显微镜下观察结果.结果重组质粒经酶切、PCR和测序证明正确无误,并在HeLa细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的红色荧光表明p38 MAPK弥散分布于细胞质中,细胞核中也有一定的分布.结论成功构建了p38 MAPK红色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究p38MAPK的细胞内定位提供了一个重要的工具.

关键词：丝裂原活化蛋白激酶红色荧光蛋白载体构建基因表达

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从全身炎症反应综合征到脓毒性休克

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中国危重病急救医学 2002年第8期14卷 500-503页

作者：郭爱华姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

脓毒症(sepsis)是由感染所致的临床综合征,表现为发热或低热、白细胞增多或减少、心动过速、呼吸急促等[1].由严重的细菌感染所引起的脓毒症迄今仍然是世界范围内非心脏病重症监护患者的首位死亡原因[2].据统计,在美国,每年有逾40万例... 详细信息

脓毒症(sepsis)是由感染所致的临床综合征,表现为发热或低热、白细胞增多或减少、心动过速、呼吸急促等[1].由严重的细菌感染所引起的脓毒症迄今仍然是世界范围内非心脏病重症监护患者的首位死亡原因[2].据统计,在美国,每年有逾40万例脓毒症患者,病死率可达35%以上[3].预计未来脓毒症的发生将有进一步增加的趋势.下面试就脓毒症发病机制和治疗方面取得的一些新理论和新进展进行综述.

关键词：全身炎症反应脓毒症患者重症监护患者心动过速细菌感染死亡原因非心脏病发病机制病死率白细胞治疗统计面试美国临床理论呼吸发热低热

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丝裂原活化蛋白激酶通路对脂多糖诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α基因表达的协同调节作用

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中华医学杂志 2002年第20期82卷 1410-1414页

作者：姜勇刘爱华秦清和殷志敏 510515 广州第一军医大学病理生理教研室全军休克微循环重点实验室南方医院呼吸内科南京师范大学生命科学学院

目的探讨脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的协同调节作用及其分子机制.方法用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264.7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合... 详细信息

目的探讨脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的协同调节作用及其分子机制.方法用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264.7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究LPS诱导的TNF-α基因转录的分子机制.结果 LPS刺激RAW264.7细胞可引起细胞外信号调节激酶1(ERK1)、c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)和p38 MAPK的一过性激活;用MAPK上游激酶的活性突变体分别转染RAW264.7均可不同程度地诱导TNF-α启动子转录活性;而且,这些MAPK通路激活诱导的TNF-α启动子转录活性表现出明显的协同效应;三种MAPK的无活性突变体均显示出对LPS刺激引起的TNF-α启动子转录激活的抑制效应;RT-PCR的结果证实,ERK、JNK和p38 MAPK的特异性抑制剂对TNF-α mRNA表达具有不同程度的抑制作用.结论 LPS刺激引起的TNF-α启动子转录活性增加,可能涉及了ERK、p38和JNK三条通路的激活;这些通路通过协同效应共同发挥对TNF-α基因表达的调控.

关键词：蛋白激酶类脂多糖类肿瘤坏死因子基因表达调控

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