检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2002年第11期18卷 1451-1454页

作者：李红乐秦清和王静珍邓鹏李树浓姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080

目的:利用大肠杆菌细菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度重组病毒.方法:自细胞周期相关激酶真核表达载体pCR3.1-CCRK中酶切出CCRK基因,亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形... 详细信息

目的:利用大肠杆菌细菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度重组病毒.方法:自细胞周期相关激酶真核表达载体pCR3.1-CCRK中酶切出CCRK基因,亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-CCRK, 采用电穿孔或化学转化法在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd-CCRK.以pAd-CCRK为模板,经DNA测序正确后,用PacI酶切线性化pAd-CCRK,转染293细胞,包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察转染细胞EGFP的表达,采用PCR的方法对重组腺病毒进行鉴定.将重组病毒上清感染RAW细胞,荧光显微镜下观察感染细胞重组病毒的表达.结果:成功地构建了携带CCRK基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒,重组病毒能在体外高效表达.结论:应用细菌内同源重组能够快速构建腺病毒载体,可高效制备均一的高滴度重组病毒,为CCRK基因功能的研究奠定了基础.

关键词：腺病毒同源重组荧光蛋白

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MAPK在肿瘤发生中的作用及其分子机制

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现代消化及介入诊疗 2002年第4期7卷 87-91页

作者：姜勇广东广州第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室510515

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p^(38)丝裂原活化蛋白激酶活性放射自显影测定方法的建立和应用

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生物化学与生物物理进展 2001年第3期28卷 410-414页

作者：闫文生姜勇黄巧冰赵克森第一军医大学病理生理教研室及全军休克微循环重点实验室广州510515

建立 p38丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于血管内皮细胞中 p38MAPK活性动态变化的研究 .结果表明放射自显影激酶活性测定方法具有很好的量效关系、灵敏性和特异性 .在... 详细信息

建立 p38丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于血管内皮细胞中 p38MAPK活性动态变化的研究 .结果表明放射自显影激酶活性测定方法具有很好的量效关系、灵敏性和特异性 .在脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)刺激的血管内皮细胞 ,p38MAPK在LPS刺激15min后活性增高 ,30～ 6 0min达高峰 ,12 0min后活性逐渐下降 ,较好地反映了LPS刺激的内皮细胞中 p38MAPK活性的动态变化 .国内实验室完全有可能和条件 ,建立本国的放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于信号转导的研究 .

关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶放射自显影激酶活性测定技术脂多糖血管内皮细胞

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云芝多糖对脑、肝组织的抗氧化作用研究

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中国药理学通报 2001年第6期17卷 628-631页

作者：莫永炎陈瑗周玫姜勇第一军医大学病理生理学教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广州510515

目的　探讨中药云芝多糖对脑、肝组织抗氧化作用的影响及机制。方法　以SD大鼠和昆明小鼠为动物模型 ,采用Fe H2 O2 诱导大脑皮层组织和肝组织匀浆的脂氢过氧化反应及黄嘌呤氧化酶体系释放自由基超氧阴离子 (O·2 ) ,以改良的邻苯... 详细信息

目的　探讨中药云芝多糖对脑、肝组织抗氧化作用的影响及机制。方法　以SD大鼠和昆明小鼠为动物模型 ,采用Fe H2 O2 诱导大脑皮层组织和肝组织匀浆的脂氢过氧化反应及黄嘌呤氧化酶体系释放自由基超氧阴离子 (O·2 ) ,以改良的邻苯三酚自氧化法、DNTB直接法测定脑组织抗氧化酶活性及原位杂交法检测脑组织硒谷胱甘肽过氧化物酶 (SeG Px)mRNA表达。结果　云芝多糖有提高脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)、SeGPx和非硒谷胱甘肽过氧化物酶 (non SeGPx)抗氧化酶活性 ,增加SeGPxmRNA表达 ,降低脑、肝组织Fe H2 O2 引发的脂氢过氧化反应和黄嘌呤氧化酶体系产生的O·2 。结论　云芝多糖可提高鼠大脑皮层、肝组织的抗氧化作用 ,对开发应用多糖类药物防治神经系统疾病。

关键词：云芝多糖大脑皮层抗氧化作用肝组织药物

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Retro-Tet:一种基于逆转录病毒的诱导性基因表达系统

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中国生物化学与分子生物学报 2001年第4期17卷 420-424页

作者：龚小卫姜勇第一军医大学病理生理学教研室全军休克微循环重点实验室广州510515

Retro-Tet基因表达系统是一种新型的高效、稳定、无毒、具有严密开/关功能的可诱导性真核细胞基因表达系统.该系统兼备了逆转录病毒基因表达系统和Tet-off/Tet-on基因表达系统的优点,在稳定表达细胞系的筛选、基因的表达与调控及基因功... 详细信息

Retro-Tet基因表达系统是一种新型的高效、稳定、无毒、具有严密开/关功能的可诱导性真核细胞基因表达系统.该系统兼备了逆转录病毒基因表达系统和Tet-off/Tet-on基因表达系统的优点,在稳定表达细胞系的筛选、基因的表达与调控及基因功能研究等方面得到了成功的应用,同时也为基因治疗提供了一种理想的基因载体系统.

关键词：诱导性基因表达系统基因调控基因治疗

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p38 MAPK在LPS诱导内皮细胞表达ICAM-1中的作用

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中华烧伤杂志 2001年第1期17卷 32-35页

作者：闫文生姜勇黄巧冰王静珍赵克森第一军医大学病理生理学教研室(全军休克微循环重点实验室) 广州510515

目的研究p38丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号转导通路在脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达细胞间粘附分子-1（ICAM-1）中的作用。方法脐静脉内皮细胞培养后分为两组：（1）刺激组，设不同时相点分别用LPS刺激内皮细胞... 详细信息

目的研究p38丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号转导通路在脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达细胞间粘附分子-1（ICAM-1）中的作用。方法脐静脉内皮细胞培养后分为两组：（1）刺激组，设不同时相点分别用LPS刺激内皮细胞；（2）预处理组，在LPS刺激前2 h，用SB203580预处理内皮细胞。观察ICAM-1蛋白和mRNA表达的变化，检测内皮细胞p38 MAPK活性变化。结果 LPS剌激后，内皮细胞表面ICAM-1分子在8～36 h显著增加，胞浆中mRNA在2 h即有显著增加；LPS刺激HUVEC后15 min，p38 MAPK 活性即有升高，30～60 min达高峰。p38抑制剂SB203580可显著抑制LPS的诱导作用。结论 LPS 可能通过激活p38 MAPK信号转导通路，调节HUVEC的ICAM-1基因和蛋白表达。

关键词： p38MAPK LPS 内皮细胞 ICAM-1 p38丝裂原激活蛋白激酶细胞间粘附分子1 脂多糖休克

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LPS和TNF-α诱导血管内皮细胞ICAM-1蛋白表达的比较

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中国微循环 2001年第2期5卷 97-99页

作者：闫文生赵克森姜勇第一军医大学病理生理教研室和全军休克微循环重点实验室广东省广州市510515

目的和方法采用细胞间接免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术 ,研究脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF -α)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)表面细胞间粘附分子 -1(ICAM -1)表达的诱导作用。结果与内皮细胞表面ICAM -1的基础表达相比 ,LP... 详细信息

目的和方法采用细胞间接免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术 ,研究脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF -α)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)表面细胞间粘附分子 -1(ICAM -1)表达的诱导作用。结果与内皮细胞表面ICAM -1的基础表达相比 ,LPS可诱导内皮细胞表面ICAM -1表达在第8～24h显著增加 ,但第36h有较明显的下降 ;TNF -α也可诱导内皮细胞表面ICAM -1表达在第8～24h显著增加 ,并在36h仍维持在较高水平。LPS和TNF -α与内皮细胞ICAM -1表达之间存在剂量反应关系。结论LPS和TNF -α可诱导血管内皮细胞ICAM -1的表达 ,但内皮细胞在表达ICAM -1时对LPS的长期刺激可能产生耐受性。

关键词：脂多糖肿瘤坏死因子α 血管内皮细胞细胞间粘附分子-1 炎症反应

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β-淀粉样肽、氧应激与Alzheimer病

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生命的化学 2001年第2期21卷 161-162页

作者：莫永炎姜勇陈瑗第一军医大学病理生理教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广州510515

Alzheimer病(AD)患者的神经病学特征是脑组织萎缩，出现大量的淀粉样斑块(amyloid plaques；亦称老年斑，senile plaques，SP)和神经纤维缠结(neu-rofibritary tangles)沉积。AD病人痴呆的程度与淀粉样斑块的发展呈正相关。老年斑的主... 详细信息

Alzheimer病(AD)患者的神经病学特征是脑组织萎缩，出现大量的淀粉样斑块(amyloid plaques；亦称老年斑，senile plaques，SP)和神经纤维缠结(neu-rofibritary tangles)沉积。AD病人痴呆的程度与淀粉样斑块的发展呈正相关。老年斑的主要成分是β-淀粉样肽(β-amyloid peptide，又称β-amyloid protein，Aβ)，其分子量约为4.2 kD，由39～43个氨基酸残基组成。Aβ来自一种跨膜糖蛋白—β-淀粉样质前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)。Aβ与AD的发生、发展密切相关并起重要作用[1]。

关键词： Alzheimer病 β-淀粉样肽氧应激

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定心方药物血清对H_2O_2致培养乳鼠心肌细胞损伤的研究

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中医药学刊 2001年第3期19卷 215-217页

作者：赵晓山贾钰华秦清和姜勇第一军医大学中医系广州510515 基础部病理生理学教研室、全军休克微循环重点实验室广州510515

目的：研究定心方药物血清对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）致培养乳鼠心肌细胞损伤的影响。方法：用Ｈ２Ｏ２处理心肌细胞，以建立心肌细胞的Ｈ２Ｏ２损伤模型。用血清药理学研究方法制备定心方药物血清；比色法测定乳酸脱氢酶活性；戊巴比妥酸... 详细信息

目的：研究定心方药物血清对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）致培养乳鼠心肌细胞损伤的影响。方法：用Ｈ２Ｏ２处理心肌细胞，以建立心肌细胞的Ｈ２Ｏ２损伤模型。用血清药理学研究方法制备定心方药物血清；比色法测定乳酸脱氢酶活性；戊巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化物（ＭＤＡ）的含量；ＭＴＴ法测定细胞活力。结果：Ｈ２Ｏ２对心肌细胞有显著的损伤作用。定心方（ＤｉｎｇｘｉｎＲｅｃｉｐｅ，ＤＸＲ）能明显地降低心肌细胞损伤指数．减少细胞内ＭＤＡ的生成和提高细胞活力（Ｐ＜０．０１）。结论：ＤＸＲ对Ｈ２Ｏ２致心肌细胞损伤有保护作用，其机理可能与其减少膜脂质过氧化物生成有关；ＤＸＲ可用于防治一些与氧自由基密切相关的心血管疾病和冠心病、心肌缺血／再灌注（ＭＩ／Ｒ）损伤等。

关键词：定心方药物乳鼠心肌细胞损伤药理

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MAPK信号转导通路对炎症反应的调控

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生理学报 2000年第4期52卷 267-271页

作者：姜勇龚小卫第一军医大学病理生理教研室暨全军休克微循环重点实验室广州510515

丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen -activatedproteinkinase ,MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一 ,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程。在哺乳动物细胞中已发现和克隆了ERKJNK/SAPK、p38/RK、ER... 详细信息

丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen -activatedproteinkinase ,MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一 ,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程。在哺乳动物细胞中已发现和克隆了ERKJNK/SAPK、p38/RK、ERK5/BMK1四个MAPK亚族。这些MAPK能被多种炎性刺激所激活 ,并对炎症的发生、发展起重要调控作用。研究感染和炎症反应过程中这些MAPK被激活的机制及其生物学效应 ,探讨MAPK特异性抑制剂的药理学作用及分子基础 ,对于感染的防治及炎症反应的控制有着广泛的应用前景。

关键词：丝裂原活化蛋白激酶信号转导炎症反应 MARK

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