检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2025年第4期 324-330页

作者：单尼奇刘善收王玉玲刘辉汪帅武祎琳段楚君范瀚尹荆杨梦杰庄然张春梅空军军医大学基础医学院免疫学教研室空军军医大学西京医院急诊科空军军医大学唐都医院普外科延安大学医学院西北工业大学医学研究院延安大学生命科学院

目的建立定量检测唾液中嗜铬粒蛋白A (CHGA)的双抗体夹心ELISA方法，并探究其在唾液样本检测中的初步应用。方法人CHGA重组蛋白免疫BALB/c小鼠，常规杂交瘤技术制备、筛选单克隆抗体(mAb);构建双抗体夹心ELISA检测方法，优化唾液样本... 详细信息

目的建立定量检测唾液中嗜铬粒蛋白A (CHGA)的双抗体夹心ELISA方法，并探究其在唾液样本检测中的初步应用。方法人CHGA重组蛋白免疫BALB/c小鼠，常规杂交瘤技术制备、筛选单克隆抗体(mAb);构建双抗体夹心ELISA检测方法，优化唾液样本基质效应，并应用该方法检测应激人群唾液中的CHGA浓度。结果获得21株稳定分泌抗人CHGA的高效价杂交瘤细胞株。经方阵ELISA筛选出一对效果最佳的检测抗体，优化确定了最佳包被浓度为10μg/mL,最佳检测抗体稀释度为1∶32 000。该方法的准确性及可重复性验证结果良好，批内和批间变异率均在15%以内，回收率在80%～120%之间。进一步对基质效应进行优化，使之适用于唾液样本检测；采集不同应激状态人群唾液样本，使用本研究方法检测CHGA水平，结果提示其具有反映应激强度的潜力。结论成功建立了可靠的唾液CHGA检测方法，并初步探索其作为生物标志物在应激相关研究中的应用价值。

关键词：嗜铬粒蛋白A(CHGA) 单克隆抗体(mAb) 生物标志物应激唾液

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大鼠皮肤及毛囊骨桥蛋白研究

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 296-299页

作者：杨恬向明明第三军医大学细胞生物学教研室重庆400038

目的　对出生前和出生后大鼠皮肤及毛囊的骨桥蛋白 (osteopontin)的 m RNA进行研究。方法　确定妊龄 14～ 18d和出生后 1～ 6 1d Wistar大鼠毛发周期 ,用放射性同位素标记的原位杂交法对大鼠皮肤和毛囊骨桥蛋白 m RNA的分布和含量进行... 详细信息

目的　对出生前和出生后大鼠皮肤及毛囊的骨桥蛋白 (osteopontin)的 m RNA进行研究。方法　确定妊龄 14～ 18d和出生后 1～ 6 1d Wistar大鼠毛发周期 ,用放射性同位素标记的原位杂交法对大鼠皮肤和毛囊骨桥蛋白 m RNA的分布和含量进行研究。结果　骨桥蛋白 m RNA在大鼠出生后第 18天首次在真皮乳头 (derm alpapilla,DP)细胞中出现。在各毛发周期中骨桥蛋白 m RNA信号均出现于毛囊退化期 DP细胞 ,在毛囊静止期和生长期中信号完全消失。在皮肤和毛囊的其它细胞中均未检出骨桥蛋白 m RNA。结论　骨桥蛋白对毛发生长和毛发周期可能有重要的调节作用。

关键词：骨桥蛋白毛发周期真皮乳头

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嗜肺军团菌抑制小鼠巨噬细胞内体溶酶体融合的机制探讨

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解放军医学杂志 2025年第2期50卷 176-187页

作者：陈民佳曹秀琴贺瑞霞陈海霞杨志伟宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系宁夏银川750004 宁夏医科大学生育力保持省部级共建教育部重点实验室宁夏银川750004

目的探究嗜肺军团菌感染抑制小鼠巨噬细胞内体溶酶体融合的相关致病机制。方法将12只C57BL/6J小鼠随机分为对照组与嗜肺军团菌感染组(n=6),麻醉后经鼻分别滴入相同体积的生理盐水或嗜肺军团菌液;连续3 d记录体重变化,取出整肺观察其伤情... 详细信息

目的探究嗜肺军团菌感染抑制小鼠巨噬细胞内体溶酶体融合的相关致病机制。方法将12只C57BL/6J小鼠随机分为对照组与嗜肺军团菌感染组(n=6),麻醉后经鼻分别滴入相同体积的生理盐水或嗜肺军团菌液;连续3 d记录体重变化,取出整肺观察其伤情,HE和免疫组化染色观察小鼠肺组织病理特征;转录组测序分析肺组织中的差异表达基因(DEGs)和相关信号通路。提取小鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs),与嗜肺军团菌共培养,采用免疫荧光染色鉴定感染情况,转录组测序分析感染前后的DEGs和富集的相关信号通路。筛选感染后共同参与信号通路的核心基因,用RT-qPCR验证核心基因mRNA表达水平在体内外的一致性,Western blotting检测相关蛋白的表达情况,细菌繁殖实验检测嗜肺军团菌在细胞内的繁殖情况。结果与对照组比较,感染后2 d、3 d,嗜肺军团菌感染组小鼠体重明显下降(P<0.001),左右肺组织水肿并呈红色肝样变,病变区域由肺门向肺周边蔓延;HE染色显示嗜肺军团菌感染组小鼠肺泡腔炎性细胞浸润增多、肺泡间隔增厚、纤维蛋白渗出增多;免疫组化检测结果显示,嗜肺军团菌感染组小鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)阳性面积百分比明显增高(P<0.001);转录组测序共筛选出DEGs 2550个,其中上调基因1444个,下调基因1106个;KEGG富集分析显示,富集通路主要涉及肿瘤坏死因子、类风湿关节炎、Rap1、PI3K-Ak和吞噬体通路等。免疫荧光检测结果显示,嗜肺军团菌在体外小鼠BMDMs内增殖;转录组测序筛选出DEGs 2550个,其中上调基因1677个,下调基因873个;KEGG富集分析显示,富集通路涉及癌症中的转录失调、PI3K-Akt和吞噬体通路等。筛选出富集在吞噬反应集群中的DEGs,得到小鼠肺组织和BMDMs重叠的微管蛋白β1(Tubb1)等13个核心基因。RT-qPCR检测结果显示,小鼠肺组织和BMDMs感染嗜肺军团菌后,Tubb1表达水平均明显降低(P<0.001);Western blotting检测结果显示,Rab7、Tubb1、LAMP2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和MPO表达水平明显增高(P<0.05)。胞内增殖实验结果显示,随着感染时间增加,BMDMs中的嗜肺军团菌逐渐增多。结论嗜肺军团菌感染小鼠巨噬细胞的可能机制是下调Rab7/Tubb1/LAMP2,抑制内体溶酶体的融合。

关键词：嗜肺军团菌微管蛋白β1 内体溶酶体融合转录组测序巨噬细胞

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用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 145-147页

作者：胡火珍李丹李小玉姚玉成胡以平四川大学华西基础医学与法医学院细胞生物学教研室成都610041 上海第二军医大学细胞生物学教研室

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ... 详细信息

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ,与雌鼠交配 ,用 PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源 DNA和肝组织中表达的 p X蛋白。结果　测序结果与文献报道一致 ,并且 X基因在 Hela细胞中表达 ;共产仔鼠 16只 ,其中 1只为阳性仔鼠 ,阳性率为 6 .2 5 %。结论　初步证明用精原干细胞介导法制备

关键词：乙肝病毒X基因转基因小鼠精原细胞

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激光诱发小鼠脉络膜新生血管后骨髓来源细胞在眼部的表型特征

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中华眼科杂志 2008年第3期44卷 212-216页

作者：侯慧媛王雨生徐建峰张鹏苏晓娜王耀春刘津平第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所西安710032 第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室第四军医大学神经生物学教研室

目的探讨激光诱发小鼠脉络膜新生血管（CNV）后，骨髓来源细胞（BMC）在其眼部的表型特征。方法实验研究。以绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠为供体，野生型C57BL／6J小鼠为受体进行骨髓移植后，应用532nm倍频激光对嵌合子小鼠（处理组... 详细信息

目的探讨激光诱发小鼠脉络膜新生血管（CNV）后，骨髓来源细胞（BMC）在其眼部的表型特征。方法实验研究。以绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠为供体，野生型C57BL／6J小鼠为受体进行骨髓移植后，应用532nm倍频激光对嵌合子小鼠（处理组）和野生型小鼠（对照组）的右眼进行光凝，建立CNV模型，应用荧光素眼底血管造影和组织病理学分析确定模型稳定后，对实验眼进行免疫荧光染色，观察GFP阳性细胞在眼部的表型特征。结果激光照射后14dCNV生长趋于稳定，此时GFP阳性细胞分布于CNV区域（包括CNV深层的脉络膜）、CNV表层的视网膜、角巩膜缘、睫状体、视乳头周围及远离CNV的视网膜、脉络膜和巩膜。CD31或αSMA阳性的GFP＋细胞仅出现于CNV区域，F4／80和GFP双阳性的细胞不仅出现在CNV区域，还出现在CNV表层的视网膜、角巩膜缘和睫状体。结论分化为血管细胞的BMC可特异性向CNV区域趋化，出现在眼部其他区域的BMC中有部分是巨噬细胞或树突状细胞。BMC在眼部除参与CNV形成外，可能还有其他功能。

关键词：脉络膜新生血管化巨噬细胞树突细胞激光凝固术

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基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 537-540页

作者：卢洋黎怀星李建秀傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分... 详细信息

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分别移入 45只受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 44只 ,存活 35只 ,采用 PCR,PCR- Southern和基因组 Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠。以 4只经基因组 Southern杂交证实在基因组 DNA中整合有多拷贝结构完整的 p MTR1质粒的小鼠作Founder小鼠 ,进行转基因小鼠的建系工作。对每个 Founder小鼠已有的 F1代及 F2代转基因小鼠的基因组 DNA进行p MTR1质粒回收实验。结果 :从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的 p MTR1质粒。结论 :(1)建立了在基因组 DNA中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ;(2 )

关键词：转基因小鼠基因突变 PMTR1质粒

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自组装多肽的形成、组装及在疫苗开发中应用的研究进展

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山西医科大学学报 2025年第1期56卷 98-106页

作者：杜海琛曾诚王舒宁张旺倩向安李维娜刘丽君李萌张英起张存空军军医大学药学系生物制药学教研室西安710000 中国人民解放军联勤保障部队第940医院肿瘤科

自组装是指分子在热力学和动力学条件下自发聚集成具有明确结构的超分子的过程。自组装现象广泛存在于自然界中,从细胞到大型生物体,均可观察到自组装的现象。自组装多肽(self-assembling peptides, SAPs)是一类具有独特性质的多肽,通... 详细信息

自组装是指分子在热力学和动力学条件下自发聚集成具有明确结构的超分子的过程。自组装现象广泛存在于自然界中,从细胞到大型生物体,均可观察到自组装的现象。自组装多肽(self-assembling peptides, SAPs)是一类具有独特性质的多肽,通常由数个到数十个氨基酸组成,其能够自发形成具有特定结构和功能的有序的纳米结构。自组装过程是由非共价相互作用(例如氢键、静电相互作用、范德华力和π-π堆积等)驱动的[1]。这些相互作用促使肽链能够在适当的条件下自发地折叠并组装成稳定的二级结构构象,如α-螺旋、β-折叠或β-片层等。自组装多肽在生物体内是普遍存在的,这一现象与许多生命活动和生物功能密切相关。例如,特定的氨基酸序列可以组装成具有特定空间结构的分子,这一过程在细胞的生长和分化中起着关键作用[2]。自组装纳米疫苗因无需使用佐剂而成为疫苗设计开发领域中的研究热点之一[3]。本文综述了自组装多肽的自组装机制、影响因素、生物学特性及其在疫苗开发中的应用概况等研究进展,旨在为疫苗开发提供新策略与新思路。

关键词：自组装多肽多肽疫苗主动免疫纳米纤维纳米疫苗 β-折叠 α-螺旋

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广西柳州市血红蛋白H病的分子流行病学和血液学研究

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中华血液学杂志 2002年第5期23卷 261-262页

作者：蔡稔梁昕潘莉珍黄丽华黄燕珍李莉艳赵永忠刘忠英徐湘民广西柳州市妇幼保健院遗传优生科 545001 第一军医大学细胞生物与医学遗传学教研室

目的研究微波辐射与采用水浴加热,模拟微波辐射的人视网膜色素上皮细胞在细胞应激和凋亡相关基因转录的差异,探讨微波对培养的人视网膜色素上皮细胞基因转录的影响.方法应用基因芯片技术对2 450 MHz微波辐射、模拟微波辐射的人视网膜色... 详细信息

目的研究微波辐射与采用水浴加热,模拟微波辐射的人视网膜色素上皮细胞在细胞应激和凋亡相关基因转录的差异,探讨微波对培养的人视网膜色素上皮细胞基因转录的影响.方法应用基因芯片技术对2 450 MHz微波辐射、模拟微波辐射的人视网膜色素上皮细胞的mRNA进行检测.结果在97条有关应激和凋亡的目的基因中发现有7条基因转录上调,M31166基因上调2.52倍, L24123基因上调2.66倍,AF039704基因上调2.22倍,U67156基因上调2.07倍,AF040958基因上调2.13倍,NM-001423基因上调2.63倍,NM-005346基因上调3.68倍,未检测到转录显著下调的基因.结论微波辐射可引起培养的人视网膜色素上皮细胞中多个与应激和凋亡有关基因转录上调,微波辐射除了辐射引起的热作用外还存在微波辐射本身的作用.

关键词：广西柳州市血红蛋白H病分子流行病学血液学研究

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小鼠CXCR4基因的克隆和慢病毒介导的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第7期25卷 652-653,656页

作者：王莉胡轶阳王耀春韩骅第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室陕西西安710032

目的:克隆小鼠CXCR4基因并建立其慢病毒表达系统。方法:设计合成PCR引物,从小鼠骨髓有核细胞来源的cDNA中扩增并克隆小鼠CXCR4基因的编码区。构建CX-CR4-IRES-GFP表达单元后通过转染细胞,观察GFP的表达证实其表达效能。然后建立慢病毒... 详细信息

目的:克隆小鼠CXCR4基因并建立其慢病毒表达系统。方法:设计合成PCR引物,从小鼠骨髓有核细胞来源的cDNA中扩增并克隆小鼠CXCR4基因的编码区。构建CX-CR4-IRES-GFP表达单元后通过转染细胞,观察GFP的表达证实其表达效能。然后建立慢病毒表达载体,包装慢病毒后感染培养的细胞,用流式细胞术分析其在被感染的细胞中的表达。结果:成功扩增了小鼠CXCR4基因的编码区。克隆入质粒载体后经DNA序列测定证实了其序列。通过转染细胞和流式细胞术以及荧光显微镜观察证实了CXCR4-IRES-GFP的表达效能。成功构建了CXCR4慢病毒表达载体,感染细胞后经流式细胞术分析,证实被感染的细胞可以表达小鼠CX-CR4。结论:成功扩增、克隆了小鼠CXCR4基因,并成功建立起其慢病毒表达系统,为后续的基础和应用研究奠定了基础。

关键词： CXCR4 基因表达慢病毒

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小鼠正畸牙移动过程中锌指蛋白阳性细胞的分布特征和蛋白质组学分析

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中华口腔医学杂志 2025年第1期60卷 61-68页

作者：刘安琪张立书黄晓瑶曹元蔡欣悦金钫第四军医大学口腔医院口腔正畸科口颌系统重建与再生全国重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心西安710032 第四军医大学口腔医院口腔预防科口颌系统重建与再生全国重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心西安710032 解放军联勤保障部队第九八五医院口腔科太原030000

目的探讨小鼠正畸牙移动过程中锌指蛋白(Gli1)阳性细胞的分布特征并对其蛋白质组学进行分析。方法选择40只Gli1-β-半乳糖苷酶(Gli1-LacZ)转基因小鼠, 构建体内标记Gli1阳性细胞的正畸牙移动组(正畸组)及未加力的对照组(每组20只), 使... 详细信息

目的探讨小鼠正畸牙移动过程中锌指蛋白(Gli1)阳性细胞的分布特征并对其蛋白质组学进行分析。方法选择40只Gli1-β-半乳糖苷酶(Gli1-LacZ)转基因小鼠, 构建体内标记Gli1阳性细胞的正畸牙移动组(正畸组)及未加力的对照组(每组20只), 使用显微CT检测牙移动距离。免疫荧光染色检测牙周组织中Gli1阳性细胞与CD31和内皮黏蛋白(EMCN)双阳性H型血管的空间位置关系和分布特征。繁育20只Gli1-膜靶向的串联番茄红荧光蛋白/膜靶向的绿色荧光蛋白(Gli1-mT/mG)双基因型小鼠, 他莫昔芬诱导后获取长骨组织, 分选Gli1阳性细胞进行蛋白质组学测序, 通过基因本体功能注释(GO)和京都基因和基因组数据库(KEGG)进行富集分析。结果显微CT三维重建结果显示, 正畸组加力7 d后小鼠上颌第一磨牙近中移动(69±15)μm, 表明成功构建Gli1-LacZ转基因小鼠正畸牙移动模型。免疫荧光染色结果显示, 牙周组织中的血管多为CD31和EMCN双阳性H型血管, 正畸组牙根张力侧Gli1阳性细胞数量百分比[(54.5±13.2)%]和相对荧光强度(2.6±0.9)均显著大于对照组Gli1阳性细胞百分比[(36.3±9.1)%](t=3.60, P=0.002)和相对荧光强度(1.0±0.3)(t=5.20, P<0.001)。对照组仅少量Gli1阳性细胞与H型血管分布一致, 正畸组张力侧Gli1阳性细胞数量增加且与H型血管空间分布紧密。GO富集分析显示, Gli1阳性细胞中大量蛋白质富集于促进血管形成和组织改建等生物学过程的通路, KEGG富集分析显示, 相关蛋白主要富集于血管形成和Gli1相关通路, 如缺氧诱导因子1信号通路、血管内皮生长因子信号通路以及刺猬信号通路。结论正畸牙移动过程中Gli1阳性细胞响应机械力, 张力侧数量上升且与H型血管空间分布紧密, 可能与其自身高表达血管形成和组织改建相关蛋白的特性有关。

关键词：牙正畸牵引锌指蛋白间充质干细胞蛋白质组学牙周组织

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