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武汉大学学报（医学版） 2012年第4期33卷 462-465,502页

作者：胡新根訾晓渊张红霞胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙型肝炎转基因小鼠肝脏的组织病理学及部分免疫学特征。方法:通过对130例SPF级乙型肝炎转基因小鼠和30例同龄正常C57BL/6小鼠肝组织进行免疫组织化学染色、HE染色和浸银染色分析,... 详细信息

目的:研究C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙型肝炎转基因小鼠肝脏的组织病理学及部分免疫学特征。方法:通过对130例SPF级乙型肝炎转基因小鼠和30例同龄正常C57BL/6小鼠肝组织进行免疫组织化学染色、HE染色和浸银染色分析,研究转基因小鼠HBsAg的表达以及病理改变情况。选取15例肝组织有单个核细胞浸润的转基因小鼠检测白细胞分化抗原的表达情况。结果:60.77%(79/130)的转基因小鼠肝脏组织中出现了不同程度的肝组织病理性改变,包括肝细胞变性、单个核细胞浸润和纤维组织增生,且与月龄正相关,而与性别、病毒蛋白的表达无相关性。选取出现单个核细胞浸润的肝组织进行免疫组织化学检测发现,肝组织中浸润的单个核细胞大多为CD3+、CD4+T细胞。结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙肝全基因组转基因小鼠肝脏产生类似慢性无症状HBV携带者的病理学变化,病理改变与病毒蛋白表达无相关性,与小鼠月龄呈正相关性。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学免疫组织化学

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CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第7期24卷 540-544页

作者：商艳李强胡振林施柯周凤娟刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管... 详细信息

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管肺泡灌洗液 (BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比 (EOS % )的变化及IL 4、IL 5、IL 12、IFN γ的含量变化。取肺组织行病理切片HE染色、AB PAS染色检查 ,观察小鼠气道炎症情况 ,免疫组化染色观察CpG ODN对小鼠哮喘模型肺部GATA 3表达的影响。结果　CpG ODN治疗组BALF中IL 12和IFN γ的产生增加 ,IL 4、IL 5的产生减少 ,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例降低 ,肺部炎症情况明显减轻 ,肺血管周围及支气管周围表达GATA 3的细胞数较哮喘模型组及对照寡核苷酸治疗组明显减少。结论　哮喘小鼠激发阶段气道内滴入CpG可能通过诱导IL 12、IFN γ产生 ,抑制GATA 3的表达 ,导致TH2型细胞因子的产生减少 ,从而减轻哮喘气道过敏性炎症。

关键词： CpG-ODN气道哮喘小鼠过敏性气道炎症 GATA-3 基因表达细胞因子

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高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 973-976页

作者：陈雪松张朵张红霞胡以平朱海英第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的研究高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响。方法构建pMSCVpuro-ABCG2逆转录病毒质粒,并转染至病毒包装细胞PT67中,将获得的病毒上清液感染人原发性肝癌non-SP(Side population)细胞,筛选稳定感染的细胞系non-SP-ABCG2和n... 详细信息

目的研究高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响。方法构建pMSCVpuro-ABCG2逆转录病毒质粒,并转染至病毒包装细胞PT67中,将获得的病毒上清液感染人原发性肝癌non-SP(Side population)细胞,筛选稳定感染的细胞系non-SP-ABCG2和non-SP-puro,RT-PCR法检测细胞中ABCG2基因的转录水平,Western blot法检测细胞中ABCG2蛋白的表达水平,显微镜观察细胞形态的变化,Hoechst33342染色分析细胞的SP表型。结果逆转录病毒质粒pMSCVpuro-ABCG2经双酶切及测序证实构建正确;non-SP-ABCG2细胞中ABCG2基因的转录和蛋白表达水平均较空载体pMSCVpuro转染的细胞non-SP-puro明显提高;non-SP-ABCG2细胞的形态发生改变,成梭形生长,偶见小三角样细胞,细胞生长缓慢,细胞间排列不紧密,并出现了SP表型。结论 ABCG2基因的高表达与细胞SP表型的形成具有一定的相关性,并能影响细胞的基本形态。

关键词： ABCG2基因 SP表型肝癌细胞系生物学特性

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内皮细胞靶向的可溶性人源Delta-like 4抑制生理性与病理性眼部血管新生

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中国科学：生命科学 2015年第5期45卷 271-278页

作者：晏贤春杨子岩陈衍张毓飞王莉李娜窦国睿刘瑗段娟丽冯蕾韩骅张萍第四军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室西安710032 第四军医大学附属第一医院西京医院肿瘤科西安710032 第四军医大学附属第一医院西京医院眼科西安710032

Notch信号通路在血管新生过程中具有重要作用,是治疗病理性血管新生的关键靶标.Notch信号通路的激活与抑制均可阻抑血管新生,但由于体内长期抑制Notch信号通路会导致血管瘤等严重毒副反应,通过激活Notch信号抑制新生血管形成可能更具临... 详细信息

Notch信号通路在血管新生过程中具有重要作用,是治疗病理性血管新生的关键靶标.Notch信号通路的激活与抑制均可阻抑血管新生,但由于体内长期抑制Notch信号通路会导致血管瘤等严重毒副反应,通过激活Notch信号抑制新生血管形成可能更具临床应用价值.然而,目前缺乏可在体内高效活化Notch信号通路的Notch配体.在众多的Notch配体中,Delta-like4(Dll4)特异性表达于血管内皮组织,对血管新生具有关键调控作用.本研究表达并纯化了新型可溶性人源Notch配体h D4R,其由人源Delta-Serrate-Lag-2片段和内皮细胞靶向的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序组成.实验证实,h D4R可通过其RGD基序与内皮细胞结合,并可有效激活内皮细胞中的Notch信号.平面管腔形成实验和微球萌出实验显示,h D4R能在体外显著抑制血管新生.更为重要的是,h D4R能在体内有效抑制新生鼠视网膜血管新生和激光诱导的脉络膜新生血管形成.综上所述,本研究发明了一种能显著抑制体内外血管生成的可溶性Notch配体h D4R,为治疗过度血管新生性相关疾病提供了新的手段.

关键词： Notch信号通路人源Delta-like4 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序血管新生脉络膜新生血管形成

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hJagged1^(ext)-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第3期20卷 278-281页

作者：贾洪霞张萍周鹏李军锋韩骅梁英民第四军医大学唐都医院血液科陕西西安710038 第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室陕西西安710032

目的 :构建含人Jagged1胞外段 IgFc融合基因片段的质粒 ,并在真核细胞中表达。方法 :从人骨髓细胞中用RT PCR扩增hJagged1基因的胞外段。经DNA测序后 ,将hJagged1基因的胞外段插入改造过的质粒pBluescriptskⅡ中 ,获得hJagged1ext Fc融... 详细信息

目的 :构建含人Jagged1胞外段 IgFc融合基因片段的质粒 ,并在真核细胞中表达。方法 :从人骨髓细胞中用RT PCR扩增hJagged1基因的胞外段。经DNA测序后 ,将hJagged1基因的胞外段插入改造过的质粒pBluescriptskⅡ中 ,获得hJagged1ext Fc融合基因。将融合基因插入真核表达载体pEF BOSneo ,构建真核表达载体pEF BOSneo hJagged1ext Fc。以其瞬时转染COS7细胞 ,应用RT PCR、细胞免疫荧光技术 ,及夹心ELISA检测融合蛋白的表达。结果 :hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。DNA序列分析表明 ,所构建的含hJagged1ext Fc融合基因的质粒与设计相同 ,hJagged1ext Fc融合蛋白得到正确表达。结论 :成功地构建了hJagged1ext Fc融合基因的真核表达载体 ,并在真核细胞中正确表达 ,为进一步研究Jagged1在造血干 /祖细胞的体外扩增奠定了基础。

关键词：造血干/祖细胞 Notch Jagged1 融合蛋白真核表达

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陕西青年人群与老年人群Rb基因的多态性研究

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 307-308页

作者：舒青郑强荪刘军第四军医大学细胞生物学与医学遗传学教研室第四军医大学唐都医院心内科西安710032

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动脉粥样硬化患者Rb基因短重复序列的多态性研究

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 306-307页

作者：刘素英舒青郑强荪刘军第四军医大学细胞生物学与医学遗传学教研室第四军医大学唐都医院心内科西安710032

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小鼠表皮角质形成细胞中Ca^(2+)对组织型纤溶酶原激活剂表达的调节

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中国医学科学院学报 2001年第3期23卷 262-265,I005页

作者：连小华杨恬曾益军第三军医大学细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2＋)对组织型纤溶酶原激活剂（tPA）表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2＋)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2＋)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA... 详细信息

目的探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2＋)对组织型纤溶酶原激活剂（tPA）表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2＋)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2＋)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA的表达及表皮KC分化的影响。结果与未经Ca^(2＋)处理的对照相比，低Ca^(2＋)浓度下培养的表皮KC中，tPA mRNA及tPA量均增加（P< 0.05），KC分化标记物K10抗原表达为弱阳性，KC胞体较小，细胞形态趋于圆形；而高Ca^(2＋)浓度下的培养表皮KC中，tPA mRNA及tPA量显著增加（P< 0.001），K10抗原呈强阳性表达，KC胞体增大,形态为典型的多角形。结论Ca^(2＋)浓度的增高促进了tPA mRNA及tPA的表达，并与KC分化有关。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂 Ca^2+ 表皮角质形成细胞表达调节皮肤疾病

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皮肤抗衰老研究进展

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中国老年学杂志 2001年第4期21卷 320-322页

作者：张艺杨恬第三军医大学细胞生物学教研室重庆400038

由于皮肤暴露于体外,因而在老化中表现得最为明显,预防和延缓皮肤衰老已成为医学科学研究的热点之一.现已明确皮肤衰老是内源性因素和外源性因素共同作用的结果,内源性衰老(自然衰老)为不可避免的渐进过程,外源性衰老(如风、光、热、烟... 详细信息

由于皮肤暴露于体外,因而在老化中表现得最为明显,预防和延缓皮肤衰老已成为医学科学研究的热点之一.现已明确皮肤衰老是内源性因素和外源性因素共同作用的结果,内源性衰老(自然衰老)为不可避免的渐进过程,外源性衰老(如风、光、热、烟、化学物质等)中以紫外线作用(光衰老)最为明显[1].国内外学者对皮肤自然衰老和光衰老的组织细胞学改变、分子遗传机理以及临床治疗都作了深入的研究.

关键词：皮肤衰老病理学治疗药物疗法维甲酸

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类器官的研究进展

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中国细胞生物学学报 2019年第3期41卷 494-500页

作者：杨桃孙宇陈佳佳刘清桂王敏君胡以平陈费海军军医大学细胞生物学教研室上海200433

类器官是体外培养的由干细胞分化而来的后裔细胞所形成的具有一定空间结构的三维细胞复合体。类器官具有某些与来源器官相似的结构特征和功能特性,而且能够在体外3D培养体系中稳定扩增。目前,类器官在生物学基础研究、构建疾病模型、肿... 详细信息

类器官是体外培养的由干细胞分化而来的后裔细胞所形成的具有一定空间结构的三维细胞复合体。类器官具有某些与来源器官相似的结构特征和功能特性,而且能够在体外3D培养体系中稳定扩增。目前,类器官在生物学基础研究、构建疾病模型、肿瘤研究、组织再生修复、基因治疗以及药物筛选等方面显示出了广阔的应用前景。该综述将简要介绍类器官培养体系的发展,以及其在生命科学研究中的应用。

关键词：类器官干细胞三维培养再生医学

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