检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2023年第9期45卷 1370-1375页

作者：刘泽昆陆蒙尉丁陈志南边惠洁空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室&国家分子医学转化中心西安710032

医学细胞生物学是医学院校本科生必修的专业基础课,该课程的实验环节对提高学生的实践能力和培养学生创新思维有着举足轻重的作用。为培养复合型医学创新人才,该研究从转变实验课传统教学理念入手,以科学问题为导向,在培养科研创新思维... 详细信息

医学细胞生物学是医学院校本科生必修的专业基础课,该课程的实验环节对提高学生的实践能力和培养学生创新思维有着举足轻重的作用。为培养复合型医学创新人才,该研究从转变实验课传统教学理念入手,以科学问题为导向,在培养科研创新思维及激发学生自主实践操作方面进行教学设计,采用翻转课堂、案例式等教学方法,并综合运用网络化教学平台和国家精品课程等线上资源,融入思政教育内容,最终建立“科学问题、前置式学习、贯穿式跟踪评价”相结合的实验教学新模式。通过对新教学模式的探索和实践,旨在培养科研思维活跃、实践能力强,且适应新时代发展需要的新医科人才。

关键词：医学细胞生物学混合式实验教学科学问题教学改革

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WT1多肽乳佐剂疫苗的免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应研究

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陆军军医大学学报 2024年第9期46卷 1024-1033页

作者：叶演张泽珑朱宝行刘姝琳宋振袁庆鹏杨赟李海波邹全明曾浩孙红武陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的评价Wilm瘤基因1(Wilms’ tumor gene1, WT1)多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗的稳定性、安全性、免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应。方法用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱评价该佐剂疫苗中WT1多肽的稳定性;将C57BL/6雌性小... 详细信息

目的评价Wilm瘤基因1(Wilms’ tumor gene1, WT1)多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗的稳定性、安全性、免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应。方法用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱评价该佐剂疫苗中WT1多肽的稳定性;将C57BL/6雌性小鼠按照随机数字表法分成3组:PBS组、WT1组和WT1+AddaVax^(TM)组,使用免疫剂量为抗原50μg/只、佐剂50μg/只,按照第0、14、28天肌肉注射免疫程序进行免疫。用HE染色评价疫苗肌肉注射小鼠脏器组织毒性;用ELISA检测细胞因子水平;ELISpot检测脾细胞分泌IFN-γ细胞数量;流式细胞术检测疫苗促体外骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)成熟和促淋巴细胞活化及H-2Db WT1四聚体检测特异性CD8+T细胞比例;用C1498-mWT1稳转细胞株构建小鼠白血病肿瘤模型后,评价其预防与治疗的抗肿瘤效应。结果 WT1多肽可在疫苗中稳定存在,对小鼠肌肉注射未发生明显的脏器组织变化;对小鼠肌肉注射WT1+AddaVax^(TM)疫苗后,与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组可诱导高水平的Th1细胞免疫应答γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及其Th17免疫应答白介素17A(IL-17A)(P<0.05);与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞数量增加(P<0.01),促进BMDCs成熟的标志物CD40^(+)/CD11c^(+)、CD86^(+)CD80^(+)/CD11c^(+)细胞比例增加(P<0.05),促进淋巴细胞中CD4^(+)/CD3^(+)T、CD69^(+)/CD8^(+)T细胞比例增加(P<0.05)及其特异性CD8+T细胞比例增加(P<0.05);利用C1498-mWT1小鼠急性髓系白血病皮下荷瘤模型的抗肿瘤效应中,WT1+AddaVax^(TM)组中位生存期相比于WT1组小鼠延长了6 d。在第50天时,WT1多肽+AddaVax^(TM)组小鼠生存率为28.5%,其他组小鼠全部死亡(P<0.05)。结论 WT1多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗具有良好的免疫学和明显抗肿瘤效果。

关键词： WT1多肽 AddaVax^(TM)乳佐剂急性髓系白血病免疫应答抗肿瘤效应

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丘脑中央内侧核的形态及功能研究进展

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中华神经医学杂志 2024年第5期23卷 494-499页

作者：任肖叶笑妮张明明张潜李云庆遵义医科大学基础医学院人体解剖学教研室遵义563006 空军军医大学人体解剖与组织学胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

丘脑中央内侧核(CM)是位于丘脑中线的髓板内核团,是丘脑中线核群中的一个重要部分,同时也属于丘脑的非特异投射系统,与脑内其他区域有着广泛的神经纤维联系,发挥着中继传导和脑内整合中心的作用。近年来研究表明,CM参与机体多种行为的... 详细信息

丘脑中央内侧核(CM)是位于丘脑中线的髓板内核团,是丘脑中线核群中的一个重要部分,同时也属于丘脑的非特异投射系统,与脑内其他区域有着广泛的神经纤维联系,发挥着中继传导和脑内整合中心的作用。近年来研究表明,CM参与机体多种行为的产生和调节,包括全身麻醉与唤醒、疼痛、痒觉、情绪和认知等方面。本文现围绕CM的解剖结构及细胞类型、神经纤维联系、电生理特性及其相关功能进行综述,以期为进一步的相关研究提供参考依据。

关键词：丘脑中央内侧核神经纤维联系电生理特性疼痛痒觉认知

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基于OPN/IGF-1/mTOR探讨左归丸对缺血性脑卒中小鼠神经功能恢复作用及其机制

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中国中药杂志 2023年第19期48卷 5250-5258页

作者：刘燕高春辰厉励吴旦丛羽君冯清华吴明华李文磊南京中医药大学附属医院/江苏省中医院南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029 空军军医大学医学遗传与发育生物学教研室陕西西安710032

探讨左归丸促进缺血性脑卒中小鼠神经组织修复和功能恢复作用及其机制。雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:假手术组、模型组、左归丸低剂量组(3.5 g·kg^(-1))、左归丸中剂量组(7 g·kg^(-1))、左归丸高剂量组(14 g·kg^(-1)),... 详细信息

探讨左归丸促进缺血性脑卒中小鼠神经组织修复和功能恢复作用及其机制。雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:假手术组、模型组、左归丸低剂量组(3.5 g·kg^(-1))、左归丸中剂量组(7 g·kg^(-1))、左归丸高剂量组(14 g·kg^(-1)),每组15只。采用光化学栓塞法建立缺血性脑卒中模型。分别于造模前和给药第7、14、21、28天进行行为学检测。在造模3 d后进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,给药28 d后进行影像学T2加权成像(T2-weighted imaging,T2WI)检测、扩散加权成像(diffusion-weighted imaging,DWI)检测,评估模型损伤情况。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑皮质区组织学情况。通过免疫荧光和免疫蛋白印迹观察轴突标记蛋白(myelin basic protein,MBP)、轴突生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP43)、细胞内在活力相关通路哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及其下游磷酸化S6核糖体蛋白(phosphorylated s6 ribosomal protein,p-S6)以及机制相关蛋白骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)的相对表达量。左归丸治疗组对缺血性脑卒中小鼠神经功能的损伤有一定的恢复作用,TTC染色显示感觉运动皮质区出现白色梗死灶,T2WI影像学上观察到感觉运动皮质区坏死,形成囊腔;脑组织损伤较轻、瘢痕较少、毛细血管增多,神经元轴突较模型组增多、神经元活力较强。与模型组相比,左归丸治疗组GAP43、OPN、IGF-1、mTOR蛋白表达明显增多。综上,左归丸能促进缺血性脑梗死小鼠神经功能恢复,促进轴突生长,其机制可能与激活OPN/IGF-1/mTOR信号轴有关。

关键词：左归丸缺血性脑卒中神经功能恢复 OPN IGF-1 mTOR

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ELOC突变肾细胞癌的临床病理及分子遗传学特征分析

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中华病理学杂志 2023年第12期52卷 1204-1209页

作者：文珠张雯慧梁佳毅柴佳王映梅徐婉妮王哲范林妮空军军医大学第一附属医院病理科西安710000 延安大学医学院延安716000 空军军医大学基础医学院病理学教研室西安710000

目的探讨ELOC突变肾细胞癌的临床病理、分子遗传学特征、鉴别诊断及预后。方法收集2015年1月至2022年6月具有透明形态、弥漫表达碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)及表达不同程度细胞角蛋白(CK)7但无3p缺失的肾细胞癌11例,通过全外显子测序(whole exome ... 详细信息

目的探讨ELOC突变肾细胞癌的临床病理、分子遗传学特征、鉴别诊断及预后。方法收集2015年1月至2022年6月具有透明形态、弥漫表达碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)及表达不同程度细胞角蛋白(CK)7但无3p缺失的肾细胞癌11例,通过全外显子测序(whole exome sequencing,WES)诊断为ELOC突变肾细胞癌的患者2例,对其临床特征、形态学、免疫表型、荧光原位杂交(FISH)及全外显子测序结果进行分析,并复习相关文献。结果2例ELOC突变肾细胞癌患者均为男性,年龄分别为29和51岁,临床无明显症状,均为体检发现肾脏占位。肿瘤最大径分别是3.5 cm和2.0 cm。低倍镜下肿瘤与周围组织界限较清楚,呈推挤性生长,被粗大的纤维分隔呈结节状,肿瘤细胞排列方式多样,呈管状、乳头状、实性巢团状或腺泡状;高倍镜下肿瘤细胞体积大,胞质透亮或含有细小的嗜酸性颗粒,细胞界限较清。2例患者肿瘤细胞CAⅨ均呈弥漫“盒状”阳性,病例1 CK7部分中等强度阳性、CD10部分强阳性,P504s弥漫中等强度阳性,34βE12局限性中等强度阳性;病例2 CK7、CD10部分中等强度阳性,P504s弥漫中等强度阳性,34βE12阴性。荧光原位杂交检测结果显示2例均未见3p缺失。病例1全外显子测序结果为ELOC c.235T>A(p.Y79N)突变,病例2全外显子测序结果发现ELOC c.236_237inv(p.Y79C)突变,2例术后随访均未见复发或转移。结论ELOC突变肾细胞癌作为一种临床新分类,由于其与透明细胞肾细胞癌的形态学与免疫表型高度重叠,临床可能存在低诊断。在临床病理诊断中,对于ELOC突变肾细胞癌,需综合形态学、免疫组织化学染色、FISH检测及基因突变检测确诊,需要更多的病例积累来阐释其生物学行为及预后。

关键词：癌,肾细胞基因病理学,分子预后

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天然植物薰衣草精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第18期46卷 2046-2056页

作者：赵曼吴梓靖孙存叶演陈婷刘姝琳朱宝行赵安妮宋振杨赟孙红武曾浩陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的探讨天然植物薰衣草精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及初步机制。方法用微量稀释法测定薰衣草精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;用杀菌动力学研究进一步确定其起效和维持时间;用小鼠感染模型评价薰衣... 详细信息

目的探讨天然植物薰衣草精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及初步机制。方法用微量稀释法测定薰衣草精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;用杀菌动力学研究进一步确定其起效和维持时间;用小鼠感染模型评价薰衣草精油对创口愈合的促进作用;用结晶紫染色定量测定法对其生物膜的抑制和清除作用进行研究;用激光共聚焦显微镜观察生物膜中细菌存活情况;用核酸蛋白测定仪器检测3 mg/mL、6 mg/mL薰衣草精油干预后的细菌DNA核酸和蛋白质泄漏量;用钾离子试剂盒测定钾离子泄漏量,并采用蛋白组学技术结合生物信息学研究方法,初步探究薰衣草精油抗多重耐药鲍曼不动杆菌的作用机制。结果薰衣草精油的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度均为6 mg/mL,在120 min时,该浓度可杀死几乎所有多重耐药鲍曼不动杆菌,且呈现明显的剂量依赖效应和时间依赖效应。整体动物模型评价表明,3 mg/mL和6 mg/mL薰衣草精油均能促进创口愈合,疗效明显。进一步研究发现,3 mg/mL薰衣草精油具有一定的多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜抑制作用,且能显著增加DNA核酸和蛋白质的泄漏量,并能促进钾离子外流。同时,6 mg/mL薰衣草精油展现了对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜的清除作用。蛋白组学研究提示,薰衣草精油的抗菌作用可能与影响多重耐药鲍曼不动杆菌的氧化还原酶活性和细胞代谢过程,干扰细胞壁/膜/包膜等结构的生物合成有关。结论薰衣草精油在3 mg/mL时即可发挥对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用,其作用机制可能与破坏细菌生物膜和干扰细菌代谢有关。

关键词：薰衣草精油多重耐药鲍曼不动杆菌抗菌作用作用机制

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糖尿病难愈性创面的发病机制研究进展

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生命科学 2024年第4期36卷 509-516页

作者：施芳婷沈佳琪仵敏娟海军军医大学基础医学院一大队上海200433 海军军医大学基础医学院组织胚胎学教研室上海200433

糖尿病创面具有发病率高、修复难度大、迁延不愈等特点,严重影响患者的生活质量,威胁人类健康。糖尿病创面在止血期后,多出现炎症期消退延迟,氧化应激增加,造成创面愈合延迟。该文介绍糖尿病创面愈合的概念及在糖尿病创面愈合过程中的... 详细信息

糖尿病创面具有发病率高、修复难度大、迁延不愈等特点,严重影响患者的生活质量,威胁人类健康。糖尿病创面在止血期后,多出现炎症期消退延迟,氧化应激增加,造成创面愈合延迟。该文介绍糖尿病创面愈合的概念及在糖尿病创面愈合过程中的创面组织、细胞、神经病变以及创面微生物群的最新研究进展,从创面微环境、细胞功能、细胞因子及分子层面阐述导致糖尿病创面迁延不愈的因素及作用机制,以期为糖尿病创面的诊断及治疗提供新的切入点。

关键词：糖尿病创面愈合微环境细胞功能神经系统创面微生物群

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卡介苗对1型糖尿病小鼠的免疫治疗作用及其机制

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解放军医学杂志 2023年第7期48卷 768-775页

作者：康亚莉扈启宽宁唤唤周洁任瑞康健路延之韦垠高晓菁张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750001 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学西京医院内分泌科陕西西安710032

目的评价卡介苗(BCG)对1型糖尿病(T1DM)小鼠的免疫治疗效果,并探索其作用机制。方法将15只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为造模组(n=10,腹腔注射50 mg/kg链尿佐菌素建立T1DM模型)与对照组(n=5,腹腔注射等量柠檬酸缓冲液);取造模成功即随... 详细信息

目的评价卡介苗(BCG)对1型糖尿病(T1DM)小鼠的免疫治疗效果,并探索其作用机制。方法将15只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为造模组(n=10,腹腔注射50 mg/kg链尿佐菌素建立T1DM模型)与对照组(n=5,腹腔注射等量柠檬酸缓冲液);取造模成功即随机血糖≥16.7 mmol/L的10只小鼠分为T1DM组(n=5)与卡介苗(BCG)组(n=5)。随后BCG组小鼠经皮下注射BCG 1×10^(6) cfu/只进行免疫治疗,4周后加强免疫治疗1次,T1DM组与对照组注射相同剂量磷酸盐缓冲液(PBS)。在实验周期(13周)内,每周监测小鼠体重和进食量变化,尾静脉采血检测各组小鼠血糖水平,采用口服葡萄糖耐量实验(OGTT)检测各组小鼠葡萄糖负荷后的血糖调节能力。采用HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理变化,免疫组化染色检测胰腺胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清C-肽含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脾组织细胞因子mRNA水平,流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)比例。结果BCG免疫治疗2次后(第13周),T1DM组小鼠血糖水平明显高于对照组(P<0.001),而BCG组血糖水平虽高于对照组(P<0.01),但明显低于T1DM组(P<0.01)。OGTT结果显示,3组小鼠在葡萄糖灌胃后血糖水平迅速升高,120 min时开始下降,到180 min时,对照组小鼠血糖水平降至正常水平;与对照组比较,T1DM组及BCG组小鼠在120 min后血糖水平虽有下降趋势,但在180 min时仍明显高于对照组(P<0.001),而BCG组与T1DM组间差异无统计学意义(P>0.05)。在初次免疫时(第5周),与对照组比较,T1DM组和BCG组小鼠体重增长百分比明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001)。BCG免疫治疗2次后(第13周),与对照组比较,T1DM组小鼠体重增长百分比仍明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001);与T1DM组比较,BCG组小鼠体重增长百分比增高(P<0.001),进食量减少(P<0.001),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰岛发生明显的萎缩,而BCG组小鼠胰岛形态与对照组接近,且胰岛内细胞数目明显多于T1DM组。免疫组化染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰腺中胰岛素阳性面积明显减少(P<0.01),而BCG组胰岛素阳性面积虽然少于对照组(P<0.05),但明显多于T1DM组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,T1DM组、BCG组血清C-肽含量明显降低(P<0.001,P<0.05),但BCG组血清C-肽含量明显高于T1DM组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组比较,T1DM组脾组织细胞因子mRNA水平无明显变化(P>0.05);BCG组白细胞介素-2(IL-2)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA水平与对照组和T1DM组比较均明显升高(P<0.0001),而γ干扰素(IFN-γ)mRNA水平无明显变化(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠体内Treg细胞百分比降低(P<0.05);与T1DM组比较,BCG组小鼠Treg细胞百分比明显增高(P<0.05),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论BCG免疫治疗可诱导Treg细胞增多,调节自身免疫应答,并通过减轻胰腺病理损伤、恢复胰岛细胞功能以促进胰岛素分泌,从而降低T1DM小鼠的血糖水平。

关键词：卡介苗 1型糖尿病免疫治疗

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非侵入式静电场刺激对脂多糖诱导神经认知障碍小鼠的改善作用

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陆军军医大学学报 2022年第22期44卷 2237-2245页

作者：魏国梁王聪孙书情刘贵松田学隆王星温惠中重庆大学生物工程学院重庆400044 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院神经生物学教研室重庆市神经生物学重点实验室重庆400038

目的探究非侵入式静电场刺激(noninvasive electrostatic field stimulation,NEFS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的神经认知障碍小鼠的改善作用。方法将48只3月龄雌性C57小鼠分为CTL组、NaCl+NEFS组、LPS+SHAM组、LPS+NEFS组,每组12只。LPS+NEFS组和LPS+SHAM组都以腹腔注射LPS(2 mg/kg)的方式建立神经认知障碍模型,建模后,连续进行4 d的NEFS治疗,其中LPS+NEFS组接受160 kV/m的静电场刺激(30 min/d)而LPS+SHAM组只接受0 kV/m的假刺激(3 s/d)。NaCl+NEFS组注射等量0.9%生理盐水代替LPS并进行160 kV/m的静电场刺激;CTL组不做任何处理。NEFS后,用T迷宫(T-maze)实验和新物体识别(new object recognition,NOR)实验观察小鼠的认知能力;用免疫组化技术检测小鼠海马神经元的数量;用免疫荧光技术检测小鼠海马星形胶质细胞的变化。结果与CTL组比较,LPS+SHAM组在T-maze和NOR中的学习记忆能力显著减弱(P<0.05),且海马区神经元的数目显著减少而活化的星形胶质细胞的数目显著增加(P<0.05)。而与LPS+SHAM组比较,LPS+NEFS组在T-maze和NOR中的学习记忆能力显著提高(P<0.05),且海马区神经元的数目也显著增加(P<0.05),星形胶质细胞的增生被显著抑制(P<0.05)。结论腹腔注射2 mg/kg的LPS可以建立神经认知障碍模型,NEFS对LPS诱导神经认知障碍小鼠起到改善作用。

关键词：电刺激疗法神经认知障碍神经保护学习记忆脂多糖

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低氧联合辐照对小鼠骨髓造血细胞的影响作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第7期47卷 681-690页

作者：杨欣海陈芳全勇胡梦佳芦玉凯陈乃成许杨王崧王军平陆军军医大学(第三军医大学):军事预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=4... 详细信息

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=43),7 Gy单纯辐照组(7 Gy组,n=12)、7 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+7 Gy组,n=12)、7 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+7 Gy+Hy组,n=12)、6 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+6 Gy+Hy,n=10);Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组于常压低氧舱内进行7 d预处理(氧浓度12%),其余组小鼠在正常氧环境中饲养;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照6 Gy;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照7 Gy;Control组、6 Gy组、7 Gy组小鼠全程正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+6 Gy组小鼠辐照损伤后继续低氧饲养24 h后恢复正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠辐照后持续低氧环境饲养。Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠制备骨髓细胞悬液,采用全自动细胞计数仪计数小鼠骨髓有核细胞数量,采用HE染色观察小鼠骨髓腔病理形态改变,采用流式细胞术检测造血干/祖细胞(Lin^(-)Sca1^(+)c-Kit^(+),LSK)、髓系祖细胞(myeloid progenitor,MP)以及成熟T/B髓系细胞数量;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠从低氧预处理后开始持续监测30 d的生存率;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠采取尾血,使用全自动血液分析仪检测红细胞(red blood cell,RBC)、白细胞(white blood cell,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(platelet,PLT)等的动态变化;Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠于辐照后17 d处死后获取骨髓细胞悬液并进行单细胞测序及分析。结果①与Control组相比,6 Gy组小鼠辐照后全骨髓有核细胞数量显著减少(P<0.01),HE染色显示骨髓血窦扩张明显、红细胞溢出;与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组小鼠骨髓腔内细胞密度增加,有核细胞数减少程度明显减轻(P<0.01);②流式细胞术检测结果显示与Control组比较,6 Gy组骨髓LSK、MP与成熟T/B/髓系细胞数量均显著降低(P<0.05);与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组单纯辐照造成的LSK、MP的数量减少能得到显著抑制(P<0.01);③与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy组经过低氧辐照后24 h复常氧治疗显著提高了小鼠生存率(P<0.01);与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠经持续低氧治疗未能显著改善小鼠生存率;Hy-7 d+7 Gy组与Hy-7 d+7 Gy+Hy组之间的生存率差异虽未达到统计学显著性(P=0.12),但在整个观察周期内Hy-7 d+7 Gy组始终表现出存活数量优势;④血常规检测结果显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠较6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组WBC水平得到更快的恢复(P<0.05);经低氧预处理后,Hy-7 d+6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组辐照前RBC及HGB水平更高;而相比于6 Gy组及Hy-7 d+6 Gy+Hy组,Hy-7 d+6 Gy组PLT恢复更显著且迅速(P<0.05);⑤通过单细胞转录组数据分析进行细胞亚群比例推测,相比于6 Gy组Hy-7 d+6 Gy组小鼠长期造血干细胞(long-term hematopoietic stem cell,LT-HSC)、短期造血干细胞(short-term hematopoietic stem cell,ST-HSC)数量减少得到抑制,与流式细胞术结果一致;拟时序分析显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠数据与Control组相似,表现出分化程度低且自我更新能力强的LSK较多;差异基因分析及KEGG通路富集表明,6 Gy组氧化磷酸化通路活跃度显著高于其他组,而Hy-7 d+6 Gy组则富集于染色质重塑和mRNA监视等通路。结论低氧预处理可减轻小鼠骨髓造血细胞放射损伤,辐照后恢复常氧治疗有助

关键词：低氧预处理骨髓造血干/祖细胞急性放射损伤造血功能单细胞转录组技术

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