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2014年第九次全国牙体牙髓病学学术会议

作者：童娟尹秋蓉胡轶郭静杨文晔王胜朝第四军医大学口腔医院预防科

目的:本文研究Notch信号通路对内毒素LPS刺激小鼠成牙本质样细胞MDPC-23细胞凋亡的调控作用和可能机制。方法:体外培养小鼠成牙本质细胞系MDPC-23细胞,使用梯度浓度的LPS刺激MDPC-23细胞72小时,流式细胞术及Hoechst染色检测MDPC-23细胞... 详细信息

目的:本文研究Notch信号通路对内毒素LPS刺激小鼠成牙本质样细胞MDPC-23细胞凋亡的调控作用和可能机制。方法:体外培养小鼠成牙本质细胞系MDPC-23细胞,使用梯度浓度的LPS刺激MDPC-23细胞72小时,流式细胞术及Hoechst染色检测MDPC-23细胞凋亡率。编码Notch-1胞内段的质粒瞬时转染MDPC-23细胞,使用PCR及Western blot检测Notch-1及Hes-1的表达。采用Notch-1瞬时转染入LPS刺激后的MDPC-23细胞,通过Real-time PCR及Western blot检测了凋亡相关基因及蛋白bcl2及Caspase3的表达情况。使用DAPT抑制LPS刺激后的MDPC-23细胞中Notch信号,通过Real-time PCR及Western blot检测了凋亡相关基因和蛋白bcl2及Caspase3的表达情况。LPS诱导MDPC-23细胞凋亡过程中激活Notch信号通路或抑制Notch信号通路,使用流式细胞术,Hoechst染色及免疫细胞化学方法检测了细胞的凋亡。结果:通过流式细胞术及Hoechst染色发现,0.1mg/ml的LPS作用MDPC-23细胞72h后能够明显促进MDPC-23细胞的凋亡。Notch-1质粒瞬时转染入MDPC-23细胞后,PCR和Western blot法检测到Notch-1及Hes-1过表达。通过Real-time PCR及Western blot检测发现过表达Notch1抑制LPS诱导的MDPC-23细胞中凋亡相关蛋白Caspase3及抑凋亡蛋白Bcl-2的表达。使用DAPT抑制LPS刺激后的MDPC-23细胞中Notch信号,通过Real-time PCR及Western blot检测发现抑制MDPC-23细胞中Notch信号后,凋亡相关蛋白Caspase3及抑凋亡蛋白Bcl2的表达均增加。LPS诱导MDPC-23细胞凋亡过程中激活Notch信号通路或抑制Notch信号通路,采用流式细胞术、Hoechst染色法及免疫细胞化学的方法检测MDPC-23细胞的凋亡情况:发现Notch1过表达促进了MDPC-23细胞的凋亡;DAPT抑制Notch信号后抑制了MDPC-23细胞的凋亡。结论:Notch信号通路参与LPS刺激MDPC-23细胞的凋亡过程,Notch信号可能通过调控凋亡相关蛋白的表达促进MDPC-23细胞凋亡。

关键词： Notch信号通路 LPS 细胞凋亡 MDPC-23

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阿司匹林增强干细胞膜片的骨再生能力

阿司匹林增强干细胞膜片的骨再生能力

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第十次全国牙周病学学术会议

作者：安莹高丽娜李蓓陈发明金岩王勤涛第四军医大学组织工程研发中心军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学口腔医学院牙周科军事口腔医学国家重点实验室

目的研究阿司匹林(Aspirin)对体外培养人的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)和颌骨来源的骨髓间充质干细胞(Jaw of bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)膜片性能的影响及体内再生潜能,为将来临床牙周炎... 详细信息

目的研究阿司匹林(Aspirin)对体外培养人的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)和颌骨来源的骨髓间充质干细胞(Jaw of bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)膜片性能的影响及体内再生潜能,为将来临床牙周炎的治疗提供依据。方法利用组织贴壁法从人牙周膜及颌骨中分别分离出牙周膜干细胞(PDLSCs)和骨髓间充质干细胞(JBMMSCs)并进行体外培养。在细胞膜片形成的前期(B group)、整个过程(C group)和后期(D group)

关键词：骨再生牙周膜干细胞体外培养细胞膜片阿司匹林

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不同根吸收阶段乳牙牙周膜干细胞生物学特性研究

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临床口腔医学杂志 2014年第10期30卷 589-593页

作者：王清超李蓓张钰尚临娟邬礼政金岩王小竞第四军医大学口腔医院儿童口腔科.军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学口腔医院组织工程中心.军事口腔医学国家重点实验室陕西西安710032

目的:比较生理性根吸收不同阶段的乳牙牙周膜干细胞(PDLSCs)的生物学特性,检测其对破骨细胞形成和凋亡相关分子的表达情况,为解释生理性根吸收的调控机制提供实验依据。方法:通过分离、培养处于不同生理性根吸收时期的乳牙PDLSCs(未吸... 详细信息

目的:比较生理性根吸收不同阶段的乳牙牙周膜干细胞(PDLSCs)的生物学特性,检测其对破骨细胞形成和凋亡相关分子的表达情况,为解释生理性根吸收的调控机制提供实验依据。方法:通过分离、培养处于不同生理性根吸收时期的乳牙PDLSCs(未吸收、中度吸收、重度吸收)与恒牙PDLSCs;采用流式细胞术、MTT实验比较各组PDLSCs的免疫表型、细胞增殖能力;采用成骨、成脂诱导与茜素红染色、油红O染色及Real-time PCR检测各期PDLSCs成骨成脂相关基因表达;采用Western blot检测各组PDLSCs的RANKL、OPG与FasL表达。结果:所分离获得各组乳牙PDLSCs表达间充质干细胞标志分子,与恒牙PDLSCs相比具有较强的增殖能力。其中,重度吸收组乳牙PDLSCs与其它组相比成骨能力最强、成脂能力最差。不同根吸收时期的PDLSCs差异表达RANKL、OPG与FasL蛋白。结论:不同根吸收时期乳牙PDLSCs生物学特性存在差异,RANKL、OPG与FasL的差异表达可能对生理性根吸收过程中破骨细胞的形成与凋亡起到调控作用。

关键词：生理性根吸收牙周膜干细胞生物学特性破骨细胞

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氟比洛芬减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制

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中华器官移植杂志 2013年第4期34卷 239-243页

作者：傅海龙李永华张卿卿徐海涛丁国善王全兴石学银第二军医大学附属长征医院麻醉科上海200003 第二军医大学附属长征医院器官移植中心上海200003 第二军医大学基础部移植免疫学教研室

目的探讨环氧化酶（COX）抑制剂氟比洛芬减轻肝脏缺血再灌注（IR）损伤的作用及机制。方法将C57BL／6小鼠分为假手术组、IR组和氟比洛芬组（根据药物剂量不同分为A、B、C、D组4个亚组）。除假手术组外，其余组建立70％小鼠肝IR损伤模型... 详细信息

目的探讨环氧化酶（COX）抑制剂氟比洛芬减轻肝脏缺血再灌注（IR）损伤的作用及机制。方法将C57BL／6小鼠分为假手术组、IR组和氟比洛芬组（根据药物剂量不同分为A、B、C、D组4个亚组）。除假手术组外，其余组建立70％小鼠肝IR损伤模型，肝脏缺血时间为90min。A、B、C、D组于缺血前20min经小鼠尾静脉分别注射5、7．5、10和15mg／kg的氟比洛芬。再灌注后通过血清学和组织学指标观察肝损伤情况，比较各组COX及其相关炎症因子的基因表达情况，检测各组肝细胞线粒体膜转换孔（mPTP）的敏感性。结果与IR组比较，再灌注后氟比洛芬组血清天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶均明显降低（P〈0．05），其中C组下降最为明显。再灌注6h，与IR组比较，氟比洛芬组肝组织损伤较轻，凋亡细胞数明显减少（P〈0．05）；同时，肝组织COX-2及相关炎症因子白细胞介素1／？（IL-U3）、IL-6和肿瘤坏死因子a（TNF-α）的基因表达也明显减少（P〈0．05）；再灌注后6h，氟比洛芬组mPTP对外源性Ca2＋刺激的耐受性增加。结论氟比洛芬预处理能减轻小鼠肝脏IR损伤，该作用可能与减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达，以及抑制mPTP。

关键词：小鼠肝再灌注损伤氟比洛芬线粒体

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Toll样受体4通过NF-κB通路降低牙周膜干细胞成骨能力

Toll样受体4通过NF-κB通路降低牙周膜干细胞成骨能力

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第十次全国牙周病学学术会议

作者：李成华李蓓金岩王勤涛第四军医大学口腔医学院牙周科军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学组织工程研发中心军事口腔医学国家重点实验室

目的研究TLR4激活后对于牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨能力的影响及机制。方法应用LPS(10μg/ml)体外刺激PDLSCs,同时检测PDLSCs成骨分化过程中成骨相关基因(ALP、Runx2、SP7)的表达;茜素红染色检测其矿化...

目的研究TLR4激活后对于牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨能力的影响及机制。方法应用LPS(10μg/ml)体外刺激PDLSCs,同时检测PDLSCs成骨分化过程中成骨相关基因(ALP、Runx2、SP7)的表达;茜素红染色检测其矿化结节形成能力;Western blot检测PDLSCs中NF-κB信号通路相关蛋白表达水平变化。在成骨分化过程中,LPS刺激的同时加入TLR4中和抗体或NF-κB通路阻

关键词：

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索拉非尼诱导肝癌HepG2细胞自噬的机制及意义

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第三军医大学学报 2013年第22期35卷 2435-2438页

作者：秦利燕王滨倪振洪连继勤宋方洲袁成福刘革力重庆医科大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨索拉非尼诱导肝癌HepG2细胞自噬的机制及意义。方法用GFP-LC3质粒转染HepG2细胞后观察索拉非尼对自噬小体形成的影响;免疫共沉淀法检测索拉非尼对Mcl-1与Beclin1之间相互作用的影响;使用siRNA沉默自噬相关基因Atg5或用氯喹(CQ)... 详细信息

目的探讨索拉非尼诱导肝癌HepG2细胞自噬的机制及意义。方法用GFP-LC3质粒转染HepG2细胞后观察索拉非尼对自噬小体形成的影响;免疫共沉淀法检测索拉非尼对Mcl-1与Beclin1之间相互作用的影响;使用siRNA沉默自噬相关基因Atg5或用氯喹(CQ)抑制自噬后观察索拉非尼抗肝癌细胞的效应;Western blot检测自噬与凋亡相关蛋白Atg5、Beclin1、LC3、Mcl-1与PARP表达的变化。结果索拉非尼处理HepG2细胞后LC3-Ⅱ蛋白表达量呈剂量依赖性增强,索拉非尼处理后转染GFP-LC3的HepG2细胞中出现明显的自噬小体样点状荧光,Western blot结果显示索拉非尼处理后HepG2细胞中Mcl-1表达下调,Beclin1无明显变化,Co-IP证实在HepG2细胞中Mcl-1和Beclin1间存在蛋白相互作用,索拉非尼能减弱Mcl-1和Beclin1的结合。抑制自噬后能明显增强索拉非尼的杀细胞效应。结论索拉非尼可能通过下调Mcl-1来诱导肝癌HepG2细胞自噬,抑制自噬后可显著增强索拉非尼的杀细胞效应。

关键词：索拉非尼自噬 Mcl-1 凋亡

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CRK1基因缺失对白念珠菌黏附、侵袭及宿主细胞因子表达的影响

CRK1基因缺失对白念珠菌黏附、侵袭及宿主细胞因子表达的影响

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全国首届真菌感染与宿主免疫学术研讨会

作者：赵静刘继勇张海吴建华上海长海医院皮肤科第二军医大学长海医院药材科第二军医大学肝胆医院药材科

目的：研究CRK1基因缺失对白念珠菌黏附、穿透肠粘膜的影响以及CRK1基因缺失导致宿主细胞因子差异表达. 方法：运用菌落计数法评价CRK1基因缺失对白念珠菌黏附力的影响;运用菌落计数法,比较CRK1基因缺失菌(ΔCRK1菌)及标准菌SC5314... 详细信息

目的：研究CRK1基因缺失对白念珠菌黏附、穿透肠粘膜的影响以及CRK1基因缺失导致宿主细胞因子差异表达. 方法：运用菌落计数法评价CRK1基因缺失对白念珠菌黏附力的影响;运用菌落计数法,比较CRK1基因缺失菌(ΔCRK1菌)及标准菌SC5314与肠粘膜相互作用6h、24h时穿透肠粘膜的菌落数;通过ELISA方法比较ΔCRK1菌及标准菌SC5314诱导宿主肠粘膜上皮细胞因子的表达差异. 结果：与标准菌SC5314相比,ΔCRK1菌在与肠粘膜相互作用60、90、120min时,黏附于肠粘膜的菌落数明显少于标准菌SC5314,两者之间有统计学差异;当白念珠菌与肠粘膜相互作用6h时,ΔCRK1菌及标准菌SC5314穿透肠粘膜的菌落数均很少,两者之间无统计学差异,而在24h时,ΔCRK1菌穿透肠粘膜的菌落数明显少于标准菌SC5314,两者比较有统计学差异;与标准菌SC5314相比,ΔCRK1菌作用于肠粘膜后,诱发产生的促炎细胞因子TNF-α、IL-8、IFN-γ的水平相对较高,而对于抗炎细胞因子IL-12、TGF-β、IL-10,则标准菌SC5314多于ΔCRK1菌,两者比较均有统计学差异. 结论：CRK1基因缺失影响白念珠菌粘附并穿透肠粘膜、导致白念珠菌的毒力降低,ΔCRK1菌作用于肠粘膜后,诱发宿主产生的促炎细胞因子的水平相对较高而更容易被宿主抵抗.

关键词：白念珠菌黏附力侵袭能力 CRK1基因缺失宿主细胞表达水平

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天津市老年人尿中多环芳烃代谢物与细胞因子的关系研究

天津市老年人尿中多环芳烃代谢物与细胞因子的关系研究

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2017环境与公共健康学术会议暨中国环境科学学会环境医学与健康分会、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会2017年年会

作者：王彤王智宇张楠赵若杰许嘉王百齐韩斌白志鹏汤乃军张利文天津医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系中国环境科学研究院环境基准与风险评估国家重点实验室

背景:细胞因子(cytokine)作为体内免疫调节的重要物质,其与多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons)内暴露水平的相关研究还相对较少。目的:本研究旨在探究尿中多环芳烃代谢物与细胞因子间的关系,筛选出对多环芳烃代谢较为敏感的细... 详细信息

背景:细胞因子(cytokine)作为体内免疫调节的重要物质,其与多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons)内暴露水平的相关研究还相对较少。目的:本研究旨在探究尿中多环芳烃代谢物与细胞因子间的关系,筛选出对多环芳烃代谢较为敏感的细胞因子。方法:采用固定群组的实验设计,评价尿中多环芳烃代谢物与细胞因子的相关关系。利用系统抽样的方法从天津市某2个社区抽取了112名60岁以上的老年健康志愿者参与此次研究。研究分为冬夏两次测量(夏季:2011年6月13日至7月2日,冬季:2011年11月30日至12月12日),每位志愿者需要在研究期间接受体格检查,采集静脉血和晨尿,同时通过问卷调查方法获得社会人口学信息和暴露相关信息。尿多环芳烃代谢物通过气象色谱-质谱联用(GC-MS)的方法进行测定,再利用尿肌酐进行校正。采用复合细胞因子悬浮检测技术通过试剂盒测定17种细胞因子。先分别对多环芳烃代谢物和细胞因子进行统计学描述并比较每种物质冬夏水平的差异。将多环芳烃代谢物的同分异构体进行加和处理,然后对多环芳烃和细胞因子进行Spearman秩相关分析。回归分析采用广义线性混合模型(GLMM)进行处理。结果:冬夏季间尿中多环芳烃代谢物水平存在差异且冬季高于夏季,同时细胞因子水平在冬夏季之间也存在差异。相关分析发现多数细胞因子水平随着多环芳烃代谢物水平升高而升高且具有统计学意义。进一步回归分析分析发现在调整年龄、性别、BMI、季节以及吸烟状况后,IL-5、IL-7、IL-12、IL-13、GM-CSF以及IFN-γ分别对不同的多环芳烃代谢物表现出积极的正效应(P<0.05)。对于吸烟和性别进行分层分析发现,不吸烟的人群与男性的细胞因子随多环芳烃代谢物改变较为明显。结论:研究结果提示细胞因子水与尿中多环芳烃代谢物水平存在一定关系,且不吸烟与男性更为敏感。

关键词：多环芳烃细胞因子固定群组广义线性混合模型

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强酸性电解质水对根尖外多菌种生物膜作用的体外研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2014年第4期24卷 202-207页

作者：于丁一赵春苗杨扬程小刚仇珺王聪田宇余擎第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科军事口腔医学国家重点实验室陕西西安710032 宝鸡市口腔医院牙体牙髓病科陕西宝鸡721001

目的:比较不同浓度次氯酸钠和强酸性电解质水对根尖外多菌种生物膜的杀灭作用。方法:分别在人牙根尖牙骨质和细胞爬片上共同培养形成包含血链球菌、衣氏放线菌和粪肠球菌的多菌种生物膜;分别用强酸性电解质水(SAEW)和不同浓度(5 g/L和10... 详细信息

目的:比较不同浓度次氯酸钠和强酸性电解质水对根尖外多菌种生物膜的杀灭作用。方法:分别在人牙根尖牙骨质和细胞爬片上共同培养形成包含血链球菌、衣氏放线菌和粪肠球菌的多菌种生物膜;分别用强酸性电解质水(SAEW)和不同浓度(5 g/L和10 g/L)次氯酸钠(NaClO)液处理15 s、1、5 min,52.5 g/L NaClO液和生理盐水分别为阳性对照和阴性对照;各组处理结束后,用激光共聚焦显微镜进行观察,并用ImageJ软件分析各组的杀菌效率。结果:各实验组和阳性对照组在各处理时间点的活菌比例均显著低于阴性对照组(P<0.05),其中SAEW 15 s组,5 g/L/NaClO 15 s、1 min、5 min组,10 g/L/NaClO 15 s、1 min组的活菌比例均明显高于阳性对照组(P<0.05);而SAEW 1 min组、5 min组,10 g/L NaClO 5 min组的活菌比例分别与阳性对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。结论:强酸性电解质水以及不同浓度次氯酸钠液均能有效杀死多菌种生物膜中的细菌,其效果均随冲洗时间的延长而增强。

关键词：多菌种生物膜粪肠球菌血链球菌衣氏放线菌次氯酸钠(NaClO) 强酸性电解质水 (SAEW)

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miR-193b对结肠癌细胞侵袭转移的影响及其机制

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中国老年学杂志 2013年第2期33卷 351-354页

作者：任昊天赵行宇朱文赫李妍罗军张巍第四军医大学口腔医学系08级陕西西安710032 吉林医药学院生理教研室吉林医药学院生物化学与分子生物学教研室

目的探讨miR-193b对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制。方法 RT-PCR检测高转移细胞系SW620、低转移细胞系中SW480 miR-193b的表达,同时设计miR-193b siRNA及miR-193b利用脂质体2000转染入细胞内,并通过RT-PCR检测其转染... 详细信息

目的探讨miR-193b对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制。方法 RT-PCR检测高转移细胞系SW620、低转移细胞系中SW480 miR-193b的表达,同时设计miR-193b siRNA及miR-193b利用脂质体2000转染入细胞内,并通过RT-PCR检测其转染效率,利用体外划痕及Transwell实验验证转染miR-193b siRNA及miR-193b后对肿瘤细胞的侵袭转移能力的影响,利用Western印迹验证miR-193b对尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)的影响。结果 RT-PCR结果显示miR-193b在高转移细胞系SW620中表达水平显著低于转移细胞系SW480;RT-PCR检测转染效率的结果显示转染miR-193b-siRNA的SW480细胞中miR-193b的表达较对照显著降低,而在转染mimic-miR-193b的SW620细胞中其表达水平明显升高;体外划痕实验结果显示SW480-miR-193b-siRNA细胞体外迁移能力显著升高,而在转染mimic-miR-193b的SW620细胞中其迁移能力较对照组显著降低;Transwell小室结果显示体外细胞侵袭及迁移实验中过表达miR-193b均可明显抑制SW620细胞的侵袭转移能力,而抑制miR-193b的表达可显著增加SW480侵袭转移潜能;Western印迹显示过表达miR-193b可显著降低SW620细胞中uPA蛋白的表达,抑制miR-193b可明显提高SW480中uPA蛋白的表达水平。结论 miR-193b通过下调uPA可抑制结肠癌细胞的侵袭和转移。

关键词：结肠癌 miRNAs 侵袭转移尿激酶型纤溶酶原激活剂

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