目的:探讨微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对人肝癌BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green luorescent protein,EGFP)基因的miR-21表达载体pGL3-miR21-EGFP瞬时转染BEL-...
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目的:探讨微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对人肝癌BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green luorescent protein,EGFP)基因的miR-21表达载体pGL3-miR21-EGFP瞬时转染BEL-7402细胞,实时荧光定量-PCR检测细胞中miR-21的表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化蛋白激酶B[phospho-protein kinase B,p-PKB(又称p-AKT)]、磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)的表达,MTT法检测miR-21过表达对BEL-7402细胞增殖的影响,细胞划痕和Transwell小室法检测miR-21过表达对BEL-7402细胞迁移和侵袭能力的影响。将pGenesil-shAKT载体转染BEL-7402细胞,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-21的表达,蛋白质印迹法检测细胞中AKT和p-AKT的表达水平,MTT法和细胞划痕实验检测pGenesil-shAKT对BEL-7402细胞增殖和迁移的影响。结果:与空白对照组(未转染质粒的BEL-7402细胞)相比,pGL3-miR21-EGFP转染后,BEL-7402细胞中miR-21的表达水平明显上调(P<0.01),p-AKT和p-ERK的表达水平同时上调(P<0.05);与空白对照组相比,miR-21的过表达明显促进了BEL-7402细胞的增殖、迁移和侵袭的能力(P<0.05)。pGenesil-shAKT转染BEL-7402细胞后,伴随着AKT和p-AKT表达水平的下调,细胞的增殖和迁移能力均明显下降(P<0.05),而细胞中miR-21的表达水平无明显变化。结论:MiR-21可能通过AKT/ERK信号通路促进BEL-7402细胞的增殖和迁移。
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