检索结果-内蒙古大学图书馆

2015南方消化疾病及消化内镜国际论坛

作者：阮族明陈晖广西医科大学第一附属医院消化内科广西南宁 530021

目的探讨嗜酸细胞性胃肠炎(eosinophilic gastroenteritis,EG)的临床及内镜特点,分析易误诊的主要原因,以提高临床诊治水平。方法收集广西医科大学第一附属医院2004～2014 年期间收治的EG 患者24 例,对患者的病史、临床表现、实验室... 详细信息

目的探讨嗜酸细胞性胃肠炎(eosinophilic gastroenteritis,EG)的临床及内镜特点,分析易误诊的主要原因,以提高临床诊治水平。方法收集广西医科大学第一附属医院2004～2014 年期间收治的EG 患者24 例,对患者的病史、临床表现、实验室检查、影像学特点、内镜及病理特点、诊断与鉴别诊断、治疗情况进行回顾性分析。

关键词：嗜酸细胞性胃肠炎临床特点

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Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1166-1170页

作者：胡代曦张锡峰张超钟沁冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定... 详细信息

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

关键词： wnt3 肝前体细胞上皮-间质转化肝硬化

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汉滩病毒包膜糖蛋白糖基化位点突变体重组假病毒的构建及初步鉴定

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现代生物医学进展 2013年第30期13卷 5811-5816,5824页

作者：于澜张亮张蕾王芳刘梓谕程林峰薛添吴兴安徐志凯张芳琳第四军医大学微生物学与病原生物学教研室陕西西安710032 西北大学生命科学学院陕西西安710032

目的:为进一步研究汉坦病毒包膜糖蛋白的糖基化与病毒的感染性和免疫原性等的关系,构建含有汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(GP)糖基化位点突变体的重组假病毒。方法:利用定点突变的方法,分别突变了HTNV 76-118株的5个N-糖基化位点并克隆入慢... 详细信息

目的:为进一步研究汉坦病毒包膜糖蛋白的糖基化与病毒的感染性和免疫原性等的关系,构建含有汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(GP)糖基化位点突变体的重组假病毒。方法:利用定点突变的方法,分别突变了HTNV 76-118株的5个N-糖基化位点并克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染293T细胞,构建5株重组假病毒。感染HEK293细胞后,进行RT-PCR鉴定及免疫荧光检测。结果:经测序显示构建的含有N-糖基化位点突变体的5个重组假病毒原序列中的天冬酰胺(N)均被置换为谷氨酰胺(Q)。RT-PCR结果显示5个重组假病毒均有HTNV GP基因的表达。免疫荧光检测5个重组假病毒均可表达HTNV的Gn和Gc蛋白。结论:成功构建了含有HTNV包膜糖蛋白糖基化位点突变体的5个重组假病毒,分别命名为rLV-M1、rLV-M2、rLV-M3、rLV-M4和rLV-M5。本研究为明确N-糖基化对汉坦病毒生物学活性的影响提供了有利的研究工具,并为汉坦病毒疫苗及致病机理的进一步研究打下了一定的基础。

关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白糖基化位点突变株重组假病毒

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骨髓间充质干细胞在小鼠早衰性骨质疏松中的细胞生物学功能研究

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中国病理生理杂志 2013年第4期29卷 707-712页

作者：杲丽胡成虎金岩第四军医大学口腔医学院口腔组织病理学教研室组织工程研发中心陕西西安710032

目的:研究在小鼠早衰性骨质疏松症中骨髓间充质干细胞(BMMSCs)功能的变化,为揭示骨质疏松发病机制提供理论依据。方法:以早衰小鼠(SAMP6)为动物模型(对照小鼠:SAMR1),分离培养3个月与6个月小鼠的BMMSCs,利用流式细胞术进行干细胞表型鉴... 详细信息

目的:研究在小鼠早衰性骨质疏松症中骨髓间充质干细胞(BMMSCs)功能的变化,为揭示骨质疏松发病机制提供理论依据。方法:以早衰小鼠(SAMP6)为动物模型(对照小鼠:SAMR1),分离培养3个月与6个月小鼠的BMMSCs,利用流式细胞术进行干细胞表型鉴定后用于基因芯片检测筛选差异表达基因,并对该结果进行了Pathway分析。分离培养鉴定2组的BMMSCs并对其成骨与成脂的分化能力进行比较,在诱导分化后进行实时定量RT-PCR检测相关基因的表达,揭示骨髓间充干细胞功能在早衰性骨质疏松中的改变。结果:本研究证明了随着年龄的增长,骨髓间充质干细胞成骨能力降低而成脂能力增高;芯片结果的Pathway分析显示,转化生长因子β(TGF-β)信号通路有4个关键基因发生改变,提示TGF-β信号通路可能在此过程中发挥重要作用。结论:随着年龄增长,早衰性骨质疏松个体的骨髓间充质干细胞生物学功能及TGF-β通路发生了改变,为通过改变骨髓间充质干细胞的生物学功能从而有效逆转治疗、改善骨质疏松状态提供靶点和理论依据。

关键词：骨髓间充质干细胞骨质疏松衰老细胞分化

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慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白转染大鼠角膜的效率及其毒性研究

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解放军医学杂志 2014年第4期39卷 307-310页

作者：刘立赵敏重庆医科大学附属第一医院眼科重庆市眼科学重点实验室重庆400016

目的观察慢病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白(LV-EGFP)经不同浓度和途径转染大鼠角膜的转染效率及毒性,探讨慢病毒转染角膜的最佳途径。方法 25只SD大鼠,随机分为5组。A组为感染复数(MOI)=5点眼组,B组为MOI=5结膜下注射组,C组为MOI=10... 详细信息

目的观察慢病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白(LV-EGFP)经不同浓度和途径转染大鼠角膜的转染效率及毒性,探讨慢病毒转染角膜的最佳途径。方法 25只SD大鼠,随机分为5组。A组为感染复数(MOI)=5点眼组,B组为MOI=5结膜下注射组,C组为MOI=10点眼组,D组为MOI=10结膜下注射组,E组为MOI=10离体转染组,各组予以相应浓度LV-EGFP。7d后取转染后角膜于荧光显微镜下观察荧光分布,并分析荧光强度;HE染色观察转染后角膜细胞病理改变。结果荧光显微镜观察显示,相同MOI组之间比较,点眼方式的角膜荧光分布较结膜下注射方式均匀。各组相对荧光强度值分别为:A组0.1803±0.0440,B组0.1061±0.0434,C组0.2369±0.0157,D组0.2002±0.0307,E组0.2434±0.0173,点眼方式的角膜荧光强度高于结膜下注射方式(P<0.05),且MOI增加时EGFP表达增强(P<0.05)。E组荧光强度明显高于A、B、D组(P<0.05),但与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示各组角膜细胞形态正常,未见明显凋亡细胞。离体转染角膜经过7d培养液转染后,角膜内皮细胞生长良好,未出现皱缩、变形及缺失等病理改变。结论 LV-EGFP可在较低MOI下有效转染大鼠角膜,且持续转染的安全性良好;点眼方式的转染效率高于比结膜下注射,提高MOI能提高角膜转染的效率。

关键词：慢病毒角膜绿色荧光蛋白质类

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青蒿琥酯对食管癌Ec9706细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

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解放军医学杂志 2014年第1期39卷 25-29页

作者：刘亮左连富王静石家庄河北医科大学第四医院肿瘤研究所流式细胞分析室 050011

目的研究青蒿琥酯(Art)对食管癌Ec9706细胞线粒体膜电位的影响,探讨Art诱导食管癌Ec9706细胞凋亡的作用机制。方法以不同浓度(30、60、120μmol/L)的Art作用于食管鳞癌Ec9706细胞12h,对照组以生理盐水代替Art。光学显微镜下观察细胞形... 详细信息

目的研究青蒿琥酯(Art)对食管癌Ec9706细胞线粒体膜电位的影响,探讨Art诱导食管癌Ec9706细胞凋亡的作用机制。方法以不同浓度(30、60、120μmol/L)的Art作用于食管鳞癌Ec9706细胞12h,对照组以生理盐水代替Art。光学显微镜下观察细胞形态变化,采用流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡水平,荧光染料罗丹明123染色检测细胞线粒体膜电位水平。采用流式细胞术检测Caspase-3蛋白表达水平。结果 Art作用后Ec9706细胞形态上呈现不同程度的变化,贴壁细胞变圆,体积变小,飘浮于细胞培养液中。不同浓度Art作用12h后,Ec9706细胞表现出不同程度的细胞凋亡且呈药物剂量依赖性,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);Ec9706细胞线粒体膜电位表现出不同程度降低且呈药物剂量依赖性,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Art组Ec9706细胞中Caspase-3蛋白表达水平显著增加(P<0.01),且呈药物剂量依赖性。结论 Art诱导Ec9706细胞凋亡的机制可能是通过降低细胞线粒体膜电位,启动内源性线粒体凋亡途径,激活Caspase-3蛋白,从而诱导细胞凋亡。

关键词：青蒿琥酯细胞凋亡膜电位线粒体流式细胞术

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MLL在HOXAIO表达调控中作用的实验研究

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第三军医大学学报 2013年第17期35卷 1797-1800页

作者：姚婕方立超郑峻松第三军医大学医学检验系临床检验学教研室重庆400038

目的:通过研究在急性髓性白血病细胞中HOXA10表达调控机制,探讨HOXA10调控作为AML防治新靶点的可能性。方法:以不同剂量雌二醇(E2)在不同时间点刺激急性粒细胞白血病细胞株(HL-60),以不刺激的HL-60细胞作参照应用RT-PCR检测HOXA10基因... 详细信息

目的:通过研究在急性髓性白血病细胞中HOXA10表达调控机制,探讨HOXA10调控作为AML防治新靶点的可能性。方法:以不同剂量雌二醇(E2)在不同时间点刺激急性粒细胞白血病细胞株(HL-60),以不刺激的HL-60细胞作参照应用RT-PCR检测HOXA10基因表达活性的差异明确E2对HOXA10表达的活化作用,并在E2刺激下以反义寡核苷酸转染技术分别敲除ERα、ERβ和MLLs(MLL1-4)后再检测HOXA10mRNA和蛋白表达的变化确定哪一种雌激素受体的活化与HOXA10的表达相关,哪一种MLL对HOXA10表达有调控作用。以ChIP实验检测MLL和HOXA10的相互作用,再以Western blot检测E2刺激前后组蛋白H3K4甲基化状态以明确MLL是否通过表观遗传学途径调控HOXA10的表达。结果:在E2 50 nmol/L 6h刺激下HOXA10表达明显升高,ERα和ERβ反义寡核苷酸转染后HOXA10表达均有下降,MLL1表达沉默时HOXA10表达明显降低(P<0.05),MLL1可以结合到HOXA10启动子上的ERE区域而组蛋白H3K4甲基化状态在E2刺激后明显高于刺激前(P<0.05)。结论:急性髓性白血病细胞的HOXA10基因表达受MLL1蛋白调控,可能为急性髓性白血病的致病机制分析提供了一个新的方向, MLL1介导的HOXA10表达的改变有可能成为急性髓性白血病的防治新靶点。

关键词：肿瘤细胞培养的白血病髓样急性/代谢白血病髓样急性/病理学雌二醇/投药和剂量雌激素受体α/代谢雌激素受体β/代谢基因表达调控组蛋白类/代谢人类

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肺炎链球菌蛋白PotD的表达纯化及免疫活性分析

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第三军医大学学报 2014年第16期36卷 1660-1663页

作者：闵迅黄健黄美容钟文董杰陈特张雪梅遵义医学院附属医院、医学检验科贵州遵义563000 遵义医学院附属医院、医学输血科贵州遵义563000 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016

目的研究PotD蛋白免疫保护活性,探讨其作为疫苗候选蛋白的可能性。方法构建、表达、纯化PotD蛋白,通过免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体,评估其免疫原性,并进一步分析其对儿童的免疫保护效应;采用PCR技术扩增8株不同血清型***中PotD基因... 详细信息

目的研究PotD蛋白免疫保护活性,探讨其作为疫苗候选蛋白的可能性。方法构建、表达、纯化PotD蛋白,通过免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体,评估其免疫原性,并进一步分析其对儿童的免疫保护效应;采用PCR技术扩增8株不同血清型***中PotD基因后进行测序鉴定分析基因序列的保守性;再通过western blot技术分析8株菌中PotD蛋白的表达水平,以评估PotD蛋白保守性;采用粘附抑制实验分析PotD蛋白的免疫保护活性。结果成功获得纯度大于95%的PotD目的蛋白,将其免疫小鼠后获得高效价抗体;在10岁以下儿童***感染者及健康带菌者血清中均有抗PotD存在;对8株不同血清型*** PotD基因进行PCR扩增和测序发现8株细菌中该基因具有高度保守性;Western blot技术分析证实,8株不同血清型***均表达该蛋白;粘附抑制实验证实,重组PotD蛋白及其抗体均能够显著抑制***对A549细胞的粘附作用。结论 PotD蛋白制备方便,在我国流行***血清型中有良好的保守性和免疫原性,能够显著抑制***对宿主细胞的粘附,可能成为良好的蛋白疫苗靶点。

关键词：肺炎链球菌谷氨酰胺tRNA合成酶保守性抗原性

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菖远胶囊给大鼠长期大剂量用药的安全性评价

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现代生物医学进展 2013年第3期13卷 427-433页

作者：肖会敏王萌何悦谢艳华王四旺第四军医大学药学院天然药物学教研室陕西西安710032

目的:研究菖远胶囊对大鼠长期大量用药后的安全性影响。方法:通过对大鼠连续灌胃菖远胶囊13周、26周和停药4周,分别与正常对照组比较血液、生化、病理学检查结果。结果:①菖远胶囊各剂量组给药后5～30 min动物自主活动有所减弱,30 min... 详细信息

目的:研究菖远胶囊对大鼠长期大量用药后的安全性影响。方法:通过对大鼠连续灌胃菖远胶囊13周、26周和停药4周,分别与正常对照组比较血液、生化、病理学检查结果。结果:①菖远胶囊各剂量组给药后5～30 min动物自主活动有所减弱,30 min后自主活动逐渐恢复正常,各剂量组大小便颜色偏深,高剂量组比较明显,停止给药后,上述症状均恢复正常;②大鼠血液细胞学、生化学指标中有个别指标在给药初期(13周)出现明显差异,继续给药至26周,未见明显异常,停止给药后恢复正常;高剂量组动物体重有一定降低,个别脏器质量及指数增大,停药4周后均能恢复正常;病理检查结果示,菖远胶囊各剂量组主要脏器未见由药物引起的病理学改变;整个实验期间各组动物未见死亡;③大鼠长期给予菖远胶囊的安全剂量为4.0 g/kg。结论:菖远胶囊对动物的毒性较低,是值得开发的一个中药新药。

关键词：菖远胶囊大鼠长期毒性安全评价

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壳聚糖纳米微粒对靶向转化生子因子-βⅡ型受体核酸适配子的缓释作用及其安全性研究

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中华实验眼科杂志 2013年第4期31卷 352-357页

作者：陈侠李磊鲜光军王薇朱晓燕谢琳第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆 400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科一室重庆400042

背景本课题组前期已筛选得到了靶向转化生长因子-β（TGF-β）Ⅱ型受体（TpRⅡ）的核酸适配子S58，并证明S58可抑制TGF-β介导的人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转分化作用。壳聚糖纳米微粒（ CS-NP）已被证实可作为药物载体，但其包埋S58... 详细信息

背景本课题组前期已筛选得到了靶向转化生长因子-β（TGF-β）Ⅱ型受体（TpRⅡ）的核酸适配子S58，并证明S58可抑制TGF-β介导的人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转分化作用。壳聚糖纳米微粒（ CS-NP）已被证实可作为药物载体，但其包埋S58后抑制HTFs增生的有效性和安全性值得关注。目的制备CS（S58）-NP，研究其生物学特性，并观察CS～NP对S58的保护及缓释作用。方法本研究所用细胞由本课题组前期原代培养的HTFs传代而来，取第4-10代对数生长期的细胞用于实验。以S58为实验对象，通过离子交联法制备出不同浓度CS-NP与S58表面电荷比（N／P比）的CS（S58）-NP。应用Zeta粒径分析仪检测CS（S58）-NP粒径及其Zeta电位；用扫描电子显微镜观察粒径的大小、形态及分布情况；采用琼脂糖凝胶电泳法检测CS-NP与S58的结合情况，并评估CS（S58）-NP对核酸酶的抵抗能力；用紫外分光光度计检测不同时间点缓释液PBS中S58的含量，以判断CS（S58）-NP缓释S58的情况；利用乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测CS（S58）-NP对HTFs的细胞毒性。结果制备的CS（S58）-NP粒径分布于130～270nnl之间，其Zeta电位分布范围为＋16-＋28mV；扫描电子显微镜下可观察到CS（S58）-NP呈球形，分布均匀，粒径在300nm以内。当CS-NP与S58N／P比例为10、20、30、40时，CS（S58）．NP平均包封率分别为88．9％、89．3％、91．7％、90．5％；加入DNaseI组与无DNaseI组比较，S58经CS-NP包裹后能够明显抵御DNaseI的酶解作用；体外缓释实验发现，CS-NP在PBS中持续缓慢释放S58，随着时间的延长，S58累计释放量增加，以24～36h释放速率最高，96hS58累计释放量为100％。随着CS（S58）-NP浓度的增加，HTFs上清液中LDH相对释放率逐渐增加，差异有统计学意义（F=588．018，P=0．000）。50nmol／LCS（S58）-NP处理HTFs48h时LDH相对释放率最大，为（12．853±0．375）％。结论CS-NP对S58具有保护及缓释作用，其浓度在50nmol／L以下时对HTFs的毒性作用小，具有良好的生物相容性，可用于核酸适配子的载体研究。CS（S58）-NP可用于抑制TGF-β介导的HTFs转分化研究。

关键词：核酸适配子纳米载体壳聚糖 Tenon囊成纤维细胞转化生长因子生物靶向治疗

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