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中华口腔医学会第四届颞下颌关节病学及（牙合）学专业委员会换届大会暨第十一次全国颞下颌关节病学及（牙合）学学术研讨会

作者：吴敏婷刘静黄敏辉暨南大学医学院口腔系口腔修复学教研室

目的尝试正畸牙矫治结束后对其牙周组织给予外源性IL-4,观测其对正畸牙矫治后复发的影响,探明IL-4对牙周组织的改建作用,为临床进一步探索借助外源性因子减少正畸牙复发及辅助正畸保持器控制复发,稳固正畸疗效提供实验依据。方法 (1)25... 详细信息

目的尝试正畸牙矫治结束后对其牙周组织给予外源性IL-4,观测其对正畸牙矫治后复发的影响,探明IL-4对牙周组织的改建作用,为临床进一步探索借助外源性因子减少正畸牙复发及辅助正畸保持器控制复发,稳固正畸疗效提供实验依据。方法 (1)25只SPF级7周龄雄性SD大鼠,随机分为A、B、C、D、E5组,建立大鼠上颌双侧正畸牙移动模型,给予50g的力使第一磨牙向近中移动,3周后拆除加力装置并测量第一磨牙位移量。(2)选取上颌第一磨牙颊侧及颚侧注射外源性IL-4,右侧为实验侧,分别按以下剂量注射外源性IL-4:A组(25ng/50μl一周)、B组(25ng/50μl两周)、C组(50ng/50μl一周)、D组(25ng/50μl两周);左侧为对照侧,与右侧同部位注射等量PBS液;E组为空白对照,不给予任何处理。(3)分别测量上颌第一磨牙近中沟与上颌第二磨牙近中沟之间的距离;制备含第一磨牙的双侧上颌牙槽骨组织块,行固定、脱钙、包埋、切片;应用HE染色、ALP染色和TRAP染色,检测移动牙牙周组织的形态学变化及牙周组织内成骨细胞和破骨细胞的成骨与破骨活性。结果 (2)牙齿移动模型加力结束后实验侧和对照侧牙齿移动距离分别为3.70±0.22mm和3.76±0.11mm,无显著性差异;给予外源性IL-4,实验侧距离为0.44±0.16mm,与对照侧牙齿复发距离(0.42±0.12mm)有显著性差异;实验侧复发距离与注射剂量和注射时间成反变关系。(2)注射IL-4一周组,实验侧第一磨牙牙周膜纤维排列规则,近中牙槽骨可见新生骨组织;对照侧近中牙槽骨边缘亦出现新生骨组织,但远中牙槽骨可见较多吸收陷窝和破骨细胞。注射IL-4两周组,实验侧牙周膜纤维排列规则,近远中侧成骨细胞多见,破骨细胞较少;对照侧近远中牙槽骨均可见骨形成和吸收现象,远中侧可见较多破骨细胞。实验侧注射剂量越大,时间越长,新生骨组织越多,牙槽骨吸收陷窝和破骨细胞越少见。(3)ALP染色和TRAP染色,可见实验侧钙结节明显较对照侧多,破骨细胞数量较对照侧少,且两者与剂量和时间呈正相关。结论外源性IL-4能减缓正畸牙齿移动后复发;外源性IL-4在大鼠正畸牙齿移动后能增加成骨活性,促进骨组织生成,同时减弱破骨活性。

关键词： IL-4 成骨细胞破骨细胞 ALP染色 TRAP染色正畸牙移动复发牙周组织大鼠

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小鼠瞳孔对光反射观察方法的建立及其应用研究

小鼠瞳孔对光反射观察方法的建立及其应用研究

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作者：刘锐第四军医大学

学位级别：硕士

瞳孔对光反射(pupillary light reflex，PLR)与视觉系统、丘脑、脑干系统及自主神经系统有着密切的关系[1]，其在视觉系统[2-5]、神经系统[6,7]及精神心理相关疾病[8,9]的诊断和评价中有着重要意义。临床上通常采用光照法直接观察瞳孔... 详细信息

瞳孔对光反射(pupillary light reflex，PLR)与视觉系统、丘脑、脑干系统及自主神经系统有着密切的关系[1]，其在视觉系统[2-5]、神经系统[6,7]及精神心理相关疾病[8,9]的诊断和评价中有着重要意义。临床上通常采用光照法直接观察瞳孔口径及其变化，简单、实用，但是影像学方法能够客观记录瞳孔的细节变化和动态变化，因此后者被广泛用于研究工作。为进一步探索PLR指标在视觉生理和眼科临床研究中的应用，本文建立了小鼠PLR影像学检测方法，探讨了刺激光颜色、强度、麻醉药物、束缚等因素对小鼠瞳孔对光反射的影响。同时结合视网膜电图(electroretinogram,ERG)观察了一种快速视网膜退行性变(retinal degeneration fast，rdf/B6)小鼠的PLR，以进一步探索视网膜功能客观评价方法。材料和方法 1.成年雄性C57BL/6小鼠(SPF级，购自第四军医大学实验动物中心)40只用于预实验和实验研究。rdf/B6小鼠(SPF级)20只由第四军医大学航空航天医学系动物屏障实验室提供。 2.采用远红外摄像镜头拍摄瞳孔，通过图像处理程序分析瞳孔图像动态变化的原理，建立了动物PLR检查系统，并用于观察不同颜色光及其强度刺激下小鼠PLR的动态变化以及麻醉、束缚的影响;采用12通道心电图记录仪(ECG6511, Inc, NihonKohden)记录束缚及麻醉状态下小鼠的心率;采用RETIport系统(Roland Consult，德国)记录ERG。 3.采用SPSS13.0统计学软件对各实验数据进行统计分析。结果 1.刺激光强度对正常C57BL/6小鼠PLR的影响在从2cd/m至256cd/m五个光亮度等级的白、红、绿及蓝色光刺激下，瞳孔收缩潜伏期(pupillary constriction latency,CL)无显著变化。瞳孔收缩幅度(constrictionamplitude，CA)与白、绿和蓝色的刺激光强度呈直线正相关(P<0.01)，而与红色光强度无明显相关。瞳孔收缩速度(constriction velocity，CV)及瞳孔复张速度(re-dilationvelocity，RV)与白光、绿光及蓝光亮度等级呈直线负相关(P<0.01)，与红色光强度无明显相关。 2.刺激光颜色与正常C57BL/6小鼠PLR动态分析曲线参数的关系在弱光强(2cd/m)刺激时，红色光刺激时的CL较其他颜色光略有延长(P<0.05)其他三种光之间无明显差异;红色光刺激引起的CA明显小于白光(P<0.001)，但是白光与绿色光与蓝色光刺激引起的CA变化之间无明显差异;CV、RV的变化与刺激光的颜色无关。在光强为8cd/m、32cd/m、128cd/m、256cd/m时，红色光刺激引起的PLR的CA明显小于白光(P<0.05)，蓝色光刺激引起的CA值明显大于白光(P<0.05)，绿色光刺激的CA与白光无明显差异(P>0.05);红色光引起的CV稍大于白光(P<0.05)，蓝色光引起的CV明显小于白光(P<0.05)，绿色光与白色光刺激引起的CV无明显差异(P>0.05);红色光引起的RV均大于白光(P<0.05)，蓝色光引起的RV小于白光(P<0.05),绿光与白光刺激引起的RV无明显差异(P>0.05)。 3.束缚适应与麻醉药物对小鼠PLR的影响在束缚适应1d、2d和7d时，小鼠瞳孔直径自主调节幅度之间无显著差异，而在3d、4d和5d时，瞳孔直径自主调节幅度明显小于其他4天(P<0.05)。束缚适应5天后，束缚组小鼠瞳孔初始直径(initial pupil diameter，IPD)与塞拉嗪组小鼠之间无明显差异，但是大于氯胺酮麻醉组及氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组(P<0.01)。氯胺酮组与氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组二者之间的IPD无明显差异;束缚组小鼠的瞳孔收缩最小值(minimum pupil diameter。minPD)与氯胺酮麻醉组及氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组相比均无明显差异。在强度为200cd/m，波长为625nm光刺激下，塞拉嗪麻醉组表现为PLR消失，瞳孔直径未见变化。束缚组PLR的CL值小于氯胺酮组及氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组(P<0.05)，CA值大于后两组(P<0.01)，而后两组间无明显差异;束缚组CV值则小于氯胺酮麻醉组CV(P<0.01)，氯胺酮麻醉组大于氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组(P<0.01);三组间的RV值无明显差异。在束缚适应的7d中小鼠心率无明显改变。麻醉后，氯胺酮组、塞拉嗪组与氯胺酮联合塞拉嗪麻醉组三者之间的心率无明显差异，但均小于束缚组(P<0.01)，其中氯胺酮组部分小鼠出现心律不齐。 4. C57BL/6小鼠、rdf/B6小鼠彩色光ERG比较在暗适应条件下，红色光刺激引起C

关键词：瞳孔对光反射测量刺激光亮度刺激光颜色内在感光性视网膜神经节细胞小鼠快速视网膜变性小鼠

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HCN1在胃肠道分布特点及莱菔苷对其作用研究

HCN1在胃肠道分布特点及莱菔苷对其作用研究

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作者：徐纯第四军医大学

学位级别：硕士

背景：胃肠动力障碍疾病是临床常见疾病，困扰人类健康，不同程度上降低患者的生活质量，给病人、家庭及社会造成了巨大的心理及经济负担。胃肠动力障碍疾病一直被认为是由于胃肠道平滑肌的运动发生异常，尤其是起搏功能异常导致。近年... 详细信息

背景：胃肠动力障碍疾病是临床常见疾病，困扰人类健康，不同程度上降低患者的生活质量，给病人、家庭及社会造成了巨大的心理及经济负担。胃肠动力障碍疾病一直被认为是由于胃肠道平滑肌的运动发生异常，尤其是起搏功能异常导致。近年来，cajal间质细胞（Interstitial cells of Cajal, ICC）成为胃肠起搏的研究热点，被认为在胃肠道起搏过程中起重要作用。有研究表明，在哺乳动物中超极化激活环核苷酸门控阳离子通道（Hyperpolarization-activated cyclicNucleotide-gated channels, HCN）为具有慢波起搏特性的离子通道，其在心脏起搏以及神经电活动方面的作用已非常明确，该通道有4个亚型，各亚型间虽功能上存在一定差异，但均具有以下特点：超极化激活；钠、钾、钙离子混合通透；直接受环磷酸腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate,cAMP）调控。目前研究证实，该通道不仅与神经系统疾病联系紧密，与胃肠道动力障碍疾病也存在一定联系。而对于HCN1亚型，本实验室前期预实验通过超微结构观察、免疫荧光双标、蛋白胚胎发育情况观察到HCN1在ICC上的特异分布，进一步离体实验通过给以HCN1特异性阻断剂ZD7288观察离体肌条的收缩变化，证明HCN1不但特异分布于ICC并可能是胃肠道起搏的始发离子通道，为探讨胃肠动力起搏的机制研究提出了新的理论。就目前临床上促胃肠动力药物的应用与开发方面来看依然是十分有限，尤其是无明显毒副作用的中药的开发尚需亟待解决。前期我们研究发现，白萝卜子即莱菔子具有显著促胃肠动力的功能，但其促胃肠功能的机制及可能靶点尚不明确。在此基础上，进一步研究莱菔粗提物的提纯物莱菔苷（Raphanusin）对胃肠道的作用机制对开发具有祖国医学传统特色的促胃肠动力新药有重要意义。目的：本研究拟利用免疫荧光双标记观察HCN1在大鼠胃肠各部分的分布特点以及胃肠道各部分的电生理特点，通过对大鼠灌胃进一步观察莱菔子提纯物莱菔苷对胃肠各部分电生理的影响，以及给予HCN1通道阻断剂ZD7288干扰后莱菔苷对胃肠电活动的影响情况。并进一步进行离体ICC原代培养，观察HCN1在离体ICC上的分布情况，并对离体ICC进行加药处理，对比莱菔苷与传统促胃肠动力药物胃复安对离体ICC的影响，从而探索莱菔苷对胃肠起搏通道HCN1的作用情况，为研究新的胃肠动力机制提供理论依据。方法： 1．采用免疫荧光法，观察离子通道HCN1在胃肠道分布的特点，并采用电生理的方法，测定胃肠道不同部位胃肠运动的状况。 2．给予莱菔苷灌胃后，观察给药前后胃肠道不同部位的电活动的变化；再采用尾静脉注射HCN1特异性阻断剂ZD7288予以干预，观察予以同剂量莱菔苷灌胃后，胃肠道不同部位电活动给药前后变化情况，并以等量生理盐水灌胃作为对照进行观察。 3．采用酶消化法对新生大鼠胃肠道cajal间质细胞进行原代培养并鉴定。 4．将培养至2周的离体ICC进行加药处理，分别加入莱菔苷，胃复安，DMEM低糖培养液和生理盐水，比较莱菔苷与传统胃药胃复安对胃肠动力作用与影响。结果： ***1在胃肠道的分布特点及电生理特点采用免疫荧光双标记技术的方法，对大鼠胃肠进行HCN1与c-kit双重标记染色。结果显示：在胃、十二指肠、空肠及回肠部可见HCN1荧光标记，以胃底-体交界处分布最为密集，后依次为十二指肠、空肠、回肠。电生理结果显示：胃底-体交界处电活动频率比十二指肠处相比较慢，存在统计学差异（P<0.05）；空肠与回肠处MMC的各项指标相比均无统计学差异（P>0.05）。 2．莱菔苷对大鼠胃肠道动力的影响及其可能的作用靶点采用灌胃的方法，给予大鼠1ml/kg浓度的莱菔苷观察到：胃、十二指肠处电活动波幅及频率与给药前相比明显增加，有统计学差异（P<0.05）；空肠及回肠MMC与给药前相比周期明显缩短、活动期/周期、每分钟快波数明显增加，有统计学差异（P<0.05）。再采用静脉注射给药方式给予HCN1特异性阻断剂ZD7288（0.5mmol/l）予以干预后再给予与前相同浓度的莱菔苷灌胃后观察到：胃、十二指肠处电活动波幅及频率与本组给药前、以及莱菔苷组给药后相比明显减弱，均有统计学差异（P<0.05）；空肠及回肠MMC与本组给药前、莱菔苷组给药后相比周期明显延长、活动期/周期、每分钟快波数明显减少，均有统计学差异（P<0.05）。生理盐水组，给药前后无统计学差异（P>0.05）。 ***的鉴定及HCN1的表达采用酶消化法，对新生SD大鼠的十二指肠和空肠段进行原代培养，接种于置有事先用多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被的24

关键词： HCN1 ICC 起搏机制胃肠道莱菔苷

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氟氏佐剂诱导大鼠慢性前列腺炎疼痛模型中L5-S2脊髓中枢小胶质细胞的活化

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现代生物医学进展 2013年第19期13卷 3623-3625,3670页

作者：张恒沈文浩潘进洪王永权刘丽梅杨忠周占松第三军医大学西南医院全军泌尿中心重庆400038 第三军医大学西南医院病理科重庆400038 第三军医大学神经生物学教研室重庆400038

目的:观察大鼠慢性前列腺炎疼痛模型中L5-S2脊段背角小胶质细胞活化的变化。方法:通过前列腺完全弗氏佐剂注射制作大鼠慢性前列腺炎疼痛模型,对照组注射生理盐水,观察时间为0、4、12、24 d,用热辐射痛阈测定法和前列腺病理进行疼痛模型... 详细信息

目的:观察大鼠慢性前列腺炎疼痛模型中L5-S2脊段背角小胶质细胞活化的变化。方法:通过前列腺完全弗氏佐剂注射制作大鼠慢性前列腺炎疼痛模型,对照组注射生理盐水,观察时间为0、4、12、24 d,用热辐射痛阈测定法和前列腺病理进行疼痛模型鉴定,采用实时荧光定量RT-PCR检测L5-S2脊段后角中小胶质细胞标志物IBA-1的表达。结果:成功建立慢性前列腺炎疼痛大鼠模型,并观察到L5-S2脊髓背角中存在小胶质细胞的活化。结论:慢性前列腺炎疼痛可以引起L5-S2脊髓中枢小胶质细胞活化,小胶质细胞异常活化可引起神经炎性疼痛,有可能与慢性前列腺炎疼痛的持续和泛化有密切关系。

关键词：前列腺痛氟氏佐剂小胶质细胞脊髓中枢

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GFP转染的骨髓来源神经元样细胞桥接修复坐骨神经长距离缺损的研究

GFP转染的骨髓来源神经元样细胞桥接修复坐骨神经长距离缺损的研究

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作者：丁文彬第二军医大学

学位级别：硕士

研究背景周围神经损伤也叫做PNI，它是一种十分常见的临床损伤症状。最近几年，伴随着现代建筑工业、交通业不断发展，周围神经损伤发病人群数量逐渐增加。美国临床医学研究发现，每年都有超过5万起周围神经损伤病例；而在我国，每年都... 详细信息

研究背景周围神经损伤也叫做PNI，它是一种十分常见的临床损伤症状。最近几年，伴随着现代建筑工业、交通业不断发展，周围神经损伤发病人群数量逐渐增加。美国临床医学研究发现，每年都有超过5万起周围神经损伤病例；而在我国，每年都要增加60万到90万周围神经损伤病例[1]。另外，和其他组织细胞相比，神经元在发育成熟阶段无法自行分裂、复制，一旦出现损伤，如果不及时救治很可能造成损伤扩大甚至会失去肌肉运动、感觉功能，从而导致永久残疾瘫痪[2]。这对于病患们的身体及心理健康造成极大伤害，严重降低了病患的生活质量。现阶段，周围神经损伤治疗理论依据主要是周围神经可再生理论，创造神经纤维再生环境，提供相应的神经成长因子和细胞元素，使得受损神经再次生长发育，但并没有使神经快速连接人体感受器、效应器。为解决这一问题，本文提出了“桥接神经元修复周围神经损伤”的治疗方法，就是利用神经元进行连接传递，使得神经快速连接到人体感受器、效应器，缓解机体病变症状，从而达到良好修复治疗效果。目的 1、从家兔身上抽取骨髓，并进行培养保存，将家兔骨髓源性神经组织定向干细胞（简称为NTCSC）作为母体细胞，运用免疫荧光细胞化学鉴定法，判断其是否属于神经干细胞。 2、对NTCSC进行分离鉴定，在此基础上培养第三代干细胞，并转染其携带的GFP慢病毒，最后获得携带GFP病毒的NTCSC。 3、促使携带GFP病毒的NTCSC分化为神经元细胞，培养出能够进行移植的干细胞源性神经元细胞。 4、设置脱细胞神经支架，建立神经再生培养室。 5、通过神经支架培育干细胞源性神经元细胞，在体外形成满足移植条件的工程化神经元组织。 6、在体外培养满足移植条件的工程化神经元组织，认真观察神经支架上的细胞变化情况以及工程化神经元组织的电生理特性。 7、研究工程化神经元组织移植体，观察受损周围神经中GFP转染骨髓神经元细胞存活情况，分析工程化神经元组织对于周围神经损伤的修复效果。方法 1、本研究中的骨髓样本取自于三个月大的家兔，从家兔胫骨平台下抽取2到3毫升骨髓，将家兔骨髓源性神经组织定向干细胞（NTCSC）作为母体细胞。 2、对骨髓神经组织干细胞溶液进行分离培养，等到细胞融合程度达到80%，然后进行传代培养，最终获得第三代NTCSC。接着在新的干细胞溶液中加入10μL浓度为1.5×109pfu/L的GFP慢病毒悬液，将GFP病毒转染到第三代NTCSC上，从而获得携带GFP病毒的NTCSC。 3、在感染GFP病毒的NTCSC培养基中加入2000nmol/L的RA诱导剂和500ng/mL的SHH诱导剂，促使母体细胞分为化神经元细胞。 4、选用长度为10厘米的医学硅胶管，把它放到零下80度的冰箱中进行冷冻，然后取出干燥成形的硅胶管制成胶原-壳聚糖支架。然后从家兔坐骨神经上剪掉0.5厘米，让神经组织自然回缩，出现1.5厘米的神经缺损，接着用清洁硅胶管缝接受损神经两端，获得实验动物模型。 5、制作20个家兔坐骨神经1.5厘米缺损的实验模型，10个自体神经移植模型。30只家兔随机平均分为三组，进行实验研究。实验1组(采用空支架移植)：从家兔坐骨神经上剪掉0.5厘米，让神经组织自然回缩，出现1.5厘米的神经缺损，把细胞支架和坐骨神经缺损两端进行缝合，沿纵轴放入微量注射器，以1.5毫米为间隔，选取11个注射点，把160μL细胞悬液分散注入脱细胞神经支架。实验2组（采用细胞支架）：把浓度为107细胞数/ml的NTCSC神经细胞悬液，用微量注射器抽取160μL的细胞悬液，方法和上面相同。实验3组（采用神经移植）：从家兔身上截取1.5厘米的坐骨神经，把神经两头调换后重新缝合。 6、在体外培养满足移植条件的工程化神经元组织，认真观察神经支架上的细胞变化情况以及工程化神经元组织的电生理特性。通过研究体内工程化神经元组织移植体，在细胞移植4周后进行动物行为学检测，8周后进行肌肉力量检测，12周后进行肌电图分析。对受损周围神经中感染GFP病毒的骨髓神经元样本细胞存活情况进行观察分析，探讨“桥接神经元修复周围神经损伤”治疗方法可行性，评价分析工程化神经元组织对于受损周围神经的修复治疗效果。结果 1、通过观察脱细胞神经支架中移植细胞生长、分化情况发现：神经元细胞的NTCSC可以在神经支架上培育存活，并且成片均匀分布，生长势头良好。细胞液充足，细胞膜完整光滑，可以清晰看到细胞核轮廓。这表明NTCSC通过脱细胞神经支架顺利实现移植，母体细胞在移植环境中能够正常存活。通过免疫组织化学检测发现：Nestin阳性细胞利用脱细胞神经支架顺利完成移植，并保持神经前体细胞在一段时间内结构稳定，实现自我更新。另外，通

关键词：骨髓来源神经元样细胞桥接修复坐骨神经长距离缺损 GFP转染

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移居汉族高原红细胞增多症多导睡眠监测

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第三军医大学学报 2013年第7期35卷 679-681页

作者：何兵李素芝第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 西藏军区总医院拉萨850007

目的研究高原红细胞增多症(High altitude poly cythemia,HAPC)夜间睡眠呼吸及血氧饱和度(arterial oxy-gen saturation,SaO2)特点,为临床合理治疗提供依据。方法以40例患HAPC的汉族移居者为研究对象(HAPC组),并以20例健康的汉族移居者... 详细信息

目的研究高原红细胞增多症(High altitude poly cythemia,HAPC)夜间睡眠呼吸及血氧饱和度(arterial oxy-gen saturation,SaO2)特点,为临床合理治疗提供依据。方法以40例患HAPC的汉族移居者为研究对象(HAPC组),并以20例健康的汉族移居者作为对照组。2组在安静、舒适的睡眠监测室内行整夜多导睡眠监测。观察呼吸暂停/低通气指数(apnea-hypopnea index,AHI)、呼吸暂停指数(apnea index,AI)、低通气指数(hypopnea index,HI)、清醒SaO2(awakeSaO2,ASaO2)、睡眠平均SaO2(mean SaO2,MSaO2)、最低SaO2(lowest SaO2,LSaO2)、SaO2下降百分比(percentage of reducedSaO2,A-MSaO2%)、氧减饱和度指数(oxygen desaturation index,ODI4)、氧减时间百分比(percentage of time for ODI4,TODI4%)等指标。睡眠监测后填写匹兹堡睡眠质量问卷(pittsburgh sleep quality index,PSQI),并抽取静脉血检测红细胞(red blood cell,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、红细胞压积(haematocrit,HCT)。结果 HAPC组RBC、HGB、HCT显著高于对照组(P<0.01);2组PSQI总分及各因子计分无显著差异性(P>0.05);2组AHI、AI无显著差异(P>0.05),但HAPC组HI显著高于对照组(P<0.05);HAPC组ASaO2、MSaO2、LSaO2显著低于对照组,A-MSaO2%、ODI4、TODI4%显著高于对照组(P<0.05)。结论 HAPC患者夜间睡眠期间以低通气及SaO2水平显著降低为主要特征。

关键词：高原红细胞增多症睡眠多导睡眠监测高海拔

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超顺磁纳米γ-Fe2O3材料的磁热特性研究

超顺磁纳米γ-Fe2O3材料的磁热特性研究

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作者：翟明明第四军医大学

学位级别：硕士

肿瘤治疗的方法随着医学研究的进展而层出不穷，但是目前治疗肿瘤的主要手段依然是手术、放疗还有化疗。物理医学以及医学影像学的研究发展，致使物理治疗逐渐成为医学工程研究的热点，其中热疗即为当前国内外学者研究的热点之一。将靶... 详细信息

肿瘤治疗的方法随着医学研究的进展而层出不穷，但是目前治疗肿瘤的主要手段依然是手术、放疗还有化疗。物理医学以及医学影像学的研究发展，致使物理治疗逐渐成为医学工程研究的热点，其中热疗即为当前国内外学者研究的热点之一。将靶区温度加热至41～46℃热损伤肿瘤细胞的方法称为肿瘤热疗；将靶区温度加热至56℃以上治疗肿瘤的方法称为热消融或者热切除肿瘤法。目前常用的射频、激光、聚焦超声、全身热疗、隔离灌注等热疗方法，因为其对肿瘤的靶向能力差，容易导致肿瘤临近正常组织受到损伤，而限制了他们的临床应用范围。磁介导热疗（MegneticMediated Hyperthermia，MMH）因其具有较强的靶向性，可在体外交变磁场通过磁滞现象或诱导涡流等致使进入肿瘤病灶局部的磁性粒子或磁种产热，磁性材料将热传导给癌细胞而不损伤邻近正常组织的优点，成为非常具有前景的新一代肿瘤热疗方法之一。 MMH的概念于1957年首先由Gilchrist等描述，需要解决的关键因素包含以下两个：一个是高产热效率的磁性材料，一个是适用于临床且对人体无损害的磁场发生设备。在热疗技术中，磁性纳米材料因为具有普适性、高特征吸收率（吸收率是指投射到物体上而被吸收的热辐射能与投射到物体上的总热辐射能之比）等特点，受到学者们的广泛关注。但是由于磁性纳米粒子材料的肿瘤靶向特异性不是很稳定，所以限制了磁介导热疗的临床广泛应用。以往的研究发现光敏剂卟啉衍生物具有很好的肿瘤亲和性，因此可以利用卟啉衍生物对肿瘤组织的亲和力从而将卟啉衍生物作为表面修饰，包埋超顺磁性纳米粒子，输运到达肿瘤组织并与之结合，在适宜的外交变磁场的反复磁化下，产生磁滞效应等而发热，并将热传递给肿瘤细胞，从而达到高温灭活肿瘤细胞、组织的目的。本文从实验用磁场发生装置的研制、实验用纳米粒子的研制、纳米材料磁热特性三方面进行了探讨性研究，为今后的卟啉包裹体超顺磁性纳米材料磁滞热疗肿瘤技术方法研究提供了有力的支持。首先本实验设计研制了磁滞热疗肿瘤用磁场发生装置。目的是设计一种磁感应热疗用交变磁场发生装置适合于实验室研究使用，验证理论激发磁场参量值的正确性。所采用的电路设计制作方法为，以555时基芯片作为核心，利用RC振荡电路转换为正弦波信号，加入放大器进行电流放大，外接密绕线圈，从而产生所需磁场用于实验研究。设计结果表明该装置可产生50-150kHz的正弦波形磁场，可使微量纳米磁性粒子集合体产热。该磁场发生装置成本低，精度高，性能稳定，参数调整方便，为在实验室内做磁热疗肿瘤基础探究提供必要的手段。其次本实验对纳米粒子Fe2O3的制备方法进行了研究比较，目的是通过固相研磨、化学加热沉淀以及均匀沉淀三种不同方法制备纳米氧化铁粒子Fe2O3，从中选择具有超顺磁性特质的纳米粒子晶型，为在实验室中进行药物包被，制作磁滞热疗肿瘤用纳米材料做前期准备，并对制备方法从制备时间、粒子粒度以及纯度等方面进行比较。本实验采用的方法为，利用化学分析纯级别的氯化铁FeCl3·6H2O、氯化亚铁FeCl2·4H2O、氢氧化钠NaOH、硝酸铁Fe（NO3）3·9H2O等作为初始原料，分别采用固相研磨法、化学加热沉淀法以及均匀沉淀法制备出磁性纳米粒子，利用XRD比较粒子晶型，选出超顺磁性纳米粒子（γ-Fe2O3），并通过场扫描电子显微镜观察粒径等特质。最后的结果表明，固相研磨法可能会使粒子晶格畸变、团聚现象严重，化学加热沉淀法所得粒子粒径好、但是受影响因素较多，前二者生成γ-Fe2O3；均匀沉淀法可以调节纳米粒子核形成速率、粒径大小可以控制，生成α-Fe2O3。因此通过比较分析，得出结论，化学沉淀法操作简单适合于实验室制备实验用超顺磁性纳米粒子（γ-Fe2O3）。最后本实验对表面改性后的γ-Fe2O3在交变磁场中的产热进行了初步探究。利用的方法为，取15mg表面改性的γ-Fe2O3制成75μl流体分别放在同一交变磁场发生装置内的10A、20A、30A的不同设定电流下，观察磁纳米粒子是否发热，观察同一交变磁场输出不同电流时对纳米粒子的发热影响。结果表明改性后的超顺磁纳米粒子在交变磁场中的温升达到平稳前与时间具有一定的相关性。据此可以得出结论，表面改性后的超顺磁纳米粒子在交变磁场作用下可发热，且可以通过调节产生磁场的设定电流来进行温度调控。本实验创新性的提出了磁动力学疗法（MDT，Magnetic dynamic therapy），可作为一种肿瘤治疗的新材料与新方法。用具有肿瘤靶向特性的光敏剂材料包裹纳米超顺磁性物质作为靶向药物植入体内并在肿瘤组织中蓄积，在外交变磁场的激发作用下可以引起超顺磁性物质反复磁化发热并导致肿瘤组织的温度升高，产生对肿瘤的磁热疗作用。该方法也可以称为肿瘤组织内的靶向热疗。本研究寻找到了超顺磁纳米粒子激发产

关键词：肿瘤热疗磁介导热疗超顺磁性纳米粒子氧化铁

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非典型性抗精神病药喹硫平抑制胶质瘤干细胞的生长并促进其分化成熟

非典型性抗精神病药喹硫平抑制胶质瘤干细胞的生长并促进其分化成...

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中国解剖学会第十三届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会

作者：李成仁汪云韦美李红丽肖岚第三军医大学组织学与胚胎学教研室重庆400038

胶质瘤是临床上常见的恶性肿瘤之一,其复发率高可能与存在胶质瘤干细胞密切相关.喹硫平是一种非典型精神病药物,我们以前的研究发现喹硫平具有促进神经干细胞向少突胶质细胞分化的作用,但对肿瘤干细胞的作用尚不清楚.本实验采用在体和...

胶质瘤是临床上常见的恶性肿瘤之一,其复发率高可能与存在胶质瘤干细胞密切相关.喹硫平是一种非典型精神病药物,我们以前的研究发现喹硫平具有促进神经干细胞向少突胶质细胞分化的作用,但对肿瘤干细胞的作用尚不清楚.本实验采用在体和离体实验,应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色技术等方法观察喹硫平的抗胶质瘤和胶质瘤干细胞的作用.

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Sox10基因启动子在人多形性胶质母细胞瘤中高甲基化的实验研究

Sox10基因启动子在人多形性胶质母细胞瘤中高甲基化的实验研究

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中国解剖学会第十三届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会

作者：陈兴书李文英牛建钦陈显军吴锡艳肖岚第三军医大学组织学与胚胎学教研室重庆400038

多形性胶质母细胞瘤为恶性程度较高的胶质瘤之一.Sox10为少突胶质细胞发育分化相关转录因子,在多形性胶质母细胞瘤中低表达,与其发生发展密切相关,但机制不清.基因启动子区高甲基化抑制基因表达,胶质瘤中基因广泛被甲基化修饰,那么Sox1...

多形性胶质母细胞瘤为恶性程度较高的胶质瘤之一.Sox10为少突胶质细胞发育分化相关转录因子,在多形性胶质母细胞瘤中低表达,与其发生发展密切相关,但机制不清.基因启动子区高甲基化抑制基因表达,胶质瘤中基因广泛被甲基化修饰,那么Sox10基因在多形性胶质母细胞瘤中低表达是否由于高甲基化导致呢?

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高压氧抗急性药物性肝损伤作用研究

高压氧抗急性药物性肝损伤作用研究

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亚太潜水与高气压医学学术会议暨第二届海峡两岸高压氧医学学术会议、中华医学会第二十二次全国高压氧医学学术会议

作者：衣洪杰郑成刚王万银第二军医大学高压氧医学中心第二军医大学海军医学系舰艇卫生学教研室

目的为了解高压氧对急性药物性肝损伤的影响及其可能的作用机制。方法应用对乙酰氨基酚腹腔注射导致小鼠肝损伤模型,观察高压氧暴露对肝损伤程度的影响,血生化仪检测血清AST、ALT水平,常规组织切片H-E染色观察肝损伤清况;比色法测定肝... 详细信息

目的为了解高压氧对急性药物性肝损伤的影响及其可能的作用机制。方法应用对乙酰氨基酚腹腔注射导致小鼠肝损伤模型,观察高压氧暴露对肝损伤程度的影响,血生化仪检测血清AST、ALT水平,常规组织切片H-E染色观察肝损伤清况;比色法测定肝组织匀浆液还原型GSH及氧化产物MDA的含量;EIISA法测定血清细胞因子IL-65、IL-1β、TNF-α和MCP-1;WesternBlot检测目的蛋白磷酸化水平。

关键词：急性药物性肝损伤氨基酚高压氧作用研究

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