检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：朱俊杰第二军医大学

学位级别：硕士

【研究背景及目的】肝细胞癌（简称肝癌）是恶性程度很高，预后极差的恶性肿瘤。我国是肝癌高发区，肝癌的致死率居所有肿瘤的第二位。肝癌的发生可以由很多外界因素引起，如肝炎病毒感染导致慢性肝脏炎症，逐渐转变成肝硬化，最后到肝... 详细信息

【研究背景及目的】肝细胞癌（简称肝癌）是恶性程度很高，预后极差的恶性肿瘤。我国是肝癌高发区，肝癌的致死率居所有肿瘤的第二位。肝癌的发生可以由很多外界因素引起，如肝炎病毒感染导致慢性肝脏炎症，逐渐转变成肝硬化，最后到肝癌；肝特异性致癌物，如黄曲霉素，它能特异的破坏正常肝细胞进而诱导肝癌；还有遗传因素等等。同时也是体内多条信号通路、多个肝癌驱动基因共同作用的结果。近年来大量基础医学研究结果提示炎症是肿瘤发生和肿瘤进展的主要因素之一，多种恶性肿瘤都是由炎症诱发和促进。肝癌是一种与炎症密切相关的恶性肿瘤，它经常是经历迁延不愈的慢性炎症，肝细胞的损伤，受损的肝细胞引起更高的炎症，肝细胞反复坏死增生，形成肝硬化，最终导致肝癌的发生。已有研究显示致癌基因（如编码蛋白络氨酸激酶、RAS-R、β-catenin、转录因子c-myc等）的异常激活可以诱导一些炎症化学趋化因子和炎症细胞因子的分泌，影响正常肝脏细胞微环境的重塑，从而促进肿瘤微环境形成。表观遗传学因素的改变包括染色体重排，DNA甲基化，组蛋白乙酰化，RNA编辑和microRNA等在肝癌的发生和进展过程中也起着重要的作用。比如DNA的甲基化沉默抑癌基因，去甲基化激活癌基因；和组蛋白的乙酰化激活癌基因等等。癌基因p28GANK（又称p28，Gankyrin，PSMD10）是日本科学家从人类肝癌组织cDNA文库中筛选出来的，它编码了七个重复的ankyrin序列。我们前期研究确认p28GANK为具有一定肝癌细胞特异性的癌蛋白，可作为肝细胞癌鉴别诊断的标志物。p28GANK作为一重要的肝癌调控节点分子，参与调控Rb/E2F、NF-κB、p53、Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等多个信号通路，促进肝癌细胞增殖、抑制肝癌细胞的凋亡、增强肝癌细胞的转移和侵袭能力等；同时，p28GANK可调控核转录因子Oct4，提高肝癌干细胞的干性，促进肝癌进展。在肝癌的临床样本中p28GANK的蛋白表达水平与患者术后复发转移密切相关，不仅作为分子病理分型和预后判断的指标，也是肝癌基因治疗的潜在靶点。目前我们借助肝癌基因组二代测序技术，尚未发现p28GANK有突变或基因拷贝数的增多。由此我们推测p28GANK在肝癌中高表达是由于其自身转录调控异常引起的。前期我室研究发现炎性因子IL-1β和TNFα可以引起p28GANK转录活化，但是具体作用机制尚不清楚。已有诸多文献报道，作为IL-1β下游的NF-κB信号通路在炎症的相关肿瘤中扮演了举足轻重的角色，它的失调与多种肿瘤的发生发展密切相关。因此，本课题进一步研究IL-1β/IRAK-1通路上调p28GANK的分子机制，探索其他的激活p28GANK转录的因素，比如表观遗传学的因素。为更深的理解肝癌的发生发展机制和寻找靶向治疗肝癌有效分子靶点提供理论线索。【实验方法】 1.构建含有p28GANK启动子区的荧光报告基因质粒。 2.建立稳转荧光报告基因质粒的HEK293细胞系。 3.利用稳转细胞系筛选可以激活p28GANK的细胞因子或药物。 4.探索炎症因子IL-1β，甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷，组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A上调p28GANK的机制。 5.在细胞系上验证IL-1β通过促进乙酰化酶活性上调p28GANK的可能机制。 6.建立二乙基亚硝胺（DEN）诱癌大鼠模型，检测诱癌过程中血清IL-1β变化，检测在诱癌的过程中p28GANK，p-IRAK1的表达变化。 7.收集正常人、肝炎、肝硬化和肝癌患者的血清，检测血清中IL-1β的水平，比较IL-1β在正常人、肝炎、肝硬化和肝癌患者中的变化情况。 8.在细胞系，正常人、肝硬化和肝癌患者的肝样本中检测p-IRAK1、p28GANK和IL-1β的表达。【实验结果】 1.成功构建出含有p28GANK启动子区的荧光报告基因质粒和稳转该质粒的HEK293细胞系。 2.采用荧光报告基因系统对p28GANK转录活性行检测，发现组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A和丁酸钠，炎症因子IL-1β，甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷可提高p28GANK转录活性。 3.证实IL-1β是通过磷酸化IRAK1，引起p300磷酸化激活和高表达，激活p28GANK的转录。 4. IL-1β通过使IRAK1发生磷酸化，进而激活JNK信号通路引起p300发生磷酸化激活，从而激活p28GANK。 5.在DEN诱癌模型中，血清IL-1β和蛋白水平在肝炎期表达升高，肝硬化期有所下降，肝癌时期又重新升高，p28GANK和p-IRAK1在蛋白水平具有相同的趋势。 6.肝硬化和肝癌患者血清IL-1β水平明显高于正常人，肝炎患者IL-1β水平最高，

关键词：肝细胞癌 p28GANK 甲基化 IL-1β 炎症 p300

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花青素类提取物对大鼠视网膜光损伤的保护作用

花青素类提取物对大鼠视网膜光损伤的保护作用

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作者：程强第四军医大学

学位级别：硕士

视网膜是感受和传递视觉信息的起始部位，也是体内代谢最旺盛的组织之一，容易受到强光的影响而造成视觉功能障碍（如暗适应功能）、光诱导视网膜损伤等。因此对视网膜光损伤的防护具有重要的军事价值和临床意义。花青素是一类广泛存在... 详细信息

视网膜是感受和传递视觉信息的起始部位，也是体内代谢最旺盛的组织之一，容易受到强光的影响而造成视觉功能障碍（如暗适应功能）、光诱导视网膜损伤等。因此对视网膜光损伤的防护具有重要的军事价值和临床意义。花青素是一类广泛存在于多种天然植物中的多酚类化合物，其在抗辐射损伤、抗氧化损伤、抗疲劳、抗衰老等方面进行了广泛的研究。据报道，英军曾第二次世界大战期间采用蓝莓（富含花青素）作为保护暗适应的一项措施，但是缺乏足够的实验证据[2]。我国传统医学理论认为黑米具有“明目活血”之功效，而现代研究表明从黑米皮中提取的黑米花青素（black rice anthocyanidin）其抗氧化活性明显高于常见的抗氧化剂如牛磺酸，类胡萝卜素和维生素C，安全性研究尚未发现其具有明显的急慢性毒副作用。为此，我们在前期工作基础上，进一步完善了视网膜光损伤模型，探讨了花青素类提取物对视网膜损伤的防护作用。材料和方法 72只成年SPF级雄性SD大鼠购自第四军医大学实验动物中心，根据实验需要分批进行实验，随机分至各组。其中花青素防护作用实验分为生理盐水组、花青素组和混合组，分别采用生理盐水、花青素提取物（纯度25%，由西安皓天生物制剂有限公司提供）及氢饱和生理盐水（按文献方法自制）与花青素提取物混合进行腹腔注射给药，花青素不同给药方式和时间实验分为对照组、灌胃和滴眼组，连续给药1周、2周、4周。利用本实验室自制的光损伤箱进行视网膜光损伤造模。采用RETIport视觉电生理系统（Roland,德国）进行视网膜电图（electroretinogram, ERG）检查，常规组织病理学制备观察石蜡标本，根据标本定位方向，以视盘为中心，上下每隔0.5mm进行切片观察，对各切片部位大鼠视网膜的外核层细胞数目进行计数。数据统计利用SPSS17.0软件进行分析。结果 1.不同环境温度：10±2℃（低温），20±2℃（室温）和30±2℃（高温）分组进行光暴露时，视网膜损伤程度（ERG波幅值和视网膜ONL细胞层数）高温组>低温组和室温组，差异有统计学意义（P<0.05）。 2.花青素组（100mg/kg）、花青素-氢饱和生理盐水混合组（100mg/kg）和生理盐水组损伤眼各ERG反应的波幅值均下降，其中生理盐水组幅值下降最为明显，与自身对照眼比较差异具有统计学意义（P<0.05），花青素组与混合组双眼ERG幅值差值明显低于生理盐水组，具有统计学意义（P<0.05）。三组大鼠损伤眼的视网膜ONL细胞层数均有所下降，部分位置的数据与自身对照眼相比，差异具有统计学意义（P<0.05），尤其以视网膜上部区域以及视神经乳头周边1-2mm范围内最为明显。花青素组及混合组损伤眼的ONL细胞层数明显多于生理盐水组，三组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。 3.花青素（100mg/kg，1次/d）灌胃，1周时已经有一定的保护作用，到2周效应最为明显，与对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05），但是到4周时其效应出现下降。花青素滴眼（滴眼液浓度为4%，0.1ml/次/d）对视网膜光损伤的保护效应呈现时间依赖性的特点，1周时最低，4周时最高，与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 1.实验室环境温度对大鼠视网膜光损伤造模有影响，在高温时会加重视网膜损伤，提示进行视网膜光损伤造模时应当注意通风，保持适宜的环境温度。 2.花青素类提取物对大鼠视网膜光损伤有一定的预防保护作用，花青素与氢饱和生理盐水混合组的作用与单纯使用花青素类提取物作用相似。 3.灌胃给药以及滴眼给药方式也具有预防视网膜光损伤的作用，其中灌胃方式的效果在2周时最为明显，滴眼连续给药方式在4周时效果最好。

关键词：视网膜光损伤环境实验境温度视网膜电图花青素类提取物光损伤视觉功能变化灌胃滴眼保护作用

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Rab分子参与树突状细胞抗原交叉递呈的机制研究

Rab分子参与树突状细胞抗原交叉递呈的机制研究

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第二届免疫学博士生论坛

作者：邹丽云张晋宇万瑛吴玉章第三军医大学基础部免疫学教研室

树突状细胞(dendritic cell,DC)是机体进行交叉递呈的主要抗原递呈细胞。外源抗原经DC内化形成吞噬体,经过一系列胞内囊泡融合、转运,最终将形成的MHC-I类肽复合物转运到细胞膜上才完成整个抗原递呈过程。近年来为了解此递呈途径的胞内... 详细信息

树突状细胞(dendritic cell,DC)是机体进行交叉递呈的主要抗原递呈细胞。外源抗原经DC内化形成吞噬体,经过一系列胞内囊泡融合、转运,最终将形成的MHC-I类肽复合物转运到细胞膜上才完成整个抗原递呈过程。近年来为了解此递呈途径的胞内机制开展了大量研究,但其相关机制尚不明确。鉴于Rab蛋白家族在真核细胞囊泡转运中的重要性,我们拟通过研究Rab蛋白对树突状细胞抗原交叉递呈的影响,进而探讨树突状细胞抗原递呈中胞内转运机制和调控机制。首先,我们采用基于慢病毒的si RNA库筛选到12个与抗原交叉递呈相关的Rab分子,包括:Rab3b,3c,4a,5b,6,8b,10,27a,32,33a,34,35;其次,构建EYFP-Rab融合蛋白,采用激光共聚焦观察阳性Rab分子的分布以及吞噬细菌抗原后招募到吞噬体的情况,与外吐相关的Rab分子如Rab3b,3c,32与吞噬体不共聚,但位于吞噬体的周围,并且部分形成管状结构与细胞膜融合,提示该结构可能参与吞噬体内物质往细胞膜转运;分析Rab3b,3c,32阳性外吐囊泡的性质,发现该囊泡为LAMP+Tfn+的非酸性囊泡,提示该囊泡为溶酶体性质的回运囊,进一步分析Rab3b,3c囊泡与抗原交叉递呈中的重要装配装置MHC-I类分子的共聚情况,发现MHC-I类分子聚集在Rab3b,3c阳性囊泡中;采用β2微球蛋白标识回运的MHC-I类分子,发现储存在Rab3b,3c阳性囊泡中的MHC-I类分子为回运性质的MHC-I类分子;而干扰Rab32的DC2.4细胞吞噬细菌抗原后,Rab3b,3c与细胞膜回运MHC-I类分子的共聚明显减少,提示干扰Rab32阻断了MHC-I类向Rab3b,3c囊泡的转运。由于吞噬体由部分细胞膜形成,细胞膜上的MHC-I类分子可能与吞噬颗粒一起内化形成吞噬体结构,因此该结果提示干扰Rab32阻断了吞噬体内MHC-I类分子向Rab3b,3c囊泡的转运,进而向细胞膜上转运,从而影响抗原交叉递呈。总之,本研究通过RNA干扰筛选获得一些与树突状细胞抗原交叉递呈相关的Rab分子,进一步分析发现树突状细胞中存在回运性质的Rab3b,3c,32阳性溶酶体相关细胞器参与抗原交叉递呈,并且干扰Rab32阻断了吞噬体内回运MHC-I类向Rab3b,3c囊泡的转运,进而影响抗原交叉递呈,提示回运相关的囊泡在联系吞噬体和细胞膜之间的物质转运中发挥作用,该结果为进一步探讨树突状细胞抗原交叉递呈胞内机制的理论模型提供依据,为基于树突状细胞抗原递呈的治疗策略奠定基础。

关键词：树突状细胞 Rab 吞噬体膜转运

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内镜超声引导下细针穿刺抽吸术在诊断上消化道及其周围占位病变中的价值

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临床军医杂志 2015年第7期43卷 680-683页

作者：彭海霞杨大明褚以忞蒯榕李吉陶琨金云菲王赛玉上海交通大学医学院附属同仁医院内窥镜室上海200336 上海交通大学医学院附属同仁医院病理科上海200336

目的探讨内镜超声引导下细针穿刺抽吸术(EUS-FNA)对上消化道及其周围实质性占位病变诊断的准确性及其临床应用价值。方法回顾性分析2011年11月至2014年5月行超声内镜检查及超声内镜引导下的细针穿刺检查的87例患者的临床资料,对比细胞学... 详细信息

目的探讨内镜超声引导下细针穿刺抽吸术(EUS-FNA)对上消化道及其周围实质性占位病变诊断的准确性及其临床应用价值。方法回顾性分析2011年11月至2014年5月行超声内镜检查及超声内镜引导下的细针穿刺检查的87例患者的临床资料,对比细胞学和(或)病理学检查与术后病理结果及随访结果。结果本组86例患者成功进行了EUS-FNA,穿刺成功率98.85%。其中,病灶位于食管9例(10.35%),胃39例(44.83%),十二指肠球部10例(11.49%),胰腺18例(20.69%),腹腔10例(11.49%)。74例患者细胞学检查结果为阳性,阳性率85.06%。39例患者获得组织碎片或组织细条行病理学检查,组织获得率44.83%;其中,20例病理学检查结果为阳性,阳性率51.28%。与术后病理结果及术后随访结果对照,EUS-FNA对上消化道及其周围占位病变诊断的准确率为89.65%。对于病灶直径大小(>3 cm及≤3 cm)、穿刺针针号(19G及22G)及抽吸负压(5 ml负压及10 ml负压),两两比较发现,EUS-FNA诊断准确率差异均无统计学意义(P>0.05)。穿刺过程中无明显并发症发生。结论在上消化道及周围实质性占位病变中,EUSFNA是一项安全、有效、准确的诊断及鉴别诊断方法,穿刺诊断的准确性与病灶的大小,穿刺针的针号及穿刺抽吸负压大小无明显相关性。

关键词：内窥镜超声检查活组织检查细针穿刺抽吸术

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兔异体脂肪干细胞移植的实验研究

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现代生物医学进展 2013年第7期13卷 1244-1248页

作者：杨涛杨勇刘斌李龙令狐大科刘彦普第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710032 第四军医大学口腔医院口腔生物学教研室及实验动物中心陕西西安710032

目的:建立一种可注射异体脂肪移植模型,观察兔异体脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)复合自体脂肪颗粒(adipose granule,AG)和富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)移植后的形态学和免疫学的变化,为临床异体脂肪干... 详细信息

目的:建立一种可注射异体脂肪移植模型,观察兔异体脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)复合自体脂肪颗粒(adipose granule,AG)和富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)移植后的形态学和免疫学的变化,为临床异体脂肪干细胞移植提供一种实验依据。方法:取30只健康新西兰家兔,随机分成5组:A组,(N=6),移植物为自体AG;B组,(N=6),自体AG+自体PRF;C组(N=6),自体AG+自体ADSCs:D组(N=6),自体AG+自体PRF+自体ADSCs,E组(N=6),实验组,自体AG+自体PRF+异体ADSCs。在术后1、3、6个月,大体外观、HE染色分析其形态学改变;免疫组化、外周血淋巴细胞亚群CD4/CD8比值、血浆IL2和IL4分析其免疫学改变。结果:术后1、3、6个月在大体外观、免疫组化等D、E两组与A、B、C三组比较均有显著性差异(P<0.05)。E组在淋巴亚群CD4/CD8、血浆IL-2、IL-4等与D组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:异体ADSCs复合自体PRF、AG能够显著提高移植脂肪组织的成活率,并且无明显免疫排斥反应,可为临床异体脂肪干细胞移植提供实验依据。

关键词：脂肪移植异体移植脂肪干细胞免疫原性

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自体ADSCs复合PRF修复家兔耳软骨缺损的实验研究

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现代生物医学进展 2013年第12期13卷 2210-2214页

作者：杨勇杨涛刘斌令狐大科李龙刘彦普第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710032 第四军医大学口腔医院口腔生物学教研室及实验动物中心陕西西安710032

目的:将未诱导的自体脂肪干细胞(ADSCs)与富血小板纤维蛋白(PRF)复合,作为一种全新的软骨修复材料,探讨其对家兔耳软骨全层缺损修复的可行性。方法:取家兔10只,于每只家兔耳部做4处软骨全层缺损,随机分为A、B、C、D组,A组,作为空白对照;... 详细信息

目的:将未诱导的自体脂肪干细胞(ADSCs)与富血小板纤维蛋白(PRF)复合,作为一种全新的软骨修复材料,探讨其对家兔耳软骨全层缺损修复的可行性。方法:取家兔10只,于每只家兔耳部做4处软骨全层缺损,随机分为A、B、C、D组,A组,作为空白对照;B组植入自体ADSCs;C组植入自体PRF;D组植入自体ADSCs与PRF的复合物。分别于术后1月、2月、3月取材,进行大体及HE染色观察,并使用IPP6.0软件对软骨生成量进行半定量分析。结果:HE染色显示,3月后,A组几乎无新生软骨生成,B、C、D三组软骨生成量依次增多,D组尤为明显。IPP6.0统计结果显示,移植物植入3月后,A组软骨缺损修复率为(1.68±0.17)%,B组为(15.4±0.91.)%,C组为(32.0±2.76)%,D组为(85.77±4.88)%。各组间有显著统计学差异,与HE染色结果相符。结论:未诱导的自体ADSCs复合自体PRF作为一种全新的软骨修复材料,可以有效的修复家兔耳软骨全层缺损,具有潜在的临床应用价值。

关键词：脂肪干细胞富血小板纤维蛋白软骨缺损修复

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过表达Axin对胶质瘤细胞U87的生物学行为的影响及其作用机制

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现代肿瘤医学 2014年第7期22卷 1507-1510页

作者：陆建荣李青张娟丁彩霞陕西省肿瘤医院病理科陕西西安710061 第四军医大学西京医院病理科陕西西安710032

目的:观察Axin对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法:pCMV5-HA-Axin瞬时转染胶质瘤U87细胞,TUNEL法检测细胞的凋亡,流式细胞仪检测瘤细胞周期变化,Western blot检测Axin及β-catenin蛋白质的表达。结果:Axin显著促进胶质... 详细信息

目的:观察Axin对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法:pCMV5-HA-Axin瞬时转染胶质瘤U87细胞,TUNEL法检测细胞的凋亡,流式细胞仪检测瘤细胞周期变化,Western blot检测Axin及β-catenin蛋白质的表达。结果:Axin显著促进胶质瘤U87细胞的凋亡、抑制细胞的增殖;促进β-catenin蛋白在胞浆内的蓄积。结论:过表达Axin的胶质瘤U87细胞可能通过降低细胞核内β-catenin的蛋白表达量抑制Wnt信号通路,从而抑制细胞增殖并促使细胞凋亡。

关键词：胶质瘤 Axin β—catenin 细胞增殖细胞凋亡

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应激诱发抑郁症的细胞因子机制研究进展

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生理学报 2013年第2期65卷 229-236页

作者：彭云丽王雯英蒋春雷王云霞第二军医大学应激医学研究室山东省青岛市骨伤科医院关节二科

抑郁症是现代社会严重的精神卫生问题,而应激是抑郁症的重要诱发因素。抑郁症发病机制复杂,尚未完全明确。应激诱发抑郁症的机制也有待深入研究。神经内分泌免疫学的飞速发展为应激性抑郁症的病因学研究提供了更广阔的视野。长期慢性应... 详细信息

抑郁症是现代社会严重的精神卫生问题,而应激是抑郁症的重要诱发因素。抑郁症发病机制复杂,尚未完全明确。应激诱发抑郁症的机制也有待深入研究。神经内分泌免疫学的飞速发展为应激性抑郁症的病因学研究提供了更广阔的视野。长期慢性应激激活外周及中枢免疫系统,大量炎性介质释放(包括细胞因子)。激活的免疫系统通过与神经系统、神经内分泌系统的相互作用影响抑郁症的进程。细胞因子通过调节单胺类神经递质的合成、代谢与重摄取,引起下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA)轴的过度激活并使其负反馈调节受损,破坏神经形成等机制引发抑郁症。本文将从细胞因子的角度对应激诱发抑郁症机制的研究进展进行综述。

关键词：应激抑郁症细胞因子 5-羟色胺下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴神经可塑性

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乙型肝炎病毒致癌过程中的病毒进化问题

乙型肝炎病毒致癌过程中的病毒进化问题

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中华预防医学会第四届学术年会

作者：曹广文侯晓玫第二军医大学流行病学教研室上海200433

肝细胞癌(HCC)占我国大陆地区恶性肿瘤死亡原因的第二位，乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是主要原因.人类白细胞Ⅱ类抗原遗传因素参与决定HBV感染的慢性化和免疫清除.HBV与免疫系统相互作用导致的慢性炎症是HBV进化和HCC发生的必要因素.

关键词： HBV突变体细胞变异肝细胞癌进化

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兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的诱导分化

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现代生物医学进展 2013年第12期13卷 2225-2229页

作者：翁雁鸣王之发居兆慧刘斌刘彦普第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710032 第四军医大学口腔医院儿童口腔科陕西西安710032 第四军医大学口腔医院口腔生物学教研室陕西西安710032

目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的定向诱导分化,为血管化组织工程骨研究提供实验基础。方法:采集2周龄兔后肢长骨骨髓,用全骨骨髓贴壁法进行原代培养,将获... 详细信息

目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的定向诱导分化,为血管化组织工程骨研究提供实验基础。方法:采集2周龄兔后肢长骨骨髓,用全骨骨髓贴壁法进行原代培养,将获得的第2代骨髓基质干细胞以1×105/mL密度接种于内皮细胞条件培养基(含10μg/L VEGF,10μg/L bFGF,10%胎牛血清的DMEM/F12培养液)进行体外诱导培养,对诱导2周的细胞进行细胞形态观察和表型、功能鉴定。结果:经血管内皮细胞条件培养基诱导2周后的细胞呈扁平形,多边形,表达血管内皮细胞特异性标志CD31、VWF因子,细胞具有吞噬DiI-Ac-LDL和摄取FITC-UEA-1的功能,诱导的细胞可在BD基质胶内形成管腔样结构。结论:血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可以成功诱导兔骨髓基质干细胞为血管内皮样细胞,有希望作为组织工程骨的血管化的种子细胞。

关键词：骨髓基质干细胞血管内皮样细胞血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子

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