目的探讨在机械张应力刺激下细胞外信号调节激酶(ERK1/2)对成牙骨质细胞骨保护素(OPG)和破骨细胞分化因子(RANKL)表达的影响。方法利用Flexcell FX4000T张应力加载系统和ERK1/2特异性抑制剂PD98059,以体外培养的成牙骨质细胞样细胞OCCM30为研究对象,将细胞随机分为4组:A组(不加力不加抑制剂组);B组(不加力加抑制剂组);C组(加力不加抑制剂组);D组(加力加抑制剂组)。采用Western blotting检测张应力加载5、15、30、60min4个时间点的ERK1/2磷酸化水平,荧光定量PCR检测张应力加载12h时的OPG和RANKL m RNA表达水平。结果机械张应力可迅速激活C组成牙骨质细胞内的ERK1/2信号通路,且在5、15、30min时P-ERK1/2水平明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),至60min时恢复至与A组相近的水平;在抑制剂作用下,B、D组P-ERK1/2水平显著降低。张应力作用下细胞OPG m RNA表达减弱,RANKL m RNA表达增强,RANKL/OPG比值增大,而在抑制剂与机械张应力双重作用下,细胞OPG m RNA表达增强,RANKL m RNA表达减弱,RANKL/OPG比值减小,但仍高于抑制剂作用组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERK1/2信号通路参与张应力对成牙骨质细胞OPG、RANKL表达的调控,但不是唯一激活通路,可能有其他信号通路共同参与对OPG、RANKL基因表达的调控。
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