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中国病原生物学杂志 2013年第9期8卷 799-802,826页

作者：商少华巫姜李涛吐尔洪江·吐逊林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心新疆乌鲁木齐830054 第四军医大学晒京医院血管内分泌外科陕西西安710032

目的榆测包虫病灶切除术前、术后Th17相关细胞因子（IL-17、IL-23）的表达，探明包虫病灶切除术前、术后免疫状态变化情况。方法将SD大鼠分为健康对照组、泡球蚴感染对照组和泡球蚴病手术组（简称手术组），分别于腹股沟注射感染泡球蚴... 详细信息

目的榆测包虫病灶切除术前、术后Th17相关细胞因子（IL-17、IL-23）的表达，探明包虫病灶切除术前、术后免疫状态变化情况。方法将SD大鼠分为健康对照组、泡球蚴感染对照组和泡球蚴病手术组（简称手术组），分别于腹股沟注射感染泡球蚴（健康对照组用中理盐水代替），3月后将感染成功的大鼠纳入试验。对手术组大鼠切除皮下包虫病灶，术后第1～7d各处死大鼠6只，第7d处死健康对照组和泡球蚴感染对照组大鼠各6只，采集下腔静脉血液和肝脏组纵，分别用ELISA法检测血清和肝匀浆组织IL-17和IL-23水平，用Real—timeRT—PCR检测肝脏IL-17mRNA和IL-23mRNA表达水平。结果包虫病大鼠血清IL-17和IL-23分别为（8．38±1．04）pg／ml和（352．69±25．04）pg／ml，健康对照组分别为（17．14±1．21）pg／ml和（450．05±29．37）pg／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）；手术组术后分别于第2d和第3d开始增高，于第6d和第7d开始趋于正常。包虫病大鼠肝匀浆IIL-17和IL-23分别为（7．68±2．21）pg／ml和（336．65±28．73）pg／ml，健康对照组分别为（16．88±2．36）pg／ml和（446．68±24．53）pg／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）：于术组术后分别于第3d和第4d开始增高，IL-17于第7d趋于正常，IL23第7d仍低于健康对照组。包虫病大鼠肝IL-17mRNA和IL-23mRNA分别为（0．32±0．08）pg／ml和（0．96±0．79）pg／ml，健康对照组分别为（0．73±0．97）pg／ml和（1.57±0．73）pg／ml，羞异有统计学意义（P〈0．05）；手术组术后分别于第1d和第3d开始增高．于第4d和第6d开始趋于正常。结论IL-17和IL-23为Th17细胞发挥功能的主要细胞因子。包虫病灶切除后，包虫寄生所致的IL-17和IL-23抑制状态能存较短时间内恢复并趋于正常，进而可能对其他感染或者移植器官产生趋于日常的免疫排斥反应。

关键词：泡型包虫病辅助性T-17细胞白介素17 白介素-23

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肝及腹腔淋巴结结核1例

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肝脏 2015年第5期20卷 426-428页

作者：王静舞王兆林王盖昊于晓辉兰州军区兰州总医院消化科甘肃730050 兰州大学第二临床医学院

患者,男,19岁,因＂上腹胀痛20余天＂入院,患者无明显诱因出现上腹胀痛,伴有低热、纳差、体质量下降（约3 kg）,无反酸、烧心、恶心、呕吐、黑便及咳嗽咳痰等症状,就诊于我院,查体可见左侧腹股沟触及肿大淋巴结,质中、活动度尚可,无触痛... 详细信息

患者,男,19岁,因＂上腹胀痛20余天＂入院,患者无明显诱因出现上腹胀痛,伴有低热、纳差、体质量下降（约3 kg）,无反酸、烧心、恶心、呕吐、黑便及咳嗽咳痰等症状,就诊于我院,查体可见左侧腹股沟触及肿大淋巴结,质中、活动度尚可,无触痛、腹肌紧张、肝区叩击痛,移动性浊音可疑阳性。实验室检查提示血常规、肝肾功能、血沉等无明显异常,金标法结核抗体IgG阳性,腹水化验示：总蛋白52.4 g/L、Rivalta试验阳性,白细胞2.9×109/L、淋巴细胞比例40%,腺苷脱氨酶（ADA）34.3U/L，AFP、CEA、CA-199均为阴性；腹水细胞学检查可见淋巴细胞、单核细胞发中性粒细胞，偶见间皮细胞，未见肿瘤细胞。

关键词：腹腔淋巴结结核肝区叩击痛腹水细胞学检查可疑阳性 CA-199 上腹胀痛肿大淋巴结左侧腹股沟

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转录因子EN1在帕金森病模型小鼠中脑表达中的变化

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中国康复医学杂志 2012年第3期27卷 197-200页

作者：谢晓明刘宏亮高宇姚忠祥詹晓黎吴永涛第三军医大学西南医院康复医学科重庆400038 第三军医大学基础部组织学与胚胎学教研室

目的:研究小鼠帕金森病(PD)模型急性期中脑转录因子EN1表达变化的特点及小鼠的自发性活动改变。方法:应用6-羟多巴胺(6-OHDA)纹状体注射制备小鼠PD模型;旷场试验观察其行为学变化;免疫组织化学/荧光染色检测注药后24h内中脑EN1、酪氨酸... 详细信息

目的:研究小鼠帕金森病(PD)模型急性期中脑转录因子EN1表达变化的特点及小鼠的自发性活动改变。方法:应用6-羟多巴胺(6-OHDA)纹状体注射制备小鼠PD模型;旷场试验观察其行为学变化;免疫组织化学/荧光染色检测注药后24h内中脑EN1、酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化。结果:与对照组相比,模型组运动方式明显异常,7d内基本恢复正常;运动总量随注药后时间延长呈恢复趋势,但与对照组对比无显著差异;中央区域活动时间逐渐减少,反映了焦虑指数增高。与对照侧相比,实验侧中脑EN1免疫阳性细胞数在3—9h时已出现减少,12—18h时已较显著,18h为65.2±22.3%(P<0.05),21h时减少非常显著。TH阳性的多巴胺能(DA)神经元数目也随时间逐渐减少,但时间上略晚于EN1,15h才可见减少,18h时减少明显,为68.3±1.2%(P<0.05)。EN1在中脑主要定位于细胞核,但也可见于细胞浆。结论:注射6-OHDA后,小鼠出现行为学改变,焦虑指数增高;实验侧中脑EN1和TH阳性细胞数均随时间逐渐减少且EN1变化早于TH,提示转录因子EN1的减少可能是诱导DA神经元凋亡及PD部分症状出现的重要原因。

关键词：帕金森病转录因子EN1 酪氨酸羟化酶多巴胺能神经元旷场试验

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卵巢早衰患者CD4^+CD25^+调节性T细胞的变化及干扰素-γ、转化生长因子-β1的表达

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华西医学 2013年第3期28卷 377-379页

作者：谢江燕何畏赵俪梅陈铭梁志清重庆第三军医大学西南医院妇产科重庆400038 重庆第三军医大学西南医院中心实验室重庆400038

目的通过观察卵巢早衰POF患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞Treg及干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)的变化,探讨POF的免疫学发病机制。方法收集2011年12月-2012年9月就诊的POF患者17例,卵巢储备功能减退DOR患者11例,以及生殖... 详细信息

目的通过观察卵巢早衰POF患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞Treg及干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)的变化,探讨POF的免疫学发病机制。方法收集2011年12月-2012年9月就诊的POF患者17例,卵巢储备功能减退DOR患者11例,以及生殖中心健康育龄女性16例,流式细胞仪定量检测外周血Treg数量,Elisa方法检测血清IFN-γ、TGF-β的水平,并以FSH/LH评价卵巢储备功能,进行相关性分析。结果与对照组相比,POF组和DOR组IFN-γ水平增高P<0.01、TGF-β水平降低P<0.01,POF患者及DOR患者Treg比例降低P<0.01,IFN-γ的增高与卵巢储备功能的下降呈显著正相关r=0.70,P<0.01。结论 Treg和IFN-γ、TGF-β水平与卵巢早衰密切相关,IFN-γ对评估卵巢储备功能、预测卵巢早衰具有参考价值。

关键词：卵巢功能早衰 T淋巴细胞,调节性干扰素Ⅱ型转化生长因子-β1

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病毒介导的P53低表达HepG2细胞株的建立

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免疫学杂志 2012年第6期28卷 493-496页

作者：刘佳张俊磊李庆伟韩俊峰徐小峰王嘉丽陈炜饶贤才李国利重庆医科大学实验教学管理中心 401331 第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038 诸城市人民医院呼吸内一科 262200 第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038 第三军医大学医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学生理学教研室重庆400038 重庆三峡医药高等专科学校 404120

目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰... 详细信息

目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰效果;选择干扰效果最好的重组质粒转染PT67细胞进行病毒包装,获得逆转录病毒颗粒感染HepG2细胞,通过Hygromycin筛选获得多个细胞克隆,Western blot检测P53蛋白的表达情况;选择P53表达水平最低的细胞克隆。通过5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡实验,检测P53低表达的HepG2细胞p53通路介导的细胞凋亡情况。结果经酶切和测序验证成功构建重组病毒载体;瞬时转染HepG2细胞后P53 mRNA表达下调;病毒颗粒感染HepG2细胞后P53的mRNA、蛋白表达下调;用5-FU处理后P53低表达HepG2细胞凋亡水平明显低于对照。结论成功构建了干扰P53的逆转录病毒载体,建立了P53低表达HepG2细胞株,明显阻断了P53通路依赖的细胞凋亡。

关键词：逆转录病毒 P53 HepG2 RNA干扰细胞凋亡

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小鼠Mmp-9 shRNA重组慢病毒包装、筛选及干扰效果检测

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陕西医学杂志 2013年第3期42卷 259-262,265页

作者：张冠华易成刚马戈甲杨力第四军医大学西京医院整形科西安710032

目的:设计、筛选、构建并鉴定Mmp-9小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),并构建其慢病毒表达载体,为血管化疾病的防治提供理论依据及实验室数据。方法:针对基质金属蛋白酶9靶基因设计siRNA序列,并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,s... 详细信息

目的:设计、筛选、构建并鉴定Mmp-9小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),并构建其慢病毒表达载体,为血管化疾病的防治提供理论依据及实验室数据。方法:针对基质金属蛋白酶9靶基因设计siRNA序列,并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)结构的DNA,与经AgeΙ和EcoRΙ酶切的pSIL-RFP连接、转化大肠杆菌感受态细胞,构建成携带Mmp9-shRNA慢病毒质粒载体(pSIL-RFP/MMP9-shRNA),PCR及测序鉴定后,Western blot筛选出携带最佳siRNA的慢病毒质粒载体,并利用慢病毒包装质粒(pHelper1.0和pHelper2.0)将其制备成MMP9-shRNA慢病毒,并测定病毒滴度为1×1010pfu/l。结果:PCR和DNA测序证实合成的含基质金属蛋白酶9短发卡RNA慢病毒载体寡核苷酸链正确插入pSIL-RFP载体,表明实验成功构建基质金属蛋白酶9RNA干扰慢病毒表达载体。结论:成功的构建并筛选出针对小鼠Mmp9基因沉默的特异性shRNA重组慢病毒,为血管化性疾病的防治研究提供基础。

关键词：基质金属蛋白酶9 基因表达调控,酶学 RNA干扰慢病毒属

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CD4+Foxp3+和CD8+Foxp3+在脂多糖和酵母多糖致炎后的动态变化

CD4+Foxp3+和CD8+Foxp3+在脂多糖和酵母多糖致炎后的动态变化

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国际休克·脓毒症高峰论坛暨第九届中国病理生理学会休克专业委员会学术大会

作者：严军范霞杨雪张醇刘东擘梁华平 400042 重庆第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室

目的:利用Treg荧光单标小鼠以及成功繁育的Treg-Th17双标小鼠，针对LPS和Zym致炎条件下Treg亚群的变化进行了体内研究。方法:从美国哈佛大学医学院引进Treg和Th17荧光单标小鼠(即C57BL/6背景的Foxp3-GFPKI小鼠、Foxp3-RFPKI小鼠和IL... 详细信息

目的:利用Treg荧光单标小鼠以及成功繁育的Treg-Th17双标小鼠，针对LPS和Zym致炎条件下Treg亚群的变化进行了体内研究。方法:从美国哈佛大学医学院引进Treg和Th17荧光单标小鼠(即C57BL/6背景的Foxp3-GFPKI小鼠、Foxp3-RFPKI小鼠和IL-17A-GFPKI小鼠)，按照无特定病原体动物(special pathogen free,SPF)级动物饲养标准进行。室内温度控制在20℃-26℃,湿度50 ％-60%，照明采取12h昼夜交替的方式;小鼠的饮食由第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心配制;饲养期间密切观察小鼠生长情况。依照遗传学规则进行将Foxp3-RFPKI小鼠和IL-17A-GFPKI小鼠进行配对繁殖，筛选Treg-Th17荧光双标小鼠(即IL-17A-GFPKI-homo-Foxp3-RFPKI小鼠)。利用该双标小鼠制备该小鼠LPS体内致炎模型，即将双标小鼠随机分为3组，每组5只，实验组再分为LPS处理24h和48h组，各自按lOmg/kg剂量尾静脉注射LPS(Sigma,055:B5)，继续饲养至LPS处理后24h和48h两个时相点，对照组尾静脉注射相同体积的等渗盐水;同时利用Treg荧光单标模型制备Zym体内致炎模型，分组条件同上，各自按腹腔注射Zym(溶剂为1×PBS)，剂量为600mg/kg，对照组腹腔注射与上述模型体积相等的1×PBS。在LPS和Zym处理24h组和48h组，取相应组别小鼠淋巴结和脾并制备细胞悬液anti mouse APC-CD4和PECYS-CD8染色，流式细胞分析各组别中CD4+Foxp3+和CDB+Foxp3+的百分数变化。结果:第一批7只子2代小鼠中有3只小鼠(2a1早)为所需纯合子，自交3代连续基因分型结果均为Foxp3 RFPKI-homo-IL-17A-GFPKI，而且小鼠生长状态正常;LPS致炎处理能诱导明显的荧光，对照组CD8+Foxp3+低于CD4+Foxp3+(P<0.05)，但LPS各处理组CD8+Foxp3+的表达明高于CD4+Foxp3+，尤其是LPS处理24h组更是如此(P<0.01或P<0.05)，但对照组与LPS处理48 h组之间的差异无统计学意义(P>0.05);另一方面，Zym致炎后各时间点CD4+Foxp3+的比例取明显高于CDB+Foxp3+(P<0.05)。结论:本实验培育的Foxp3 RFPKI-homo-IL-17A-GFPKI小鼠具有相同的基因表型和稳定的遗传学特征，是一种能够有效实时监测机体Treg-Th17平衡变化的模式动物和全新在体研究平台;机体遭受LPS刺激后，CD4+Treg亚群的作用明显弱于CD8+Treg亚群，但Zym刺激却能使CD4+Treg亚群的作用明显上升并使CD8+Treg亚群的变化减少。其原因和机制值得进一步关注和探索。

关键词：炎症反应调节T细胞脂多糖酵母多糖

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苦参碱对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用研究

苦参碱对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用研究

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：于晓红吕安程鹏许磊梅晨李德银刘凤华许剑琴北京农学院动物科技学院奶牛营养学北京市重点实验室北京102206 中国农业大学动物医学院中兽医实验室北京100193

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我国学者揭示肿瘤向肺部转移新机制

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中华医学信息导报 2016年第16期31卷 6-6页

作者：肖鑫《中华医学信息导报》编辑部

本报讯近日，曹雪涛院士与第二军医大学医学免疫学国家重点实验室博士生刘艳芳、顾炎等科研人员揭示了肿瘤向肺部转移的新机制，相关学术论文于8月8日发表在美国《癌细胞》杂志上。

关键词：肺部转移肿瘤国家重点实验室学者第二军医大学医学免疫学科研人员学术论文

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复合营养素对急性束缚冷水浸泡应激诱发的Th1/Th2细胞因子变化的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第6期28卷 601-603,606页

作者：刘亚莉毕辉樊荣李雨衡王跃民陈耀明陈景元迟素敏裴建明第四军医大学基础医学院生理学教研室陕西西安710032 第四军医大学口腔医学系十四队陕西西安710032 第四军医大学军事预防医学系劳动与环境卫生学教研室陕西西安710032

目的:探讨复合营养素对大鼠急性束缚冷水浸泡应激时血清Th细胞亚群相关细胞因子变化引起的Th1/Th2失衡的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、急性应激对照组、急性应激喂复合营养素组。采用束缚冷水浸泡应激模型,急性应激30 min... 详细信息

目的:探讨复合营养素对大鼠急性束缚冷水浸泡应激时血清Th细胞亚群相关细胞因子变化引起的Th1/Th2失衡的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、急性应激对照组、急性应激喂复合营养素组。采用束缚冷水浸泡应激模型,急性应激30 min,应激后0 min、30 min、60 min和120 min处死动物取血,分离血清保存于-70℃备用,ELISA试剂盒检测大鼠血清中的IL-2、IL-6和TNF-α的变化。结果:急性束缚冷水浸泡应激后可引起细胞因子IL-2水平的降低,IL-6和TNF-α升高,不同时间点(0、30、60、120 min)中30min的变化最明显,应用复合营养素可削弱急性束缚冷水浸泡应激引起的IL-2水平的降低和IL-6、TNF-α的升高,同样以应激后30 min复合营养素的改善作用最显著。结论:复合营养素可以显著改善急性束缚冷水浸泡应激应激大鼠Th1/Th2细胞因子IL-2、IL-6和TNF-α的变化,提示复合营养素可改善应激大鼠的免疫调节功能,恢复Th1/Th2平衡,对于提高机体抗应激能力、减轻应激所造成的损伤可能具有一定的作用。

关键词：复合营养素 Th细胞细胞因子急性束缚冷水浸泡应激

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